7. PRODUCCION DE LARVAS DE CONCHA PRIETA EN

Taller Binacional Ecuador-Colombia
Conservación de los manglares y sus recursos en la frontera Ecuador-Colombia
Plan de acción regional para la conservación de manglares en el Pacífico sudeste (PAR)
MANEJO DEL RECURSO CONCHA
PRODUCCIÓN DE LARVAS DE CONCHA
PRIETA/NEGRA EN LABORATORIO PARA
REPOBLAMIENTO Y ENGORDE: EXPERIENCIAS EN
ECUADOR Y PERÚ
Virna Cedeño Escobar
ESTRATEGIAS DE RECUPERACIÓN DEL RECURSO
Anadara tuberculosa
- Limitación esfuerzo de pesca  vedas  prevención
- Producción de semillas en condiciones de laboratorio:  ACUICULTURA-REPOBLAMIENTO
Larva pediveliger
Larva con ojo
Larva
umbonada
Larva asentada
12 días
11 días
Larva- D
6 días
18
días
48
horas
Trocofora
Post- larvae
20 días
Ciclo biológico de la concha negra
Anadara tuberculosa
12 horas
37 días
semilla 1 mm
Ovocitos
60 días
Huevo
fecundado
Semilla de 3-5 mm
espermas
Reproductores
71-FINCYT-PITEI-2010
Experiencias en
producción de
semilla de A. tuberculosa concha
negra con fines de repoblamamiento
Ocean Farm – Ecuador y CEBAP
Puerto Pizarro- Perú.
FINCyT PITEI 071:
Desarrollo de metodologías para la reproducción y larvicultura de la Concha negra
(Anadara tuberculosa), destinada a operaciones de repoblación en el Santuario
Nacional Los Manglares de Tumbes y engorde en cultivo.
Diseño de laboratorio
Cultivo de microalgas
Fijación de
larvas
Tanques con
semillas
Laboratorio de
diagnóstico
Área de cultivo
Acuicultura: Acondicionamiento y desove
1
2
Temperatura adecuada y
estable, alimentación
suficiente
maduración gonadal.
Inducción desove
shock térmico, químico,
microalgas, estrés…
3
Desove masal o separada,
fecundación masal o
controlada
Experiencia Ecuador: Ocean Farm, Manta
Experiencia Perú: Hivos y PRC en el CEBAP, Puerto Pizarro
a
b
Desove de una hembra (a) y de un
macho (b) de Anadara tuberculosa
Desarrollo embrionario a 26°C de Anadara tuberculosa: Óvulo fecundado de 55µm (A);
Aparición del primer glóbulo polar (B); Divisiones celulares(C, D, E y F); Larva
trocófora (G y H).
Desarrollo larvario de las fases planctónicas de Anadara tuberculosa
a) larva tipo D, b) larva umbonada, c) larva con ojo, d) larva pediveliger
Experiencia Perú: Hivos y PRC en el CEBAP, Puerto Pizarro
2.500.000
# de larvas
2.000.000
1.500.000
1.000.000
500.000
3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22
Sistema de acondicionamiento de reproductores de Anadara
Dias de cultivo
tuberculosa en un congelador para mantener una temperatura
Seguimiento de las mortalidades del primer lote de larvas de
de 23-24°
Anadara tuberculosa obtenida en el CEBAP
9.000.000
8.000.000
# de larvas
7.000.000
larvas umbonadas y semillas de menos de 1mm de lotes de
larvas de Anadara tuberculosa obtenido en el CEBAP
6.000.000
5.000.000
4.000.000
3.000.000
2.000.000
1.000.000
3
4
5
6
7
8
9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29
Dias de cultivo
Seguimiento de las mortalidades del primer lote de larvas de
Anadara tuberculosa obtenida en el CEBAP
II. Enfermedades
Mortalidades en reproductores
Diagnóstico molecular Perkinsus sp.
Bacteriosis Vibrio y Pseudomonas.
Mortalidad en larvas
Bacteriosis: Vibrio y Pseudomonas
Géneros relacionados a mortalidades son: V. alginolyticus, V. tubiashii y
V. anguillarum, V harveyi, V . parahaemoliticus (Romalde et al., 2015;
Elston., 1980; Riquelme et al., 1995, 1996, 2001, 2015).
microbiota nativa benéfica
Microbiota
nativa
cultivable
Tracto digestivo
Agua
Sangre
Suelo
Microbiota
nativa
no cultivable
Explorar la composición de la microbiota nativa cultivable y no cultivable asociada a
la sangre y al tracto digestivo de individuos sanos de A. tuberculosa, un candidato
potencial para la producción acuícola.
Microbiota cultivable
 Se encuentra dominada por bacterias con fácil crecimiento  Vibrio, Pseudomonas, etc
 Alto % de las especies bacterianas no son cultivables  diversidad es sub estimada.
Microbiota total (Metagenómica): bacterias cultivables y no cultivables in vitro
 La composición microbiana global del tracto digestivo de ostras ha sido analizada en los últimos años (Kings et al.,
2012; Trabal et al., 2012 y Chauhan et al., 2014).
 Se han direccionado estudios de la microbiota total presente en la hemolinfa en la ostra del Pacífico bajo condiciones
de estrés de temperatura e infección con vibrios (Lockmer et al., 2014).
 La metagenómica ha demostrado que la ostra alberga un microbioma más diverso que aquel generalmente
caracterizado por microbiología clásica (Garnier et al., 2007; Najiah et al., 2008).
Realización de cortes congelados de concha negra para visualizar y
caracterizar componentes moleculares del molusco y bacterias asociadas.
Final
100
-
Shots
800
-
43438;
Run
#10;
4271.2456(R240,S124)
Label
H6
M
Vibrio sp. Y1-10
a
s
a
n
Staphylococcus aureus
i
m
a nativas, aisladas a partir de TD y SG de
Primeros perfiles MS de bacterias
A. tuberculosa : proteómica
metaproteómica
l
e
s
p
Circulo de investigación
en biotecnología
molecular para el desarrollo
y la sostenibilidad
a
de los sectores acuícolas
r del Perú.
Proyectos Canon
a
a
•
Bioenergética
á
90
582.4
6161.2100(R354,S128)
80
5173.9624(R287,S105)
70
6401.2568(R348,S80)
60
50
40
7189.6821(R672,S35)
30
6460.7622(R450,S23)
9445.0225(R636,S26)
20
10
0
1996.0
4609.4
7222.8
9836.2
Mass
12449.6
15063.0
(m/z)
Final - Shots 800 - CONCHA NEGRA IB 9-2 16; Run #5; Label K13
7534.2607(R558,S211)
100
2172.1
90
80
6886.9878(R454,S144)
70
60
50
40
30
Detección de genes antibacterianos a partir
de bacterias nativas, aisladas a partir de TD y
SG de A. tuberculosa
 Estudio de genética
de 03 población de A.
tuberculosa de
Ecuador:
 Primera detección
del patógeno
intracelular Perkinsus en A. tuberculosa
por diagnostico molecular
20
4424.9185(R346,S56)
3919.5210(R383,S31)
6856.2808(R674,S20)
6223.2539(R418,S33)
9526.1504(R597,S35)
10
0
1996.0
5612.4
9228.8
12845.2
16461.6
Mass (m/z)
•
•
•
Composición en FAAs
Cambios estructurales (M.electronica)
Transcriptomica diferencial
20078.0
GRACIAS
B. DIRINGER, K. PRETELL, R. AVELLAN, A. FLORES, J.
GONZALEZ, K. ZAPATA, N. RIOS, A. MARCHAN, G.
HULLIN, E. MOTTE, E. MIALHE, V. CEDEÑO