MANUAL DE NORMAS Y PROCEDIMIENTOS PAG. No: SERVICIO DE LABORATORIO (SEROLOGIA) 1 DE 3 PROCEDIMIENTO: REACCIÓN DE WIDAL CODIGO 1. GENERALIDADES La reacción de widal es un método sexológico usado comúnmente en el diagnóstico de las fiebres tifoideas, entéricas y ondulantes; la reacción mide el título del suero contra una suspensión de microorganismos conocidos. Salmonella son bacilos no esporulados aerobios Gram negativos. Hay 3 especies clínicamente importantes de salmonella: enteritidis, choleraesuis y typhi. Tres síndromes principales resultan de la infección por salmonella 1) gastroenteritis la forma más común 2) fiebre tifoidea y 3) septicemia. 2. MUESTRA La prueba se realiza en contaminadas. sueros. Se debe descartar muestras turbias, bemolizadas o 3. MÉTODO Método de aglutinación rápida en placa. 4. FUNDAMENTO Se basa en reacciones de aglutinación entre los antígenos y los anticuerpos contra estos antígenos presentes en el suero del paciente. Tabla Nº 1: Reacción de Vidal EQUIPO Cronograma Agitador de placas MATERIAL Placa de vidrio con divisiones Aplicadores Micropipeta graduable De 10 a 100 ul. REACTIVO Antìgeno O Antígeno H Ag. Paratyphi A Ag. Paratyphi B Fuente: Elaborado por Laboratorio Clínico, “Reacción de Vidal”, SSU, 2010. 5. PROCEDIMIENTO Utilizar de preferencia una placa de vidrio marcada. Anotar el antígeno que le corresponde a cada serie. Depositar en los cuadros de cada serie 0.08, 0.04, 0.02, 0.01 y 0.005 ml de suero del paciente de arriba abajo. Agregar una gota de antígeno a cada una de las cantidades de suero. MANUAL DE NORMAS Y PROCEDIMIENTOS PAG. No: SERVICIO DE LABORATORIO (SEROLOGIA) 2 DE 3 CODIGO PROCEDIMIENTO: REACCIÓN DE WIDAL Mezclar con aplicador limpio, comenzando con la ultima dilución de abajo hacia arriba. Agitar suavemente la placa por rotación a 120 rpm durante 2 minutos. Leer con luz indirecta con el objetivo de 10. 6. LECTURA E INTERPRETACIÓN Se observa la aglutinación microscópica y se valora los resultados de la siguiente forma: Tabla Nº 2: Grado de Aglutinación Microscópica GRADO DE AGLUTINACIÓN 100 % 75 % 50 % 25 % 0 4+ 3+ 2+ + - Fuente: Elaborado por Laboratorio Clínico, “Reacción de Vidal”, SSU, 2010. El punto final de la aglutinación será la máxima dilución de suero que muestre una aglutinación ejemplo: Tabla Nº 3: - Suero en (ml). - Aglutinación. - Título correspondiente. 0.08 5+ 1/20 0.04 4+ 1/40 0.02 3+ 1/80 0.01 2+ 1/160 0.005 1+ 1/320 Fuente: 7. CONTROL DE CALIDAD Es recomendable el uso de controles, tanto positivos como negativos, para asegurar la validez de los resultados diarios. 8. RECOMENDACIONES No congelar ninguno de los reactivos. Evitar utilizar los reactivos fríos. La mayoría de los sueros considerados como normales pueden mostrar títulos de 1/20, 1/40 y ocasionalmente 1/80. La presencia de títulos bajos puede ser debido a vacunaciones, a infecciones pasadas o subclínicas. MANUAL DE NORMAS Y PROCEDIMIENTOS PAG. No: SERVICIO DE LABORATORIO (SEROLOGIA) 3 DE 3 PROCEDIMIENTO: REACCIÓN DE WIDAL CODIGO La mejor indicación de un proceso activo lo marcan dos titulaciones sucesivas con una diferencia importante entre el primero y el segundo título, lo que nos indicaría infección activa, aunque también se observa esto en los convalecientes. Es conveniente estudiar varias muestras de sangre del enfermo con diferencia de 5-7 días en los casos dudosos.