breve historia del establecimiento de la química moderna de proteínas
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BREVE HISTORIA DEL ESTABLECIMIENTO DE LA QUÍMICA MODERNA DE PROTEÍNAS (1750-1960) PLINIO EL VIEJO (59 A.C. – 24 D.C.) El término albumen se remonta a el primer siglo de nuestra era. Plinio El Viejo lo acuñó para referirse a la clara de huevo (album ovi, lo blanco del huevo, en latín) En 1747, Iacopo Beccari (1682-1766) describió como se podía obtener un gluten (gluten, cola, en latín) a partir de la harina de trigo, sin más que amasar ésta con agua para eliminar el almidón. También se sabía cómo la separación de la sangre coagulada del suero daba lugar a un material rojo, insoluble en agua, llamado fibrina por Furcroy. El último de los materiales proteicos estudiados intensamente durante esa época fue el cuajo obtenido tras tratar la leche con ácidos. Este material insoluble fue el que se denominó caseína (caseum, insoluble en ácido, en latín). William Prout (1785-1850) En 1827 clasificó las sustancias que formaban los alimentos en tres categorías: las sacarinosas (los actuales azúcares), las oleaginosas (los actuales lípidos) y las albuminosas (las que hoy llamamos proteínas). Jöns Jakob Berzelius (1779–1848) “Supongo que el óxido orgánico que constituye la base de la fibrina y de la albúmina (y al que hay que dar un nombre; por ejemplo, proteína) está compuesto de un radical terciario combinado con oxígeno...Parece ser la molécula primitiva o principal de la nutrición animal, que las plantas preparan para los herbívoros y que luego éstos proporcionan a los carnívoros” (1835). Gerardus Johannes Mulder (1802-1880) “La palabra proteína se refería a un compuesto que estaba en el origen de sustancias muy distintas y, por tanto, podía ser considerado como un compuesto primario” (1838). Del griego: sustancia original de la que están hechos los seres vivos Thomas Graham (1805-1861) Georges Square, Glasgow Inventor de la diálisis cuando observó que algunas sustancias no eran capaces de atravesar las membranas semipermeables. Precisamente para estas sustancias es para las que acuñó el término coloide en contraposición al de cristaloide, que se aplicaba a las moléculas que difundían rápidamente y sí atravesaban las membranas: “…la condición coloidal de la materia es propia de los elementos plásticos del cuerpo animal, como la gelatina, y diferente de las llamadas sustancias cristaloides” (1861). Hermann Emil Fischer (1852-1919) Premio Nobel de Química en 1902 "in recognition of the extraordinary services he has rendered by his work on sugar and purine syntheses" Descubridor del enlace peptídico Frederick Sanger (1918- ) “Como hipótesis de trabajo asumiremos que la teoría del enlace peptídico es válida. Es decir, que una proteína está constituida por una cadena de α-aminoácidos unidos mediante enlaces peptídicos a través de sus grupos α-amino y α-carboxilo. A pesar de que esta teoría es válida casi con certeza (...). Se debe recordar que todavía no ha dejado de ser una hipótesis que no ha sido definitivamente probada. Probablemente, la mejor prueba a su favor es que, desde que se propuso en 1902, no se ha encontrado ningún hecho que la contradiga” (1952). Max Perutz Estructura de la hemoglobina (1960) Laurent y Gerhardt en1848 acuñan el término aminoácido para describir el carácter de sustancias como la Gly o la Leu En casi todos los casos, el descubrimiento y caracterización de los aminoácidos proteicos se ajustó al siguiente esquema: 1) Se descubre una sustancia con carácter de aminoácido, muy abundante en alguna fuente natural, y se le asigna un nombre. 2) Se comprueba que es idéntica a alguna de las sustancias liberadas tras la hidrólisis de las proteínas. 3) Se intenta su formulación elemental y estructural. 4) Se lleva a cabo la síntesis orgánica de la misma sustancia que había sido obtenida a partir de la fuente natural. Aminoácido Descubierto (Año) Descubridor Estructuraa y Formulación (Año) Formulador Síntesis (Año) Sintetizador Origen biológico Asparagina 1806 Vauquelin Robiquet 1838 Pelouze Von Liebig 1887 Piutti Jugo espárragos Cistina 1810 Wollaston 1884 1903 Erlenmeyer Jr. Cálculo vejiga 1903 Külz Baumannb Friedmannc Cahours Perkin/Duppa 1858 Cahours Perkin/Duppa Gelatina 1870 1891 Hüfner Strecker Fibra muscular y lana Glicocola (Glicina) 1820 Braconnot 1857 1858 Leucinad 1820 Braconnot 1848 Tirosina 1846 Von Liebig 1869 Von Barth 1883 Erlenemyer Sr. Lipp Caseína Alaninae 1888 Weyl 1901 Fischer Skita 1850 Strecker Seda Valina 1856 Gorup Besanez 1906 Fischer Serina 1865 Cramer 1902 Fischer Leuchs Seda Glutámico 1866 Ritthausen 1890 Wolff Gluten de trigo Aspárticof 1868 Ritthausen 1850 Dessaignes Hidrolizado de proteínas Estructuraa y Formulación (Año) Síntesis (Año) Sintetizado r Origen biológico Schulze Barbieri 1879 1882 Posen Erlenemyer Jr. Lipp Brotes de altramuz (Lupinus) 1883 Schulze Bosshard 1933 Bergmann Zervas Salzmann Jugo de carne Lisina 1885 1889 Schulze Drechsel 1899 1902 Fischer Weigert Caseína Arginina 1886 Schulze Steiger 1939 Totter Berg 1942 Almquist/Gr au Mecchi Kratzer Semillas de altramuz (Lupinus) Histidina 1896 Kossel Hedin 1904 Pauly 1911 Pyman Esperma Esturión Prolinae 1901 Fischer 1900 Willstatter Caseína Triptófano 1901 Hopkins Cole Hidroxiprol ina 1902 Fischer 1905 Leuchs Gelatina Isoleucina 1904 Ehrlich 1907 Ehrlich Melaza bovina Aminoácido Descubierto (Año) Descubridor Fenilalanin a 1879 Glutamina 1907 Formulador Ellinger Flamand Albúmina Caseína Aminoácido Descubierto (Año) Descubridor Estructuraa y Formulación (Año) Formulador Síntesis (Año) Sintetizado r Origen biológico Metionina 1922 Mueller 1928 Barger 1928 Barger Coyne Caseína Treonina 1935 Rose 1935 Carter Zeína del maíz Fibrina Hidroxilisi na 1938 Asn Nicolas Louis VAUQUELIN (1763-1829) Cis William Hyde WOLLASTON (1766-1828) Síntesis Tyr Emil F.G.K. Erlenmeyer Sr. CONCEPTO DE AMINOÁCIDO ESENCIAL Se considera que el punto de inflexión en cuanto al estudio de los aspectos nutricionales de los aminoácidos lo marcan los experimentos desarrollados en 1914 por Thomas B. Osborne y Lafayette B. Mendel William Cumming Rose (1887-1985) En 1935 publicó la composición de una dieta idónea para criar ratas que utilizaba una mezcla de aminoácidos puros como única fuente nutricional de nitrógeno. En 1942 utilizó a una serie de estudiantes de doctorado para extender el concepto de aminoácido esencial a los humanos EL ENLACE PEPTÍDICO 1902: Hermann Emil Fischer y Franz Hofmeister proponen la existencia del ENLACE PEPTÍDICO “He encontrado métodos para convertir aminoácidos en sus amidas tipo anhidrido, polímeros que he bautizado como polipéptidos, y creo que su síntesis es la primera etapa hacia la construcción natural de pectosas y albumosas” (Fischer, 1906) También en 1902 Franz Hofmeister propuso que la unidad recurrente en las proteínas tenía que ser del tipo: -CO-NH-CH= Estructura que se parece bastante a la real. Sin embargo, no mencionó las palabras péptido o peptídico. PRINCIPALES PROBLEMAS: -¿Cuál es la masa de las proteínas? -¿Cristalizan las proteínas? -¿Qué es una proteína desnaturalizada? -¿Qué fuerzas plegadas? mantienen las proteínas - ¿Cuál es la estructura tridimensional de una proteína? ¿CUÁL ES LA MASA MOLECULAR DE LAS PROTEÍNAS? “...uno podría llegar pronto a pesos moleculares dos o tres veces mayores, parecidos a los asumidos para algunas proteínas naturales. Para otras, las estimaciones son mucho mayores, de hasta 1200015000. Pero en mi opinión estos números están basados en suposiciones muy inseguras, puesto que no existe la menor garantía de que las proteínas naturales sean sustancias homogéneas” (Fischer, 1907). “…aunque podría ser que los péptidos ensayados no fuesen lo suficientemente largos, era más probable pensar que simplemente la pepsina atacase en las proteínas otro tipo de enlace, y no el enlace peptídico” (Fischer). “No se ha encontrado ningún caso en el que la pepsina tuviera algún efecto sobre un sustrato sintético modelo, tanto si éste contenía enlaces peptídicos, como si no” (Vickery y Osborne, 1928). LAS PROTEÍNAS COMO COLOIDES “…la condición coloidal de la materia es propia de los elementos plásticos del cuerpo animal, como la gelatina, y diferente de las llamadas sustancias cristaloides”. “El estado coloidal es un estado dinámico de la materia, siendo los cristales la condición estática de la misma. Por ello, el coloide posee energía y puede ser considerado como la fuerza primaria de la vitalidad, del fenómeno de la vida”. (Graham, 1861) Wolfgang Ostwald Se le considera fundador de la escuela coloidal Editor de la Revista del Coloide (Kolloid Zeitschrift) Fanático defensor de la naturaleza coloidal de las proteínas “La naturaleza química de las enzimas es probablemente muy diversa. Hay pruebas directas de que algunas no son proteínas y es dudoso que lo sea alguna. Muchas parecen ser complejos sistemas de coloides formados por componentes inorgánicos y otros compuestos simples” (William M. Bayliss, 1924). Pero también había quien discrepaba: “No hay duda de que la molécula de proteína es relativamente grande, mucho más que la mayoría del resto de los objetos sometidos a la investigación química” (Schulz, 1903). El propio Hofmeister hablaba de la molécula gigante de proteína Henderson formula los principios que condujeron al concepto de tampón (1908) Sørensen desarrolla el concepto de pH (1908) Donnan describe el efecto que lleva su nombre (1911) Sørensen quien primero aplicó este tipo de medidas de presión osmótica a la determinación de la masa molecular de proteínas cristalizadas En 1925 Adair estableció, por ejemplo, que la hemoglobina tendría una masa molecular de 67000, cuatro veces mayor a aquél que había sido calculado a partir de su contenido en hierro. Obtuvieron valores que eran hasta diez veces mayores al máximo valor considerado como verosímil por Fischer LA ULTRACENTRÍFUGA “...las proteínas están compuestas por partículas individuales y, por lo tanto, en realidad son moléculas gigantes. Hay razones para creer que las partículas de las disoluciones y cristales proteicos están construidos de acuerdo con un plan que convierte a cada átomo en una pieza indispensable para la obtención de la estructura final” (The Svedberg, 1938, en The Protein Molecule). Premio Nobel en 1926: "for his work on disperse systems" “...sólo un número limitado de masas es posible. Probablemente la molécula proteica se construye por la sucesiva agregación de unidades de masa definida, pero sólo son estables ciertos agregados”. (The Svedberg, 1938, también en The Protein Molecule). Svedberg propuso que las masas de todas las proteínas debían ser múltiplos de una unidad fundamental de masa 17000 o 34000. Idea errónea que fue ampliada y modificada por Bergman y Nieman que, en entre 1937 y 1939, a la vista de las composiciones de aminoácidos conocidas hasta entonces, propusieron teorías como que el número total de residuos de cualquier proteína debía poder ser expresado por la fórmula 2n x 3m, donde n y m serían números enteros o cero. CONCEPTO DE MACROMOLÉCULA “Las macromoléculas serían aquellas estructuras covalentes mucho mayores en extensión que las que aparecen en los compuestos simples, de forma que sólo esta característica ya daría cuenta de las propiedades que las sitúan aparte de otras formas de la materia” (Staudinger, ¡1920!). Hermann Staudinger (1881-1965) Premio Nobel de Química en 1953 ¿CRISTALIZAN LAS PROTEÍNAS? Los primeros cristales proteicos se obtuvieron alrededor de 1880 a partir de proteínas de semillas de plantas (Ritthausen). “...la existencia de cristales no garantiza por sí misma la individualidad química, puesto que puede tratarse de mezclas isomorfas, como ocurre con frecuencia en mineralogía con los silicatos” (Fischer, 1913). James Batcheller Sumner (1887-1955) Premio Nobel de Química en 1946 "for his discovery that enzymes can be crystallized" En 1926 cristalizó la primera enzima, la ureasa, a partir de semillas de Canavalia eusiformis (el haba). John Howard Northrop (1891-1987) Premio Nobel de Química en 1946 "for their preparation of enzymes and virus proteins in a pure form" En 1930 conseguía cristalizar la pepsina, utilizando un extracto de jugo gástrico de cerdo como material de partida. Posteriormente en colaboración con Kunitz, consiguió también la cristalización de otras enzimas digestivas, como la tripsina y la quimotripsina, y la de alguno de sus precursores inactivos. En 1912 Max Von Laue sugiere que la longitud de onda de los rayos X es menor que la longitud que separa a los átomos en una red cristalina. Esto marcó el comienzo de la cristalografía. En ese mismo año se obtuvo también el primer patrón de difracción de rayos X, de un cristal de sulfato de cobre, por parte precisamente de Laue, Friedrich y Knipping Max Von Laue En 1937 Lawrence Bragg se hace cargo de la dirección del Laboratorio Cavendish de Cambridge. W.H. Bragg COMIENZA LA CRISTALOGRAFÍA DE PROTEÍNAS Los Bragg, padre e hijo, impulsaron la utilización de la difracción de rayos X en el estudio de la estructura tridimensional de las proteínas. 1915 Ambos recibieron el Premio Nobel de Física en 1915 por su contribución al análisis de las estructuras cristalinas mediante rayos X. John Desmond Bernal y Dorothy Crowfoot En 1934 publicaron su primer artículo sobre difracción de rayos X de una proteína, en la revista Nature, aunque el único detalle novedoso que pudieron aportar fue la observación de que el tamaño de la celdilla mínima de esos cristales de pepsina era compatible con la masa molecular que se había calculado con la ultracentrífuga de Svedberg ¿QUÉ ES UNA PROTEÍNA DESNATURALIZADA? SEGUNDA MITAD DEL SIGLO XIX Todos los químicos de proteínas de ese periodo aceptaban que las proteínas eran sustancias ricas en energía y, por tanto, fuente de vida. Al morir las células, perdían esta cualidad y se transformaban en sustancias muertas que, en definitiva, eran las que se conseguían aislar a partir de las diversas fuentes biológicas. Por eso se aislaban amidas y no los grupos ricos en energía, como los ciano o aldehidos. ¡1925! Se empieza a sospechar que la desnaturalización de las proteínas puede ser reversible, y a distinguir entre los conceptos de coagulación y desnaturalización. Mona Spiegel-Adolf describe que la albúmina de suero coagulada se puede redisolver si se enfría y alcaliniza ligeramente. Martin y Chick son los primeros en enunciar el entonces revolucionario concepto de que una proteína desnaturalizada podía ser perfectamente soluble. THE ROCKEFELLER INSTITUTE En 1931, Mortimer Anson y Alfred Mirsky demostraron que también la desnaturalización de la hemoglobina podía ser reversible y propusieron que debía haber un equilibrio entre la forma nativa y la desnaturalizada. Chinese Journal of Physiology “…una proteína sería como un cristal submicroscópico que se mantendría unido mediante interacciones no covalentes” (Hsien Wu, 1931). Pero, ¿cuáles eran esas fuerzas? ¿QUÉ FUERZAS MANTIENEN PLEGADAS A LAS PROTEÍNAS? “…la simple formación de amidas no es el único modo posible de enlace en las moléculas proteicas”. “…aunque podría ser que los péptidos ensayados no fuesen lo suficientemente largos, era más probable pensar que simplemente la pepsina atacase en las proteínas otro tipo de enlace, y no el enlace peptídico”. Emil Fischer en los 1920s LA HIPÓTESIS DEL CICLOL CICLOL-6 Dorothy Wrinch Con esta estructura pretendía explicar los patrones de difracción hexagonales obtenidos por Astbury con proteínas fibrilares. Bernal llegó a decir que el análisis realizado por Dorothy Wrinch había sido chapucero, incompetente e, incluso, deshonesto. Irving LANGMUIR Premio Nobel de Química de 1932 "for his discoveries and investigations in surface chemistry" Apoyó a Dorothy Wrinch Propuso el efecto hidrofóbico “Langmuir ha usado el principio del efecto hidrofóbico como justificación de la red del ciclol, pero es estrictamente independiente de él” (Bernal, 1939). Crowfoot Bernal “...el comportamiento de los grupos hidrofóbicos de las proteínas debe ser tal que se mantengan juntos...las moléculas de proteína en disolución deben tener sus grupos hidrofóbicos apartados del contacto con el agua, es decir, en contacto entre ellos...De esta manera la fuerza de asociación suministrada no sería tanto de atracción entre dichos grupos hidrofóbicos, que es siempre débil, sino de repulsión de los mismos frente al agua del medio que les rodea” (Bernal, 1939). El efecto hidrofóbico cayó en el olvido hasta renacer en 1959, de la mano de Walter Kauzmann que lo describió, ya en su concepción moderna, ese año en los Advances of Protein Chemistry. El propio Bernal, que había sido uno de sus principales impulsores, pareció olvidarse de él y, en 1958, decía: “Las fuerzas que mantienen a las proteínas en su estructura nativa son, por orden de importancia, (1) covalentes, (2) iónicas y (3) puentes de hidrógeno, especialmente del tipo C =O•••N – H”. Ni se menciona el efecto hidrofóbico. “...la estabilidad de la conformación nativa de una proteína en agua puede ser completamente explicada sobre la base del establecimiento de interacciones hidrofóbicas entre las partes no polares de la molécula” (Tanford, 1962) La idea que subyace al concepto que hoy entendemos como enlace por puente de hidrógeno fue sugerida por primera vez en 1920 por un científico llamado Huggins Bernal Perutz Crick Bernal y Fowler proponen la existencia de los enlaces por puentes de hidrógeno para explicar la estructura del agua (1933) Alfred Ezra Mirsky Linus Pauling y Alfred Mirsky señalaron que la estructura de una proteína se debía mantener gracias al establecimiento de muchas interacciones débiles (uniones secundarias) que se rompían durante el proceso de desnaturalización. En 1936 asignaron este papel a los puentes de hidrógeno. Linus Pauling ¿CUÁL ES LA ESTRUCTURA TRIDIMENSIONAL DE LAS PROTEÍNAS? THE NATURE OF THE CHEMICAL BOND “En 1937 poco se sabía acerca de la estructura de las proteínas. De hecho, incluso se dudaba de que fuesen cadenas polipeptídicas. Alfred Mirsky y yo habíamos escrito que las proteínas se mantenían en su conformación nativa gracias a los puentes de hidrógeno”. Pauling y Mirsky también predijeron, en 1937, que el enlace peptídico era plano y que los grupos NH y CO del mismo formarían puentes de hidrógeno. En 1937 Robert Corey se desplaza de The Rockefeller Institute al laboratorio de Pauling en Caltech (Pasadena) Ralph Wyckoff Corey y Pauling se concentraron en la determinación de estructuras de aminoácidos y pequeños péptidos utilizando la difracción de rayos X Los modelos conocidos como CPK corresponden a las iniciales de Corey, Pauling y Walter Koltum, que supervisaron su creación y construcción. LA HÉLICE Producto de la genialidad de Pauling Enlace peptídico plano Paso de rosca no entero (3.6 residuos/vuelta) La estructura que le salía era una hélice en la que la distancia entre los puentes de hidrógeno era de 2.8 Å y el paso de rosca era de 3.6 residuos (5.4 Å). Sin embargo, no publicó la estructura de la hélice hasta Mayo de 1951, porque los diagramas de difracción de rayos X existentes entonces predecían pasos de rosca de 5.1 Å (proteínas fibrilares). Premio Nobel de Química en 1954. "for his research into the nature of the chemical bond and its application to the elucidation of the structure of complex substances" Premio Nobel de la Paz en 1962. MAX PERUTZ (1914-2002) En 1936 se trasladó al famoso Laboratorio Cavendish donde, tras ser Research Assistant de Lawrence Bragg, obtuvo su doctorado por la Universidad de Cambridge en 1940. Fue Bernal quien le introdujo en la cristalografía Los primeros cristales de hemoglobina con los que empezó a trabajar eran de caballo, y habían sido preparados por Adair. En 1938 ya tenía mapas de difracción con una resolución de 2 Å; mapas que publicó pero que no sabía interpretar Durante la Segunda Guerra Mundial estuvo confinado en un campo de concentración canadiense debido a su condición de extranjero. Cuando quedó claro que no estaba ligado a los nazis le liberaron y pudo volver a Cambridge en 1941 donde emprendió un trabajo de investigación secreto, relacionado con la guerra, y que consistía en la construcción de un portaaviones con hielo. La guerra retrasó muy significativamente su trabajo sobre la estructura de la hemoglobina. Max Perutz John Kendrew Justo antes de que Pauling propusiera la existencia de la hélice , Bragg, Perutz y Kendrew publicaron un largo artículo en los Procceedings of the Royal Society en el que proponían toda una gran variedad de estructuras posibles para las proteínas, muchas de ellas helicoidales y casi todas erróneas. La mencionada publicación indujo a Pauling a publicar la hélice Cuando el grupo de John Kendrew calculó la estructura tridimensional de la mioglobina en 1957, todo el mundo se quedó hasta altas horas de la madrugada esperando a ver si aparecía la hélice . Cuando quedó claro que sí existía este tipo de estructura, todo el mundo se fue a la cama. Resolvió la estructura de la hemoglobina en 1959 con una resolución de 5.5 Å. El paso fundamental lo dio en 1953 cuando se le ocurrió incluir átomos de mercurio en sus cristales. Cuando Perutz comparó las placas fotográficas de precesión de los cristales de la proteína natural con las de aquellos modificados con mercurio, se encontró con que los átomos de este metal habían causado diferencias importantes de intensidad en algunas de las señales de difracción. Ceremonia de entrega del Premio Nobel de 1962 Entre 1947 y 1962, con el apoyo de John Kendrew y Lawrence Bragg, fue fundador y director de la Unidad de Biología Molecular del Consejo de Investigación Médica de Cavendish (Medical Research Council Unit for Molecular Biology at Cavendish). En 1962, se fundó el Laboratorio de Biología Molecular (Molecular Biology Laboratory) en la misma institución. Max Perutz también lo dirigió hasta 1979. EL ANALIZADOR AUTOMÁTICO DE AMINOÁCIDOS A mediados del siglo XIX químicos de tanto prestigio como Justus Von Liebig opinaban que todas las proteínas tenían la misma composición. Hasta 1940 no eran muy alentadores los avances obtenidos en cuanto a las técnicas de determinación de la composición de aminoácidos de las proteínas. Alrededor de 1945, se produjo un avance muy importante con la utilización de la cromatografía de adsorción, la de interacción iónica y los métodos electroforéticos. Esta metodología permitió a Erwin Brand calcular la composición de aminoácidos de la -lactoglobulina y, además, estimar que su masa molecular era de 42000, valor que coincidía con el calculado en la ultracentrífuga. Este trabajo le convirtió en uno más de los defensores de la existencia del enlace peptídico como fuerza de unión principal en las proteínas: “Se puede concluir que los aminoácidos que constituyen las proteínas están unidos principalmente por enlaces peptídicos; otras uniones como enlaces peptídicos atípicos (como en el glutation), ésteres, anhidridos o imidas, si aparecen, lo hacen en muy pequeño número”. Stanford Moore William H. Stein En 1946, Stein y Moore desarrollaron un método cromatográfico automatizado basado en la utilización de columnas rellenas de almidón. Esto les permitió publicar en 1949 la composición de aminoácidos de la -globulina, corrigiendo varios errores cometidos por Brand. Esta cromatografía de reparto fue sustituida en 1951 por una de intercambio iónico. La descripción de su analizador automático la llevaron a cabo en 1958, con el método de cuantificación, basado en la reacción con la ninhidrina, incorporado. Este analizador, conocido como de Spackman-SteinMoore, permitió el cálculo rápido y simplificado de la composición de aminoácidos de cualquier hidrolizado proteico y la separación parcial de mezclas de péptidos. EL PRIMER COLECTOR DE FRACCIONES William H. STEIN y Stanford MOORE Premio Nobel de Química de 1972 "for their contribution to the understanding of the connection between chemical structure and catalytic activity of the active centre of the ribonuclease molecule" “Con frecuencia recibo la visita de valiosos hombres y mujeres, cargados con cuestionarios y grabadoras, que quieren saber qué es lo que hizo que el Laboratorio de Biología Molecular fuese tan creativo. Entonces yo siento la tentación de hacerles ver cómo en Florencia, en el siglo XV, de una población de menos de cincuenta mil personas surgieron personajes como Leonardo, Miguel Ángel, Rafael, Ghiberti, Brunelleschi, Alberti y otros grandes artistas. ¿Estos entrevistadores se habrían preocupado entonces de investigar si los gobernantes de Florencia habían creado una organización interdisciplinaria de pintores, escultores, arquitectos y poetas para que floreciera todo este gran arte? Mi pregunta no es tan absurda como parece, porque la creatividad en Ciencia, como en las artes, no puede ser organizada. Surge espontáneamente del talento individual. Los laboratorios bien dirigidos pueden fomentarla, pero la organización jerárquica, las reglas burocráticas e inflexibles, y las montañas de inútil papeleo, pueden aniquilarla. Los descubrimientos no pueden ser planeados, surgen, como Puck, en las esquinas inesperadas”. CHRISTIAN B.ANFINSEN Premio Nobel de Química de 1972 "for his work on ribonuclease, especially concerning the connection between the amino acid sequence and the biologically active conformation" Frederick Sanger (1918) Premio Nobel de Química en 1958 "for his work on the structure of proteins, especially that of insulin" The Sequence of Insulin
