i Productinfo Hematoxilina de Harris modificada solución DC Código: 256991 Aplicación La hematoxilina de Harris es una solución ampliamente utilizada en el ámbito de la histología y la citología como componente de la tinción hematoxilina-eosina, básicamente como revelador de las estructuras nucleares, tanto de las nucleoproteínas como de los ácidos nucleicos en muestras de tejido humano. Principio La hematoxilina en sí, es un compuesto sin propiedades colorantes. Es un producto de su oxidación, la hemateína, la que le confiere dichas propiedades. Esta oxidación puede producirse de forma espontánea o inducida. La primera opción es lenta pues implica la oxidación natural debida al aire y la luz. La segunda, muy rápida o instantánea, implica el uso de algún agente oxidante como el mercurio o el yodo, sin embargo, esto provoca que la durabilidad de la tinción se vea reducida, ya que la hemateína también puede ser oxidada. Por tanto, las hematoxilinas de oxidación inducida tienen menos durabilidad pero no necesitan de un proceso de maduración para obtener unos resultados adecuados; se pueden usar prácticamente al instante después de su preparación. Para reducir los problemas generados por el agente oxidante se puede aumentar la concentración de etanol y disminuir el pH de la solución. Ambas estrategias fueron adoptadas en la formulación de la solución de Hematoxilina de Harris original. En algunos casos son insuficientes para preservar la actividad colorante después de teñir muchas muestras, probablemente por agotamiento de la hemateína a causa del agente oxidante y del elevado número de muestras a teñir. Principales ventajas Formulación mejorada: Mejor contraste y mayor poder de fijación del color. Aumento de la capacidad de procesar mayor número de muestras. Exento de mercurio: Contribuye a la preservación del medio ambiente. Mayor seguridad para el usuario. La Hematoxilina de Harris modificada ha sido especialmente diseñada por Panreac con un objetivo claro y es el de aumentar la durabilidad de la capacidad colorante, manteniendo el resto de las propiedades con respecto a la solución original. Productinfo i Hematoxilina de Harris modificada solución DC Procedimiento MANUAL Procedimiento AUTOMÁTICO ETAPA REACTIVO TIEMPO ETAPA REACTIVO TIEMPO Desparafinar Xileno 3 x 5 min Desparafinar Hidratar Etanol absoluto Etanol 90% Etanol 70% Agua destilada 7 min 7 min 7 min 7 min Xileno Xileno-etanol Etanol absoluto Etanol 96% 3 x 5 min 5 min 2 x 3 min 3 min Lavar Agua corriente 4 min Teñir Hematoxilina de Harris modificada 6 min Teñir Hematoxilina de Harris modificada 6 min Lavar Agua corriente 5 min Lavar Virar la tinción Ácido Acético 2% 10 - 20 s Agua corriente Ácido Acético 4 min 12 s Lavar Agua corriente Etanol 96% 5 min 1 min Lavar Agua corriente Etanol litiado 4 min 30 s Teñir Solución de Eosina-Floxina (*) 5 min Teñir Eosina-Floxina (*) 3 min Aclarar Deshidratar Etanol 70% Etanol 90% Etanol absoluto Etanol absoluto 5s 5s 1 min 5 min Etanol 96% Etanol absoluto Xileno 1 min 2 x 1 min 3 x 1 min Montar DPX Xileno 5s+ secado 5 min Xileno 5 min + secado Aclarar Montar (*) Preparación de la Solución de Eosina-Floxina Solución madre de eosina: Disolver 1,0 g de Eosina amarillenta en agua y enrasar a 100 mL con agua. Solución madre de floxina: Disolver 1,0 g de Floxina en agua y enrasar a 100 mL con agua. Mezclar 10 mL de la Solución madre de eosina con 1 mL de la Solución madre de floxina, añadir 78 mL de Etanol 96% y 0,4 mL de Ácido Acético glacial. Homogeneizar y guardar protegido de la luz. Medio de montaje (DPX, Eukitt, Histofluid…) Resultados Núcleos: azulados. Citoplasma y matriz: diferentes tonalidades rosadas y rojizas. Información de pedido CÓDIGO DESCRIPCIÓN ENVASE 256991.1612 Hematoxilina de Harris modificada solución DC 2,5 L 256879.1210 Eosina Amarillenta solución alcohólica 1% DC 500 mL 256879.1612 Eosina Amarillenta solución alcohólica 1% DC 2,5 L 251301.1608 Eosina Amarillenta solución hidroalcohólica 1% DC 100 mL 251301.1609 Eosina Amarillenta solución hidroalcohólica 1% DC 250 mL 251301.1611 Eosina Amarillenta solución hidroalcohólica 1% DC 1000 mL 251299.1606 Eosina Amarillenta (C.I. 45380) DC 25 g 251299.1608 Eosina Amarillenta (C.I. 45380) DC 100 g 252081.1606 Floxina B (C.I. 45410) DC 25 g PI-142 Disponemos de una gama completa de reactivos para histología. No dude en consultarnos.