lactoferrina fecal (leuko-test) (cf008)

Laboratorio de Investigación de
Enfermedades Gastrointestinales
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LACTOFERRINA FECAL (LEUKO-TEST) (CF008)
UTILIDAD CLINICA
Es una prueba rápida que puede ser útil en la
evaluación de pacientes con diarrea para determinar si hay o no reacción inflamatoria. Su valor
predictivo para identificar muestras que requieren cultivo es superior que el examen de leucoci-
tos fecales por microscopía. Es útil también en el
tamizado inicial de pacientes con diarrea crónica
para detectar enfermedad inflamatoria intestinal
así como para evaluar la actividad de la enfermedad en pacientes ya diagnosticados.
DESCRIPCION
Este examen detecta lactoferrina en heces, una
proteína muy estable que marca la presencia de
leucocitos. Cuentas de látex recubiertas con anticuerpos anti-lactoferrina dan una reacción positiva de aglutinación si hay lactoferrina en niveles
elevados. La reacción indica un número aumentado de leucocitos fecales, salvo que la lactoferrina
provenga de otras fuentes, como leche materna.
Cuentas de látex recubiertas con IgG sirven como
control negativo. El examen es semi-cuantitativo.
INFORMACION CLINICA
Lactoferrina es
una proteína
de los
leucocitos y un
marcador muy
estable de
reacción
inflamatoria
En contraste con las diarreas virales y las diarreas
causadas por algunas bacterias como E. coli
enterotoxigénica y V. cholerae o parásitos como
Cyclospora y Cryptosporidium, las diarreas causadas por Shigella, Campylobacter, Salmonella,
Clostridium difficile y Yersinia, inducen una reacción inflamatoria intensa en la pared intestinal
que se traduce en la exudación hacia el lumen de
grandes cantidades de leucocitos que subsecuentemente aparecen en el moco fecal. Otras condiciones clínicas de origen no-infeccioso como colitis alérgica y enfermedad inflamatoria intestinal
crónica causan un proceso inflamatorio similar.
La detección de leucocitos en las heces es por
eso una herramienta diagnóstica útil en la evaluación de pacientes con diarrea. La mayoría de la-
boratorios clínicos detecta leucocitos fecales mediante microscopía; sin embargo, este método no
es estándar porque depende de la experiencia del
examinador y de las condiciones de la muestra.
Los leucocitos son estructuras frágiles y su morfología puede cambiar y su cantidad disminuir, haciendo difícil su reconocimiento, si la muestra no
es examinada inmediatamente tras su recolección. De otro lado, algunas toxinas como las
producidas por C. difficile pueden desintegrar los
leucocitos. Por todo esto puede que no se
observen leucocitos aun cuando hay una severa
inflamación. La detección de lactoferrina fecal,
una proteína liberada de los leucocitos, es un
método alternativo para evaluar la inflamación
intestinal sin las limitaciones de la microscopía.
MUESTRA
Heces frescas, refrigeradas o congeladas, en recipiente apropiado (frasco limpio, seco, de boca ancha y
tapa hermética). Mínimo 5 mL (5 g) – Mayor cantidad si conjuntamente se solicitan otros exámenes.
INSTRUCCIONES PARA OBTENCION Y TRANSPORTE DE LA MUESTRA
Obtener la muestra en frasco limpio de boca
ancha y tapa hermética. No mezclar la muestra
con orina, cremas o talco. Colectar la mayor
cantidad posible. En niños pequeños colocar el
pañal al revés (por la parte no absorbente), cubrir la salida de la uretra con un trozo de algodón
(para no contaminar la muestra con orina) y
trasvasar la muestra al frasco. Muestras en pañal
no son aceptables. Enviar la muestra al laboratorio inmediatamente después de su obtención en
caja térmica con refrigerantes. Muestras de lugares fuera de Lima o que no pueden ser enviadas
al laboratorio antes de 3 horas desde su obténción deben ser congeladas a -20°C hasta su envío.
Muestras en un medio de preservación como
Cary-Blair son aceptables para esta prueba. No
colectar la muestra en recipientes que contengan
formol o compuestos similares, sueros animales,
iones metálicos, agentes oxidantes o detergentes
debido a posibles interferencias con la prueba.
METODO DE ANALISIS
Se prepara una suspensión de la muestra con una
solución tamponada y se mezcla en Vórtex. Se
coloca una gota de Látex Sensibilizado en cada
uno de dos círculos de la tarjeta de aglutinación
(círculos 1 y 2) y una gota de Látex Control
Negativo en otro círculo (círculo 3). Una gota de
la muestra-suspensión se añade a los círculos 2 y
3 y una gota de Reactivo de Control Positivo al
círculo 1 de la tarjeta. Se incuba y agita la
tarjeta durante 3 minutos, se lee y se registran
los resultados. Para ser válida la prueba, el
control positivo debe dar una reacción de
aglutinación claramente visible como un anillo
blanco en el perímetro y el control negativo no.
GASTROLAB | BR-CF008 | DERECHOS RESERVADOS® | ABRIL 2011 | Página 1 de 2
RANGO DE RESULTADOS
Negativo, sin aglutinación visible
Positivo 1+, reacción inflamatoria leve
Positivo 2+, reacción inflamatoria moderada,
Positivo 3+, reacción inflamatoria severa
Positivo 4+, reacción inflamatoria muy severa
RANGO NORMAL
Negativo, no hay lactoferrina en cantidad elevada
TIEMPO DE ENTREGA DE RESULTADOS
3 horas o antes, desde recibida la muestra
INTERPRETACION DE RESULTADOS
Si el resultado se informa como POSITIVO indica
la presencia de niveles elevados de lactoferrina
liberada de leucocitos, salvo que la lactoferrina
provenga de otras fuentes como leche materna.
Normalmente no hay o hay solo una escaza cantidad de leucocitos (y por ende lactoferrina) en
una muestra fecal. Para esta prueba, la muestra
se diluye a un nivel suficiente para detectar
únicamente cantidades elevadas de lactoferrina
por lo que esta prueba se puede considerar bastante específica de reacción inflamatoria clínicamente relevante. En muestras fecales diarreicas,
niveles aumentados de lactoferrina indican que
una bacteria invasiva podría ser la causa y que un
cultivo puede ser necesario. Niveles elevados de
lactoferrina fecal pueden presentarse también en
procesos inflamatorios intestinales de origen noinfeccioso como colitis alérgica o enfermedad
inflamatoria intestinal crónica. Aunque la prueba
es semi-cuantitativa, el número de cruces en una
reacción POSITIVA indica la intensidad de la reacción inflamatoria. Si el resultado se informa como
NEGATIVO es muy poco probable que haya realmente una condición inflamatoria intestinal sea
infecciosa o no-infecciosa. Esta prueba sólo detecta lactoferrina en las heces y no indica necesariamente que hay una infección ni cuál podría
ser el agente infeccioso de estar presente. Esta
información es sólo para ser tomada en cuenta. El
médico es el más indicado para decidir lo que se
deba hacer en base a los síntomas, el cuadro
clínico y el resultado de esta prueba.
LIMITACIONES Y RECOMENDACIONES
1. Mantener la muestra refrigerada desde su
obtención hasta la llegada al laboratorio; la
lactoferrina es una proteína estable pero
puede deteriorarse en muestras expuestas
a temperaturas elevadas durante el transporte al laboratorio;
2. En niños que reciben leche materna, el
resultado de esta prueba puede ser
POSITIVO debido a la lactoferrina que está
presente en la leche materna en forma
natural;
3. Si el resultado de la prueba es NEGATIVO y
la sospecha de enfermedad inflamatoria es
muy fuerte puede ser conveniente repetir
la prueba en una nueva muestra;
4. Esta prueba detecta niveles elevados de
lactoferrina liberada de leucocitos fecales;
la prueba puede no ser adecuada para
personas inmunosuprimidas;
5. Esta prueba no ha sido evaluada clínicamente para ser utilizada en la detección de
leucocitos en otro tipo de muestras clínicas;
sólo puede ser utilizado en el examen de
especímenes fecales.
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