VENTAJAS DE LA TRANSFERENCIA DE GENES EN LOS PECES ALTA FECUNDIDAD GAMETOS FACILMENTE DISPONIBLES (DESOVES DE MILES DE HUEVOS) MAYOR NUMERO DE INDIVIDUOS TRANSGENICOS PRODUCIDOS FERTILIZACION E INCUBACION EXTERNA SE EVITAN LOS PROBLEMAS DE FERTILIZACION IN VITRO Y REIMPLANTACION LA FERTILIZACION PUEDE RETRAZARSE POR UN PERIODO DE TIEMPO CONSIDERABLE DESPUES DE LA COLECTA DE HUEVOS (DIAS EN EL CASO DE SALMONES) SIN VARIACIONES APRECIABLES EN SU VIABILIDAD GRAN TAMAÑO FACILITA EL MANEJO, ROBUSTOS Y GRANDES (DE 1 A 7 mm DE DIAMETRO) FRECUENCIAS DE INTEGRACION IGUALES O MAYORES A LAS REGISTRADAS PARA RATONES (10 – 70 %) ACCION DE SECUENCIAS REGULADORAS SIMILARES A LAS DE LOS VERTEBRADOS SUPERIORES 1983 EN RESPUESTA A LOS PROBLEMAS ENFRENTADOS POR LA INDUSTRIA ACUICOLA CANADIENSE DOS MANERAS POTENCIALES EN LA QUE LA TECNOLOGIA DE TRANSGENICOS PODRIA SER USADA PARA RESOLVER EL PROBLEMA 1) PRODUCIR SALMONES RESISTENTES A LA CONGELACION 2) ELEVAR LAS TASAS DE CRECIMIENTO, PARA EVITAR LA NECESIDAD DE CULTIVARLOS EN INVIERNO DOS GENES OFRECEN EXPECTATIVAS DE GRAN VALOR PARA LA ACUACULTURA GH y AFP LA TRANFERENCIA DE ESTOS GENES EN ADICION A SU INCORPORACION, HERENCIA Y PERSISTENCIA EN LOS HUESPEDES REQUIERE ADEMAS DE: EXPRESION DEL TRANSGEN EN LOS TEJIDOS APROPIADOS NIVEL DE EXPRESION SUFICIENTE PARA MEDIAR UNA ACCION FISIOLOGICA CAPACIDAD DE MANIPULAR LOS NIVELES DE EXPRESION IN VIVO Funcionamiento diferente del sistema endócrino de los peces transgénicos (GH) • Los transgenes de GH se incorporan en prácticamente todos los tejidos • Ausencia de expresión de GH en la pituitaria de algunas especies (regulación negativa) - Niveles plasmáticos de IGFs son muy bajos - Altos niveles de mRNA de los IGFs en los hepatocitos y el músculo – Acción autócrina o parácrina APETITO • El apetito en los peces transgénicos no esta directamente influenciado por los IGFs • Se han observado niveles bajos de Grehlina y del neuropeptido Y (moléculas orexigénicas) en peces transgénicos, a pesar de mostrar una gran motivación por alimentarse • Los niveles de CCK (hormona anorexigénica) cerebrales no fluctúan estacionalmente, como sucede con los peces no transgénicos • Continúan alimentándose aún en invierno, contrariamente a los no transgénicos Lee et al. (2009) Notothenioid and Channicthyid fish n= 4 to 88 m.w.= 2,600 to 56,000 Da Freezing Avoidance in Frigid Marine Environment The other half of the story: AFGP in Northern Gadids (Cods) Polar cod B. saida Saffron cod E. gracilis Atlantic cod G. morhua Greenland cod G. ogac Antarctic notothenioid : AAT-AAT-PAT-AAT-PAT-AAT-AAT-etc disac Northern cod : disac disac disac disac disac disac AAT-AAT-PAT-AAT-PAR-AAT-AAT-etc disac disac disac disac disac disac Antifreeze Peptides (4 types) • Type I: 3-4 kDa • Type II: ~14 kDa • Type III: 7 kDa 14 kDa • Type IV: ~15 kDa Induction of liver tumors in TO(Myc) fish. Li Z et al. Dis. Model. Mech. 2013;6:414-423 ©2013 by The Company of Biologists Limited (Chan et al, 2010) Deleterious transgene spread to control invasive fish species MICROINYECCION INFECCION RETROVIRAL TRANSPOSONES TRANFERENCIA BALISTICA ELECTROPORACION PIGGYBACKING LIPOFECCION CELULAS MADRE Fang & Miller, 2012 GH expresada aún en aguas frías Smoltificación precoz (Devlin et al., 1994) EFECTO DE GH SOBRE VARIEDADES SELECCIONADAS Misgurnus mizolepis (Cypriniformes, Cobitidae) Promotor βactina ligado a GH Crecimiento >30 veces (Nam et al. 2001) IMPACTO POSITIVO NEGATIVO NEUTRO CORTO PLAZO LARGO PLAZO TOLERANCIA A FACTORES FISICOS DEL MEDIO MODIFICACION DE HABITATS PREFERENCIALES MODIFICACION DE AREAS DE REPARTICION COMPETENCIA INTRA-E-INTERESPECIFICA COLONIZACION DE NUEVOS MEDIOS PURGA GMO tiene una menor adaptación – el más seguro EXPANSION GMO tiene igual o mayor adaptación GEN DE TROYA Efectos antagónícos en dos componentes adaptativos propician el descenso de la población • MACHOS DE MEDAKA TRANSGENICOS (GH) 4 VECES MAYOR PROBABILIDAD DE REPRODUCIRSE 30% MAS SUCEPTIBLES A MORIR QUE SUS SIBLINGS NO TRANSGENICOS • MODELO 60 TRANSGENICOS MEZCLADOS EN UNA POBLACION DE 60,000 NO TRANSGENICOS 40 GENERACIONES CON PREVALENCIA DE TRANSGENICOS CON MAYOR ÉXITO REPRODUCTIVO PRODUCCION CONTINUA DE CRIAS QUE MUEREN PRECOZMENTE • EXTINCION DE LA POBLACION Pennington & Kapuscinski 2010 wild-type medaka transgenic medaka side views top view • ¿Purga? • ¿Expansión? • ¿Gen de Troya? Las truchas arco iris transgénicas son 37-83 más grandes al alcanzar la madurez sexual y tienen una menor viabilidad juvenil LOS TRANGENICOS SON NUEVOS ORGANISMOS PARA LOS CUALES NO EXISTE INFORMACION RELEVANTE EN CUANTO A SU COMPORTAMIENTO EN EL AMBIENTE NATURAL TAMPOCO EXISTE NINGUNA BASE TEORICA APROPIADA PARA SU PREDICCION SE HAN PROPUESTO RESTRICCIONES QUE IMPLICAN LA UTILIZACION DE ORGANISMOS INFERTILES LAS POBLACIONES UTILIZADAS PARA FINES DE INVESTIGACION Y DESARROLLO REQUIEREN DE ORGANISMOS FERTILES Minusvalidos nutricionales Requieren de un aminoácido particular que las especies silvestres sintetizan de manera constitutiva Mientras el AAS se distribuya en la dieta de los peces no habría problema, pero si se escapan mueren