Trabajos de laboratorio N° ……… Apellido: …………………………………. Curso: …………… Fecha: …………… Escuela Normal Superior 9-001 “Gral. José de San Martín” EXTRACCION DE PIGMENTO FOTOSINTETICO Objetivo general Verificar por medio de la técnica de cromatografía la extracción de pigmentos fotosintético con lo cual se tuvieron que utilizar muchas muestras de flores y hojas de distintos colores para la realización satisfactoria de la extracción de pigmentos. Objetivos específicos Realizar la extracción de pigmentos fotosintéticos por medio de la técnica de cromatografía. Separar e identificar los pigmentos presentes en hojas y plantas de las distintas especies a estudiar. Introducción Los cloroplastos deben su color verde a un pigmento denominado clorofila. Sin embargo, lo que en realidad existe en los cloroplastos es una mezcla de pigmentos representados principalmente por dos tipos de clorofila (clorofila a y clorofila b), por b caroteno y por xantofila. Todas estas sustancias presentan un grado diferente de solubilidad, lo cual permite su separación cuando una solución de la misma asciende por capilaridad por una tira de papel poroso (papel de filtro), ya que las más solubles se desplazarán a mayor velocidad, pues acompañarán fácilmente al disolvente a medida que éste va ascendiendo. De esta forma, al cabo de cierto tiempo, a lo largo del papel de filtro se irán situando los distintos pigmentos en forma de bandas coloreadas, tanto más desplazadas cuanto más solubles sean los pigmentos a que pertenecen y tanto más anchas cuanto mayor sea la abundancia de estos en la mezcla. Para la extracción y separación de pigmentos fotosintéticos se realizaron dos recorridos por el campus universitario para seleccionar flores y hojas con un corte aproximado de 30cm una para realizar extracción de pigmentos fotosintéticos y la otra para utilizar la técnica de herborización utilizando una prensa para su posterior identificación especialmente las que presentan colores intensos como lo son las rosa. Metodología de trabajo 1. Colocar en un mortero trozos de hojas de un vegetal quitando las terminaciones nerviosas. 2 .Añadir una pequeña cantidad de alcohol 90. 3. Triturar hasta que el líquido adquiera una coloración intensa. 4. Filtrar en un embudo. 5. Colocar el filtrado en una placa Petri, y sobre ella una tira de papel filtro (un rectángulo de unos 15 centímetros de ancho por 10 centímetros de alto doblado en V para que se mantenga en pie sobre la caja Petri. 6. Dejar reposar nuestro experimento hasta que el alcohol suba sobre el papel filtro para poder observar los pigmentos extraídos. Después de preparada la técnica se espera que el alcohol suba y es colocado en laminillas de vidrio y allí se pueden observar distintas líneas de colores dependiendo de la hoja o flor de la que se ha extraído los pigmentos. Si por ejemplo el pigmento extraído es de una planta con hojas moradas intensas el resultado de la técnica de cromatografía será morado intenso al principio luego otra pequeña capa demorado más claro, luego una pequeña franja de blanco y así sucesivamente se puede observar lo obtenido por medio de extracción de pigmentos fotosintéticos. Se puede observar los diferentes colores que se obtienen de las diferentes hojas. 7. una vez terminada la experiencia recortar y pegar en el práctico el papel de filtro donde se observen los pigmentos extraídos y anotar al lado de qué planta se realizó dicha extracción. Marco teórico La clorofila es un pigmento color verde que se halla presente en las hojas y tallos de muchos vegetales y es el responsable del proceso de fotosíntesis, este proceso permite a las plantas adsorber energía por medio de la luz solar. Este pigmento se encuentra prácticamente en todas las plantas con semilla helechos, muscos y algas encontrándose en el interior de células vegetales específicamente en un orgánulo llamado cloroplasto, los cuales son simplemente plásticos que contienen pigmentos clorofílicos. Un pigmento son los matices y combinaciones de colores del espectro, entre estos colores están los que tienen un predominio general es decir los colores primarios rojo, verde, amarillo, azul los cuales son conferidos a los vegetales por determinados compuestos químicos definidos llamados pigmentos. Trabajos de laboratorio N° ……… Apellido: …………………………………. Curso: …………… Fecha: …………… Escuela Normal Superior 9-001 “Gral. José de San Martín” Para la elaboración y separación de la extracción de pigmentos fotosintéticos se utilizó la técnica de cromatografía que consiste en separar los pigmentos fotosintéticos presentes en una planta específicamente las hojas y flores. Un pigmento es cualquier sustancia que absorbe luz. Los pigmentos de los cloroplastos se pueden clasificar en dos grupos principales: las clorofilas y los carotenoides. Las clorofilas, los pigmentos verdes del cloroplasto son las más importantes de las plantas. En la actualidad se pueden distinguir por lo menos ocho tipos de clorofilas: las clorofilas a, b, c, d, y e, la bacterioclorofila a, bacterioclorofila b y clorofila de clorobio (bacterioviridina). Las clorofilas a y b son las más conocidas y abundantes. La clorofila a se encuentra en todos los organismos fotosintéticos (plantas, ciertos protistas y cianobacterias). La clorofila b, está presente en todas las plantas verdes (algas verdes, euglenophytas y plantas superiores) Los carotenoides son compuestos lipídicos que se encuentran ampliamente distribuidos tanto en animales como en plantas y presentan colores que varían desde el, amarillo hasta el púrpura. Los carotenoides hidrogenados (es decir, exclusivamente formados por carbono e hidrógeno) se llaman carotenos y aquellos que contienen oxígeno reciben el nombre de xantofilas. Aunque no están presentes en los cloroplastos todas las plantas, existen otros pigmentos importantes para las plantas, como por ejemplo las antocianinas (presente en los pétalos de las flores) y las ficobilinas, las cuales están presentes en las algas rojas y verde azules. Las ficobilinas rojas se denominan ficoeritrina y las azules, ficocianinas. El otro gran grupo de pigmentos son los carotenoides, que dan color rojo-anaranjado o amarillo a las flores, hojas, frutos y semillas, y se diferencian de las antocianinas por su estructura química y su localización celular. Al igual que los carotenoides y flavonoides, las betalaínas también cumplen una función importante en la atracción de animales, pero se cree que tienen funciones adicionales como la absorción de luz ultravioleta y protección contra los herbívoros. Estos pigmentos, rojo-violeta y amarillos, están presentes en 10 familias de plantas. Las betalaínas y las antocianinas son mutuamente excluyentes, por lo que cuando se encuentran betalaínas en una planta, estarán ausentes las antocianinas, y viceversa. Conclusión: Después de realizado este trabajo de investigación podemos decir que la cromatografía es un método sumamente interesante ya que existen diferentes métodos para llevarlo a cabo, pero el que nosotros utilizamos que fue el de la cromatografía de papel nos dio los resultados que esperábamos que era la obtención de pigmentos de las hojas y flores de las cuales extrajimos las diferentes muestras. La importancia de la cromatografía radica en la obtención de pigmentos de diferentes plantas con el conocimiento necesario se puede determinar cuanta luz y cuanta energía química produce o necesita dicha planta para mantenerse en el medio, porque hay que recordar que la obtención de la energia la hace a través de la luz del sol, pero los diferentes tipos de colores absorben la energía en diferentes longitudes de onda; se puede establecer con conocimientos más profundos una tabla que me establezca la cantidad de luz que necesita determinada planta solamente al ver las proporciones de sus colores en sus hojas y flores asi como el tipo de pigmentos que contienen cada una de ellas, ya que estas últimas si hay tablas que establecen los valores determinados del tipo de clorofila y en color que lo representa en la extracción. Recomendaciones: Siempre macerar bien las hojas y dependiendo si las hojas o flor es dura o no, agregar bastante o poco alcohol para tener una buena extracción. No es recomendable que se le agregue mucho alcohol, mejor que esté concentrada la mezcla para tener mejores resultados. Siempre en necesario lavar bien los recipientes para tomar otra muestra porque puede ir residuos de la muestra anterior y darnos datos erróneos como resultados. Trabajos de laboratorio N° ……… Apellido: …………………………………. Curso: …………… Fecha: …………… Escuela Normal Superior 9-001 “Gral. José de San Martín” ESTRUCTURA DE LA FLOR 1. OBJETIVOS. Observar e identificar las distintas partes de una flor. Realizar un dibujo esquemático de los órganos reproductores de la planta. Adquirir un vocabulario botánico elemental. 2. MATERIAL. Flores de árboles frutales, o silvestres, de buen tamaño y recién cortadas. Bisturí o tijera. Lupa binocular. Lupa de mano. Pinzas de disección. 3. REALIZACIÓN. a) Coloca encima de tu mesa de trabajo un pliego de papel blanco y realiza sobre él todas tus observaciones. Compara tu flor con la de la figura e identifica sus partes más importantes. b) Arranca los pétalos de la flor y comprueba si están soldados entre sí o sueltos. Cuenta su número. Determina el número de sépalos y comprueba si están soldados o sueltos. c) Determina el número de estambres y observa si están libres, o si se unen por el filamento formando varios grupos entre sí. d) Cuenta el número de carpelos y observa si están sueltos o soldados. e) Arranca un estambre y tras observarlo con lupa, identifica sus partes. f) Observa un carpelo y tras compararlo con el de la figura, identifica sus partes. g) Parte por la mitad un carpelo y observa a la lupa su constitución interna. h) Dibuja todo lo que observes. 4. OBSERVACIONES Y RESULTADOS. Completa, para tu flor, este cuadro que resume parte de tus observaciones. Para que uses de referencia
