Práctica nº4 Práctica 4: OBTENCIÓN DE UN FORTIS SANGUÍNEO Y VISUALIZACIÓN: TINCIÓN WRIGHT Realización del frotis con tinción Wrigth: Material: Frotis sanguíneo Colorante de Giemsa Microscopio de inmersión Aceite de inmersión Colorante Wright/Tampón PBS (1 volumen de colorante y dos volúmenes de PBS) Agua destilada DPX Lanceta para punción digital Guantes Gasas Dos portaobjetos Cubreobjetos 2 pipetas Cubeta Lancetas Portas Pipetas Cubeta Método de realización de la preparación: Hacer un frotis sanguíneo con una gotita de sangre capilar, para ello aplicar la técnica explicada en la práctica nº2. Dejar secar el frotis. Una vez seco, sumergirlo en colorante de Giemsa sin diluir durante 1 minuto. Sumergirlo en colorante Wright/ tampón PBS, Colorante Giemsa durante 10 minutos. Lavar en abundante agua y dejar secar. Aplicar el cubreobjetos sobre la preparación y fijar con DPX. Frotis sanguíneos Práctica nº4 Observación al microscopio: Para hacer este tipo de observación a 4000 aumentos se utiliza aceite de inmersión. El aceite debe colocarse encima del portaobjetos, en la parte que vamos a visualizar. Gracias a ésta técnica veremos las células con mayor detalle y podremos discernir mejor sus características. Las proporciones linfocitarias que encontramos en la muestra son las siguientes: Neutrófilos: 50-70% Eosinófilos: 1-3% Basófilos: muy raros Linfocitos: 20-25% Monocitos: 1-6% Neutrófilo segmentado