Subido por yuri irwin jaime gamboa

XENOBIOTICOS

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BA-6;2010/11-1
TEMA 6.- BIOACTIVACIÓN Y DETOXICACIÓN: Biotransformaciones de XBs. Compuestos biodegradables y no
biodegradables o persistentes: bioacumulación y biomagnificación. Rutas para la biotransformaciones de XBs. Reacciones de fase
I y de fase II. Transformaciones de activación y de detoxicación.
BIOTRANSFORMACIONES DE LOS COMPUESTOS XENOBIOTICOS
Los organismos están expuestos a un gran número de diferentes sustancias químicas xenobióticas, que, una vez absorbidas
por el organismo, se acumulan en él y pueden amenazar su equilibrio funcional. Si la concentración de cualquier xenobiótico en el
organismo es excesiva, inevitablemente comportará un riesgo para las funciones de las biomoléculas que actúen en su entorno,
pudiendo alterar el correcto funcionamiento de un órgano, tejido, sistema, etc, interfiriendo en las reacciones bioquímicas.
Al igual que la absorción y la distribución, dos procesos de transferencia, la Biotransformación también se lleva a cabo utilizando los
mecanismos existentes en los tejidos, para ello se usa la misma maquinaria bioquímica con la que se metabolizan los compuestos
endógenos, a veces de estructura química similar.
Al conjunto de reacciones metabólicas por medio de las cuales los organismos modifican la estructura química de un XB se le
denomina BIOTRANSFORMACIÓN. Podemos predecir que la biotransformación de un XB consiste fundamentalmente en
incrementar su polaridad para posibilitar su eliminación, en convertir un compuesto no polar en uno soluble en agua. Este es el
mecanismo más común que usan los organismos para transformar y eliminar los XBs ambientales.
Un XB en el interior del organismo puede seguir muchas opciones, pero simplificando:
a) puede ser excretado sin que haya sufrido modificación alguna, con su estructura original.
b) puede sufrir reacciones de transformación metabólica, biotransformaciones. Cuando éstas se producen, los compuestos son
biodegradables. Existe un conjunto de enzimas en los organismos que es más responsable de las biotransformaciones de XBs.
METABOLISMO Y BIOTRANSFORMACION
El metabolismo de un organismo es el conjunto de reacciones enzimáticas organizadas en rutas bioquímicas que sirven para
mantener la funcionalidad de las células con las características estructurales y funcionales propias. Cuando las reacciones
enzimáticas operan sobre componentes endógenos nos estamos refiriendo al metabolismo propiamente dicho y cuando las
reacciones enzimáticas operan sobre los xenobióticos nos referimos a las reacciones de biotransformación. Ambos términos
metabolismo y biotransformación se usan a veces como sinónimos, particularmente cuando se refiere al campo de los xenobióticos o
de "drugs" .
Por ejemplo, las enzimas biotransformadoras de xenobióticos son frecuentemente llamadas enzimas metabolizantes de drogas.
Cualquier enzima puede operar sobre su sustrato natural o sobre un compuesto XB, sea fármaco, contaminante, etc.:
enzima
Sustrato --------------------------- Producto o metabolito
Cofactor
El término enzimas bitransformadoras de xenobióticos sería
mas apropiado, aunque el término enmascararía el hecho de que
varios compuestos endógenos, como los esteroides, puedan ser
sustratos de estas mismas enzimas. Aplicar el término metabolismo a
la biotransformación de xenobióticos, así como el término de
metabolito a los derivados metabólicos de aquellos no parece muy
adecuado, pero suele ser generalizado.
Igualmente cuando se habla de individuos metabolizadores pobres,
aquellos con alguna deficiencia enzimática y que tienen menor
capacidad de biotransformar los XBs., o el término metabolizadores
extensivos para aquellos individuos con fenotipo normal. Podría
resultar conveniente aplicar el término de sistemas
biotransformadores, aunque no es usual.
Biotransformación: Cualquier reacción bioquímica que opere sobre
un XB a cargo de los sistemas enzimáticos de un organismo. Se
entenderá como BIODEGRADACIÓN el conjunto de
transformaciones metabólicas que sufra un XB a lo largo de su paso
por un organismo, especialmente cuando el XB se degrade y ha sido
el proceso mas estudiado para muchos xenobióticos en muchos tipos
diferentes de organismos (fundamentalmente µorganismos).
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Biodegradación: El resultado de todas las biotransformaciones de un XB en un entorno concreto, a cargo de los diferentes
organismos que operen en él. La capacidad biotransformadora de los organismos es muy diferente y está relacionada, además, con
su grado de exposición a XBs. Por ejemplo, los insectos, que se alimentan de una amplia variedad de plantas, tienen una mayor
capacidad para biotransformar XBs que aquellos insectos que se alimentan de un número limitado de plantas. Comparados con los
mamíferos, los peces tienen una ostensible menor capacidad de biotransformar XBs, porque ellos pueden eliminar más fácilmente
los XBs no transformados a través de las branquias. Por otra parte, las diferencias específicas en la capacidad de biotransformar XBs
entre los mamíferos no refleja simplemente unas diferencias en su exposición a contaminantes, sino otros muchos factores.
Algunos compuestos estimulan la síntesis de enzimas implicadas en la biotransformación de XBs. Este proceso conocido
como inducción enzimática es una respuesta reversible y adaptativa a la exposición a XBs. La inducción enzimática hace posible
que algunos XBs aceleren su propia biotransformación y la biotransformación de otros compuestos. Se estudiará este proceso en
relación con las enzimas tipo Cit. P-450 y algunas conjugasas.
BIOACUMULACIÓN: COMPUESTOS BIODEGRADABLES Y NO DEGRADABLES O PERSISTENTES.
Los xenobióticos después de ser absorbidos, dependiendo de sus propiedades físico-químicas, se acumulan en los
organismos, especialmente los compuestos con características lipofílicas o que son fuertemente liposolubles. Otros compuestos se
acumulan porque emulan comportamientos de análogos biológicos o porque interaccionan con algunas biomoléculas.
Por ejemplo el Pb es transportado en sangre dentro de los eritrocitos, como el Fe2+ y se acumula en los huesos al igual que el Ca2+
.El Cd2+ interacciona con las enzimas que dependen de Zn2+ (carboxipeptidasas).
El comportamiento bioacumulador se basa también en las funciones de los órganos excretores (riñón, pulmón, etc.), que
generalmente se deshacen de las sustancias en contacto con líquidos o con gases, donde están en contacto con los conductos de estos
órganos. El riñón excreta sustancias (hidrosolubles) a través del filtrado glomerular de la sangre, enviándolas por los túbulos renales
a la vejiga. Desde los túbulos renales muchas sustancias son reabsorbidas hasta la circulación, bien de forma activa (agua, sales,
glucosa) o bien de forma pasiva (sustancias lipofílicas). La reabsorción pasiva de las sustancias lipofílicas se produce porque
dichas sustancias tienden a disolverse en los lípidos de las membranas de las células epiteliales. Puesto que en ellas pueden unirse
después a proteínas o lipoproteínas de la sangre, así se genera un transporte neto desde el filtrado glomerular hacia la sangre. Este
fenómeno explica que la concentración de sustancias lipofílicas en el organismo pueda ir en aumento y se produzca su
bioacumulación, primordialmente en los tejidos con alto contenido lipídico (adiposo, hígado, mamas, etc).
Este fenómeno se produce generalmente para los compuestos que en su paso por el organismo no son degradados, sino que
son persistentes, porque no son abordados por los sistemas de biotransformación. En general son muy persistentes los
hidrocarburos, mas si son policíclicos y si están halogenados y son menos persistentes los carbamatos y los organofosforados Estos
compuestos XBs persistentes en el medio, se van acumulando desde entornos acuosos hasta los tejidos de las diferentes especies,
conduciendo a un fenómeno de bioconcentración de los XBs. La acumulación de un compuesto en los tejidos de cualquier
organismo para conseguir un nivel mayor que el que tiene el medio ambiente del entorno.
BCF: factor de bioconcentración = razón entre las [ ] y BAF: factor de bioacumulación = razón entre las
concentraciones del organismo/agua o medio, cuando hay un eslabón alimenticio intermediario.
Las especies correspondientes a los eslabones superiores de las cadenas tróficas suelen soportar los niveles más altos de los XBs
acumulados. Se denomina biomagnificación a los procesos de bioconcentración y bioacumulación que se producen en los
organismos de una secuencia trófica a través de la cadena alimentaria. Ver pirámides invertidas de biomasa y de contenido en XBs o
el Proceso de bioacumulación para TCDDs.
Ejemplo de Biomagnificación de TCDDs (persistentes)
Suelo superficial
Hierba
Hierba (Seveso)
Hígado
Granja Seveso
conejos
pollos
150 pg/g
270 pg/g
100 pg/mg = ng/g
433-633 ng/g
35-24
ng/g
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BIOTRANSFORMACIONES Y ACCIÓN TÓXICA:
Desactivación o detoxicación y bioactivación o activación.
Los organismos contienen un número de sistemas enzimáticos capaces de biotransformar compuestos XBs, al igual
que metabolizan los compuestos endógenos para convertirlos en desechables, para transformarlos en otros más hidrosolubles,
que sean mas fácilmente excretables. Las biotransformaciones pueden inducir considerables cambios en la actividad biológica
de los XBs. Si esta actividad decrece, el proceso se denomina de bioinactivación (detoxicación) y si aumenta se denomina
bioactivación (activación). Así pues, los efectos tóxicos de los compuestos exógenos, frecuentemente no provienen de los
compuestos patrón sino de los metabolitos reactivos formados a partir de ellos dentro de las células. Estas
biotransformaciones de compuestos relativamente inertes a metabolitos muy reactivos con una toxicidad intrínseca mayor que
la de los compuestos originales se denomina activacion metabolica , bioactivacion o toxificación
Esquema de biotransformaciones: activaciónes y desactivaciones
XENOBIÓTICOS
ABSORCIÓN
Efectos farmacológicos
XBs en TORRENTE
CIRCULATORIO y
TEJIDOS
Efectos patológicos
Reacciones metabólicas
BIOTRANSFORMACIONES
EXCRECCIÓN
Daños en el DNA
Reparación
celular: DNA
y proteínas
Replic
ación
DETO
XIFICA
CIÓN
Se unen a componentes
celulares: Enzimas,
Receptores,
Membranas, DNA,
TOXI
FICACI
ÓN
DNA alterado
METABOLITOS
NO TÓXICOS
ACTIVACIÓN
DESACTVACIÓN
METABOLITOS
TÓXICOS o
REACTIVOS
Ejemplos de biotransformaciones:
La hidroxilación en el anillo de aminas aromáticas 1ªs conduce a su destoxicación, mientras que la hidroxilación en el N de la aminas
primarias conlleva activación. Los estudios pioneros de James y Miller (años 40-50) con el colorante N-(CH3)2-4-amino-azobenceno (DAB), un hepatocarcinógeno en ratas, demostraron la conversión “in vivo” del compuesto químico a productos derivados
que eran los que se unían a Ac. nucleicos y proteínas, los carcinógenos.
El -naftil-amino tiende primero a ser metabolizado antes que a causar cáncer de vejiga y el 2-Acetilaminofluoreno (2AAF) sólo es carcinógeno después de su biotransformación a N-OH-AAF. Estos hechos establecen la importancia de la activación
metabólica en la carcinogénesis inducida químicamente.
DETOXICACIÓN: La actividad biológica (incluida la tóxica) de las sustancias frecuentemente desciende
con las biotransformaciones, pero no siempre La biotransformación suele producir un aumento de
hidrosolubilidad de una molécula y así mejora su excrección. Habrá menos acumulación de la sustancia en el
organismo, su nivel descenderá y puesto que hay una relación general (dosis-respuesta) entre la concentración
de sustancia y la intensidad de su efecto tóxico, este tipo de biotransformaciones significan un descenso de la
intensidad de la acción biológica original y se puede definir como bioinactivación o detoxicación.
La Detoxicación, sigue diversos caminos en dependencia de la naturaleza química del XB.
- Detoxicación con grupos no funcionales
- Detoxicación de nucleófilos
- Detoxicación de electrófilos
- Detoxicación de radicales libres
benceno, tolueno
requiere 2 fases
-OH, -SH, -NH2
conjugación: S, Glu, Ac.
iones
-GSH, epoxi hidrolasa, H-quinona y DT-diaforasa
HO.
Glutation (-GSH)
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BIOACTIVACIONES: Producen un aumento de la reactividad del XB; generalmente conllevan la FORMACIÓN DE:
Formación de electrófilos,
de radicales libres,
de nucleófilos o
de reactivos red-ox
Estas reacciones aumentan la polaridad de los XBs y la introducción de grupos polares en una molécula no solo aumenta su
reactividad para someterse a posteriores reacciones de destoxicación y aumenta su reactividad hacia otras muchas moléculas,
incluidas las biológicas. Si un XB puede reaccionar con un componente de un sistema biológico (proteina, DNA, etc, o
cualquier metabolito del metabolismo celular) hay una posibilidad razonable de que la célula se vea afectada por él. Si esta
influencia es adversa, significa que el XB mostrará un efecto tóxico.
REACCIONES DE BIOACTIVACIÓN más frecuentes
Oxidación
Des-conjugación
Microflora intestinal
Enzimas
Cit P450, FMO, Alcohol y aldehido deshidrogenasa, PGSintasa
B-liasa de XB- conjugados
Hidrolasas y reductasas.
Ejemplos de reaciones:
AMINAS PRIMARIAS
N-hidroxilación
HIDROCARBUROS POLICÍCLICOS
Derivados epoxi
DERIVADOS AZO-BENCENO
Radicales
PCDD Y PCBs COPLANAR
Todos forman metabolitos reactivos carcinógenos, sustancias
electrófilas que se unen al DNA.
Otras biotransformaciones que son reacciones de bioactivación,
son las de oxidación de los organofosforados, i.e., la oxidación
del insecticida parathion en paraoxon (cambia un >P=S por un
>P=O). El parathion es un organotiofosfato, cuya neurotoxicidad
radica en la inhibición de la aceilcolinesterasa (AChE). La afinidad de la enzima por el paraoxon (metabolito) es muy superior que la
que mantiene por el precursor. La reacción de oxidación que transforma al tóxico en un compuesto mas hidrosoluble y mas
excretable, le convierte también en un compuesto más tóxico. El paraoxon, no obstante, puede ser hidrolizado y como consecuencia
pierde su efecto tóxico sobre la AChE.
Los nitritos y las aminas forman fácilmente carcinógenos en el organismo. Conversión de nitrato, vía nitrito en
nitrosamina cancerígena. La formación de nitrosamina puede tener lugar en el estómago (pH) después del consumo de
alimentos ricos en nitratos (espinacas), junto con un componente de la dieta que contenga aminas, que pueden nitrosilarse.
Las nitrosaminas son carcinogénicas porque sus metabolitos son muy reactivos, por ejemplo la hidroxilación de las Nnitrosaminas procura procesos de metilación sobre las bases nitrogenadas en el DNA.
PRINCIPALES RUTAS PARA LA BIOTRANSFORMACIÓN DE XENOBIÓTICOS
Las reacciones de biotransformacion son conversiones enzimáticas de sustancias xenobióticas lipofílicas hacia productos
hidrofílicos, generalmente, mas eliminables o excretables. Las reacciones son a veces son coincidentes con las que sufren los
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productos metabólicos endógenos (Vit. D, prostaglandinas, ). El conjunto de reacciones de biotransformación de XB suele agruparse
en dos fases: I y II.
XENOBIÓTICOS
altamente lipofílicos
metabólicamente estables
lipofílicos
polares
hidrofílicos
BIOACUMULACIÓN
acumulación de XBs
en lípidos del cuerpo
FASE I: + polares
bioinactivación o activación
OXIDACIÓN, REDUCCIÓN
HIDRÓLISIS
polares
FASE II +
hidrofílicos
(bioanactivación)
MOVILIZACIÓN EXTRACELULAR
circulación plasmática
Excrección biliar
excrección renal
Aunque la degradación completa de un XB requiere de muchas reacciones, el ataque incial suele ser mediante las
reacciones de fase I. Un primer conjunto de reacciones, en las que la biotransformación es la conversión de compuestos lipofílicos
(no polares) en compuestos mas polares y por lo tanto algo más solubles en agua, mediante las reacciones llamadas de FASE I,
(oxidaciones, reducciones e hidrólisis). Muchas de estas reacciones tienen lugar bajo la catálisis de enzimas componentes de los
sistemas llamados oxidasas de función mixta (OFM), distribuidas principalmente en hepatocitos. Estas reacciones producen
compuestos que pueden ser más, igual o menos tóxicos que sus predecesores, aunque si es frecuente que sean más reactivos, lo que
suele conllevar una mayor capacidad tóxica. Las oxidaciones incluyen todas las monooxigenasas dependientes del Cit P-450, las
monooxigenasas que contienen nucleótidos de flavina y otras (ver tabla adjunta).
Son muchas las reacciones de
oxidación que conllevan la bioactivación de sus
sustratos por la formación de puentes epoxi. Este
es el caso de los XBs con anillos aromáticos,
cuya oxidación a derivados hidroxi pasa por la
formación de intermediarios muy reactivos,
epoxis. Estos epoxi no son estables y la mayor
parte derivan hacia fenoles.
A causa de su carácter electrófilo, los epoxi pueden también reaccionar con grupos nucleofílicos en biomoléculas como las proteínas
o el DNA, que pueden inducir daño en dichas moléculas. Algunas de estas reacciones en el DNA pueden producir alteraciones que
eventualmente deriven en cáncer. Muchas de las conocidas bioactivaciones carcinogenéticas pasan por la producción de un
intermediario reactivo electrofílico.
Las reacciones de FASE II son reacciones de conjugación (glucuronidación, sulfonación y
conjugación con GSH – con formación de Ac. Mercaptúrico-), donde los XBs polares, son conjugados
con sustancias endógenas hidrofílicas (ac. glucurónico, sulfato, glutation). Estas reacciones enzimáticas
están encaminadas a aumentar aún más la
hidrosolubilidad de sus sustratos y por lo
tanto hacerlos más fácilmente excretables
por el organismo. Además la mayor parte de
los derivados conjugados tienen muy baja
actividad biológica, por lo tanto muchas reacciones de la fase II son reacciones de bioinactivación en
procesos de detoxicación, aunque no siempre.
Fase III.- después de las modificaciones
Después de las reacciones de fase II, los conjugados de xenobióticos pueden sufrir aún más
modificaciones. Un ejemplo muy común es el procesado de los conjugados de glutation hasta acetil5
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cisteinil-derivados (ácidos mercaptúricos). En estos casos, los residuos de γ-glutamato y glicina en la
molécula de glutation son hidrolizados por la Gamma-glutamil transpeptidasa y las dipeptidasas. En el
paso último, la cisterna es acetilada en el conjugado. Los conjugados y sus metabolitos pueden ser
excretados desde las células en la fase III de su metabolismo, con los grupos aniónicos actuando como
marcadores de afinidad para una serie de transportadores de membrana de la familia proteina resistente a
multi-XBs (MRP). Estas proteínas son miembros de la familia de transportadores transmembrana que
unen ATP y pueden catalizar el transporte dependiente de ATP de una estrecha variedad de aniones
hidrofóbicos, y así actuar para extraer productos de la fase II hacia el medio extracelular, donde pueden
ser posteriormente metabolizados o excretados.
MRP: P-glicoproteína: es una proteína humana transportadora de la subfamilia MDT/TAP. Está muy
distribuida y se expresa en células normales tales como intestino, hígado, células proximales de riñón,
endoteliales capilares y células de la barrera hemato-encefálica. También se expresa en células de la línea
P-gp, denominadas cómo ABCB1, miembro 1 de la sub-familia B de las transportadoras dependientes de
ATP, MDR1, y PGY1. la glicoproteina P también se la designa cómo CD243 (grupo de diferenciación
243).
ATP-binding cassette transporters (ABC-transportadores) son miembros de una superfamilia,
una de las más abundantes, y más antiguas (ancestrales) familias con representación en todos los
organismos, desde procariotas a humanos. Estas son unas proteínas transmembrana que funcionan en el
transporte de de una amplia variedad de sustratos a través de las membrana extra e intracelulares,
incluyendo productos metabólicos, lípidos y esteroles, y drogas. Las proteínas son clasificadas cómo
ABC transportadores basado en la secuencia y organización de su dominio de unión al ATP(s), también
conocido como plieges de unión a nucleotidos (NBFs). ABC transportadores están implicados en
resistencia de tumores, fibrosis cística, resistencia multi-drogas bacteriana y un rango de otras
enfermedades humanas heredables.
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