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EVALUACIÓN DE EXUDADOS DE MAÍZ (RAÍZ) PARA PROTEGER
A P. PUTIDA KT2440 DE LA DESECACIÓN
Ligia Catalina Muñoz-Arenas1, Yolanda Elizabeth Morales-García2, Laura Abisaí Pazos-Rojas2,
José Alfredo González-Vázquez2, Candelario Vázquez-Cruz2 y Jesús Muñoz-Rojas*2
1
Ingeniería Ambiental-Facultad de Ingeniería Química-BUAP, 2CICM-ICBUAP
*[email protected]
Modalidad Oral, Tecnología y Biotecnología Ambiental
Palabras clave: Pseudomonas putida, desecación, exudados.
Introducción. Pseudomonas putida KT2440
usa diversos compuestos aromáticos como
fuente de carbono, coloniza la raíz de diversas
plantas y estimula su crecimiento (1). Así, la
interacción P. putida-planta es adecuada para la
rizorremediación de xenobióticos. P. putida es
muy sensible a la desecación (2, 3). Sin
embargo, recientemente, se ha probado que en
presencia de algunas sustancias como azúcares
y polialcoholes (presentes en exudados de
plantas) la supervivencia de la bacteria a
desecación ambiental es favorecida (2).
Objetivo: Evaluar si los exudados de la planta
de maíz favorecen la supervivencia de P. putida
KT2440 a la desecación natural.
Metodología.
Germinación. Las semillas se esterilizaron, se
colocaron en placas con MS y se incubaron a
30ºC en oscuridad durante 4 días.
Obtención de exudados: En un sistema hidropónico (con 100 mL de MSJ), se colocaron las
semillas de maíz germinadas. Los sistemas se
colocaron en cámaras de cultivo a 28ºC,
fotoperiodo 16/8. Los exudados se colectaron a
los 5, 10, 15, 20, 25, 30 y 41 días de crecimiento
de las plantas y se almacenaron a -80 0C
Protección de bacterias por exudados: Las
células de P. putida se crecieron en medio
líquido LB, hasta fase estacionaria, las células
se lavaron y se resuspendieron en los exudados
obtenidos. La suspensión fue alicuotada en
tubos eppendorf (en replicas de 500µl), se
cubrieron con algodón y se desecaron a 30ºC y
30% de humedad relativa. El No. UFC/ml se
determinó a los 0, 6, 9 y 12 días posteriores a la
desecación (dpd). La tasa de supervivencia
bacteriana (BSR) se determinó en todas las
etapas experimentales (3).
Resultados y discusión. La sensibilidad de una
bacteria a la desecación natural, es una limitante
para la biorremediación en un sitio contaminado.
De hecho, la muerte rápida de algunas bacterias
adheridas a semillas ocurre por la baja
disponibilidad de agua en los suelos (4). Las
raíces de las plantas exudan una gran cantidad
de
sustancias
(a.a,
lípidos,
azúcares,
polialcoholes, y otros) y en este trabajo
observamos que la supervivencia a la
desecación de P. putida KT2440 incrementa
cuando es protegida con los exudados del maíz.
A medida que ocurre la pérdida de agua de las
muestras, la BSR disminuye. No obstante, la
BSR de las bacterias desecadas en presencia
medio MS es muy baja comparada con la BSR
en presencia de MS con exudados; donde la
supervivencia a la desecación es favorecida e
incrementa con la edad de la planta.
Conclusiones. Los resultados indican que la
raíz del maíz exuda diversos componentes que
protegen a P. putida de la desecación. Los
componentes presentes en los exudados del
maíz están aún por ser analizados para
establecer una correlación de su concentración
con la BSR de la bacteria.
Agradecimientos. Agradecemos a la VIEPBUAP por el apoyo otorgado para el desarrollo
de este trabajo y por la beca otorgada a L. C.
Muñoz-Arenas y a Y. E, Morales-García.
Bibliografía.
1. Molina, L., Ramos, C., Duque, E., Ronchel, M. C.,
García, J. M., Wyke, L., and Ramos, J. L. (2000).
Survival of Pseudomonas putida KT2440 in soil and in
the rhizosphere of plants under greenhouse and
environmental conditions. Soil Biol. Biochem. 32:315321.
2. Muñoz-Arenas, L. C., Pazos-Rojas, L. A., MoralesGarcía, Y. E., Toribio-Rosales, C., Bustillos-Cristales,
M. R. y Muñoz-Rojas, J. Supervivencia de P. putida
KT2440 a condiciones de desecación ambiental. En:
E. Durán-Párramo y E. Salgado-Manjarrez (Eds.). V
Encuentro Nacional de Biotecnología del IPN. México,
D. F. 2006. Pp. 50-54
3. Muñoz-Rojas, J., Bernal, P., Duque, E., Godoy,
P., Segura, A., and Ramos, J. L. (2006). Involvement
of cyclopropane fatty acids in the response of
Pseudomonas putida KT2440 to lyophilization. Appl.
Environ. Microbiol. 72:472-477.
4. Streeter, J. G. (2003). Effect of trehalose on
survival of Bradyrhizobium japonicum during
dessication. J. Applied Microbiol. 95:484-491.