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INTRODUCCIÓN DE LA CRÍA MASIVA DE Galleria mellonella PARA EL
AISLAMIENTO DE HONGOS ENTOMOPATÓGENOS Y REPRODUCCIÓN DE
NEMÁTODOS EN LA CIUDAD DE MONTERREY NUEVO LEÓN
Introduction of the mass rearing of Galleria mellonella for purpose to isolation of
entomopathogens fungi and reproduction of nematodes in the Monterrey city.
Myriam Elías-Santos, Mónica Gpe Lozano-Contreras, María Guadalupe MaldonadoBlanco, María de Lourdes Castro-Saucedo, José Lorenzo Meza-García, Milca GarcíaMiranda. Instituto de Biotecnología, Facultad de Ciencias Biológicas. Universidad
Autónoma de Nuevo León (UANL), Av. Pedro de Alba y Manuel L. Barragán, Ciudad
Universitaria C.P. 66450, A.P. 414 Y 2790 San Nicolás de los Garza Nuevo León, México.
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Palabras Clave: Galleria mellonella, mass rearing, entomopathogens fungi.
Introducción
Galleria mellonella es una polilla del orden de los Lepidópteros y pertenece a la
familia Pyralide. Los lepidópteros (Lepidoptera) conforman el segundo orden con más
especies entre los insectos (siendo superado solamente por el orden Coleoptera) e incluye
todas las mariposas, diurnas y nocturnas. Cuenta con más de 180.000 especies clasificadas
en 127 familias y 46 superfamilias. El nombre de este orden deriva del griego lepidopteron, que significa "ala escamosa".
Los lepidópteros son insectos con cuatro alas grandes, membranosas recubiertas con
pequeñas escamas. Sus larvas tienen aparato bucal masticador y muchas veces son
perjudiciales para la agricultura. Orden de insectos que comprende unas 150.000 especies
de polillas y mariposas.
Las Pieridae constituyen una extensa familia de Lepidoptera. Con unas 700 especies
la mayoría de África tropical y Asia. Se caracterizan por su coloración alba o amarillosulfurea, a menudo con manchas negras. Dimorfismo sexual, que se observa a menudo en
el patrón o número de marcas negras.
Galleria mellonella (L.) (LEPIDOPTERA: PYRALIDAE), es un insecto de hábito
nocturno conocido como gusano de la cera que ataca a colmenas de abejas. El adulto
hembra penetra en la colmena y pone los huevos directamente en panales. Sin embargo, este
lepidóptero presenta variados atributos en el manejo como sustrato para variados experimentos
a nivel de laboratorio en la búsqueda de agentes de control biológico en el combate de plagas
importantes de los principales cultivos. Su técnica de producción es prácticamente sencilla y
esta disponible (Mohamed & Coppel, 1983). Puede realizarse a bajos costos, pero es necesario
un acercamiento para establecer una colonia estandarizada a las condiciones del laboratorio de
biotecnología. El ciclo completo de Galleria puede ser utilizado para variados experimentos,
por ejemplo, la producción de huevos y larvas ha sido utilizada universalmente como larvahuésped para la reproducción in vivo del grupo de nemátodos entomopatógenos Steinernematidae y Heterorhabditidae (Bedding et al., 1993; Gómez et al., 2001), con
biofermentaciones (Smart, 1995), Caracterización de bacterias simbiontes de los nematodos
entomopatógenos (Abocourt et al., 2006); así como también en la búsqueda y bioensayos de
hongos entomopatógenos (Barker & Barrer, 1998): evaluación de virulencia en bioensayos de
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bacterias entomopatógenas (Burges, 1976); Biofermentaciones para la reproducción masiva
por nuevas metodologías en la reproducción de virus entomopatógenos (Skuratovskaya,
1986). Por lo anterior, la producción de larvas de G. mellonella, para el aislamiento de hongos
entomopatógenos y la producción de Nematodos entomopatógenos abrirá proyectos de
investigación a diferentes niveles desde ocupar técnicos en la producción como servicio social,
hasta proyectos de doctorado en la búsqueda de agentes de control para diversas plagas
importantes económicas en nuestro país, atendiendo así, al desarrollo del control biológico
que cada vez requiere de mayor atención para un manejo ecológico y racional de las
poblaciones plagas sin la contaminación química que tanto afecta a los cultivos agrícolas de
México. Asimismo, se dispondrá de material biológico para otros proyectos de investigación
que surjan en el Instituto de Biotecnología de la Facultad de Ciencias Biológicas de la
Universidad Autónoma de Nuevo León.
Ciclo Biológico: Las hembras fecundadas realizan la puesta, con su oviducto que es
muy móvil, en las fisuras de las colmenas o en cualquier otro lugar no protegido por la
acción de las abejas. El número de huevos de la Galleria mellonela, es de 400 a 1800
huevos, en grupos de 5 a 30, de 0,45x 0,35 mm. La temperatura y la humedad ambiente son
factores muy importantes en la eclosión de los huevos. El tiempo que tardan en eclosionar
es de ocho a diez días, si la temperatura es óptima, entre los 30-32 grados, y si por el
contrario, la temperatura es muy baja, la eclosión se produce en varios meses. Los daños
causados por las larvas de esta polilla, consisten en la destrucción de las reservas de la
colonia, cera, etc. estando después de algunas semanas todos los cuadros de una colmena
afectada, amen de dejar en ellos hilos sedosos y excrementos que dan un aspecto de
soladoral conjunto de los cuadros. La destrucción se lleva a cabo a través de las galerías
que hacen las larvas de uno a otro lado del panal. La presencia de polillas adultas, larvas en
distinto estado de desarrollo, ninfas, deyecciones, cuadros destruidos, son estos signos
evidentes para diagnosticar sin lugar a dudas, la presencia de este enemigo.
Materiales y Método
Los huevos de G. mellonella fueron traídos del Colegio de la Frontera Sur El
ECOSUR de Tapachula, Chiapas a una semana de su oviposición. Posterior a ello se
incubaron dentro de un módulo a 29 2°C; 75  15% HR. Los huevos son colocados en masa
y en 6.5  2 días emergen las larvas. En etapa larval, Galleria tiene un periodo de 28  6 días,
con fotoperiodo de 10:14 h Luz:Oscuridad . Posteriormente, en 6.5  1.5 días la larva forma la
pre-pupa y la pupa. A los 10  2 días de la pupación, emerge finalmente el adulto en donde
la hembra coloca los huevos para un nuevo ciclo. Para alimentar a las larvas, se elaboró una
dieta artificial que consiste en: 65 mL de miel de abeja, 80 mL de glicerol, 25 g de Germen
de trigo, 200 g de harina de arroz y 50 g de levadura (Saccharomyces cerevisae), lo cual, se
encuentra a temperatura de 29 °C favorable a su crecimiento óptimo. Al cabo de los
estadios larvales y la generación de pre-pupas y pupas, se realiza la recolección de los
imagos para trasladarlos a nuevas cámaras especiales para su maduración y oviposición, el
cual contiene miel en una concentración de 50% y un cartoncillo doblado en forma de
abanico para que depositen los huevos entre los pliegues. Los huevos fueron colocados
nuevamente en dieta recién preparada para su posterior eclosión, desarrollo y maduración
de las larvas, para reiniciar con el ciclo de vida.
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Duración del ciclo en
condiciones ideales
Alrededor de 6 semanas
4-6 generaciones por año
•Se alimentan durante la noche
•No se alimenta
•Las alas se expanden de 14 – 38
mm
•Sobreviven de 1- 3 semanas
•Las hembras ovopositan 300 –
adulto
1000 de huevos
Duración 1 – 9
semanas
•Eclosión de 50 - 150
huevos
•Cambio de
•En capullo
•Fase inmóvil
•No necesitan
pupa
huevos
blanco
a rojizo
alimento
Etapa muy activa – DAÑO
•Crecen de 1 a >23mm
•8 – 10 etapas (cambio de piel)
larva
•Paso a la etapa de capullo
•Duracion de 28 días a 6 meses dependiendo de la temperatura y
Temp. °C
24-27
10-16
>9
Duración (días)
5-8
>35
no eclosionan
la alimentación
•Temperatura ideal de 29-35 °C
•Se detiene el desarrollo a <15°C
Figura 1. Desarrollo de la Polilla mayor de la cera
Resultados
En un periodo de cinco meses de cría masiva y en condiciones de laboratorio (29
2°C; 75 15% HR); Galleria presenta un ciclo de vida de 60 días promedio, con una
longevidad del adulto de 7 días promedio en los machos y de 9 días promedio en las hembras.
El ciclo de vida es similar al reportado por Marston et al., (1975), sin embargo, la dieta
adaptada mantiene a la hembra viva diez días mientras que la dieta de Marston et al., 8.5 días
en promedio (Cuadro 1).
Cuadro 1. Estados de desarrollo de Galleria mellonella en laboratorio (29 2°C; 75 15% HR).
Tipo de
dieta
Adaptada
IB-UANL
Marston
(1975)
huevo
(días)
6.5 2
larva
(días)
28 6
pre-pupa
(días)
6.5 1.5
pupa
(días)
9 2
6.5 2
28 6
6.5 1.5
9 2
adulto
(días)
9 2 hembra
7 2 macho
8.5 hembra
(no reporta en macho)
Las hembras colocan los huevos en masa en el pliegue de papel cartón atravesando de
la tela de plástico. Posteriormente, emergen las pequeñas larvas y se alimentan en forma
eficiente de la dieta artificial. La producción de las larvas se utilizó para incrementar la cría
masiva. Actualmente la producción diaria es de 500 larvas del 4° instar destinadas para la
producción de nemátodos, para una capacidad estimada 1000 larvas por día.
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Conclusiones
La reproducción de Galleria mellonella es factible en la laboratorio de producción de
organismos benéficos en condiciones de laboratorio (292°C; 7515% HR) con diferencias en
la dieta propuesta por Marston, et al., (1975).
Agradecimientos
Al programa PAICYT de la UANL por el apoyo otorgado a través del proyecto CN1542-07.
Literatura Citada
Abocourt, Y.P., M.E. Márquez-Gutiérrez & Gómez. 2006. Caracterización de la Fase
Primaria de las Bacterias Simbiontes de los Nematodos Entomopatógenos
Steinernema cubanum, Heterorhabditis indica y H. bacteriophora. Fitosanidad 10
(3):194-195.
Barker, C.W. & G.M. Barker. 1998. Generalist Entomopathogens as Biological Indicator of
Deforestation and agricultural Land Use Impactos on Walkato Soils. New Zealand
Journal of Ecology. 22 (2): 189-196.
Bedding, R.,R Bedding, R., R. Akhurst, and H. Kaya. 1993. Nematodes and their
Biological control of insect pests, p. 1–178. CSIRO Publications, Melbourne,
Australia.
Gómez, L., D. M. Soler y L. Sánchez. 2001. Virulencia y Potencial Reproductivo de
Aislamientos Cubanos de Nematodos Entomopatógenos. Rev. Protección Veg. 16
(1):50:54.
Marston, N., Campbell, B. and Boldt, P.E. 1975. Mass producing eggs of the greater wax
moth, Galleria mellonella L. U.S. Department of Agriculture Technical Bulletin
1510.
Mohamed, M. A., and H. C. Coppel. 1983. Mass rearing of the greater wax moth, Galleria
mellonella (Lepidoptera: Pyralidae), for small-scale laboratory studies. Great
Lakes Entomol. 16:139–141.
Smart, G.C. 1995. Entomopathogenic Nematodes for the Biological Control of Insects.
Suppl. Journal of Nematology 27(4S):529-534.
Skuratovskaya, I. N, L. I. Strokovskaya, E. N. Zherebtsova and A. P. Gudz-Gorban. 1986.
Supercoiled DNA of nuclear polyhedrosis virus of Galleria mellonella L.Arch.
Virol. 53(2):79-86.
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