Isótopos estables Mauricio Ortiz L. Laboratorio de Relación Suelo-Agua-Planta Facultad de Ciencias Agronómicas Universidad de Chile Enero 2010 Isótopos estables Los átomos que son isótopos entre si tienen igual Nº atómico (Z), pero difieren en el número másico (A). Isótopos del hidrogeno Z= 1 Z= 1, A= 1 Hidrógeno (Protio) 1H Z= 1, A= 2 Deuterio 2H=D Z= 1, A= 3 Tritio 3H Isótopos estables Los átomos que son isótopos entre si tienen igual Nº atómico (Z), pero difieren en el número másico (A). Si la relación entre protones y neutrones no es la apropiada para obtener estabilidad nuclear el isótopo cambia a una forma estable y emite energía (rayos , o ). El tiempo de neutralización varía entre elementos. Isótopos del hidrogeno Z= 1 1H 2H 3H Electrón (partícula beta) estable estable inestable Vida media=12,32años 3He Abundancia natural de algunos Isótopos estables La distribución de un determinado tipo de isótopo varía tanto en ubicación como en el tiempo, de acuerdo a algún proceso que genera la diferencia. El fenómeno de variación es conocido como fraccionamiento isotópico y se refiere al comportamiento diferencial que experimentan moléculas que poseen formas isotópicas ligeras respecto de las más pesadas El fraccionamiento isotópico puede ocurrir por: - Efectos cinéticos, que dependen de las diferencias en la tasa de reacción y de los coeficientes de difusión de moléculas isotópicas - Efectos termodinámicos en reacciones de intercambio isotópico. Efecto cinético La tasa de una reacción química es sensible a la masa atómica en una posición particular en una de las especies reactantes: 12C –A k12 12C –B y k 13C k12 k13 –A k13 13C –B Efecto termodinámico En un sistema en equilibrio químico k1 A B k2 eq RA RB Por ejemplo el factor de fraccionamiento para la hidratación del CO 2 CO2+H2O H2CO3 es C13 / C12 (CO2 ) 1 / 1.011 a 25ºC 13 12 C / C ( H 2CO3 ) Características de tres tipos de moléculas de agua Propiedad 1H 16O 2 D216O 1H 18O 2 Densidad (20ºC) 0.997 1.1051 1.1106 Temperatura de la densidad max (ºC) 3.98 11.24 4.30 Punto de ebullición (ºC) 100.00 101.42 100.14 Presión del vapor (100ºC, en Torr) 760.00 721.60 758.07 Proporción de isótopos estables 13 R ( 000 ) C 12 C Rmuestra / Restándar 1 x1000 Elemento Estándar Oxígeno SMOW 18O/16O 0,0020052 Carbono PDB 13C/12C 0,0112372 Hidrógeno SMOW 2H/1H 0,0001558 Rmuestra>Restandar, R valor >0, “enriquecida” Rmuestra<Restandar, <0, “empobrecida” Proporción de isótopos estables a a l ( fuente) l ( producto) a 1 l ( producto) 1000 es independiente de la composición isotópica del estándar y de Ra. Expresa la consecuencia del proceso biológico. Diagrama de un espectrómetro de masas para la determinación de cocientes de isótopos Peso Molecular CO2 12C 16O 16O Peso Molecular 44 12C 18O 16O Peso Molecular 46 13C 16O 16O Peso Molecular 45 Usos de los isótopos estables Usos de los isótopos estables La composición isotópica de una planta, que depende de los sustratos que utilizó durante su crecimiento y de los procesos de fraccionamiento, entrega información sobre su funcionamiento en el ambiente que habita. Reconstrucción de las condiciones ambientales pasadas. Reconstrucción de dietas. La composición isotópica de la materia orgánica del suelo refleja el material vegetal que ocupó la superficie en el pasado. Las δ2H y δ18O del agua en la savia del xilema entregan una medida directa de las fuentes de agua utilizadas en el momento por la planta. En animales migratorios, la composición isotópica de los tejidos refleja la composición isotópica del agua de las localidades en que el tejido inicialmente se formó. Estimar la eficiencia en el uso del agua, diferenciar entre los metabolismos C3, C4 (y CAM) en floras actuales o en reconstrucciones de paleo-floras. Ciclo del nitrogeno Discriminación isotópica de 13C ( 13C) El CO2 atmosférico está compuesto en un 99% por 12CO2 y en un 1% 13CO2. Existe un uso diferencial de los isótopos de C en la difusión a través de los estomas y en la reacción con la enzima rubisco. Discriminación Isotópica de 13C a (b a) * Ci Ca Donde a: es la discriminación causada por difusión en aire (4,4 ‰). b: es la discriminación de 13C de la enzima RuBP carboxilasa (27 ‰). Ci / Ca: presión parcial de CO2 al interior de la hoja / presión parcial de CO2 atmosférico. 4,4 22,6 Factores que afectan 13C: - Tasa de fotosíntesis - Apertura de estomas (resistencia) ci x10 ca 3 4,4 22,6 ci x10 ca 3 En plantas C4, el CO2 primero es fijado en ácidos orgánicos, los cuales son translocados a las células de empalizada en las que son de-carboxilados. El resultado es que Rubisco no puede discriminar C3 13C -27‰ C4 -12‰ Crassulacean Acid Metabolism Estoma abierto Estoma cerrado En plantas CAM la Rubisco no puede ser exigente, por lo que los azucares que produce contienen altos niveles de 13C (pesados). ¿...y las plants CAM? predicciones? 13C C3 -27 ‰ C4 -12 ‰ CAM -12‰ Las plantas CAM facultativas pueden tener valores C3. Cactos, Euphorbias Agaves y muchas bromelias (puya) 90% de todas las plantas vasculares Pastos tropicales (maiz, caña de azucar, sorgo) Enriquecimiento con 18O. El agua que absorben las plantas está compuesta en un 99,75% por H 216O y en un 0,2% H218O. La tasa de transpiración puede ser modelada como: E g w wi wa En el proceso de transpiración existe fraccionamiento isotópico, provocando un enriquecimiento con 18O del agua foliar, el que es explicado por: 18 e OV k En condiciones de aire bien mezclado e 18O v k k h es cercano a - +, por lo que 1 ea / ei Enriquecimiento con 18O. e k 1 ea / ei 2,644 3,206 (103 / Tl ) 1,534 10 6 / Tl k 32 rs rs 22 rb / 1000 rb 2 *10 3 Enriquecimiento con 18O. e Factores que afectan 18O: - Humedad relativa - Apertura de estomas (resistencia) k 1 ea / ei - La composición isotópica de hojas formadas durante la temporada permite inferir: a) Eficiencia de transpiración integrada. b) Si cambios en eficiencia de transpiración se deben a cambios en transpiración y/o a cambios en carboxilación. 13C 18O Profundidad inicial del nivel freático en el salar de Llamara Descenso del nivel freático en el salar de Llamara Temporada 2005-2006 ( sin extracción de agua) E g w wi wa Temporada 2006-2007 (4,7 a 0 m de descenso del nivel freático) E g w wi wa Determinación de fuentes de agua Día -60 MPa -3,0 MPa -1,5 MPa 0 MPa 0,0 MPa -1,0 MPa -1 Contenido de humedad (g g ) 0.0 0 0.1 0.2 0.3 20 -1,5 MPa 40 z (cm) Noche 60 80 100 0 MPa Bajo copa Fuera copa Redistribución hidráulica Promedio 18O de la savia del xilema colectada al final de la estación seca para 27 especies en un sitio cerrado sensu stricto del centro de Brasil; las barras representan los promedios y las líneas representan los errores estándares para 2-6 individuos por especie. b: 18O del agua del suelo en relación con la profundidad colectadas en el mismo sitio y al mismo tiempo; n = 4, por profundidad (Oliveira, 2004). Proporción de isótopos de hidrógeno (δ 2H) del agua del xilema de plantas que crecen en la misma localidad árida al sur de Utah después de un intenso evento de lluvia de verano. También se muestran las variaciones observadas de la composición isotópica de las lluvias de verano (fuente de humedad en la parte superior del perfil de suelo), las lluvias de invierno (humedad en la parte profunda del perfil), y agua subterránea (adaptado de Ehleringer et al. 1991). Efecto continental Efecto continental www.sahra.arizona.edu Efectos Continentales: Latitudinales y de elevación La disminución progresiva de 18O y 2H es descrita usando la destilación de Rayleigh. La partición progresiva de isotópos pesados en un reservorio de agua va a disminuir en tamaño: R R0 f a 1 Donde R0 es la relación inicial de isotopos, R es la relación despues de que el proceso ocurre, f es el componente residual y a es el factor de fraccionamiento en equilibrio. El hemisferio Norte El Hemisferio Sur Los Isopaisajes Efecto de Latitud Ecología En animales migratorios, la composición isotópica de los tejidos refleja la composición isotópica del agua de las localidades en que el tejido inicialmente se formó. 16 out of 19 spp contain > 50% saguaro carbon 100% 0% 90-120 individuals/date Nitrógeno La δ15N provee información respecto a las entradas y transformaciones del nitrógeno dentro de un ecosistema, también permite cuantificar la fijación biológica de nitrógeno atmosférico. La δ15N provee información respecto a las entradas y transformaciones del nitrógeno dentro de un ecosistema, así como permite cuantificar la fijación biológica de nitrógeno atmosférico. Alimentación Una antigua receta... Ingredientes Pan de cebada Cebada tostada Cebada malteada y miel Miel de dátil Levadura Lúpulo, una adición reciente (gracias a los monjes medievales). Todos los ingredientes son C3 y por tanto la cerveza debe estar empobrecida en 13C. La relación Blue-Ribbon Pap’s-Guinness Data from Brooks et al. 2002. J. Agric. Food Chem. 50: 6413-6418. Data from Brooks et al. 2002. J. Agric. Food Chem. 50: 6413-6418. Paleoclimatología y Cambio Climatico La formula química de un ser humano Elemento % Hidrogeno Oxigeno 61.8 25.4 Carbono 9.4 99% Nitrógeno 1.4 Otros 1.0 La composición isotópica de un ser humano Imagen (Fry 2007) Isótopos estables Mauricio Ortiz L. Laboratorio de Relación Suelo-Agua-Planta Facultad de Ciencias Agronómicas Universidad de Chile Enero de 2010