MANUAL DE PRÁCTICAS

MANUAL DE PRÁCTICAS
MATERIA: APLICAR LAS TECNICAS DE VALORACION DEL METABOLISMO
SEMESTRE: FEBRERO- JULIO 2011
MAESTRA: FAUSTINA OROZCO GUTIERREZ
SAN LUIS RIO COLORADO, SONORA A FEBRERO 08 DEL 2011
OBJETIVO GENERAL DEL MÓDULO:
Al término del módulo el alumno será competente para: ¨Procesar muestras
biológicas utilizando
técnicas cuantitativas de sustancias metabólicas
interpreta los resultados y los relaciona entre sí para integrar un perfil del
metabolismo que auxilie al medico como apoyo para el reconocimiento de un
estado patológico del paciente.
OBJETIVOS PARTICULARES
1.- Valoración del metabolismo mediante Química Sanguínea
2.- Conoce, comprende, procesa y cuantifica el funcionamiento hepático
procesos bioquímicos, metabólicos y enzimáticos del estado fisiológico
interpretando los resultados.
3.- Aplica Técnicas para cuantificar electrolitos en sangre.
Índice
1.- Objetivos generales y particulares
2.- Índice
3.- Práctica #1 Determinación de Glucosa
4.- Práctica #2 Determinación de Urea
5.- Práctica #3 Determinación de Acido Urico
6.- Práctica #4 Determinación de Creatinina
7.- Práctica #5 Determinación de Colesterol
8.-Práctica #6 Determinación de Triglicéridos
9.- Práctica #7 Determinación de Lípidos Totales
PRÁCTICA #1
TECNICA. SPINREACT
DETERMINACION CUANTITATIVA DE GLUCOSA
INTRODUCCIÓN:
La glucosa es la mayor fuente de energía para las células del organismo; la
insulina facilita la entrada de glucosa en las células. La diabetes mellitus es
una enfermedad que cursa con una hiperglucemia, causada por un déficit de
insulina. El diagnóstico clínico debe realizarse teniendo en cuenta todos los
datos clínicos del laboratorio.
MUESTRAS: SUERO O PLASMA, LIBRE DE HEMÓLISIS Y LCR (El suero debe
separarse lo antes posible del coágulo) Estabilidad: La glucosa en suero o
plasma es estable 3 días a 2-8°C.
MATERIAL: 5 Tubos 12 x 75, 1 gradilla, pipeta pasteur corta con bulbo, 1
pipeta de 5 mls. 1 aplicador de madera, tubo sin edta.
PROCEDIMIENTO
Una vez separado el suero se procede a:
Etiquetar 3 tubos como:
BLANCO
PROBLEMA
STANDARD
Agregar a todos 1.0 mls. Del Reactivo
_____________
10 landas (suero)
-----------
_______________
--------10 landas (patrón)
-Mezclar e incubar 10 minutos a 37°C ó 15-20 minutos a temperatura
ambiente (15-25°C).
-Ajustar el espectrofotómetro a cero frente a agua destilada a 505
nanómetros de onda.
PROFRA. Faustina Orozco Gutiérrez
-Leer la absorbancia (A) del patrón y la muestra, frente al blanco del reactivo
(El color es estable como mínimo 30 minutos).
CÁLCULOS:
(A)Muestra
X 100 (Concentración del patrón)= mg/dl de glucosa
(A)Patrón
VALOR NORMAL:
SUERO O PLASMA = 60 – 110mg/dl
LCR= 60 – 80% del valor en sangre
_________________________________________________________________________
NOMBRE DEL PACIENTE:
GLUCOSA:
EDAD:
VALOR NORMAL:
NOMBRE DEL ALUMNO
MAESTRA: FAUSTINA OROZCO DE PALAFOX
FECHA:
REVISADO:
_________________________________________________________________________
Maestra: Faustina Orozco Gutiérrez
PRÁCTICA #2
DETERMINACION CUANTITATIVA DE NITROGENO UREICO
DEFINICIÓN
La urea es un compuesto que se forma en el hígado y es filtrado y
absorbido por los riñones. Constituye la fracción de nitrógeno no proteico
en la mayoría de los líquidos biológicos. Este es el principal producto final
del metabolismo proteico, de donde se deduce que su concentración sérica
se relaciona con la dieta y el metabolismo.
IMPORTANCIA CLÍNICA
La urea es un evaluador de la función renal, ya que aumenta cuando hay
insuficiencia renal o necrosis y disminuye en la fibrosis quística, eclampsia
y síndrome nefrótico. También es indicador de enfermedad hepática pues
su síntesis disminuye ante procesos necróticos del hígado.
La urea en suero es estable por 72 horas refrigerada 2-8°C y una vez obtenida
la muestra sin refrigerar por 8 horas.
MATERIAL: 1gradilla, 5 tubos 12 x 75, 1 pipeta pasteur/bulbo, 1 pipeta de
5mls., aplicador de madera, tubo sin edta.
PROCEDIMIENTO:
Una vez obtenido el suero se etiquetan 3 tubos como:
BLANCO
PROBLEMA
STANDARD
Agregar 1.0ml. del reactivo de trabajo a todos los tubos a temp. 37°C
__________
---------
10 Landas (suero)
----------
-------10 Landas (st)
Pasados 30segundos tomar lectura del problema y del standard y anotarla
con A1
Después de 1minuto volver a leer el problema y el estándar contra el blanco
del reactivo en una longitud de onda 340nm. Y anotarla como A2
CÁLCULO: (A1 - A2 )PROBLEMA
x Concentración ST = UREA mg/dl
(A1 - A2) STANDARD
VALOR NORMAL: 7 – 18mg/dl
REPORTE
---------------------------------------------------------Nombre del paciente:
UREA:
Nombre del alumno:
Profesora: FAUSTINA OROZCO GUTIERREZ
Edad:
Valor Normal:
Fecha:
Revisado:
________________________________________________________________________
PRÁCTICA #3
DETERMINACIÓN CUANTITATIVA DE ÁCIDO ÚRICO
TECNICA: SPINREACT
INTRODUCCION
El ácido úrico y sus sales son el producto final del metabolismo de las
purinas. En una insuficiencia renal progresiva hay una retención en sangre de
urea, creatinina y ácido úrico. Niveles altos de ácido úrico son indicativos de
patología renal y generalmente se asocia con la gota. El diagnóstico clínico
debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos clínicos y de laboratorio
MUESTRAS: SUERO O PLASMA, estabilidad 3-5 días a 2-8°C y 6 meses con
una temperatura de -20°C, en Orina de 24Hrs. Estabilidad 3 días a
temperataura ambiente
MATERIAL: 1 gradilla, 5 tubos de ensayo 12 x 75, pipeta pasteur/bulbo,
aplicador de madera, 1 pipeta de 5 mls. 1 tubo sin edta.
PROCEDIMIENTO:
Al tener separado el plasma proceder a etiquetar 3 tubos como:
BLANCO
PROBLEMA
STANDARD
Agregar 1.0 mls. Del reactivo a todos los tubos
_________
__________
25 Landas(Suero)
____________
___________
25 Landas (ST)
Mezclar e incubar 5 minutos a 37°C ó 10 mins. 15-25°C
Leer la absorbancia del patrón y la muestra, frente al blanco de reactivos. El
color es estable como mínimo 30 minutos., Leer a 520 nanómetros
CÁLCULOS: (A) Muestra
X (Concentración ST) = mg/dl de ácido úrico
(A) Standard
VALORES NORMALES: Suero o plasma Mujeres: 2.5 – 6.8mg/dl
Hombres: 3.6 – 7.7mg/dl
__________________________________________________________________________
Nombre del paciente:
Ácido úrico:
Nombre del alumno:
Maestra: Faustina Orozco de Palafox
PROFRA: Faustina Orozco Gutiérrez
Edad:
Valor Normal:
Fecha:
Revisado:
PRÁCTICA #4
DETERMINACION CUANTITATIVA DE COLESTEROL
TECNICA: POINTE
INTRODUCCIÓN: El aumento de los niveles normales del colesterol sérico
(Hipercolesterolemia) se considera desde hace ya muchos años, un factor de
riesgo de primer grado para las enfermedades cardiovasculares por ello, su
determinación se considera rutinaria en el laboratorio clínico. Aumenta en
Ictericia obstructiva, colelitiasis, mixidema, síndrome nefrótico etc.
Muestra: suero estable por 7 días a temp. De 18 a25°C y congelado 6 meses.
PROCEDIMIENTO
OBTENIDO EL SUERO ETIQUETAR LOS 3 TUBOS DE RUTINA
BLANCO
PROBLEMA
STANDARD
Agregar a cada uno de ellos 1.0ml del reactivo previamente calentado a 37°C
por 5 minutos.
_____________
10 landas (Suero)
_____________
________________
_____________
10 landas(ST)
Mezcla e incubar todos los tubos a 37°C por 5 minutos
Leer en absorbancia contra el blanco del reactivo a 500 nm en
espectrofotómetro
CÁLCULO: ABSORBANCIA (PROBLEMA) X CONC. (st)= mg/dl Colesterol
ABSOBANCIA (STANDARD)
MATERIAL: LO MISMO QUE LA PRÁCTICA ANTERIOR
VALOR NORMAL: Debajo de:
Ligeramente alto:
Alto:
200mg/dl
200 – 239mg/dl
240mg/dl
_________________________________________________________________________
NOMBRE DEL PACIENTE:
EDAD;
COLESTEROL:
NOMBRE DEL ALUMNO:
MAESTRA: Faustina Orozco de Palafox
FECHA:
REVISADO:
_________________________________________________________________________
PROFRA. FAUSTINA OROZCO GUTIERREZ
PRACTICA #5
TECNICA: POINTE
DETERMINACION CUANTITATIVA DE CREATININA
IMPORTANCIA CLÍNICA: La creatinina es un producto final del metabolismo
de la creatina muscular, se elimina de la sangre por filtración glomerular y su
concentración en sangre depende de la masa muscular del cuerpo, sus
elevaciones suelen ser paralelas a las de urea, aún cuando en general son
más tardías. No aumenta durante las enfermedades renales hasta que el
riñón no se encuentre lo suficientemente dañado.
MUESTRA: SUERO y es estable por 24 horas refrigerada (2-8°C)
MATERIAL: LO MISMO QUE LA PRÁCTICA ANTERIOR
Nota: Dependiendo del ST hacerla a la mitad
PROCEDIMIENTO
ETIQUETAR 3 TUBOS COMO:
BLANCO
PROBLEMA
STANDARD
Agregar a todos los tubos 1.0mls. del reactivo de trabajo
___________
50Landas (suero)
___________
_______________
____________
50 Landas (ST)
Mezclar y exactamente a los 60 segundos leer en absorbancia a
510nanometros contra el blanco del reactivo el problema y el estándar y
anotar esta lectura con A1 de cada uno de ellos.
Pasados otros 60 segundos volver a leer el problema y estándar y anotar las
lecturas como A2
Profra. Faustina Orozco Gutiérrez
CÁLCULO: (A1-A2)PROBLEMA x CONC. ST = mg/dl de creatinina
(A1-A2)STANDARD
VALOR NORMAL: 0.40 -1.40mg/dl
_________________________________________________________________________
Nombre del paciente:
Creatinina:
Valor Normal:
Nombre del alumno:
Maestra:
Edad:
Faustina Orozco de Palafox
Fecha:
Revisado:
_________________________________________________________________________
Profesora: Faustina Orozco Gutiérrez