CONCLUSIONES • De acuerdo con el análisis electroforético en condiciones desnaturalizantes y con base en la actividad específica para el sustrato de BAPNA la enzima purificada mediante métodos cromatográficos es identificada como tripsina. • Se establecieron las condiciones óptimas para llevar a cabo la técnica de ELISA y el Ensayo de Manchas, las cuales fueron adecuadas para el estudio de la respuesta inmune de tipo humoral frente a tripsina de sardina Monterey (Sardinops sagax caerulea) en ratones C3H/HeJ. o En el caso del método de ELISA para lograr evaluar la producción de anticuerpos anti-tripsina de sardina Monterey (Sardinops sagax caerulea), se necesita 1 µg de la enzima, utilizando un segundo anticuerpo (anticuerpo de cabra anti-IgG de ratón) en una dilución constante de 1:2000. o Para lograr una óptima detección mediante el ensayo de manchas, es necesaria la cantidad de 1.6 µg de tripsina por cada membrana de nitrocelulosa, utilizando un segundo anticuerpo (anticuerpo de cabra anti-IgG de ratón) en una dilución constante de 1:10,000. Los datos obtenidos en este estudio serán de gran utilidad para lograr la generación de anticuerpos monoclonales para tripsina, específicamente en la etapa del tamizaje y la amplificación del hibridoma (dirigido a tripsina) lo cual a su vez permitirá la creación de una cromatografía de afinidad biológica con el fin de tener una mayor eficiencia en la purificación de tripsina de sardina Monterey (Sardinops sagax caerulea). 60