VALIDACION DE TECNICAS ANALITICAS Marzo 10/2015 BPM Y BPL ANA CECILIA MATALLANA E. MARZO 2015 VALIDACION DE METODOS ANALITICOS B Y BPL QUE ES VALIDACION? Validar un método consiste en verificar y documentar su validez, esto es, su adecuación a unos determinados requisitos, previamente establecidos por el usuario para poder resolver un problema analítico particular. QUE ES VALIDACION? Validar un método consiste en verificar y documentar su validez, esto es, su adecuación a unos determinados requisitos, previamente establecidos por el usuario para poder resolver un problema analítico particular. QUE ES VALIDACIÓN La validación de un método analítico es el proceso mediante el cual se establece por medio de estudios de laboratorio que las características representativas del método analítico cumplen con las especificaciones para su aplicación. . QUE ES VERIFICACION DE METODOS ANALITICOS Confirmación mediante la aportación de evidencia objetiva que se han cumplido los requisitos especificados. Indicar el proceso que lleva a cabo el laboratorio con el fin de demostrar su capacidad para ejecutar correctamente un método normalizado cuando lo realiza exactamente como esta descrito en la norma. . TIPOS DE METODOS TIPOS DE METODOS TIPOS DE METODOS TIPOS DE METODOS QUE METODOS SE VALIDAN QUE METODOS SE VERIFICAN o Resolución 1087 de 2001. (Guía de Inspección). o Resolución 3028 de 2008. (Áreas de Fabricación). o Decreto 2086 de 2010 vigencia de la certificación. CLASIFICACION USP QUE PROCEDIMIENTOS ANALITICOS SE VALIDAN QUE PROCEDIMIENTOS ANALITICOS SE VALIDAN QUE PROCEDIMIENTOS ANALITICOS SE VALIDAN QUE PROCEDIMIENTOS ANALITICOS SE VALIDAN QUE PROCEDIMIENTOS ANALITICOS SE VALIDAN QUE PROCEDIMIENTOS ANALITICOS SE VALIDAN QUE PROCEDIMIENTOS ANALITICOS SE VALIDAN QUE PROCEDIMIENTOS ANALITICOS SE VALIDAN QUE PROCEDIMIENTOS ANALITICOS SE VALIDAN DESEMPEÑO DE LOS METODOS MICROBIOLOGICOS TERMINOLOGIA ANALITICA TÉCNICA ANALÍTICA Principio científico adaptado a uno o varios instrumentos, que nos es útil o necesario para obtener información sobre la composición de la muestra (fluorimetría, potenciometría etc.) TERMINOLOGIA ANALITICA MÉTODO ANALÍTICO Adaptación variada de una técnica, para llevar a cabo una medida determinada. (Pueden existir varios métodos analíticos distintos para determinar el mismo analito mediante la misma técnica). NECESIDAD DE VALIDACION NECESIDAD DE VALIDACION TERMINOLOGIA ANALITICA CLASIFICACION DE LOS METODOS POR TIPO DE PRUEBA -ESPECTROFOTOMETRICOS -CROMATOGRAFICOS -POTENCIOMETRICOS -VOLUMETRICOS -FISICOS CLASIFICACION DEL METODO POR TIPO DE PRUEBA ESPECTROFOTOMETRICA CROMATOGRAFICA UV/VISIBLE/ TURBIEDAD /ABSORCION ATOMICA/ CROMATOGRAFIA LIQUIDA (HPLC) CROMATOGRAFIA DE GASES CROMATOGRAFIA DE LIQUIDA-MASAS (HPLC-MS) CROMATOGRAFIA DE GASES-MASAS POTENCIOMETRICA pH /ANIONES Y CATIONES POR TECNICA DE ANION SELECTIVO/CONDUCTIMETRICA. VOLUMETRICA VALORACIONES POR TITULACION MANUAL Y AUTOMATICA GRAVIMETRICA PERDIDA POR SECADO/ RESIDUO DE IGNICION. FISICA (CUANTITATIVA) MATERIA EXTRAÑA/ DENSIDAD RELATIVA/DISOLUCION/DESINTEGRACION/ INDICE DE REFRACCION/ROTACION OPTICA/PUNTO DE FUSION/POLARIMETRIA/ I.R/ UNIFORMIDAD DE DOSIS/TEMPERATURA DE FUSION/ VISCOSIDAD. CLASIFICACION DEL METODO POR TIPO DE PRUEBA TIPO DE PRUEBA METOGIA FISICA (CUALITATIVA) PRUEBAS LIMITE DE CLORUROS, FOSFATOS, HIERRO, FLUORUROS, SULFATOS, ETC. METALES PESADOS. INHIBIDORES (FORMALDEHIDO, SALES CUATERNARIAS, OXIDANTES, DERIVADOS CLORADOS ETC). CLASIFICACION DEL METOD0 POR TIPO DE PRUEBA TIPO DE PRUEBA METODOLOGIA FISICA (CUALITATIVA) PRUEBAS LIMITE DE CLORUROS, FOSFATOS, HIERRO, FLUORUROS, SULFATOS, ETC. METALES PESADOS. INHIBIDORES (FORMALDEHIDO, SALES CUATERNARIAS, OXIDANTES, DERIVADOS CLORADOS ETC). PARAMETROS DE DESEMPEÑO DE ACUERDO AL TIPO DE PRUEBA Validación de parámetros VALIDACIÓN DE MÉTODOS ANALÍTICOS 38 PARAMETROS DE DESEMPEÑO Estudia los parámetros de desempeño analítico del método: Precisión Especificidad Exactitud Límite de detección Límite de cuantificación Linealidad e intervalo de linealidad Robustez TERMINOLOGIA ANALITICA MÉTODO ANALÍTICO Adaptación variada de una técnica, para llevar a cabo una medida determinada. (Pueden existir varios métodos analíticos distintos para determinar el mismo analito mediante la misma técnica). SISTEMA Y METODO UNA DETERMINACION ANALITICA CON METODOS INSTRUMENTALES PUEDE DIVIDIRSE EN DOS COMPONENTES PRINCIPALES: SISTEMA- INCLUYE EL INSTRUMENTO, ESTANDAR Y MATERIAL VOLUMETRICO. METODO: ANALISTAS, MUESTRAS Y VARIACIONES REALIZADAS AL SISTEMA SI SE UTILIZA MAS DE UN INSTRUMENTO. SISTEMA LAS PRUEBAS DE APTITUD DEL SISTEMA SE BASAN EN EL CONCEPTO QUE EL EQUIPO, EL SISTEMA ELECTRÓNICO LAS OPERACIONES ANALITICAS Y LAS MUESTRAS A ANALIZAR CONSTITUYEN UN SISTEMA INTEGRAL QUE PUEDE EVALUARSE COMO TAL. APTITUD DEL SISTEMA SISTEMA EVALUACION DEL SISTEMA LINEALIDAD LINEALIDAD DEL SISTEMA EVALUACION DEL SISTEMA LINEALIDAD ESPECIFICIDAD La especificidad, es la capacidad de un método analítico para obtener una respuesta debida únicamente al analito de interés y no a otros componentes de la muestra. ESPECIFICIDAD LA METODOLOGIA DEL ENSAYO VARIA SEGUN EL TIPO DE METODO ASI: 1. PRUEBAS DE IDENTIFICACION. 2.PRUEBAS DE PUREZA. 3. VALORACIONES ESPECIFICIDAD Pruebas de Identificación. Garantizan la identidad del analito. • En análisis cualitativo debe demostrarse la capacidad de distinguir compuestos de estructura estrechamente relacionada cuya presencia resulta probable. ESPECIFICIDAD Pruebas de Pureza. Garantizan que todos los procedimientos analíticos efectuados permiten declarar con exactitud el contenido de impurezas de un analito (por ejemplo, prueba de sustancias relacionadas, límites de metales pesados, impurezas orgánicas volátiles). ESPECIFICIDAD Valoraciones. Proporciona un resultado exacto, que permita una declaración exacta del contenido o potencia del analito en una muestra. ESPECIFICIDAD Valoraciones. Los métodos empleados en la valoración de un ingrediente activo farmacéutico, se pueden dividir así: -Para métodos de control de calidad. -Para método indicadores de estabilidad. ESPECIFICIDAD Para métodos de control de calidad. Se analizan según la metodología a validar: un placebo del producto, un estándar de referencia y un placebo más analito. Si es posible se analizan placebos del producto cargados con sustancias relacionadas, precursores y/o homólogos y una mezcla de placebo, analito y dichos productos. Es importante demostrar con evidencia que los resultados analíticos obtenidos no resultan afectados por la presencia de estos materiales extraños. ESPECIFICIDAD Para método indicadores de estabilidad. -Se prepara un placebo reciente, conteniendo todos los ingredientes de una muestra normal, excepto el analito, un placebo cargado, un estándar de referencia, y si es posible un placebo cargado con los productos de degradación. -Si se sospecha que en la fórmula hay productos que puedan interferir con el análisis, se corren estos compuestos individualmente y se determina si es necesario modificar el método de análisis o el de preparación. ESPECIFICIDAD Si no se dispone de estándares de impurezas o de los productos de degradación, puede demostrarse la especificidad comparando los resultados de las pruebas de muestras que contengan impurezas o productos de degradación con los de un segundo procedimiento bien caracterizado (por ejemplo, un procedimiento farmacopéico u otro procedimiento validado). Estas comparaciones deberían incluir muestras sometidas a condiciones forzadas relevantes (por ejemplo, luz, calor, humedad, hidrólisis acida y alcalina, oxidación). En una valoración, deben compararse los resultados; en pruebas de impureza cromatográfica, deben compararse los perfiles de impurezas. CASO 1 PRODUCTOS RELACIONADOS CASO 1 PRODUCTOS RELACIONADOS CROMATOGRAMA DEL DILUENTE CROMATOGRAMA DE LA SOLUCION ESTANDAR CROMATOGRAMA DE LA MUESTRA NO SOMETIDA A DEGRADACION CRITERIOS DE ACEPTACION Pruebas de Identificación. Garantizan la identidad del analito. • En análisis cualitativo debe demostrarse la capacidad de distinguir compuestos de estructura estrechamente relacionada cuya presencia resulta probable. CRITERIOS DE ACEPTACION Los documentos de ICH afirman que cuando se utilizan .los procedimientos cromatográficos, deberán presentarse cromatogramas representativos para demostrar el grado de especificidad (se debe manejar una escala reducida, que permita observar bien las impurezas o productos de degradación) y los picos deberán identificarse adecuadamente, aquellas impurezas desconocidas deberán ser identificadas con el tiempo de retención relativo, tomando como referencia el activo, la resolución o la relación altura/valle, cromatográfica entre los picos próximos al pico de interés debe ser mayor de 1.0. LINEALIDAD DEL MÉTODO . LINEALIDAD DEL MÉTODO . EXACTITUD DEL METODO . DETERMINACION DE LA EXACTITUD . DETERMINACION DE LA EXACTITUD . DETERMINACION DE LA EXACTITUD . DETERMINACION DE LA EXACTITUD . PRECISION . PRECISION DEL METODO . REPETIBILIDAD DEL METODO . REPETIBILIDAD DEL METODO . REPRODUCIBILIDAD DEL METODO . PRECISION INTERMEDIA . LIMITE DE DETECCION Determinar la menor concentración a la que se detecte el analito en la matriz de la muestra. Documentación Imprimir el cromatograma o registrar la menor concentración concentración detectable detectable en una hoja de registro LIMITE DE DETECCION Criterio de Aceptación No.hay un límite de detección mínimo. Sin embargo, para métodos cromatográficos el límite superior suele ser un valor de al menos tres veces la línea base (o nivel de ruido). Para otros instrumentos instrumentos puede ser el límite de operación del instrumento, según lo haya establecido el fabricante. razón de 3:1 entre la señal y el ruido. LIMITE DE CUANTIFICACION LIMITE DE CUANTIFICACION REPORTE DE VALIDACION REPORTE DE VALIDACION REPORTE DE VALIDACION TERMINOLOGIA ANALITICA SESGO : DIFERENCIA ENTRE EL VALOR PROMEDIO OBTENIDO DE LOS RESULTADOS DE PRUEBA CON RESPECTO A UN VALOR DE REFERENCIA ACEPTADO O CONOCIDO. GRACIAS wwwinvima.gov.co Carrera 10 D No. 17-11 - Bogotá, D.C. Colombia. Teléfono: (1)2948700
