IVD Diagnóstico in vitro Sólo para uso profesional Agar TCBS (Agar selectivo para Vibrio) Agar TCBS Art. Núm. 1.10263.0500 (500 g) Agar-tiosulfato-citrato-sales biliares-sacarosa para el aislamiento y cultivo selectivo de Vibrio cholerae y otros vibriones enteropatógenos (V. parahaemolyticus, Vibrios NAG), según NAKANISHI (1962), modificado por KOBAYASHI y col. (1963). Este medio de cultivo corresponde a las recomendaciones de la Organización Mundial de la Salud (OMS) (19ó5, 19ó7) y a la APHA (1984). Según KAMPELMACHER y col. (1969), el Agar TCBS da buen resultado en la demostración de Vibrio parahaemolyticus en pescados. Ver también las indicaciones generales de uso. Advertencias y precauciones ver web www.merck-chemicals.com Principio Método microbiológico Modo de acción Las elevadas concentraciones de tío sulfato y citrato, así como el medio fuertemente alcalina, inhiben notablemente a las Enterobacteriáceas. La bilis de buey y el colato inhiben, sobre todo, a los Enterococos. Solamente algunas cepas de Proteus saca rosa-positivas pueden formar colonias amarillas semejantes a las de los vibriones. El indicador mixta Azul de timol - Azul de bromo timol presenta un claro viraje a amarillo por la formación de ácida, incluso en medio fuertemente alcalino. Composición (g/litro) Peptona de caseína 5,0; peptona de carne 5,0; extracto de levadura 5,0; citrato sódico 10,0; tío sulfato sódico 10,0; bilis de buey, desecada 5,0; colato sódico 3,0; sacarosa 20,0; cloruro sódica 10,0; citrato de hierro (III) 1,0; Azul de timol 0,04; Azul de bromo timol 0,04; Agar-agar 14,0. Preparación Preparación y conservación Art. Núm. 1.10263.0500 Agar TCBS (Agar selectivo para Vibrio) (500 g) Utilizable hasta la fecha de caducidad cuando el frasco se conserva en lugar seco y perfectamente cerrado entre +15 º y + 25ºC. Proteger de la luz. Una vez abierto, el contenido del frasco puede utilizarse hasta la fecha de caducidad siempre que se conserve en lugar seco y perfectamente cerrado entre +15ºC y + 25ºC Disolver 88 g/litro y verter en placas. ¡No esterilizar en autoclave! pH: 8,6 ± 0,2 a 25º C Las placas can medio de cultivo son claras y de color azul verdoso. Empleo e interpretación Sembrar las placas en superficie, por estría, can el material objeto de investigación a can el procedente de un cultivo de enriquecimiento. Incubación: 18-24 horas a 37°C. Junto con un media de cultiva líquida de enriquecimiento, BURKHARDT (1969) recomienda utilizar también, por lo menos, dos medias de cultivo sólidos distintos, concretamente un medio de cultivo muy selectivo (por ejemplo, Agar TCBS) y otro menos selectivo (por ejemplo, Agar nutritivo). Colonias Planas, de 2-3 mm de diámetro, amarillas. Pequeñas, con el centro verde-azulado. Grandes, amarillas. Azules. Diminutas, transparentes. Microorganismos Vibrio cholerae, Vibrio cholerae tipo El Tor. Vibrio parahaemolyticus. Vibrio alginolyticus. Pseudomonas, Aeromonas y otros. Enterobacteriáceas y otros. Para la identificación, deben efectuarse a continuación otras investigaciones (MUCKERJEE 1961, FINKELSTEIN y MUCKERJEE 1963, ROY y col. 19ó5, BOCKEMÜHL 1974 y otras autores). Control de calidad del medio de cultivo Cepas de ensayo Vibrio alginolyticus Vibrio cholerae Inaba NIH 35 Vibrio cholerae El Tor Inaba CH 38 Vibrio cholerae Ohawa NIH 41 Vibrio cholerae El Tor Ogawa CH 60 Vibrio parahaemolyticus ATCC 17802 Escherichia coli ATCC 25922 Enterobacter cloacae ATCC 13047 Proteus mirabilis ATCC 14273 Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 crecimiento Bueno/muy bueno Bueno/muy bueno Bueno/muy bueno Bueno/muy bueno Bueno/muy bueno Bueno/Muy bueno Nulo/ligero nulo/ligero nulo/ligero nulo/ligero viraje del medio a amarillo + + + + + - Aditivos Merck Cat.No. Producto Envase 1.01800.0500 Agua de peptona alcalina 500 g TCBS Agar - Vibrio chol. eltor ogava Bibliografía nd Americon Public Heolth Association: Compendium of methods for the microbiological examination of foods.-2 ed., 1984. BOCKEMUHL, J.: Einfache Labaratoriumsdiagnostik der El Tor Cholera. -Arztl. Lab., 20; 32-41 (1974). BURKHARDT F.: Die bakteriologische Diagnose der Vibrio El Tor Infektion. -Zbl. Bakt. I. Orig., 212; 177-189 (1969). FINKELSTEIN, R. A., a. MUCKERJEE, S.: Haemagglutination a rapid method for differentiating V. cholerae and El Tor vibrios. - Proc. Soc. Exp. Biol., 112; 355359(1963). KAMPELMACHER, E. H., MOSSEL, D. A. A., VAN NOORLE-JANSEN, a. VINCENTIE, H.: A survey on the occurrence of Vibrio parahaemolyticus on fish and shellfish, marketed in the Netherlands. -J. Hyg. Camp., 68; 189-196 (1970). KOBAYASHI, T., ENÓMOTO, S., SAKAZAKI, R., a. KUWAHARA, S.: A new selective isolation medium for pathogenic vibrios: TCBS-Agar Jap.J. Bact., 18; 387-391 (1963). MUCKERJEE, S.: Diagnostic use of bacteriophage. -J. Hyg., 59; 109-115 (1961). NAKANISHI, Y.: An isolation agar medium for cholera and enteropathogenic holophilic vibrios. -Modern Media, 9; 246 (1963). ROY, C., MRIDHA, K., a. MUCKERJEE, S.: Action of polymyxin on cholera vibrios. Techniques of determination of polymyxin sensitivity. Proc. Soc. Exp. Biol., 119; 893-896(1965). WHO Expert Committee on Cholera (2nd Rep. Techn. Rep., Series No. 352, 1967). WHO: Cholera Information (1965). © Versión 2003-01-21 Merck KGaA, 64271 Darmstadt, Alemania, Tel. (06151) 720, www.merck.de
