Métodos de purificación de proteínas y su aplicación en Biotecnología.

Curso:
“Métodos de Purificación de Proteínas y su Aplicación en Biotecnología”.
5 de abril – 16 abril del 2010
PROGRAMA
PROGRAMA TEORICO:
Profesora Dra. Adriana Seixas.
Horario de 16 a 19 hs.
Salón a confirmar.
05/04
- Purificación de proteínas abordando diferentes métodos
cromatográficos
como
cromatografía
de
intercambio
iónico,
cromatografía de exclusión en gel, cromatografía de fase reversa,
cromatografía de interacción hidrofóbica, covalente y de afinidad en
iones metálicos inmobilizados y cromatografía de afinidad.
06/04 – Purificación de extractos naturales y de proteínas recombinantes.
Estrategias de purificación de proteínas recombinantes, solubilización de
corpúsculos de inclusión
07/04 - Diferentes equipamientos utilizados FPLC / HPLC / UPLC. Tampones.
Que material debemos escoger para trabajar con nuestro sistema. Como
minimizar la inactivación de proteínas.
08/04 - Ensayos para trabajar con las proteína de interés, métodos de
cuantificación de proteínas, métodos de estudios cualitativos de
proteínas. Estudios de actividades específicas de las proteínas. Diálisis y
otras técnicas de remoción de moléculas contaminantes y detergentes,
métodos de concentración y técnicas de precipitación.
09/04 - Electroforesis (uni y bidimensional) e electro-focalización, criterios de
pureza, espectrometría de masa.
1
SEMINARIOS:
Prof. Adriana Seixas
Prof. Uruguaysito Benavides
Prof. Jacqueline Maisonnave.
Horario de 14-16 hs.
Salón de post-grado.
Presentación y discusión de artículos científicos que se le entregarán a los
estudiantes en la primer semana de clases teóricas.
12/04 -Purificación de proteínas recombinantes: Métodos, problemas y
soluciones.
13/04 – Purificación de proteínas nativas (extrato): Métodos, problemas y
soluciones.
14/04 - Determinación de la concentración de proteínas y métodos de diálisis
para diferentes proteínas, problemas y soluciones.
15/04 – Métodos de estudios de las fracciones purificadas. Problemas y
soluciones.
16/04 – Planteamientos de problemas en los diferentes trabajos de
investigación llevado a cabo por los estudiantes y discusión de la
resolución.
CURSO PRACTICO
Prof. Adriana Seixas
Prof. Uruguaysito Benavides
Horario de 16-20 hs.
Laboratorio de Inmunología.
12/04 – Purificación de proteína recombinante por Glutationa-sepharose.
13/04 – Purificación de proteína nativa (extrato) por Hitrap-Q.
14/04 - Determinación de la concentraciones de las proteínas purificadas y de
diálisis.
15/04 - Electroforesis de las fracciones purificadas.
16/04 – Análisis de los resultados de la práctica y evaluación final.
EVALUACIÓN
1) Asistencia a 75% de las actividades presenciales. (Requisito para tener
derecho a dar el exámen final).
2) Asistencia de 100% del Curso Práctico. (Requisito para tener derecho a dar
el exámen final).
3) Asistencia del 100% de los Seminarios. (Requisito para tener derecho a dar
el exámen final).
4) Evaluación Continua: Seminarios de exposición y discusión de trabajos
científicos y trabajo práctico (50 % del puntaje total final)
2
5) Prueba Final escrita: (50% del puntaje final total)
EXAMEN FINAL:
16./05
Hora 18:00.
Salón de Post/grado.
DURACIÓN
Conferencias: 15 hs
Seminarios: 10 hs.
Trabajos prácticos: 35 hs.
Trabajo no presencial : 15 hs.
Prueba final: 2 hs.
TRIBUNAL EXAMINADOR:
Dra. Adriana Seixas
Dr. Uruguaysito Benavides
Dra. Jacqueline Maisonnave.
CREDITOS: 5
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