PRÁCTICA #7 DETERMINACIÓN CUANTITATIVA DE BILIRRUBINA

PRÁCTICA #7
DETERMINACIÓN CUANTITATIVA DE BILIRRUBINA
(TOTAL Y DIRECTA)
TECNICA: SPINREACT
SIGNIFICADO CLINICO: La bilirrubina se origina por la degradación de la
hemoglobina. Es transportada del bazo al hígado y se excreta en la bilis. La
hiperbilirrubinemia es el resultado de un incremento de la bilirrubina en
plasma. Causas probables de la Hiperbilirrubinemia:
Bilirrubina Total: Aumento de la hemólisis, alteraciones genéticas, anemia
neonatal, alteraciones eritropoyéticas, presencia de drogas.
Bilirrubina Directa: Colestasis hepática, alteraciones genéticas y alteraciones
hepáticas. El diagnóstico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos
clínicos del laboratorio.
MUESTRAS: SUERO O PLASMA libre de hemólisis ( separar lo antes posible
de los hematíes).Estabilidad del suero 4 días de 2 a 8°C o 2 meses a -20°C.
Material: 6 tubos de ensayo 12 x 75, 2 pipetas de 5ml, gradilla
Etiquetar 4 tubos de la siguiente manera
BLANCO
1.- DEL R1
2.- DEL R2
B.(TOTAL)
BLANCO
B.(DIRECTA)
--------
---------
1.5 ML.
1.5 ML.
1.5 ML.
---------
--------
1.5 ML.
3.- DEL R3
---------
50 LANDAS
---------
50 LANDAS
4.- ST
100 LANDAS
--------
100 LANDAS
--------
5.- SUERO
---------
100 LANDAS
----------
100 LANDAS
6.- Mezclar e incubar exactamente 5 minutos a 15 – 25 °C
7.- Leer en absorbancia a 555 nanometros, ajustar el espectrofotómetro a
cero frente a agua destilada.
Cálculos: (A) muestra - (A) blanco muestra
(A) St
VALORES NORMALES:
X conc. St= mg/dl
- (A) Blanco st
BILIRRUBINA TOTAL:
Bilirrubina
HASTA 1,10 mg/dl
BILIRRUBINA DIRECTA: HASTA 0,25 mg/dl
Nombre del paciente:
Resultados:
Nombre del alumno:
Maestra: Faustina Orozco de Palafox
PROFRA. Faustina Orozco Gutiérrez
Edad:
Valores Normales:
Fecha:
Revisado:
PRÁCTICA #8
DETERMINACION CUANTITATIVA DE PROTEINAS TOTALES
TECNICA: SPINREACT
SIGNIFICADO CLINICO: Las proteínas son compuestos orgánicos
macromoleculares, ampliamente distribuidos en el organismo. Actúan como
elementos estructurales y de transporte. Se dividen en dos fracciones,
albúmina y globulinas. Su determinación es útil en la detección de:
-Hiperproteinemia producida por hemoconcentración, deshidratación o
aumento en la concentración de proteínas específicas.
-Hipoproteinemia por hemodilución debida a un defecto en la síntesis
proteica, perdidas excesivas (hemorragias) o catabolismo proteico excesivo.
Muestras: Suero o plasma Heparinizado, estabilidad de la muestra: 1 mes en
nevera a ( 2-8°C)
MATERIAL: 1 GRADILLA. 1 PIPETA DE 5MLS. 3 TUBOS 12 X 75
ETIQUETAR 3 TUBOS DE RUTINA
BLANCO
PROBLEMA
ESTÁNDAR
1.OML DE REACTIVO A TODOS LOS TUBOS
--------
25 LANDAS(SUERO)
--------
----------
-------25LANDAS (st)
MEZCLAR E INCUBAR 5 MINUTOS A 37°C
LEER LA ABSORBANCIA (A) DEL ESTÁNDAR Y PROBLEMA, FRENTE AL
BLANCO DEL REACTIVO A 540 NANOMETROS. (EL COLOR ES ESTABLE
COMO MÍNIMO 30 MINUTOS).
CÁLCULO: (A) PROBLEMA X 7 = G/DL DE PROTEÍNAS TOTALES
(A) ST
VALORES NORMALES: ADULTOS: 6.6 - 8.3 g/dl
RECIEN NACIDOS: 5.2 - 9.1g/dl
Reporte:
Nombre del paciente:
Resultado:
Nombre del alumno:
Maestra: Faustina Orozco de Palafox
Profra. Faustina Orozco Gutiérrez
Edad:
Valor Normal:
Fecha:
Revisado:
PRÁCTICA
#9
DETERMINACIÓN DE ALBÚMINA
TECNICA: SPINREACT
SIGNIFICADO CLINICO: La albúmina es una de las más importantes proteínas
plasmáticas producidas por el hígado. Entre sus múltiples funciones se
incluye nutrición, transporte de sustancias como calcio, bilirrubina, ácidos
grasos, drogas y esteroides. Alteraciones en los valores de albúmina indican
enfermedades del hígado, desnutrición, lesiones de la piel como dermatitis,
quemaduras severas o deshidratación.
MUESTRAS: SUERO O PLASMA LIBRE DE HEMOLISIS, estabilidad 1 mes a (28°C) o 1 semana a 15 – 25°C.
MATERIAL: 3 TUBOS 12 X 75, GRADILLA, 1 PIPETA DE 5MLS.PUNTILLAS,
MICROPIPETA
PROCEDIMIENTO
ETIQUETAR 3 TUBOS COMO:
BLANCO
PROBLEMA
STANDAR
1.O ML. DE REACTIVO A TODOS LOS TUBOS
-------------
5 LANDAS (SUERO)
-----------
-------5 LANDAS (st)
MEZCLAR E INCUBAR 10 MINS. A TEMPERATURA AMBIENTE
-LEER EN ABSORBANCIA (A) DEL ST Y PROBLEMA, FRENTE AL BLANCO
DEL REACTIVO A 630 NM. EL COLOR ES ESTABLE 1 HORA A TEMP.
AMBIENTE.
CÁLCULO: (A) PROBLEMA X 5
(A)
= g/dl de albúmina del problema
ST
VALORES NORMALES: 3.5 A 5.0 g/dl
REPORTE:
_________________________________________________________________________
NOMBRE DEL PACIENTE:
RESULTADO:
EDAD:
VALORES NORMALES:
NOMBRE DEL ALUMNO:
MAESTRA: FAUSTINA OROZCO GUTIERREZ
FECHA:
REVISADO:
________________________________________________________________________
PROFRA. Faustina Orozco Gutiérrez
PRÁCTICA #10
DETERMINACIÓN DE TRANSAMINASAS TRANSAMINASA GLUTAMICO
OXALACETICA (TGO), ASPARTATO AMINOTRANSFERASA (AST).
DEFINICIÓN:
La Got es una enzima con gran concentración en el corazón, en el hígado y
los músculos. Cuando hay una lesión de estos órganos la enzima es liberada
a la sangre y aparece elevada en los análisis.
Muestra: En suero y es estable por 10 días refrigerado ( 2-8°C) y congelado
(-20°C) por 2 semanas y 4 días a temperatura ambiente de (15 a 30°C).
Material: 1 tubo 12 x 75, 1 gradilla y pipeta de 2 mls.
PROCEDIMIENTO
Etiquetar nuestro tubo como problema
-Agregar 1.0 ml. De reactivo de trabajo e incubar por 5 minutos a 37°C
-Agregar 100 landas del suero e incubar 1 minuto a 37°C
-Pasado el minuto leer en absorbancia a 340 nm contra blanco de agua
-Volver a incubar por 2 minutos y volver a leer
-Calcular la diferencia de las lecturas y multiplicar por el factor 1768
VALOR NORMAL: 5 A 34 IU/L
Profra: Faustina Orozco Gutiérrez
REPORTE:
_________________________________________________________________________
Nombre del paciente:
Resultado:
Edad:
Valor Normal:
Nombre del alumno:
Maestra: Faustina Orozco Gutiérrez
Fecha:
Revisado:
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Profra: Faustina Orozco Gutiérrez
PRÁCTICA #11
DETERMINACION DE TRANSAMINASA GLUTAMICO-PIRUVICA
(GPT), ALANINA AMINOTRANSFERASA (ALT)
TECNICA: POINT
INTRODUCCIÓN: La GPT es una enzima con gran concentración en el hígado
y en menor medida en los riñones, corazón los músculos, cuando hay una
lesión de estos órganos la enzima es liberada a la sangre y aparece elevada
en los análisis, como es una transaminasa más específicamente hepática que
la GOT, aparece más elevada en enfermedades hepáticas que en otras.
Muestra: Suero No hemolizado es estable por 3 días a temperatura ambiente
(15-30°C) 7 días refrigerado (2-8°C) y 30 días congelado (-20°C).
Material: Gradilla, 1 pipeta de 2 mls. 2 tubos 12 x 75
PROCEDIMIENTO
- En un tubo agregar 1.0 ml. Del reactivo de trabajo
- Incubar a 37°C por 5 minutos
- Preparar el espectofotometro a 340 NM. Con agua destilada ajustar a 0
- Agregar 100 landas de suero, mezclar e incubar por 1 minuto
- Pasado el minuto leer e incubar 2 minutos volver a leer
- Restar la lectura A1 – la A2 y lo que se obtenga multiplicar por el factor
1768.
Valor Normal: 4 a 36 IU/L
REPORTE:
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Nombre del paciente:
Resultado:
Nombre del alumno:
Maestra: Faustina Orozco Gutiérrez
Edad:
VALOR NORMAL:
Fecha:
Revisado:
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PRÁCTICA #12
DETERMINCIÓN DE FOSFATASA ALKALINA
Introducción: La fosfatasa alkalina es una enzima localizada en la mayor parte
de los tejidos, pero sobretodos en hígado, huesos y vías biliares, es muy
preciso en la determinación de obstrucciones de los conductos biliares, Su
elevación suele ir asociada a la elevación de la Gamma-GT, excepto en
casos de problemas óseos que elevan la Fosfatasa alkalina.
Muestra: Suero no hemolizado refrigerado de (2-8°C) no más de 2 días.
MATERIAL: LO MISMO QUE LA PRÁCTICA PASADA
1.
2.
3.
4.
Pipetear 1.0 ml. Del reactivo de trabajo, incubar 5 mins. a 37°C
Ajustar espectrofotómetro a 405 NM con agua destilada
Agregar 25 Landas de suero e Incubar 1 mins.
Pasado el minuto leer la absorbancia e incubar 2 minutos y volver a
leer.
5. Calcular la A1-A2 x el factor (2187) y nos dará el resultado de
Fosfatasa Alkalina en UI/L
VALOR NORMAL : 35 – 123 UI/L
REPORTE:
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Nombre del paciente:
Edad:
Resultado:
Valor Normal:
Nombre del alumno:
Fecha:
Maestra: Faustina Orozco Gutiérrez
Revisado:
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Profra: Faustina Orozco Gutiérrez
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