Fermentaciones Dra. Yenizey Merit Alvarez Es el espacio físico donde se realizará los procesos bioquímicos por parte de una especie microbiana. * superficie o estacionario. * sumergidas de lecho empacado o dinámico. Disponibilidad de nutrientes (C y N) pH del sustrato Temperatura de incubación Disponibilidad de oxígeno Fase de crecimiento del microorganismo Presencia de microorganismos competidores “Rendimiento de la fermentación” Fermentación discontinua (batch) 1. Sistema cerrado 2. Adición de oxígeno, agente antiespumante y ácidos o bases 3. Tiene una cantidad limitada de medio 4. Se interrumpe al final de la fase logarítmica (metabolitos primarios) o antes de que comience la fase de muerte (metabolitos secundarios) La concentración de biomasa por unidad de tiempo es: x – XR = γs (SR – s) x = concentración celular en un tiempo t XR = inóculo o concentración celular inicial γ = rendimiento para el substrato limitante (g de biomasa por g de substrato consumido) s = concentración de substrato en el tiempo t SR = concentración inicial de medio Ys = dN/dS μ = (dN/dt)/N (dN/dt)/N = Ys (dS/dt)/N μ = Ys qs «tasa específica de consumo de substrato» Fermentación continua Crecimiento en un sistema abierto se realiza un suministro constante de nutrientes se realiza una eliminación continua de residuos Mantiene las células en fase logarítmica/exponencial a una concentración constante de biomasa durante largos periodos de tiempo Esto se logra empleando un sistema de cultivo continuo Quimiostatos Turbidostatos La concentración de biomasa viene dada por: x’ = γ SR - Ks·D μmax - D X’ = concentración de biomasa en un estado estacionario γ = rendimiento para el substrato limitante (g de biomasa por g de substrato consumido) Ks = constante inicial SR = concentración inicial de medio D = velocidad específica de crecimiento (μ) μmax = velocidad máxima de crecimiento Quimiostato 1) La velocidad a la que se añade el medio fresco al cultivo es igual que la velocidad a la que se elimina el medio del cultivo 2) La rapidez de crecimiento depende del tipo de nutriente limitante D = f/V f es la velocidad de flujo (ml h-1) V el volumen del recipiente en ml Turbidostato 1. Regula el flujo de medio de cultivo fresco al recipiente del cultivo de forma que se mantiene una turbidez o densidad celular constante 2. La velocidad de dilución es variable 3. No hay nutrientes limitantes 4. Funciona mejor a elevadas velocidades de dilución DILUCIÓN CRÍTICA (Dc) VENTAJAS DEL CULTIVO CONTINUO SOBRE EL CULTIVO POR LOTES: Opera por periodos largos; tiempos muertos bajos Costos de operación y trabajo bajos El cultivo se mantiene con coeficientes de crecimiento constantes Crecimiento balanceado, composición celular constante Generación de biomasa constante como productividad y conversión Volumen de reactor reducido en comparación a la productividad similar en proceso por lotes DESVENTAJAS DEL CULTIVO CONTINUO SOBRE EL CULTIVO POR LOTES: Alto costo por alta calidad de equipos y accesorios Requiere gran reservorio para almacenamiento de medio (sustrato) Esterilización continuada, separación continuada de producto y niveles de purificación Biosensores sofisticados y automatización computarizada para operación óptima Se incrementa el riesgo de contaminación debido a la amplia operación Posibilidad de mutación, incremento de FAGOS por los cambios genéticos debido a la presencia de plasmidos La conversión total de sustrato exige sistema de multiniveles, inmovilización celular o recirculación celular que encarece el costo de operación. RENDIMIENTOS: rendimiento biomasa: rendimiento en producto: rendimiento del sustrato: Y p/x = dP dX METABOLITOS PRIMARIOS Y SECUNDARIOS Aminoácidos utilizados en la industria alimentaria Aminoácido Producción aual en el mundo (Tm) L-glutamato L-aspartato y alanina Glicina L-cysteina L-triptófano+L-histidina 370.000 5.000 6.000 700 400 Aspartame 7.000 (a partir de L-fenilalania+L-aspártico) L-lisina 70.000 DL-Metionina 70.000 Usos Finalidad Varios alimentos Zumos de frutas Alimentos edulcorados Pan Zumos Varios alimentos Leche en polvo Bebidas refrescantes Reforzar el sabor, ablandador de la carne Enriquecer el sabor Mejora del sabor, Partida para síntesis orgánicas Mejora calidad Antioxidante Antioxidante, evita enranciado; aditivo nutritivo Pan (Japón). Piensos Productos de la soja y Piensos. Aditivo nutritivo Aditivo nutritivo Aditivo nutritivo Aditivo nutritivo Edulcorante bajo en calorias CULTIVOS INICIADORES (Starters) Son microorganismos viables adicionados a los alimentos o a un sustrato para mejorar su calidad o aumentar su aceptabilidad. Cultivos puros o mixtos de cepas de M.O. seleccionados, con una actividad enzimática y que son adicionados en cantidades definidas para producir una transformación deseable en el sustrato. CARACTERISTICAS Especie Número de microorganismos Actividad Ausencia de otros microorganismos Apatogenicidad Mesofilos Homofermentativo (bacterias lacticas) Halo y nitrito tolerantes (para carnes) Preferentemente no lipoliticas, ni proteolíticas. Inexistencia de toxinas. Los cultivos iniciadores “starters” Inducen cambios en las propiedades de los alimentos, • Modificación en la textura • La conservación, • El desarrollo de aromas • La mejora nutricional. PRINCIPALES INCIADORES • • • • • • APLICACIONES DE LOS CULTIVOS Industrias lácticas Industrias cárnicas Industrias panificadoras Industrias conserveras de vegetales Fermentación de bebidas alcohólicas Producción de alcohol industrial. IMPORTANCIA DEL SUSTRATO Debe ser un sustrato industrial inócuo. Abundante dependiendo de la región Económicamente viable Inducir a la producción del M. O. o de un metabolito MATERIAS PRIMAS COMO SUSTRATO: De origen animal: Carne de res Corazón de res Cerebro de ternera o res Hígado, Sangre, Gelatina, Caseína Pescado. De origen vegetal Soya, (harina de soya) Papa (harina de papa y papa dulce) Maíz (hanias de maíz) Malta (harina de cebada malteada) Tomate Trigo (harina de trigo) Arroz (harinas de arroz y derivados de cascarilla) Guisantes De origen microbiano Levadura de panadería Levadura de cerveza.