ARTICULO Propuesta de innovación pedagógica para un trabajo práctico de la asignatura Bioquímica de la Facultad de Medicina de la UNT: la utilización de experimentos de cinética enzimática simulados por computadora Rojo, Hebe P.; Piedrabuena de Martínez, Mirta; Núñez, Carlos G.* Introducción. En las postrimerías de este siglo la tecnología computacional tiene una aplicación universal e intergeneracional, de modo que la relación con el mundo empírico está mediada, en gran medida, por la informática. La computadora se ha convertido en un instrumento útil para las más variadas actividades del hombre, entre las cuales las acciones pedagógicas y la investigación ocupan un importante lugar. Son innumerables sus posibles aplicaciones, desde simular experimentos, realizar complicados cálculos en pocos minutos, acceder a amplias y variadas bases de datos a través de redes informáticas, hasta cursar por Internet estudios de grado y posgrado en “Universidades virtuales”. La computación ha contribuido enormemente a los estudios moleculares y numerosas Instituciones de renombre mundial aplican desde hace varios años esta tecnología al servicio de los estudios biológicos, como por ejemplo al análisis de la secuencia de ácidos nucleicos.1 La cátedra de Bioquímica utiliza esta tecnología al servicio de la investigación, no así al de su propuesta pedagógica. En el marco de un Convenio de Cooperación Internacional con el Institut für Technische Chemie de la Universidad de Hannover, Alemania, con subsidio de la Fundación Antorchas, se ha instalado en nuestro laboratorio un analizador de flujo continuo (FIA) controlado por un software denominado CAFCA (Computer Assisted Flow Continuous Analyzer) que se emplea en el proyecto de investigación. Objetivo y relevancia. El objetivo de nuestro trabajo es diseñar una propuesta concreta para incorporar la informática a los procesos de enseñanza y aprendizaje en nuestra cátedra. Fundamentamos a continuación por qué consideramos que su implementación podría constituirse en una alternativa superadora a ciertos problemas, que en virtud de nuestra práctica, hemos podido detectar: 1) Las nuevas generaciones crecen inmersas en un mundo informatizado, sometidos a un bombardeo de imágenes atractivas, lo que hace difí* Cátedra de Bioquímica, Facultad de Medicina, UNT. 14 cil captar la atención del educando en el aula, despertar en él la curiosidad y las ansias por conocer. Por ello la educación no puede permanecer alejada de esta realidad tecnológica, sino debe ponerla a su servicio para despertar en el alumno la predisposición a aprender, motivándolo en pos de la construcción de conocimiento. El componente motivador debe tenerse muy en cuenta a la hora de un diseño didáctico para conseguir un aprendizaje eficaz. Pensamos que una propuesta educativa que contemple el uso de la computadora en el aula puede resultar sumamente motivadora. 2) El tiempo asignado a un trabajo de laboratorio de Bioquímica resulta insuficiente para que el estudiante ensaye, cometa errores y seleccione los aciertos, para concluir con el diseño experimental adecuado al tema planteado. Los tiempos en el proceso pedagógico no son, ni pueden ser, los mismos que en una investigación. Por ello el docente le provee al alumno una guía o protocolo de trabajo donde las “variables” no son tales, las condiciones de la experimentación están cuidadosamente fijadas de antemano y los resultados obtenidos pueden anticiparse. En esta situación lejos de plantear al alumno un problema a resolver, se le alcanza la resolución del mismo. ¿Hasta qué punto con esta metodología adiestramos a los alumnos en las estrategias de la experimentación? ¿Cómo podríamos simular las condiciones de un experimento disminuyendo el tiempo que realmente insume el mismo? ¿Cómo lograr que el estudiante, en lugar de reproducir un experimento ya puesto a punto, construya el propio ejercitándose en el planteo de hipótesis y en la verificación o refutación de las mismas en base al análisis de la información obtenida? En la búsqueda de respuesta a estos interrogantes, elaboramos la alternativa metodológica que planteamos en este trabajo y que consiste en utilizar como herramienta didáctica un programa de computación que simula experimentos de cinética enzimática, realizando en pocos minutos lo que llevaría días de trabajo. Por un lado la necesidad de motivar a los alumnos y por el otro contribuir a su adiestramiento en la Vol. 4 - Nº 1 - REVISTA DE LA FACULTAD DE MEDICINA nistra los valores de las inversas de la velocidad y de la concentración de sustrato respectivos. ARTICULO metodología científica, justifican ampliamente poner en práctica esta estrategia innovadora en nuestra cátedra. El tema elegido para iniciar este proyecto no fue arbitrario; las enzimas constituyen un tema clave dentro de la bioquímica. Su alteración, disminución o ausencia conduce a fallas del metabolismo que muchas veces son la causa de la pérdida del estado de salud. En el marco de una carrera de medicina es imprescindible plantearse como objetivo que el alumno tome conciencia de la importancia de las enzimas para la salud del hombre. Recursos. Descripción del funcionamiento del programa. En la cátedra contamos con los recursos para concretar esta propuesta: IBM PC e impresora Epson LX-810. El programa cuyo uso proponemos, se denomina ENZY y ha sido elaborado con fines didácticos. 2 Instrucciones: - Una vez cargado el programa, aparece la pregunta ¿Cuál es su número? - Se puede optar por un número comprendido entre 1 y 1000, correspondiendo cada número a una enzima distinta. - Una vez elegido el número aparecen seis opciones: 1) Reacción catalizada por una enzima simple con un único sustrato 2) Como 1) pero con un inhibidor competitivo 3) Como 1) pero con un inhibidor no competitivo 4) Como 1) pero con inhibición por exceso de sustrato 5) Reacción catalizada por una enzima con dos sustratos 6) Reacción catalizada por una enzima con dos sustratos con un mecanismo “ping-pong” - Elegido por ejemplo el caso 1) el programa solicita una concentración de sustrato - El alumno elige la misma esta primera vez al azar y el programa provee el valor de velocidad de reacción correspondiente a esa concentración. - El proceso se repite, con diferentes concentraciones, elegidas ya con criterio, a fin de obtener la variación de la velocidad de reacción con la concentración de sustrato para la enzima elegida. El programa también suministra los valores de las inversas de la velocidad y de la concentración de sustrato respectivos. - Cuando se opta por 2) o 3) además de la concentración de sustrato debe elegirse una concentración de inhibidor Metodología. El ejercicio planteado a los alumnos consiste en investigar la dependencia de la velocidad de una reacción catalizada por una enzima, de las concentraciones de sustrato y de la presencia de inhibidores. Al disponer de 1000 enzimas posibles, el docente puede dar a cada alumno un problema distinto. Elegido el valor de concentración de sustrato el programa provee inmediatamente el valor de velocidad correspondiente, de modo que el estudiante puede ensayar, cuantas veces sea necesario, posibles resoluciones fundamentadas en el conocimiento del tema y en el análisis de los datos que va obteniendo. Para visualizar mejor y analizar los resultados se sugiere graficarlos, utilizando por ejemplo el programa Excel. La comparación de los resultados obtenidos para diferentes enzimas enriquece las posibilidades de discusión y análisis en el grupo. Efecto de la concentración sobre la actividad enzimática Vol. 4 - Nº 1 - REVISTA DE LA FACULTAD DE MEDICINA 15 ARTICULO Los gráficos siguientes fueron realizados con datos brindados por el programa para la enzima “45”. En el primer gráfico de velocidad en función de concentración de sustrato, los valores de velocidad y concentración de sustrato están multiplicados por 102 . Como parte del trabajo práctico se pide a los alumnos que, utilizando su conocimiento previo del tema, deduzcan qué Ecuación utiliza el programa para calcular el valor de velocidad para cada concentración de sustrato partiendo de los valores conocidos de la constante de Michaelis y de la Velocidad Máxima, de cada enzima. La misma es la Ecuación de Michaelis-Menten: Vmáx . [S] V0 = ———————— Km + [S] Donde V0 es la velocidad inicial Vmáx es la velocidad máxima [S] es la concentración de sustrato Km es la constante de Michaelis Con esta propuesta de experimentos simulados no se pretende reemplazar el trabajo de laboratorio, sino por el contrario hacerlo más provechoso y comprensible, ampliando los límites de sus posibilidades. Gráfico de Lineweaver-Burk Gráfico de Lineweaver-Burk - Inhibición no competitiva 16 Vol. 4 - Nº 1 - REVISTA DE LA FACULTAD DE MEDICINA ARTICULO Resultados A modo de prueba piloto se realizó la experiencia con un grupo reducido de alumnos obteniéndose buenos resultados. Pudo detectarse el entusiasmo del grupo por lo nuevo y una participación activa, generándose una actitud propicia para la construcción de conocimiento. En general el grupo expresó que esta experiencia ayudó a comprender el tema en mayor profundidad. Claro está que esto constituye sólo el inicio, y que la experiencia debe ampliarse a todo el grupo así como evaluarse con rigurosidad los resultados obtenidos de la misma. Conclusiones La relevancia de la aplicación de experimentos simulados por computadora a procesos didácticos ha sido señalada por varios autores, al respeto Negroponte expresa1 : “Si bien una importante parte del aprendizaje, sin duda, se logra a través de la enseñanza estructurada –pero una buena enseñanza, impartida por buenos maestros- una parte aún mayor se logra mediante la exploración, “reinventando la rueda” y descubriendo las cosas por uno mismo. Antes de la aparición de la computadora, la tecnología de la enseñanza estaba limitada a medios audiovisuales y a la enseñanza a distancia por medio de la televisión, lo cual amplió la actividad de los maestros e incrementó la pasividad de los niños. La computadora cambió radicalmente ese equilibrio. De pronto, aprender haciendo dejó de ser la excepción para convertirse en la regla. Como ahora la simulación por computadora, de prácticamente cualquier cosa, es posible, no hace falta aprender la anatomía de la rana disecándola...” Pensamos que el uso de experimentos enzimáticos simulados por ordenador, metodología innovadora para nuestra cátedra, contribuirá a fomentar en el estudiante una actitud activa y participativa, desarrollando la habilidad para investigar el comportamiento de un sistema desconocido, favoreciendo una actitud crítica y una toma de decisiones debidamente fundamentada para la resolución de problemas. Cabe destacar que para esta experiencia sumamente motivadora, como pudimos comprobarlo al ensayarla con un grupo, utilizamos los recursos existentes en nuestra cátedra. Una vez implementada la propuesta a todo el grupo de alumnos y evaluados los resultados de la misma, pensamos ampliar este proyecto incorporando el uso de informática en sistemas interactivos en temas tales como bioquímica clínica, biología molecular y genética. BIBLIOGRAFÍA 1 - Biologie et Informatique a L’Institut Pasteur. ADIP Lettre de L’Association pour le développement de L’Institut Pasteur. Nº15, 1984 2 - Hancock, Vivian J.F. Programs simulating allosteric and other enzyme kinetics for computeraided teaching. Journal of Biological Education 12: 284-290, 1978 3 - Negroponte, Nicholas. Ser digital, Atlántida, Buenos Aires, 1995, pag 201 Vol. 4 - Nº 1 - REVISTA DE LA FACULTAD DE MEDICINA 17