UNIVERSIDAD LATINA DE PANAMÁ SEDE DE DAVID FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD DR. WILLIAM C. GORGAS LICENCIATURA DE TECNOLOGÍA MÉDICA MATERIA DE MICROBIOLOGÍA INDUSTRIAL, AGUAS, LECHE Y ALIMENTOS ETM036 LABORATORIO TEMA: ESTUDIO DE PRODUCTOS LÁCTEOS PROFESOR: RICARDO ALONSO SALDAÑA VEGA INTEGRANTE: LUIS ANTONIO JUNCÁ HERVEY 4-759-2491 AÑO 2023 CONTENIDO LABORATORIO I ................................................................................................................................... 3 ANÁLISIS MICROBIOLÓGICO DE ALIMENTOS ...................................................................................... 3 INTRODUCCIÓN ............................................................................................................................... 3 OBJETIVOS ....................................................................................................................................... 3 ESTUDIO EXPERIMENTAL ................................................................................................................ 3 MATERIALES .................................................................................................................................... 3 PROCEDIMIENTO ............................................................................................................................. 3 RESULTADO ..................................................................................................................................... 4 CONCLUSIONES ................................................................................................................................... 6 BIBLIOGRAFÍA ................................................................................................................................. 7 LABORATORIO I ANÁLISIS MICROBIOLÓGICO DE ALIMENTOS INTRODUCCIÓN El análisis de los alimentos y piensos para determinar la existencia, tipo y número de microorganismos es básico para la microbiología de alimentos. Sin embargo, ninguno de los métodos utilizados habitualmente permite determinar el número exacto de microorganismos que existe en un determinado alimento. El recuento en placa es el método más utilizado para la determinación del número de células viables o unidades formadoras de colonias (u.f.c.) en un alimento. OBJETIVOS • • Desarrollar el conocimiento practico para evaluar el grado de contaminación de un alimento. Practicar el uso y lectura del Petrifilm. ESTUDIO EXPERIMENTAL Las placas Petrifilm EC contienen los nutrientes del VRB, un agente gelificante soluble en agua fría, un indicador de la actividad glucuronidasa BCIG y un indicador de tetrazolio que facilita la enumeración de colonias. El film superior atrapa el gas producido por la fermentación de la lactosa por los Coliformes y E.coli. estas placas son las que se utilizaran en el laboratorio con la lectura según la NMKL (método 147.1993) que es el que se utiliza en el país actualmente. (3M, 2002) MATERIALES • • • • • • • • • • Agar SS, Nutritivo, MacConkey Incinerador Muestra de comida (Queso blanco aresanal) Embaces estériles Gotero Asas desechables Petrifilm Incubadora Mortero y pistilo Agua peptonada PROCEDIMIENTO 1. Se calculo y realizo el agua peptonada. 2. se pesan asépticamente 10 g del alimento. La pesada suele realizarse en bolsa de plástico para stomacher. Se añaden a la bolsa 90 mL de diluyente estéril y se homogeniza el alimento con el diluyente en Stomacher durante 2 minutos. 3. “DILUCIONES DECIMALES”, añadir 1 mL de macerado inicial (también llamado dilución madre o dilución 1:10) a un tubo con 9 mL de diluyente, homogenizar usando un agitador excéntrico de tubos de ensayo durante 20 segundos o agitando manualmente. De esta forma hemos preparado la dilución 1:100 ó 10-2. Repetir la operación anterior transfiriendo 9 mL de la dilución 1:100 a un tubo con 9 mL de diluyente para preparar la dilución 1:1000 ó 10-3. Repetir la operación anterior tantas veces como sea necesario hasta conseguir el número de diluciones deseado. Se realizo hasta 10-6. 4. Se utilizan placas previamente preparadas que contienen el medio de cultivo solidificado (unos 20 mL/placa). 5. Se deposita en la superficie del agar 0,1 mL (1 gota) de la muestra o de cada dilución. 6. Luego de realizada la descarga de la muestra, se procede a extenderla sobre toda la superficie de las placas, usando un asa de Drigalski estéril. 7. Esperar 2 ó 3 minutos a que se seque el inóculo. 8. Se llevan las placas a incubar durante 48 horas 9. Se agrega de la disolución al petrofilm. 10. Se cierra con cuidado de que no queden burbuja de aire y se incuba por 48 horas. RESULTADO Muestra y dilución Disoluciones -5 Resultado Se observa crecimiento en el agar nutritivo. Se observa una colonia lactosa positivo en el agar MacConkey. Se observo crecimiento en la disolución -5 pero no es relevante. Estas colonias son lactosa positiva. Disolución -5 Se observa crecimiento en el agar nutritivo. Se observa una colonia lactosa positivo en el agar MacConkey. Disolucion -6 Se observo crecimiento en la disolución -5 pero no es relevante. Estas colonias son lactosa positiva. Disolucion -6 Se observó crecimiento. Recuento de E. coli = 1. Recuento de coliformes = 110. Disolución -6 Recuento de E. coli = 0. Recuento de coliformes = 200. Disolución -5 CONCLUSIONES Se demostró que hay que tener cuidado con los productos artesanales que se compran, ya que estos usualmente no cuentan con buenas prácticas en la elaboración de estor. También se puede decir que la comunidad ya está acostumbrada a la mayoría de las enterobacterias que habitan estos productos y es muy raro que causen una patología, a no ser que la persona tenga una enfermedad que baje las defensas del cuerpo; también hay que mencionar que los turistas son uno de los mas afectados ya que no están acostumbrado a estas bacterias y pueden ocasionarle síntomas intestinales. Se pudo practicar con la técnica del petrofilm y practicar conocimientos ya adquiridos anteriormente con satisfacción. BIBLIOGRAFÍA 3M. (2002). Petrifilm, Placas para Recuento de E. coli y Coliformes. Lima, Perú: 3M. Recuperado el 20 de Mayo de 2023 Velasco, J., Araque, M. d., Araujo, E., Longa, A., Nieves, B., Ramírez, A. C., . . . Velazco, E. (2008). Manual Práctico de Bacteriología Clínica (Primera ed.). (L. R. Dávila, Ed.) Venezuela: Editorial Venezolana C. A. Recuperado el 20 de Mayo de 2023