Detección rápida de patógenos en superficies

Detección rápida de patógenos en superficies
La detección de patógenos en las industrias agroalimentarias debe considerarse como un
componente imprescindible de las Buenas Prácticas de Fabricación y un componente integral de cualquier
plan de APPCC (Análisis de Peligros y Puntos de Control Críticos). Por ello, la necesidad de disponer de un
método coste-efectivo, fácil de utilizar, rápido y preciso para el análisis ambiental se ha convertido en una
prioridad en la industria alimentaria.
Microgen Biproducts Ltd ha satisfecho esta necesidad desarrollando un rango de sistemas de
detección de patógenos ambientales: los Sistemas Path-Check Higiene. Estos sistemas cumplen con
todos los requisitos de los Estándares ISO para el análisis ambiental (ISO 18593:2004 (E)) por medio de la
utilización de hisopos prehumedecidos para el análisis de superficies, junto a un caldo de detección
cromogénico específico en el cual se colocan los hisopos y se incuban a una temperatura adecuada.
El rango de sistemas Path-Check Higiene está disponible para el análisis de 3 tipos de organismos
diferentes: Salmonella, Listeria y Coliformes. Sin embargo, los tres sistemas utilizan el mismo principio de
análisis. Las bacterias se recuperan de la superficie de la maquinaria de fabricación o producción de
alimentos utilizando un hisopo prehumedecido, el cual es capaz de neutralizar los detergentes y
desinfectantes que se emplean con más frecuencia. El hisopo con la muestra se transfiere a un medio
específico para cada microorganismo (los hisopos tienen un punto de ruptura por el cual pueden partirse
fácilmente para colocarlos directamente en el medio de crecimiento). Los medios de análisis se incuban
entonces a 35-37ºC durante 18-24 horas para Coliformes y Salmonella, y a 28-30ºC durante 24-48 horas
para Listeria (si se incuba el Path-Check Listeria a 35-37ºC pueden aparecer falsos positivos en algunos
casos). Si el microorganismo objetivo específico se encuentra presente en los hisopos que contienen la
muestra, el crecimiento bacteriano provocará un cambio en el color del medio.
Los kits Path-Check ofrecen los siguientes beneficios:
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Altos niveles de sensibilidad (<1 ufc por 10 cm2) y especificidad.
Conforme con los requisitos de la ISO 18593:2004 (E).
Cumple con los requisitos de la USFA/FSIS y los métodos de análisis de US FDA.
Los hisopos prehumedecidos incrementan la recuperación de superficies mojadas y secas,
neutralizan residuos de detergentes y agentes desinfectantes y conservan los
microorganismos.
Medios de detección específicos de patógenos disponibles para Salmonella, Listeria y
Coliformes.
Cómodo y fácil de utilizar.
No es necesario llevar el medio de incubación al área de producción.
Bioser, S.A. c/Tarragona 106 · 08015 Barcelona · Tel: 93 226 44 77 · Fax: 93 226 79 79 · [email protected] · www.bioser.com
M ICROGEN B IOPRODUCTS L TD
Salmonella
Listeria
Coliformes
P ATH -C HEK H YGIENE P ATHOGEN
S YSTEM
T EST
RÁPIDOS PARA LA DETECCIÓN DE
BACTERIAS PATÓGENAS EN SUPERFICIES
DE TRABAJO O MAQUINARIA
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A LTOS NIVELES SE SENSIBILIDAD (<1 CFU POR 10 CM 2 ) Y ESPECIFICIDAD
C ONFORME CON LOS REQUISITES DE LA ISO 18593:2004( E )
C UMPLE LOS REQUISITOS DE USDA / FSIS Y LOS MÉTODOS DE ANÁLISIS DE US FDA .
L OS HISOPOS PREHUMEDECIDOS INCREMENTAN LA RECUPERACIÓN DE SUPERFICIES
MOJADAS Y SECAS , NEUTRALIZAN RESIDUES DE DETERGENTS Y AGENTS
DESINFECTANTES Y CONSERVAN LOS MICROORGANISMOS
• M EDIOS
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DE DETECCIÓN ESPECÍFICOS DE PATÓGENOS DISPONIBLES PARA
L ISTERIA , COLIFORMES Y SALMONELLA
C ÓMODO Y FÁCIL DE UTILIZAR
N O ES NECESARIO LLEVAR EL MEDIO DE INCUBACIÓN AL AREA DE
PRODUCCIÓN
Protegiendo la Salud y los Alimentos
Bioser, S.A.
c/ Tarragona 106
08015 Barcelona
Tel: 93 226 44 77 Fax: 93 226 79 79
[email protected]
www.bioser.com
A medida que los fabricantes y productores de alimentos se dan cuenta de la importancia del control de la higiene microbiológica ambiental como parte de unas buenas prácticas de fabricación en la
industria alimentaria, la necesidad de un método coste-efectivo, fácil de utilizar, rápido y preciso para el análisis ambiental ha crecido en importancia. Microgen Bioproducts Ltd ha satisfecho esta necesidad desarrollando un nuevo rango de sistemas de detección de patógenos ambientales: los sistemas Path-Chek Higiene. Estos sistemas cumplen todos los requisitos de los Estándares ISO para el
análisis ambiental (ISO 18593:2004 (E)) por medio de la utilización de hisopos prehumedecidos para
el análisis de superficies, junto a un caldo de detección cromogénico específico de organismos en el
cual se colocan los hisopos y se incuban a la temperatura adecuada.
El rango de los sistemas Path-Chek Higiene consiste en análisis para 3 tipos de organismos: Listeria,
Coniformes y Salmonella.
Los tres sistemas utilizan un el mismo principio de análisis. Las bacterias se recuperan de la superficie de maquinaria de fabricación o producción de alimentos utilizando un hisopo prehumedecido, el
cual es capaz de neutralizar los detergentes y desinfectantes que se emplean con más frecuencia. El
hisopo con la muestra se transfiere a un medio específico para organismos (los hisopos tienen un
punto de rotura por el cual pueden romperse fácilmente para colocarlos directamente en el medio
de crecimiento). Los medios de análisis se incuban entonces a 35-37ºC durante 18-24 horas para
Coliformes y Salmonella, y a 28-30ºC durante 24-48 horas para Listeria (si se incuba el Path-Chek
Listeria a 35-37ºC, en algunos casos pueden aparecer falsos positivos). Si la bacteria objetivo específica se encuentra presente en los hisopos con la muestra, el crecimiento bacteriano provocará un
cambio en el color del medio.
Reacciones del test:
Resultado para Coliformes:
Positivo
Negativo
Resultados para Salmonella:
Positivo
Negativo
Resultado Para Listeria:
Positivo
Swabs Microgen Path-Chek
Higiene
Formato: 100 swabs
Conservación: Temp. ambiente
025040100 (PCS-100)
Negativo
Path-Chek Hygiene Pathogen Detection
Broth
Formato:
Conservación:
Listeria
Salmonella
Coliformes
100 ud.
2-8°C
025039100 (PCS-080)
025038100 (PCS-020)
025037100 (PCS-010)
2007-01
Technical Bulletin
No. 108
Improved Specificity of Path-Chek Hygiene
Listeria
All internationally accepted standards for the isolation of Listeria spp. and L. monocytogenes from food samples
recommend that all pre-enrichment and sometimes enrichment broths are incubated at 30°C rather than 35 - 37°C, (ISO
11290 -1:1996, AS/NZS 1766.2.16: 1998, US FDA BAM/AOAC). One rationale for this initial lower incubation temperature is
that Listeria spp. and in particular L. monocytogenes may not grow well in these media when incubated at 35 - 37°C and that
in cases of mixed populations of Listeria spp., L. innocua may in fact overgrow L. monocytogenes at this incubation
temperature but not at 30°C.
A study was performed in an independent Public Health Food Testing Laboratory to ascertain the potential effects of
incubating the Path-Chek Hygiene Listeria at 30°C rather than 35 - 37°C. This study was performed using a range of
environmental samples taken from a local food manufacturer who is known to have Listeria in their work environment.
In this trial each sample area was swabbed in triplicate, one swab was processed in Path-Chek Hygiene at an incubation
temperature of 37°C, a second swab was processed similarly, but incubated at 30°C. The third swab was transferred into
10ml UVM broth which was incubated for 48 hours at 30°C after which a sample of the broth was examined for the presence
of Listeria spp. using an AOAC Approved Listeria EIA.
All Path-Chek Listeria tests were subcultured onto Oxford Agar and incubated at 37°C for 48 hours and examined for
colonies resembling Listeria spp. after 48 hours incubation. All suspicious colonies were Gram stained and subjected to
appropriate identification tests to include or exclude Listeria spp.
RESULTS
A total of 35 environmental samples were examined for the presence of Listeria spp.. Three samples were found by all 3
methods to contain L. monocytogenes, Path-Chek Hygiene Listeria was able to detect the presence of these 3 positive
samples after only 24 hours incubation, more than 24 hours earlier than the testing laboratories control method (Table 1.).
Although the results of this trial did not demonstrate any differences between the isolation of Listeria spp. in the 3 positive
samples, this investigation did demonstrate a significant decrease in the number of false positive results in the Path-Chek
Hygiene Listeria tests that were incubated at 30°C when compared to those incubated at 37°C.
After 24 hour incubation at 30°C, only 2 samples produced false positive results, whilst the same samples incubated at 37°C
produced 9 false positive results. After a total of 48 hours incubation, the tests incubated at 37°C produced 13 false positive
results, whilst those incubated at 30°C produced only 6 false positive tests. 6 positive results at 48 hours at both 30°C and
37°C, showed no growth once sub-cultured on the Oxford Agar plates, producing no identification as the organism in the
broth did not grow on the Oxford Agar plates.
Based on this investigation it is clear optimum results for Path-Chek Hygiene Listeria are obtained at 30°C and should be
examined for a colour change indicative of the presence of Listeria spp. after both 24 and 48 hours.
Microgen Bioproducts Ltd, 1 Admiralty Way, Camberley, Surrey GU15 3DT. Tel +44 (0) 1276 600081, Fax +44 (0) 1276 600151
www.microgenbioproducts.com
Swab Source
1. Floor near sliding door
2. Drain in holding room
3. Rubber on sliding door
4. Production room drain
5. Production room floor
6. Floor under pump
7. Floor in corner
8. Floor mat near pack line
9. Coolroom floor
10. Blast room sliding door
11. Wheels on pump frame
12. Wheels on pump track 1
13. Wheels on pump track 2
14. Wheels on pump track 4
15. Wheels on pump track 3
16. Wheels on pump 2
17. Wheels on pump 3
20. Chiller slide door
26. Open drain
27. Chiller slide door
28. Underneath bench
29. Floor near pallet
30. Drain near foot bath
31. Drain in batching area
32. Fllor in blast chiller
33. Wall in thawing room
34. Door in thawing room
35. Door in chiller
Path Chek Listeria
30C Incubation
Esculin reaction
24hr
48hr
+
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-
Typical
colonies on
Oxford Agar
No
No Growth
No
No
Yes
Yes
Yes
No Growth
No Growth
Identification
GPC
GPC
GPB
L. monocytogenes
L. monocytogenes
L. monocytogenes
Path Chek Listeria
37C Incubation
Esculin reaction
24hr
48hr
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-
Typical
colonies on
Oxford Agar
No
No Growth
No
No Growth
No
No Growth
No Growth
No
Yes
No Growth
EIA
result
Identification
GPC
GPC
GPC
GPB
GPB
Yes
Yes
Yes
L. monocytogenes
L. monocytogenes
L. monocytogenes
No
No Growth
GPB
No Growth
Identification
+
+
+
-
L. monocytogenes
L. monocytogenes
L. monocytogenes
Table 1. Comparison of Path-Chek Hygiene Listeria tests incubated at 30°C and 37°C and control EIA System for
environmental samples.
GPC = gram-positive cocci, presumptively identified as E. faecalis
GPB = gram-positive bacilli, presumptively identified as Bacillus spp.
Microgen Bioproducts Ltd, 1 Admiralty Way, Camberley, Surrey GU15 3DT. Tel +44 (0) 1276 600081, Fax +44 (0) 1276 600151
www.microgenbioproducts.com