EXAMEN DE MICROBIOLOGIA 1.- Cicle lític/ lisogenic. El virus infecta la cèl·lula i transcriu el seu ADN/ARN , que s'integrarà al genoma de la cèl·lula. A) Cicle lític: S'expressen els gens del virus. Partícula infecciosa virió. Te 5 fases segures fixació(virus s’uneix a l’hoste de forma estable), injecció(virus entra a la cèl·lula mitjançant una perforació a la paret bacteriana), eclipsi(síntesis ARN), assemblatge(formació càpsida y empaquetament àcid nucleic viral), ruptura (mort cel·lular, virions surten de la cèl·lula) . B) Cicle lisigènic: L'ADN del virus queda integrat al genoma de la cèl·lula sense expressar-se. La cèl·lula es divideix sense que es multipliqui el virus. El virus pot passar del cicle lisigènic al lític. Partícula infecciosa es el pròfag. Te 3 fases segures gestació, injecció, latència. Pot passar de cicle lisigènic a lític. 2.- Estructura dels virus. L'estructura dels virus és bastant senzilla. Els components bàsics d'un virus són els següents: a) Material genètic. Aquest material genètic està format per ADN o ARN, mai tots dos alhora. Aquestes macromolècules contenen la informació que determina les característiques del virus. b) Coberta protectora. L'ADN o l'ARN està protegit per una coberta feta de proteïnes. Aquesta estructura rep el nom de càpsida i s'encarrega, a més de protegir el material genètic, d'unir-se a la cèl.lula que serà infectada pel virus. c) Envoltura: bicapa lipidica més glucoproteïnes virals. Els virus envoltats són més labils. 3.- Comparació: PROCARIOTES – EUCARIOTES ( paret, esquema endospora, fagle, organismes responsables, proves diagnostiques ). PROCARIOTES Organismes Bacteris, cianofícies, micoplasmes EUCARIOTES Protistes, fongs, plantes i animals Grandària 1-10 mm de llarg 10-100 mm de llarg Metabolisme Aeròbic o anaeròbic Aeròbic (anaeròbic facultatiu) Orgànuls Pocs Nucli, cloroplast, mitocondri, etc ADN linial, molt llarg i que conté gens fragmentats (exons i introns); associat a histones; organitzat en cromosomes i envoltat d'una membrana nuclear ADN Circular en el citoplama; no combinat amb histones; sense separació de la resta del citoplasma ARN i proteïnes ARN sintetitzat i transformat al ARN i proteïnes sintetitzades al nucli; proteïnes sintetitzades al mateix compartiment citoplasma Citoplasma Sense citoesquelet, corrents citoplasmàtics ni exocitosis Compartimentació citoplasmàtica Compartimentació citoplasmàtica escassa (mesosomes). desenvo-lupada (orgànuls membranosos). Citosquelet format per filament proteics; corrents citoplasmàtics; endocitosi i exocitosi Divisió cel·lular Organització cel·lular Per bipartició o per espores Principalment unicel·lular Per mitosi (o meiosi) Principalment pluricel·lular amb diferenciació de les cèl·lules EXAMEN MICROBIOLOGIA GENERAL 4.- Paret bacteriana. Dibuix. Esquemes. La paret bacteriana està feta de peptidoglicà (també anomenat mureïna). Les parets cel·lulars bacterianes son diferents de les parets de plantes i fongs que estan fetes de cel·lulosa i quitina, respectivament. També són diferents de les parets de Archaea, que no tenen peptidoglicà. La paret cel·lular és essencial per la supervivència de molts bacteris. N'hi han dos tipus diferents de parets bacterianes, denominades Gram-positiu i Gram-negatiu. Als bacteris Gram-positius la paret bacteriana té una gruixa capa de peptidoglicà a més d'àcids teicoics. Els àcids teicoics s'uneixen al peptidoglicà o a la membrana citoplasmàtica. Als bacteris Gram-negatius la capa de peptidoglicà és relativament prima i es troba envoltada per una segona membrana lipídica exterior que té lipopolisacàrids i proteïnes. La capa de peptidoglicà s'uneix a la membrana externa amb lipoproteïnes. 5.- Cita i descriu breument les principals etapes i/o proves per identificar una espècie bacteriana a partir d’una mostra problema. 1) Caracterització morfològica mitjançant diferents tincions: com ara la tinció simple, per esbrinar si son cocs o bacils, després la tinció gram per saber si són gram positius o gram negatius, una tinció d’ endospores bacterianes, etc. 2) Aïllament dels diferents microorganismes. Sembra en diferents medis de cultiu: agar de Mac Gonkey, agar-salat-manitol, agar-patata-glucosa, d’aquesta manera esbrinarem algunes de les propietats dels diferents bacteris. 3) Cultiu pur en un medi no diferencial, per utilitzar els microorganismes per a proves futures. EXAMEN MICROBIOLOGIA GENERAL 1. Bacteris àcid làctics. Mencionar els principals gèneres, quina morfologia tenen, afinitat a la coloració de gran i les seves característiques fisiològiques més destacades (1punt). Las bacterias acido lácticas se encuentran dentro de las bacterias grampositivas con bajo contenido en G+C y Phylum Firmicutes. Las podemos encontrar dentro de la clase Bacilli y permencen a la orden Lactobacillales: estos son anaerobios facultativos o microaerofilos, tienen un metabolismo fermentativo, nutricionalmente son muy exigentes y son indespensables en la industria alimentaria y láctica. Lactobacillus: oxidasa -, gram positivo y c.immoviles. Encontramos Homofermentativos: L.acidophilus (leche) / Heterofermentativo facultativos : L. alimentarium / Heterofermentativo obligado: L. brevis. Género Leuconostoc: fermentación herolítica. Pasa la glucosa a D-lactato o etanol y ac. Láctico ( a través de la vía transcetolasa) L.casei: Transforma el ac. Málico a ac.lactico y CO2. Género enterococos, lactococos y streptococos: Fermentación homolítica,cocos, gram positivo, quimioheterotrofos, no esporulados, c.immoviles. 2. Descriu els principals mecanismos de producción d’energia per part dels eubacteris ( 2 punts) Fermentació ac-làctica: com per exemple iogurt, formatge, fuet. Fermentació alcohólica: com per exemple etanol, pa. Hi ha alguns aliments que fan les dues com per exemple el pa negre. Fermentació ac. Mixta: com per exmple Escherichia i slmonella Fermentació propiònica: l’ac. Propi+onic és un exelent conservant. Fermentació butírica: com per exmple clostridium. Fermentació butnailglicònica: com per exmeple les enterobacteries. 3. Transducción: La transducció és un procés de parasexualitat en que Un bacteri adquireix información genética bacteriana d’un virus. Segons si la información genética bacteriana del virus prové d’un bacteri que feia cicle lític o d’un bacteri que feia cicle lisiogènic es durà a terme un tipus de transducció o una altra. Transducció generalitzada ( el material genètic bacteria que té el virus prové d’una bacteria que fa cicle lític): Transducció especialitzada ( el material genètic bacteria que té el virus prové d’una bacteria que fa cicle lisiogènic) T. generalitzada: El virus posa el seu material genètic bacteria a una proteína del bacteri. L’unió de material genètic bacteria + element proteic del propi bacteri ( càpside) es diu VIRIÓ. A mesura que es va donant la transducció els virions van augmentant de volum, fins que dins el bacteri no caben més virions i aquesta ha d’explotar, és a dir, fer lisis. T. especialitzada: El virus posa el seu material genètic bacteria en el genoma del bacteri. L’unió del material genetic bacteria + el genoma del bacteri es diu PROFAG. Els profags tenen la capacitat de dividir-se. Cosa que provoca que al cap de cert temps la célula estigui infectada per molts profags i com que aquests ja no i cabem més la celula ha de fer lisis i morir. 1. características de un buen agente solidificant: - Liquido a temperatures elevades - Solido a temperatures de crecimiento microbiano (25-37) - Autoclabable (se puede esterilitzar con calor humedo) - No sirve de alimento para otros microorganismos Agar-agar frente a gelatina: La gelatina es liquida a temperatures de crecimiento microbiano y sirve de alimento para microorganismes. 1. Indica el fundamento de una tinción diferencial bacteriana. menciona i describe 3 técnicas de tinción diferencial empleadas en bacteriologia, indicando cual es su utilidad. El fundamento principal de una tinción diferencial bacteriana es observar las diferentes morfologias de las bacterias y así ser capaces de diferenciar-las unas de otras. Las tres técnicas principales de tinción son: Tinción gram (sirve para observar las diferentes paredes de las bacterias y clasificarlas en bacterias gram positivas o gram negativas), Tinción Zehl-Neelsen (sirve para observar micobacterias) y por último Tinción Wirtz-Conklin (Sirve para observar de esporas). Tinción gram: Sirve para diferenciar la pared bacteriana de las bacterias y saber así si estamos delante de una bacteria gram negativa o gram positiva. El primer paso es la Fijación- Cristal violeta- yodo- limpiar con acetona- fuccina o safranina. Tinción Zehl-Neelsen: Fijación por calor- Safranina (se le da calor, pero no ha de hervir)- limpiar con agua- alcohol ácido- azul de metileno- secar. Podemos observar por ejemplo Mycobacterium tuberculosis. Tinción Wirtz-Conklin: Fijación por calor- verde de maliquita ( poner debajo del bunsen y esperar hasta que se den tres vapores, apróximadamente unos 5 minutos)- dejar secarlimpiar con agua ( la espora se teñira de color verde y la célula vegetativa pierde el colorante)- safranina- observar: esporas color verde y células vegetativas color rojizo. Podemos observar por ejemplo Bacillium clostridium. 2. ¿A que clase pertenecen las enterobacterias? Indica los dos modelos de fermentación de las bacterias entéricas, principalmente que producen y que pruebas utilizarias para diferenciarlas en el laboratorio. Pon un ejemplo de cada una de ellas. Las enterobacterias pertenecen al grupo de las proteobacterias gram negativo y subdivisión gamma. La primera es la fermentación ácido mixta y la segunda fermentación butanilgliconica. Producen: La fermentación ácido mixta (Escherichia coli): Dará lugar a Lactato, ,etanol,acetato,CO2... La fermentación butanilgliconica (Enterobacter): Dará lugar a 2,3Butanodiol + CO2, Etanol, Lactato, ,Acetato... Para diferenciarlas en el laboratorio podríamos hacerles la prueba de la Catalasa, el Indol, Oxidasa y tinción gram. 3. Cita dos especies de bacterias làcticas e indica cual es su papel en la indústria alimentaria. L.casei: transforma el ácido málico a ácido láctico y CO2 (desadificación) ( Quesos, iogures...) L.lactis: capaz de añadir aroma por la sintesis de diacetilo y otros productos ( En leche, quesos, mantequillas...) 4. Menciona las principales caracteríticas (organización básica, mecanismos de obtención de energia, fuentes de nutrientes, estrategias reproductivas, etc) de los hongos (reino Fungi). Cita 2 ejemplos de miembros de la división Ascomycota de interés aliemntario. No tienen células móviles, no hacen la fotosíntesis, necesitan muchos enzimas para hacer la digestión y tienen pared celular pero hecha de quitina. Hay 4 grandes grupos en los que podemos dividir los hongos: Ascomycota,Basidimicota, Zygomicota, Citridimicota ( son los menos evolucionados). Encontramos hongos unicelulares (levaduras) y hongos pluricelulares (filamentosos). Hongos unicelulares (levaduras): Tienen reproducción asexual por gemmación. La división es por mitosis del núcleo. Estan formados por filamentos (hifas) pueden ser continuos o septados y una agrupación de filamentos se llama micelio. Su reproducción ASEXUAL: En Ascomicota y Basidymicota encontramos unas células especializadas que se llaman Conidioforos que tienen conidios. Mientras que en Cigomicele encontramos unas células especializadas que tienen esporangioforos y esporangios con esporangioesporas. Su reproducción SEXUAL: Hay diferentes estructuras sexuales: Ascos (ascomicotas) : Forman ascos con un número par de células (8) Basidios (Basidimicotas) : Forman Basidios con un número par de células (4) Zigosporas (Zigomicotas) Ascomicota: tiene en Reproducción sexual 4 tipos de ascomas: periteci, gimnoteci, cleistoteci y apoteci (telomorfos) También puede hacer repoducción asexual: anamorfo. Basidimicota: Es anamorfo (rp.asexual) y telemorfo (rp.sexual) y levaduras Zigomicota: Es anamorfo (rp.asexual) 2 ejemplos de Ascomicotas: Candida albicans y Alternaria alternata 2 ejemplos Basidimicota: Lactarius deliciosus y Lactarius sanguifluus 2 ejemplos Zygomycota: Rhizopus oryzae y Rhizopus stolonifer. 5. Describe el fundamento, las ventajas e inconvenientes de los diferentes métodos de conservación de cepas bacterianas. Funciones de una colección de cultivos microbianos. Los diferentes métodos de conservación de cepas bacterianes permiten preservar las características própias de un individuo o especie. Encontramos 4 tipos de métodos de conservación de cepas bacterianas: Resiembra peródica, ultracongelación, desecación y liofilización. Resiembra periódica: En un tubo tenemos nuestra muestra, pero al cabo de un tiempo se terminaran los nutrientes de este tubo, para que no se mueran los microorganismos que tenemos en la muestra , traspasamos la meustra a otro tubo donde hay los nutrienes necesarios y las condiciones necesarias para que los microorganismos vivan. Se usan medios de cultivos pobres para alargar el tiempod e conservación y rebajar su metabolismo. Este proceso de conservación tiene coo ventajas: Es sencillo, fácil de usar, no se necesita personal especializado, es barato. Los inconvenientes: Cuando se han de transferir muchas cepas se necesita mucho tiempo y espacio. Otro inconveniente es la posible contaminación y la deriva genética ( El microorganismo pierde sus cualidades propias) Liofilización: Consiste en una congelación al bacio de una suspensión de microorganismos. Para llevar a cabo esto se necesita llevar la suspensión a un punto crítico (punto donde se encuentran lso tres estados (sólido , liquido y gas)). La suspensión la tendremos que poner dentro de un compuesto crioprotector (protege del frío). El proceso de elaboración consiste en : Ventajas: Alarga el tiempod e conservación del compuesto, se disminuye muchisimo la deriva genetica y una vez el compuesto esta liofilizado no se necesita ningún tipod e manipulación. Inconvenientes: Una liofilizadora es muy cara, se necesita personal especializado, Es un metodo que no funciona con todos los microorganismos. Desecación:Metodo para distribuir cepas de grandes volumenes se utiliza LSA ( levaduras secas activas) Consiste en quitar el agua del citoplasma de las células. Como más agua se extraiga más tiempo se conservara la cepa, pero mas le costar vovler a lactividad normal de agua. La fase lag se alarga. Liofilización.
