MÉTODO DE ANÁLISIS PARA MATERIAS GRASAS: MA2305

PRÁCTICA 3.- ANÁLISIS DE RESIDUOS DE PLAGUICIDAS EN HOJAS
METODO QuEChERS
1. INTRODUCCIÓN
Este método está diseñado para la determinación por cromatografía de gases
de residuos de plaguicidas en hojas. Los plaguicidas se extraen con Acetonitrilo y para
la determinación y cuantificación de sus residuos se utiliza la cromatografía de gases.
2. MATERIAL Y APARATOS
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Tubo centrifuga Falcon de 50 ml.
Matraz de fondo redondo de 50ml.
Molino material seco.
Balanza analítica.
Dispensador de disolvente de 15 ml y botella de 2.5 L
Centrífuga para tubos Falcon de 50 ml
Minicentrífuga para tubos Falcon de 50 ml.
Baño-rotavapor.
Agitador Vortex (opcional).
Espátulas.
Horno mufla
Cápsulas de porcelana.
Pipetas automáticas.
Pipetas pasteur.
Embudos.
Viales de 2 ml con tapón de rosca y septum para inyector automático.
Equipos de cromatografía.
3. REACTIVOS
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Sulfato magnésico anhidro >98% (MgSO4) PAR
PSA (Varian referencia 12213024)
Acido acético glacial (HAc) Grado Reactivo.
Acetonitrilo (MeCN) PAR con 1% HAc en volumen.
Disolución 50 ng/µl de Trifenilfosfato (TPP), en acetonitrilo.
Citrato sódico tribasico PAR.
Citrato sódico dibásico sexquihidrato
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Cloruro sódico (ClNa) PAR
Ciclohexano PAR.
Disoluciones de patrones de plaguicidas.
4. METODOLOGÍA
4.1. Preparación del Sulfato magnésico anhidro
Calentar el Sulfato magnésico anhidro a 500 ºC durante 5 horas en la
mufla previo a su uso para eliminar los ftalatos.
4.2. Preparación de la muestra
Picar la muestra con molino para material seco y homogeneizarla,
guardándola en bote boca ancha de PP de 250 ml.
4.3. Extracción
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Pesar en tubo Falcon de 50 ml 2 g de muestra.
Añadir 10 ml de Acetonitrilo al 1% en HAc, 4 g de MgSO4 activado, 1 g de
ClNa, 1 g de Citrato sódico tribasico y 1,5 g de Citrato sódico dibásico
sexquihidrato.
Tapar el tubo y agitar manualmente durante 30 s. Introducirlos en la
centrífuga y centrifugar durante 5 min a 5000 rpm.
Se pipetean 2,5 ml de disolvente sobre un nuevo tubo Falcon en el que
previamente se han pesado 0,375 g de MgSO4 y 0,063 g de PSA,
centrifugando en la mini centrífuga durante 2 min a 5000 rpm.
Se toma una alícuota de 1 ml del sobrenadante en un tubo de ensayo y se
evapora a sequedad en baño Turbovac.
4.4. Determinación cromatográfica
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Se disuelve el residuo con 2 ml de Ciclohexano:Acetato de etilo (9:1) en
baño ultrasonidos durante 10 minutos, y se pasa mediante pipeta a un vial
de tapón de rosca de 2 ml de inyector automático para su análisis por
cromatografía.
DETERMINACIÓN Y CUANTIFICACIÓN
Inyectar el extracto y un multipatrón de 0.5 ppm (mg/l) en el CG-MS/MS
empleando el Método Practicas.
Una vez identificado un compuesto se cuantifica mediante integración del área
de éste, comparándola con la de su patrón correspondiente o curvas de integración del
método.
Los resultados se expresan en mg por Kg o (ppm), que expresan los miligramos del
plaguicida contenidos en cada Kg de hojas.
La ecuación a utilizar durante la cuantificación es:
Am Vip Cp Vf
C= 
Ap Vim P
donde:
C= Concentración del plaguicida en la muestra (ppm)
Am = Area del pico del plaguicida en la muestra
Ap = Area del pico del plaguicida en el patrón
Vip = Volumen de inyección del patrón (L).
Vim = Volumen de inyección de la muestra (L).
Cp = Concentración del plaguicida en la disolución patrón (ppm)
Vf = Volumen de aforo final (mL).
P = Peso, en g, de la muestra.
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RESULTADOS EXPERIMENTALES
PLAGUICIDA
DIMETOATO
TERBUTIAZINA
OXIFLUORFEN
DIAZINON
METIDATION
IDENTIFICADO
CONCENTRACION ppm
Nota: Adjuntar los cromatogramas obtenidos.
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CONCLUSIONES
A tener en cuenta la información entregada.
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REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
- Fast and easy multiresidue method employing acetonitrile extraccion/partitioning
and “dispersive solid-phase extration” for the determination of pesticide residues in
produce. ANASTASSIADES ET AL.: Journal of AOAC International Vol. 86, Nª 2,
2003.
- Charles R. Worthing, B.Sc., M.A., D Phil. “The Pesticide Manual”.The British Crop
Protection Council.