COPROANÁLISIS Aguilar López Daniela Liliana Aldana Aldana Maricruz Bernal Rendón Daniel Zamudio Galeana Kensel Aarón Contenido 01 Estudio de las heces. ParasitoscópicO 02 Sangre oculta en las heces. 03 Pruebas especiales. 04 Lactoferrina. 05 Calprotectina. 06 Caso clínico 01 Estudio de las heces Parasitoscopico INDICACIÓNES Se indica en pacientes con diarrea, fiebre e inflamación abdominal. Se debe sospechar en particular si el paciente ha bebido agua de pozo, se ha sometido a tratamiento prolongado con antibióticos o ha viajado a lugares endémicos. 01 Estudio de las heces Parasitoscopico TOMA DE MUESTRA Para el estudio de las heces es necesaria la toma de una muestra de heces por parte del paciente. Habitualmente esta se hará en el propio domicilio del paciente. Es recomendable realizar una higiene adecuada de la zona. El paciente debe orinar antes de realizar la deposición, ya que las heces mezcladas con orina no resultan útiles para el análisis Estudio de las heces Parasitoscopico Exámenes coproparasitoscópicos Alude a todas aquellas técnicas en las que se utiliza la materia fecal para realizar el diagnóstico parasitológico. Se pueden clasificar según las siguientes características REALIZACIÓN Fresco o mediáticas Macroscópico Microsópico Cualitativos Cuantitativos OTROS Raspado anal y perianal. Examen de contenido duodenal 01 Estudio de las heces Parasitoscopico TAMIZADO Se utilizan tamices de diferentes mallas por las cuales se hace pasar el producto biológico (materia fecal). Bajo el chorro del agua se hace un lavado para liberar los parásitos. Necator americanus Ascaris lumbricoides Trichuris trichiura Taenia 01 Estudio de las heces Parasitoscopico CPS de concentración por centrifugación/flotación Se conoce como técnica de Faust Consiste en homogeneizar con agua una pequeña porción de materia fecal; luego se centrifuga y se lava una o dos veces, entre las cuales se decanta el líquido sobrenadante; el último botón se homogeneiza con de sulfato de zinc. Se homogeneiz a con lugol, se cubre y se observa 01 Estudio de las heces Parasitoscopico CPS de concentración por sedimentación-centrifugación o de Ritchie Se conoce como técnica de formol éter Se utiliza una solución de formalina al 10% para fijas los parásitos. La muestra se homogeneiza con solución salina isotónica y se centrifuga, se lava y se obtiene sedimento, al que se agrega solución de formalina y enseguida éter. Luego se agita y se vuelve a centrifugar. En el sedimento final se encuentran las formas parasitarias diagnósticas. 01 Estudio de las heces Parasitoscopico CPS directo en fresco Consiste en la observación en fresco de una muestra de materia fecal con solución salina o lugol, puede o no ser teñida. Se recomienda para todos aquellos casos en que se desea identificar trofozoítos de protozoos. Una aplicación es que se puede utilizar para informes cuantitativos Regla de tres se obtiene el número de huevos por gramo de heces que contiene la muestra (2-3 mg) 01 Estudio de las heces Parasitoscopico Métodos cuantitativos Son métodos que se utilizan para relacionar la eliminación de huevos de un helminto con la masividad de la parasitosis POR DILUCIÓN Hidroxido de sodio 1:15 Geohelmintiasis h/ml/h KATO-MIURA KATO-KATZ Requiere humedecer cubreobjetos en solución de verde de malaquita (Contraste) y glicerina (Aclarar). h/g/h Mismo fundamento, pero se utiliza un cartón grueso de 3 mm de grosor con un orificio de 6 mm de diámetro, por donde se hace pasar la muestra (heces para sangre oculta, prueba de sangre oculta en heces, prueba inmunoquímica fecal, prueba de DNA en heces) Valores normales: No hay sangre en las heces Indicaciones: detección de cáncer colorrectal en individuos asintomáticos. También puede detectar sangre por otras causas (p. ej., úlceras, hemorroides, diverticulosis). GUAYACOL Sustancia química con la que se cubre la muestra y tiene una actividad similar a peroxidasa de la hemoglobina cataliza la reacción de la peroxidasa y un cromógeno llamado ortotolidina para formar una ortotolidina oxidada teñida de azul.. Hace que la materia fecal cambie de color rápidamente si hay sangre. Alta sensibilidad, no se alteran por carnes rojas u oxidantes de plantas, pueden fallar en el reconocimiento de sangre oculta del tubo digestivo superior debido a que la globina se ha digerido al momento en que llega a las heces. Pruebas inmunoquímicas fecales (FIT) Prueba inmunoquímica de sangre oculta en heces (iFOBT). Más sensible que la prueba del guayacol en la detección de tumores colorrectales benignos, precancerosos y malignos. ESTUDIO DE DNA EN HECES Debido a que mayor parte de la mayor parte de los pólipos precancerosos no sangran, pueden pasar inadvertidos por la FOBT Los polipos precancerosos diseminan celulas que contienen DNA anormal , por lo tanto este estudio puede ser más preciso . PATOLOGÍAS Tumores GI benignos y malignos Úlceras Enfermedad inflamatorio intestinal Malformaciones arteriovenosas Diverticulosis Hematobilia Más comunes Hemorroides Sangre digerida de una sangrado nasal o bucofaringeo Factores de interferencia • Ejercicio vigoroso. • Consumo de carne roja tres días antes de la prueba. • La ingestión de vegetales y frutas ricas en peroxidasa (nabo, alcachofas, hongos, rábanos, brócoli, soya, coliflor, naranjas, plátanos, melones y uvas) y rábano picante pueden modificar los resultados. Los fármacos que pueden ocasionar sangrado GI incluyen anticoagulantes, ácido acetilsalicílico, colchicina, preparaciones férricas (dosis altas), antiinflamatorios no esteroideos y esteroideos. Aunque estos fármacos no interfieren con el desarrollo de la prueba, pueden provocar sangrado GI sin relación con una afección. Los fármacos que pueden inducir reacciones de peroxidación y resultados positivos falsos incluyen ácido bórico, bromuros, colchicina, yodo, hierro y derivados de la rauwolfia. La vitamina C puede precipitar resultados negativos falsos al suprimir la reacción de peroxidación. Procedimiento y cuidado del paciente Indicar el procedimiento al paciente No mezclar la orina con la muestra de heces Importancia de múltiples muestras en días diferentes para una mejor precisión de la prueba Algunos centros indican una alta ingesta de fibra Durante Prueba con tarjeta para muestra 1. Se coloca la muestra de las heces en uno de los lados del papel de guayacol; las muestras de heces deben tomarse de dos áreas diferentes de la muestra. 2. Se aplican dos gotas del revelador en el otro lado del papel. 3. Una decoloración azulada indica sangre oculta en las heces. Prueba con laminilla 1. Se coloca una muestra de las heces en el papel para prueba. 2. Se coloca una laminilla sobre la muestra de las heces. 3. Se aplican dos a tres gotas de agua corriente en la laminilla y se permite que fluya al papel. 4. Una decoloración azulada indica sangre oculta en heces. Lactoferrina En los seres humanos, se sintetiza en las glándulas mamarias, en las glándulas lagrimales, bronquiales y salivales. La lactoferrina se encuentra dentro de los neutrófilos. Tiene actividad enzimática. Tiene actividad antibacteriana, también puede ayudar a romper la membrana celular de agentes patógenos. Ayuda al crecimiento de las bacterias beneficiosas presentes en el intestino (la microbiota intestinal). La cantidad de lactoferrina liberada por los neutrófilos se ha correlacionado positivamente con la severidad de una posible inflamación en el tracto gastrointestinal. Lactoferrina La lactoferrina puede resultar útil para distinguir entre las enfermedades de causa inflamatoria y no inflamatoria. Las enfermedades inflamatorias intestinales más comunes son la enfermedad de Crohn y la colitis ulcerosa, así como cáncer de colón. También puede existir inflamación por una infección bacteriana (Shigella, Salmonella, Campylobacter y Clostridium difficile) o parasitaria. Lactoferrina (hLf) La lactoferrina se solicita cuando una persona tiene síntomas y signos sugerentes de inflamación intestinal. Valor mayor de 7,25 μg/g podría indicar EII. Calprotectina La calprotectina se encuentra en el citosol de los neutrófilos, frente a una inflamación gastrointestinal los neutrófilos se desplazan hacia la zona afectada liberando la calprotectina. Esta proteína inhibe el sistema enzimático dependiente del zinc, ocasionando con ello la muerte de ciertos microbios e induciendo la apoptosis de células sanas y cancerígenas. La calprotectina en presencia de calcio es extremadamente resistente a la degradación proteolítica. Calprotectina (hCp) Al igual que la lactoferrina, la prueba de calprotectina se indica cuando el paciente presenta episodios frecuentes de diarrea acuosa y/o sanguinolenta, dolor abdominal, pérdida de peso y fiebre. NEGATIVO: Menor de 50 μg/g INDETERMINADO: 50-200 μg/g POSITIVO: Mayor de 200 μg/g Calprotectina (hCp) A veces, como consecuencia del tratamiento con antiinflamatorios no esteroideos, se producen sangrados y alteraciones tisulares que pueden producir un aumento de las concentraciones de calprotectina. Puede producirse un resultado falso negativo con la calprotectina en heces. Es más frecuente observarlos en los niños, porque la calprotectina está disminuida a pesar de que exista inflamación. Test rápido para la detección cualitativa de Calprotectina y Lactoferrina Test rápido para la detección cualitativa de Calprotectina y Lactoferrina Indicaciones La muestra debe colocarse en un recipiente estéril y cerrado. Si hay presencia de sangre o moco en las heces debe incluirse en el recipiente. Evitar el contacto con el agua del inodoro. La muestra debe ser de 10 gr, (el tamaño de una nuez). Una vez recolectada la muestra debe ser llevada al laboratorio para analizar. Si la muestra es recolectada de un pañal debe ser retirada lo más pronto posible evitando que el pañal la absorba. CASO CLÍNICO CASO CLÍNICO Paciente masculino de 39 años de edad que acude a consulta refiriendo de 7 a 10 deposiciones blandas-acuosas, precedidas de dolor abdominal tipo cólico, con urgencia y tenesmo, sin productos patológicos ni sangrados, de 2 semanas de evolución, sin mejoría a pesar de dieta astringente y acompañadas de pesadez postprandial con fiebre, sin presencia de náuseas ni vómitos. Menciona haber estado en Fuerteventura (isla en el Océano Atlántico) tres semanas antes. Con base en el caso, ¿Qué datos consideran relevantes? Con base en el caso, ¿Qué pruebas le mandarían al paciente y por qué? Datos relevantes Dolor abdominal tipo cólico 7 a 10 deposiciones Estudios de laboratorio No presenta sangrados Al paciente se le solicita un Coproparasitoscopico debido a que no presenta sangre en las heces. Refiere haber estado en una zona endémica. Flora bacteriana mixta sin enteropatógenos. Quistes de Giardia lamblia. FUENTES Pagana Kathleen (2014) Laboratorio clínico 5ª edición. Editorial El manual moderno. Becerril MA (2014) Parasitología médica 4ª edición Editorial Mc Graw Hill. Balcells A (2006) La clínica y el laboratorio 20ª edición Editorial Elsevier.
