0005850819190c701V9.0 AST Aspartate Aminotransferase acc. to IFCC without pyridoxal phosphate activation Información de pedido Analizadores adecuados para el cobas c pack Aspartate Aminotransferase acc. to IFCC (1100 05850819190 pruebas) Material requerido adicionalmente (no suministrado): ID del sistema 05 7500 2 10759350190 10759350360 12149435122 12149435160 12149443122 12149443160 05117003190 05947626190 Código 401 Código 401 Código 300 Código 300 Código 301 Código 301 Código 391 Código 391 05947626160 05117216190 05947774190 05947774160 05172152190 Calibrator f.a.s. (12 x 3 mL) Calibrator f.a.s. (12 x 3 mL, para los EE. UU.) Precinorm U plus (10 x 3 mL) Precinorm U plus (10 x 3 mL, para los EE. UU.) Precipath U plus (10 x 3 mL) Precipath U plus (10 x 3 mL, para los EE. UU.) PreciControl ClinChem Multi 1 (20 x 5 mL) PreciControl ClinChem Multi 1 (4 x 5 mL) PreciControl ClinChem Multi 1 (4 x 5 mL, para los EE. UU.) PreciControl ClinChem Multi 2 (20 x 5 mL) PreciControl ClinChem Multi 2 (4 x 5 mL) PreciControl ClinChem Multi 2 (4 x 5 mL, para los EE. UU.) Diluent NaCl 9 % (119 mL) cobas c 701/702 Código 391 Código 392 Código 392 Código 392 ID del sistema 08 6869 3 Español L‑aspartato + 2‑oxoglutarato Información del sistema ASTL: ACN 8687 SASTL: ACN 8587 (STAT, tiempo de reacción: 7) Uso previsto Test in vitro para la determinación cuantitativa de la aspartato aminotransferasa (AST) en suero y plasma humanos en los sistemas cobas c. Generalidades1,2 La enzima aspartato aminotransferasa (AST) se encuentra ampliamente distribuida en los tejidos del organismo, principalmente en el tejido hepático, cardíaco, muscular y renal. En enfermedades que afectan estos tejidos aumentan los niveles séricos de la AST. Concentraciones elevadas se encuentran asimismo en afecciones hepatobiliares tales como la cirrosis, el carcinoma metastásico y la hepatitis viral. Como consecuencia de un infarto de miocardio, la AST sérica se encuentra aumentada y alcanza su valor máximo dos días después de ocurrido. Los valores séricos de AST pueden estar disminuidos en pacientes en diálisis renal o con una deficiencia de la vitamina B6. La reducción aparente de la AST puede estar relacionada con la disminución del nivel de fosfato de piridoxal, el grupo prostético de AST, que trae como consecuencia un incremento en la relación entre la apoenzima y la holoenzima. Se han aislado dos isoenzimas de la AST, la citoplasmática y la mitocondrial. En el suero normal sólo se halla la isoenzima citoplasmática, mientras que en el suero de pacientes con enfermedades coronarias y hepatobiliares, pueden detectarse tanto la citoplasmática como la mitocondrial. Principio del test El presente test cumple con las recomendaciones de la IFCC, si bien su estabilidad y funcionamiento han sido mejorados.3,4 La AST de la muestra cataliza la transferencia de un grupo amino entre L‑aspartato y 2‑oxoglutarato para obtener oxaloacetato y L‑glutamato. A continuación y en presencia de la malato deshidrogenasa (MDH), el oxaloacetato reacciona con NADH para formar NAD+. oxaloaceta­ to + L‑glutamato MDH Oxaloacetato + NADH +H+ La velocidad de oxidación de NADH es directamente proporcional a la actividad catalítica de la AST. Se determina midiendo la reducción de la absorbancia. Reactivos - Soluciones de trabajo R1 Tampón TRIS: 264 mmol/L, pH 7.8 (37 °C); L‑aspartato: 792 mmol/L; MDH (microorganismos): ≥ 24 µkat/L; LDH (microorganismos): ≥ 48 µkat/L; albúmina (bovina): 0.25 %; conservante R3 NADH: ≥ 1.7 mmol/L; 2‑oxoglutarato: 94 mmol/L; conservante (STAT R2) R1 está en la posición B y R3 (STAT R2) en la posición C. Medidas de precaución y advertencias Para el uso diagnóstico in vitro por los profesionales de la salud. Observe las medidas de precaución usuales para la manipulación de reactivos de laboratorio. Residuos infecciosos o microbiológicos: Advertencia: manipule los residuos como material biológico potencialmente peligroso. Deseche los residuos de acuerdo con las instrucciones y procedimientos de laboratorio aceptados. Peligros ambientales: Aplique todas las normas locales de eliminación pertinentes para asegurar una eliminación segura. Existe una ficha de datos de seguridad a disposición del usuario profesional que la solicite. Para los EE.UU.: İAtención! Según la ley federal estadounidense, este producto puede ser vendido exclusivamente por médicos o según prescripción médica. Preparación de los reactivos Los reactivos están listos para el uso. AST 2022-10, V 9.0 Español L‑malato + NAD+ 1/4 0005850819190c701V9.0 AST Aspartate Aminotransferase acc. to IFCC without pyridoxal phosphate activation Conservación y estabilidad Tiempo de reacción / Puntos 10 / 24‑38 de medición AST Sin abrir, a 2‑8 °C: véase la fecha de caducidad impresa en la etiqueta del cobas c pack. Longitud de onda (sub/princ) 700/340 nm Dirección de reacción Disminución Unidades U/L (µkat/L) Pipeteo de reactivo Diluyente (H2O) En uso y refrigerado en el analizador: 4 semanas R1 44 µL 57 µL En el gestor de reactivos: 24 horas R3 19 µL 22 µL Volúmenes de muestra Muestra Diluyente NaCl al 9 % Sin abrir, a 2‑8 °C: véase la fecha de caducidad impresa en la etiqueta del cobas c pack. Normal En uso y refrigerado en el analizador: 4 semanas Disminuido En el gestor de reactivos: 24 horas Aumentado Obtención y preparación de las muestras Emplear únicamente tubos o recipientes adecuados para recoger y preparar las muestras. Sólo se han analizado y considerado aptos los tipos de muestra aquí indicados. Suero. Plasma: plasma tratado con heparina de litio y EDTA dipotásico. Los tipos de muestra aquí indicados fueron analizados con tubos de recogida de muestras seleccionados, comercializados en el momento de efectuar el análisis, lo cual significa que no fueron analizados todos los tubos de todos los fabricantes. Los sistemas de recogida de muestras de diversos fabricantes pueden contener diferentes materiales que, en ciertos casos, pueden llegar a afectar los resultados de los análisis. Si las muestras se procesan en tubos primarios (sistemas de recogida de muestras), seguir las instrucciones del fabricante de tubos. Centrifugar las muestras que contienen precipitado antes de realizar el ensayo. Consulte la sección de limitaciones e interferencias para obtener detalles sobre posibles interferencias por muestras. La estabilidad de las muestras fue establecida a partir de los datos experimentales del fabricante o de la literatura de referencia y solamente para las temperaturas y los tiempos indicados en la metódica. Cada laboratorio debe establecer sus propios criterios de estabilidad a partir de todas las referencias disponibles y/o realizando sus propios estudios. Estabilidad:5 Diluyente (NaCl) 10 µL – – 10 µL 15 µL 135 µL 20 µL – – Definición del test cobas c 701/702 para SASTL (ACN 8587): Tipo de medición Cinética A Tiempo de reacción / Puntos 7 / 12‑26 de medición Longitud de onda (sub/princ) 700/340 nm Dirección de reacción Disminución Unidades U/L (µkat/L) Pipeteo de reactivo Diluyente (H2O) R1 40 µL 51 µL R2 17 µL 20 µL Volúmenes de muestra Muestra Dilución de muestra Muestra Diluyente (NaCl) Normal 9 µL – – Disminuido 9 µL 15 µL 135 µL Aumentado 18 µL – – Calibración Calibradores 4 días a 20‑25 °C S1: H2O S2: C.f.a.s. 7 días a 4‑8 °C Modo de calibración Lineal 3 meses a -20 °C Intervalo de calibraciones Calibración a 2 puntos Material suministrado Consultar la sección "Reactivos - Soluciones de trabajo" en cuanto a los reactivos suministrados. Material requerido adicionalmente (no suministrado) ▪ Consultar la sección “Información de pedido” ▪ Equipo usual de laboratorio Realización del test Para garantizar el funcionamiento óptimo del test, observe las instrucciones de la presente metódica referentes al analizador empleado. Consulte el manual del operador apropiado para obtener las instrucciones de ensayo específicas del analizador. Roche no se responsabiliza del funcionamiento de las aplicaciones no validadas por la empresa. En su caso, el usuario se hace cargo de su definición. Aplicación para suero y plasma Definición del test cobas c 701/702 para ASTL (ACN 8687): Tipo de medición Dilución de muestra Muestra Cinética A -tras cambiar el lote de reactivos -si así lo requieren los procedimientos de control de calidad El intervalo de calibración puede ampliarse si el laboratorio asegura una verificación aceptable de la calibración. Trazabilidad: el presente método fue estandarizado frente a la fórmula original de la IFCC utilizando pipetas calibradas con un fotómetro manual que proporciona valores absolutos y la absortividad ε, específica del substrato.6 Control de calidad Efectuar el control de calidad con los controles indicados en la sección “Información de pedido”. Adicionalmente pueden emplearse otros controles apropiados. Adaptar los intervalos y límites de control a los requisitos individuales del laboratorio. Los resultados obtenidos deben hallarse dentro de los límites definidos. Cada laboratorio debería establecer medidas correctivas a seguir en caso de obtener valores fuera del intervalo definido. Cumplir con las regulaciones gubernamentales y las normas locales de control de calidad pertinentes. 2/4 2022-10, V 9.0 Español 0005850819190c701V9.0 AST Aspartate Aminotransferase acc. to IFCC without pyridoxal phosphate activation Cálculo Los sistemas cobas c calculan automáticamente la actividad de analito de cada muestra. Factor de conversión: U/L x 0.0167 = µkat/L Valores calculados: Para convertir de 25 °C a 37 °C, se empleó el factor 2.13.13 Cada laboratorio debería comprobar si los intervalos de referencia pueden aplicarse a su grupo de pacientes y, en caso necesario, establecer sus propios valores. Limitaciones del análisis - interferencias Criterio: recuperación dentro de ± 10 % del valor inicial a una actividad de la AST de 30 U/L (0.50 µkat/L). Ictericia:7 sin interferencia significativa hasta un índice I de 60 para la bilirrubina conjugada y sin conjugar (concentración de la bilirrubina conjugada y sin conjugar: aproximadamente 1026 µmol/L o 60 mg/dL). Hemólisis:7 sin interferencia significativa hasta un índice H de 40 (concentración aproximada de hemoglobina: 25.6 µmol/L o 40 mg/dL). La contaminación con eritrocitos provoca resultados aumentados, ya que la concentración de analito en los eritrocitos es mayor que en los sueros normales. La magnitud de la interferencia varía según el contenido de analito en los eritrocitos lisados. Lipemia (Intralipid):7 sin interferencia significativa hasta un índice L de 150. No existe una correlación satisfactoria entre el índice L (que corresponde a la turbidez) y la concentración de triglicéridos. En caso de muestras lipémicas puede producirse un aviso de alta absorbancia (> Abs.). Fármacos: no se registró ninguna interferencia a concentraciones terapéuticas con paneles de fármacos de uso común.8,9 A concentraciones plasmáticas fisiológicas, la sulfasalacina o la sulfapiridina pueden llevar a resultados falsos. El fármaco Cyanokit (hidroxocobalamina) puede interferir en el test. En casos muy raros pueden obtenerse resultados falsos debidos a la gammapatía, particularmente del tipo IgM (macroglobulinemia de Waldenström).10 Para el diagnóstico, los resultados del test siempre deben interpretarse teniendo en cuenta la anamnesis del paciente, la exploración clínica así como los resultados de otros exámenes. ACCIÓN REQUERIDA Programación de lavado especial: en los sistemas cobas c, ciertas combinaciones de test requieren ciclos de lavado especial. Todos los pasos de lavado necesarios para evitar la contaminación por arrastre están disponibles a través de cobas link. En algunos casos se requieren entradas manuales. La lista de las contaminaciones por arrastre puede encontrarse en la versión más actual de la metódica NaOHD/SMS/SmpCln1+2/SCCS. Para más detalles, consulte el manual del operador. En caso necesario, implemente el lavado especial destinado a evitar la contaminación por arrastre antes de comunicar los resultados del test. Datos específicos de funcionamiento del test A continuación, se indican los datos representativos de funcionamiento de los analizadores. Los resultados de cada laboratorio en particular pueden diferir de estos valores. Límites e intervalos Intervalo de medición 5‑700 U/L (0.08‑11.7 µkat/L) Determinar las muestras con actividades superiores por la función de repetición. La dilución de las muestras por la función de repetición es a 1:10. Los resultados de las muestras diluidas por la función de repetición se multiplican automáticamente por 10. Límites inferiores de medición Límite de detección inferior del test 5 U/L (0.08 µkat/L) El límite de detección inferior representa la menor concentración medible de analito que puede distinguirse de cero. Se calcula como el valor situado a 3 desviaciones estándar por encima del estándar más bajo (estándar 1 + 3 DE, repetibilidad, n = 21). Los valores inferiores al límite de detección inferior (< 5 U/L) no son señalados por el analizador. Valores teóricos11 De acuerdo al método estándar optimizado (comparable con el método IFCC sin activación por fosfato de piridoxal12): Hombres: hasta 40 U/L (hasta 0.67 µkat/L) Mujeres: hasta 32 U/L (hasta 0.53 µkat/L) 2022-10, V 9.0 Español Precisión La precisión se determinó a partir de muestras humanas y controles según un protocolo interno con repetibilidad (n = 21) y precisión intermedia (3 alícuotas por serie, 1 serie por día, 20 días). Se obtuvieron los siguientes resultados: ASTL: Repetibilidad Media DE CV U/L (µkat/L) U/L (µkat/L) % Precinorm U 44.7 (0.746) 0.8 (0.013) 1.9 Precipath U 156 (2.61) 1 (0.02) 0.6 Suero humano A 21.3 (0.356) 0.7 (0.012) 3.2 Suero humano B 82.4 (1.38) 0.7 (0.012) 0.8 Suero humano C 564 (9.42) 3 (0.05) 0.5 Media DE CV U/L (µkat/L) U/L (µkat/L) % Precinorm U 45.8 (0.765) 0.7 (0.012) 1.5 Precipath U 156 (2.61) 1 (0.02) 0.4 Suero humano A 14.8 (0.247) 0.8 (0.013) 5.4 Suero humano B 130 (2.17) 1 (0.02) 0.9 Suero humano C 642 (10.7) 3 (0.1) 0.5 Media DE CV U/L (µkat/L) U/L (µkat/L) % Precinorm U 36.7 (0.61) 0.5 (0.01) 1.3 Precipath U 130 (2.17) 1 (0.02) 0.8 Suero humano 3 30.0 (0.50) 0.7 (0.01) 2.3 Suero humano 4 121 (2.02) 2 (0.03) 1.9 SASTL: Repetibilidad ASTL / SASTL: Precisión intermedia Los resultados de la precisión intermedia se obtuvieron del analizador cobas c 501 como sistema de referencia. Comparación de métodos Se han comparado los valores de AST en muestras de suero y plasma humanos obtenidos en un analizador cobas c 701 (y) con los obtenidos con el reactivo correspondiente en un analizador cobas c 501 (x). ASTL: Número de muestras (n) = 73 Passing/Bablok14 Regresión lineal y = 1.000x + 0.408 U/L y = 0.993x + 1.45 U/L τ = 0.989 r = 1.000 Las actividades de las muestras se encontraron entre 13.1 y 686 U/L (0.219 y 11.5 µkat/L). SASTL: Número de muestras (n) = 305 Passing/Bablok14 3/4 Regresión lineal 0005850819190c701V9.0 AST Aspartate Aminotransferase acc. to IFCC without pyridoxal phosphate activation y = 1.007x + 0.769 U/L y = 0.999x + 1.17 U/L τ = 0.928 r = 1.000 © 2022, Roche Diagnostics Las actividades de las muestras se encontraron entre 5.20 y 659 U/L (0.087 y 11.0 µkat/L). Referencias bibliográficas 1 Nagy B. Muscle disease. In: Kaplan LA, Pesce AJ, eds. Clinical Chemistry, theory, analysis, and correlation. St. Louis: Mosby 1984;514. 2 Moss DW, Henderson AR, Kachmar JF. Enzymes. In: Tietz NW, ed. Fundamentals of Clinical Chemistry, 3rd ed. Philadelphia, PA: WB Saunders 1987;346-421. 3 Bergmeyer HU, Hørder M, Rej R. Approved recommendation (1985) on IFCC methods for the measurement of catalytic concentration of enzymes. Part 2. IFCC Method for aspartate aminotransferase. J Clin Chem Clin Biochem 1986;24:497-510. 4 ECCLS. Determination of the catalytic activity concentration in serum of L-aspartate aminotransferase (EC 2.6.1.1,ASAT). Klin Chem Mitt 1989;20:198-204. 5 Use of Anticoagulants in Diagnostic Laboratory Investigations. WHO Publication WHO/DIL/LAB/99.1 Rev. 2: Jan 2002. 6 Schumann G, Bonora R, Ceriotti F, et al. IFCC Primary Reference Procedures for the Measurement of Catalytic Activity Concentrations of Enzymes at 37 °C – Part 5. Reference Procedure for the Measurement of Catalytic Activity Concentrations of Aspartate Aminotransferase. Clin Chem Lab Med 2002;40(7):725-733. 7 Glick MR, Ryder KW, Jackson SA. Graphical Comparisons of Interferences in Clinical Chemistry Instrumentation. Clin Chem 1986;32:470-475. 8 Breuer J. Report on the Symposium "Drug Effects in Clinical Chemistry Methods". Eur J Clin Chem Clin Biochem 1996;34:385-386. 9 Sonntag O, Scholer A. Drug interference in clinical chemistry: recommendation of drugs and their concentrations to be used in drug interference studies. Ann Clin Biochem 2001;38:376-385. 10 Bakker AJ, Mücke M. Gammopathy interference in clinical chemistry assays: mechanisms, detection and prevention. Clin Chem Lab Med 2007;45(9):1240-1243. 11 Thefeld W, Hoffmeister H, Busch EW, et al. Referenzwerte für die Bestimmungen der Transaminasen GOT und GPT sowie der alkalischen Phosphatase im Serum mit optimierten Standardmethoden. Dtsch Med Wschr 1974;99(8):343-351. 12 Klein G, Lehmann P, Michel E, et al. Vergleich der IFCC-Methoden für ALAT, ASAT und GGT bei 37 °C mit den eingeführten Standardmethoden bei 25 °C und 37 °C. Lab Med 1994;18:403-404. 13 Zawta B, Klein G, Bablok W. Temperaturumrechnung in der klinischen Enzymologie? Klin Lab 1994;40:23-32. 14 Bablok W, Passing H, Bender R, et al. A general regression procedure for method transformation. Application of linear regression procedures for method comparison studies in clinical chemistry, Part III. J Clin Chem Clin Biochem 1988 Nov;26(11):783-790. En la presente metódica se emplea como separador decimal un punto para distinguir la parte entera de la parte fraccionaria de un número decimal. No se utilizan separadores de millares. Todo incidente grave que se haya producido en relación con el producto se comunicará al fabricante y a la autoridad competente del Estado Miembro en el que se encuentre el usuario y/o el paciente. Roche Diagnostics GmbH, Sandhofer Strasse 116, D-68305 Mannheim www.roche.com +800 5505 6606 Distribuido en los EE.UU. por: Roche Diagnostics, Indianapolis, IN, EE.UU. Apoyo técnico al cliente estadounidense 1-800-428-2336 Símbolos Roche Diagnostics utiliza los siguientes símbolos y signos adicionalmente a los indicados en la norma ISO 15223‑1 (para los EE.UU.: consulte dialog.roche.com para la definición de los símbolos usados): Contenido del kit Volumen para reconstitución GTIN Número Global de Artículo Comercial La barra del margen indica suplementos, eliminaciones o cambios. 4/4 2022-10, V 9.0 Español
