UNIVERSIDAD NORBERT WIENER ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA Procesos Celulares y Moleculares II PRÁCTICA N°9 Transaminasas Integrantes: - Ramos Guerra Nicole - Sopla Tafur Maillori Shantal - Hurtado Huaman, Abdel Hamid -Vertiz Guillen, Jesus Enrique Marin Malca, Mirely Angely Ciclo: Segundo Sección: MD2M19 Docente: ARANGUREN, Luis Antonio Fecha de realización de la práctica: 22/10/2024 Fecha de Entrega del Informe: 27/10/2024 LIMA-PERÚ 2024 TRANSAMINASAS 1. ¿Qué se entiende por la fase pre analítica en la determinación de transaminasas y cuál es su objetivo? La fase preanalítica de la determinación de transaminasas es la etapa que comprende desde la preparación del paciente y la toma de la muestra hasta su preparación para el análisis. El objetivo de esta fase es obtener una muestra homogénea y representativa que permita entregar resultados precisos y oportunos. 2. ¿Cuáles son los pasos principales para obtener el suero sanguíneo en la fase pre analítica? Los pasos son: a. preparar al paciente: informar al paciente sobre los requerimientos para obtener resultados confiables b. Extraer la sangre: Colocar una banda elástica en la parte superior del brazo para llenar la vena de sangre. Luego, introducir una aguja en la vena y recoger la sangre en un tubo o frasco hermético c. Centrifugar la sangre: Centrifugar los tubos de sangre sin anticoagulante a 1500 g durante 15 minutos d. separar el suero: El suero sanguíneo es la fracción superior o sobrenadante que queda después de la centrifugación. Es transparente, de aspecto claro y de color amarillento 3. ¿Cómo se determina la absorbancia de la muestra en el protocolo de análisis de transaminasas? volumen de la muestra y las condiciones de la reacción, se calcula la actividad enzimática en unidades por litro (U/L).La absorbancia de una muestra en el protocolo de análisis de transaminasas (como las pruebas de ALT y AST) se determina utilizando un espectrofotómetro, un dispositivo que mide la cantidad de luz absorbida por la muestra a una longitud de onda específica 1. Preparación de la muestra: La muestra de suero o plasma se mezcla con reactivos que incluyen sustratos específicos (como α-cetoglutarato y L-alanina para ALT, o aspartato para AST) y cofactores como NADH. 2. Reacción enzimática: Las transaminasas catalizan una reacción en la que el NADH se oxida a NAD⁺. Dado que el NADH absorbe luz a 340 nm, pero el NAD⁺ no, la disminución de absorbancia a 340 nm refleja la actividad enzimática 3. Medición de la absorbancia: Se coloca la mezcla en el espectrofotómetro y se mide la absorbancia a lo largo del tiempo a una longitud de onda de 340 nm. Esta longitud de onda es seleccionada porque es donde el NADH tiene su pico de absorbancia. 4. Cálculo de la actividad enzimática: La velocidad de disminución de la absorbancia a 340 nm se relaciona directamente con la cantidad de transaminasas presentes. Usando la ecuación de Lambert-Beer, la concentración de NADH se puede relacionar con la absorbancia medida. Con esta información y factores como el 4. Explica cómo se utilizan los resultados de la absorbancia para calcular la concentración de las transaminasas en la fase post analítica. La absorbancia (A) es un valor adimensional que se calcula como una función logarítmica de la transmitancia (T): A= log10(1/T) = log10(Io/I) Para convertir un valor de porcentaje de transmitancia (%T) en absorbancia, se puede utilizar la siguiente ecuación: Absorbancia = 2 - log( La absorbancia es un concepto relacionado con la muestra, ya que indica la cantidad de luz que absorbe La determinación de transaminasas TGO y TGP es una de las pruebas de laboratorio más solicitadas para estudiar el hígado y sus enfermedades 5. ¿Qué pasos debes seguir para resolver un caso práctico donde se determina la concentración de una muestra de suero diluido? Para resolver un caso práctico de determinación de la concentración en una muestra de suero diluido, los pasos generales serían: 1. Preparación de la muestra: Asegura la correcta dilución de la muestra de suero según el protocolo establecido. 2. Selección del método de análisis: Elige el método adecuado, como espectrofotometría o enzimático, según los equipos disponibles y la precisión requerida. 3. Calibración del equipo: Usa estándares conocidos para calibrar el equipo y asegurar lecturas precisas. 4. Medición de absorbancia: Realiza las mediciones en el espectrofotómetro y registra los valores de absorbancia o actividad enzimática. 5. Cálculo de la concentración: Utiliza la curva de calibración o una fórmula de dilución para obtener la concentración final en la muestra original. 6. ¿Qué valores referenciales se deben tener en cuenta al interpretar los resultados de la concentración de transaminasas en el suero sanguíneo? Respecto a los valores referenciales de transaminasas en suero sanguíneo, generalmente se manejan los siguientes rangos: ● ALT (GPT): 7-56 U/L ● AST (GOT): 10-40 U/L Estos pueden variar según el laboratorio, la técnica utilizada y factores individuales como la edad o el género del paciente. 7. ¿Cómo se puede aplicar lo aprendido en la determinación de transaminasas en situaciones clínicas reales? En cuanto a la aplicación clínica, la medición de transaminasas permite evaluar la función hepática y detectar condiciones como hepatitis, cirrosis o daño muscular. En un contexto clínico, un aumento en AST y ALT podría indicar lesión hepática, lo cual orienta el diagnóstico y la toma de decisiones para el manejo del paciente. Preguntas Respecto al caso clínico: “Casos Clínicos: Elevación de enzimas hepáticas inducida por COVID-19 en embarazada” 1. ¿Cuál es el porcentaje de embarazadas que pueden presentar alteraciones en el perfil hepático durante el embarazo? Aproximadamente el 3-5% de las embarazadas pueden presentar alteraciones en el perfil hepático durante el embarazo. Estas alteraciones pueden deberse a causas propias del embarazo, como la colestasis intrahepática del embarazo, el hígado graso agudo del embarazo, o la preeclampsia severa, además de otras causas no relacionadas con el embarazo. Es importante monitorear el perfil hepático en mujeres embarazadas para detectar y manejar cualquier alteración que pueda afectar tanto a la madre como al feto. 2. ¿Qué porcentaje de pacientes infectados con COVID-19 pueden presentar alteraciones hepáticas durante el embarazo? Estas alteraciones en niveles porcentuales se presentan entre 3-5% de las pacientes gestantes y gran parte de estas vendrían a involucrarse a patologías propias del embarazo o enfermedades concomitantes a este. 3. Describe los síntomas iniciales que presentó la paciente embarazada de 36 años. - Dolor en hipocondrio derecho: - Tipo colico, inicio insidioso, intermitente - Escala Visual Análoga (EVA) 7/10, sin irradiación. - No relacionado con la ingesta de alimentos. Ictericia: Tinte amarillento en la piel (refiere la paciente). Orina oscura. Frecuencia cardíaca elevada: 113 lpm al ingreso. 4. ¿Qué exámenes de laboratorio se realizaron para descartar otras etiologías antes de confirmar el diagnóstico de COVID-19? Pruebas hepáticas: ● ● ● ● ● Aspartato aminotransferasa (AST/GOT): 139 U/L. Alaninoaminotransferasa (ALT/GPT): 186 U/L. Gamma glutamil transferasa (GGT): 59 U/L. Fosfatasa alcalina (FA): 144 U/L. Bilirrubina total: 1.77 mg/dL (predominio directo). Amilasa: 52 U/L. Albuminuria: Negativa. Hemograma y pruebas de coagulación: Sin alteraciones, excepto hipoalbuminemia. Serologías y pruebas inmunológicas: ● ● ● ● ● ● Anticuerpos antinucleares (ANA): (+) 1/160. Anticuerpos anti-músculo liso: Negativo. Anticuerpos anti-mitocondrial: Negativo. Virus Hepatitis B y C: Negativo. RPR (sífilis): No reactivo. VIH: Negativo. Reacción en cadena de la polimerasa (PCR) para COVID-19: Positivo. 5. ¿Qué reveló la ecografía abdominal realizada a la paciente en relación con su vía biliar? Vía biliar de 6 mm: Dentro de los límites normales. Colecistectomizada: La paciente no tiene vesícula biliar, lo cual coincide con su antecedente quirúrgico. Signos de hígado graso: Hallazgo que sugiere esteatosis hepática. 6. ¿Cuál fue la evolución de las transaminasas durante la hospitalización y un mes después del alta hospitalaria? Durante la hospitalización y seguimiento, la evolución de las transaminasas en la paciente mostró un aumento progresivo, seguido de una normalización un mes después del alta: ● Aspartato aminotransferasa (AST): Ingresó con 139 U/l, que aumentó a 246, 303 y luego 381 U/l durante la hospitalización. Al mes del alta, sus niveles bajaron a 15 U/l. ● Alanina aminotransferasa (ALT): Inició en 186 U/l, con incrementos a 278, 329 y finalmente 420 U/l en el hospital. Un mes después del alta, disminuyó a 13 U/l. 7. ¿Qué medidas de manejo se tomaron en relación con el embarazo y la evolución clínica de la paciente? Para el manejo de esta paciente embarazada con elevación de transaminasas inducida por COVID-19, se tomaron tres medidas clave: ● Enfoque de Manejo Expectante: Tras descartar otras causas comunes de daño hepático agudo y crónico, se atribuyó la elevación enzimática al SARS-CoV-2. Como la paciente se encontraba estable y sin síntomas severos, no se consideró necesario un tratamiento invasivo o la hospitalización prolongada. Tampoco se optó por la interrupción del embarazo, ya que la condición no comprometía la salud materna ni fetal. ● Seguimiento Ambulatorio Estricto: Se decidió un control ambulatorio con pruebas hepáticas cada dos semanas, con la recomendación de reingresar en caso de que presentara nuevos síntomas. ● Control Un Mes Posterior al Alta: La paciente se presentó a un mes de haber sido dada de alta, asintomática y con sus niveles de enzimas hepáticas en rangos normales, por lo cual se recomendó continuar con controles habituales en atención primaria. 8. ¿Por qué se decidió no interrumpir el embarazo en este caso a pesar de las alteraciones hepáticas? La decisión de no interrumpir el embarazo en este caso se basó en: ● La paciente se mantuvo estable y asintomática durante toda la hospitalización, sin signos de deterioro que comprometieran su salud o la del feto. ● La elevación de las transaminasas fue atribuida a la infección por SARS-CoV-2 después de descartar otras causas de hepatopatía aguda y crónica. Dado que esta alteración se debía a la infección y no a una condición hepática progresiva, no se consideró necesario interrumpir el embarazo. ● Se contó con la opinión de un equipo perinatal y de gastroenterología, quienes respaldaron el enfoque conservador al no identificar indicaciones claras para la interrupción del embarazo, ya que la condición clínica no representaba un riesgo inminente para la madre ni el feto. ● Se estableció un plan de seguimiento ambulatorio con pruebas hepáticas cada dos semanas, permitiendo monitorear la evolución de la paciente sin exponerla a un procedimiento invasivo. 9. ¿Qué sugerencia hacen los autores sobre la realización de pruebas para COVID-19 en embarazadas con alteración de las pruebas hepáticas? Los autores sugieren que en embarazadas que presenten alteraciones hepáticas persistentes sin una causa aparente, se debería considerar realizar una prueba de PCR para COVID-19. Esto se debe a que el SARS-CoV-2 puede manifestarse de forma atípica, incluyendo la elevación de enzimas hepáticas, especialmente en el contexto de la pandemia. Dado que esta presentación es poco frecuente pero posible, recomiendan esta prueba como parte del estudio diagnóstico en embarazadas con alteración hepática inexplicada 10. ¿Cuál es la relevancia del manejo multidisciplinario en casos de embarazadas infectadas con COVID-19 que presentan alteraciones hepáticas? La relevancia multidisciplinaria hacia las embarazadas que están infectadas con COVID-19,radica en la evaluación integral con determinados especialistas para descartar posibles daños hepáticos o hepatopatías sean agudas o crónicas. Su tratamiento en caso ya esté con algunas hepatopatías el manejo es sin intervención agresiva, con esto valorar los riesgos y beneficios en caso sea un paciente crítico. Preguntas hechas en clase ● Diferencia entre ascitis y cirrosis ● Cómo se interpreta el cociente de deritis ● Qué porcentaje de AST hay en citosol y mitocondrias La localización del AST es un 20% Citosol y 80% en las mitocondrias que serán liberados hacia la sangre en grandes cantidades cuando hay daño en la membrana. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS: 1. von Bischhoffshausen P1 Felipe Jordán U2 Rodrigo Latorre R2 Fernando Troncoso R 2 . SSVS. Casos Clínicos: Elevación de enzimas hepáticas inducida por COVID-19 en embarazada [Internet]. Conicyt.cl. 2020 [cited 2024 Oct 22]. Available from: https://scielo.conicyt.cl/pdf/rchog/v85s1/0717-7526-rchog-85-S1-S101.p df 2. Lesmes Moltó L, Albañil Ballesteros y. M. Aumento aislado de transaminasas: aproximación diagnóstica [Internet]. Fapap.es. [cited 2024 Oct 23]. Available from: https://fapap.es/files/639-898-RUTA/FAPAP1_2013_05.pdf 3. Vista de Importancia de la fase preanalítica en el laboratorio clínico de la Atención Primaria de Salud [Internet]. Sld.cu. [citado el 24 de octubre de 2024]. Disponible en: https://remij.sld.cu/index.php/remij/article/view/89/188 4. Cálculos con absorbancia y concentración [Internet]. Uah.es. [citado el 24 de octubre de 2024]. Disponible en: https://biomodel.uah.es/lab/calculos/abs-conc.htm 5. Fernández ABS, González YG, Hernández LA, Cid IL, Gómez OM. Evolución clínica y alteraciones del perfil hepático en gestantes con COVID-19. Rev Cuba Obstet Ginecol [Internet]. 2024 [citado el 25 de octubre de 2024];50. Disponible en: https://revginecobstetricia.sld.cu/index.php/gin/article/view/430
