334001. Cinética enzimática de Michaellis Menten

UNIVERSIDAD NACIONAL
ABIERTA Y A DISTANCIA
UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA
ESCUELA DE CIENCIAS AGRICOLA, PECUARIAS Y DEL MEDIO AMBIENTE
ECAPMA
Nombre del Curso:
334001-Sistema Metabólico Nutricional
Tema: Cinética Enzimática
JAIRO ENRIQUE GRANADOS MORENO.,MSc
(Director Nacional)
2014
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Cinética enzimática de Michaelis-Menten
Los estudios sistemáticos del efecto de la concentración inical del sustrato sobre la actividad
enzimática comenzaron a realizarse a finales del siglo XIX. Ya en 1882 se introdujo el concepto
del complejo enzima-sustrato como intermediario del proceso de catálisis enzimática. En 1913,
Leonor Michaelis
y Maud Menten , desarrollaron esta teoría y propusieron una ecuación de
velocidad que explica el comportamiento cinético de los enzimas.
Para explicar la relación observada entre la velocidad inicial (v 0) y la concentración inicial de
sustrato ([S]0, Michaelis y Menten propusieron que las reacciones catalizadas enzimáticamente
ocurren en dos etapas: En la primera etapa se forma el complejo enzima-sustrato y en la segunda,
el complejo enzima-sustrato da lugar a la formación del producto, liberando el enzima libre:
En este esquema, k1, k2 y k3 son las constantes cinéticas individuales de cada proceso y también
reciben el nombre de constantes microscópicas de velocidad. Según esto, podemos afirmar que:
v1 = k1 [E] [S]
v2 = k2 [ES]
v3 = k3 [ES]
Se puede distinguir entre enzima libre (E) y enzima unido al sustrato (ES), de forma que la
concentración total de enzima, [ET], (que es constante a lo largo de la reacción) es:
[ET] = [E] + [ES]
Como [E] = [ET] - [ES], resulta que: v1= k1[S] [ET] - k1 [S] [ES]
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Además, como [ES] es constante, la velocidad de formación de los productos es constante:
v = v3 = k3 [ES] = constante.
Como v1=v2+v3, podemos decir que:
k1[S] [ET] - k1 [S] [ES] = k2 [ES] + k3 [ES]
Despejando [ES], queda que:
en donde la expresión (k2+k3)/k1 se ha sustituído por KM, o constante de Michaelis-Menten. Este
enlace nos aporta una explicación sobre las razones que hacen de la KM un parámetro cinético
importante
Para cualquier reacción enzimática, [ET], k3 y KM son constantes. Vamos a considerar dos casos
extremos:
A concentraciones de sustrato pequeñas ([S] << KM) v = (k3 [ET]/KM) [S]. Como los términos entre
paréntesis son constantes, pueden englobarse en una nueva constante, k obs, de forma que la
expresión queda reducida a: v = k obs [S], con lo cual la reacción es un proceso cinético de primer
orden.
A concentraciones de sustrato elevadas ([S] >> KM), v = k3 [ET]. La velocidad de reacción es
independiente de la concentración del sustrato, y por tanto, la reacción es un proceso cinético de
orden cero. Además, tanto k 3 como [ET] son constantes, y nos permite definir un nuevo parámetro,
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la velocidad máxima de la reacción (Vmax): Vmax = k3 [ET], que es la velocidad que se alcanzaría
cuando todo el enzima disponible se encuentra unido al sustrato.
Si introducimos el parámetro Vmax en la ecuación general de la velocidad, obtenemos la expresión
más conocida de la ecuación de Michaelis-Menten:
[ ]
[ ]
V
Hay enzimas que no obedecen la ecuación de Michaelis-Menten. Se dice que su cinética no es
Michaeliana. Esto ocurre con los enzimas alostéricos, cuya gráfica v frente a [S] no es una
hipérbola, sino una sigmoide . En la cinética sigmoidea, pequeñas variaciones en la [S] en una
zona crítica (cercana a la KM) se traduce en grandes variaciones en la velocidad de reacción.
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