XIX Verano de la Investigación Científica y Tecnológica del Pacífico ”

XIX Verano de la Investigación Científica y Tecnológica del Pacífico
“Análisis in vivo de linfocitos T gamma-delta en el ganglio linfático regional
(inguinal) de ratones infectados con Mycobacterium lepraemurium”
Paúl Alán Báez Astorga Departamento de Ciencias Biológicas Universidad de Occidente,
[email protected]. Asesor Dr. Leopoldo Flores Romo, Centro de Investigación y de
Estudios Avanzados del IPN, [email protected].
Planteamiento del problema:
En el modelo de infección cutánea con Mycobacterium lepraemurium (MLM) en
ratón, la piel es el órgano de entrada de la micobacteria. Es en este sitio donde
células como linfocitos T (LcT) gamma-delta (γδ) son de las primeras en
interaccionar con MLM; sin embargo, es reducido el conocimiento de esta
población no solo ante este, sino también con otros microorganismos patógenos
cuya vía de entrada es la piel. Por lo tanto analizar la respuesta de LcT-γδ nos
ayudaría a entender los procesos iniciales de la infección cutánea con MLM.
Metodología:
A ratones BALB/c se les inoculó en 6 regiones ventrales con: solución salina
(control), sonicado de Mycobacterium canetti (MC) y MLM. 24 horas postinoculación se sacrificaron y obtuvieron laminas epidérmicas del área inoculada,
así como los ganglios regionales (inguinales) y braquiales (no regionales). Las
láminas epidérmicas fueron teñidas por inmunohistoquímica con anti- γδ y antilangerina para marcar a los LcT-γδ y células dendríticas respectivamente. Estas
fueron reveladas con diaminobenzidina y observadas en el microscopio. De los
ganglios inguinales y braquiales se obtuvo una suspensión celular por separado, y
a partir de 2X106 células/100μl se añadieron anti- γδ acoplado a PE y anti-CD25
acoplado a APC para medir el estado de activación de los LcT-γδ mediante
citometría de flujo
Conclusiones:
Mediante el uso de citometría de flujo se encontró que el porcentaje LcT γδ
activados (CD25) en ratones inoculados con MLM y MC tiene un incremento
estadísticamente significativo en comparación con el control. Con la técnica de
inmunohistoquímica se observó un cambio morfológico de los LcT γδ en los
grupos tratados con MLM y MC; presentando un mayor número de dendritas en
comparación con el control.
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Pacífico
Agosto 2014