TEMA 2 LA SANGRE Dra. Olga Briceño LA SANGRE Líquido rojo único, claro u oscuro de composición variable que circula a través de los vasos sanguíneos del cuerpo humano cumpliendo con todas las actividades fisiológicas y patológicas que ocurren en el organismo. Es un tejido líquido (conectivo especializado), que forma parte del medio interno (linfa, plasma, etc.) del cual las células toman elementos nutritivos (O2, sustancias alimenticias), y de desecho (Urea, CO2, etc.) COMPOSICION ELEMENTAL Sangre circulante ó hecha incoagulable se puede estudiar en dos fases: Fase Plasmática: Líquido amarillo pálido. -Representa el 55% del Volumen total sanguíneo -90% de agua y 10% de sustancias sólidas -Elementos Orgánicos: -Proteínas 7%: -Albúmina 5% -α Globulinas (transporta bilirrubina, esteroides) -β Globulinas (transporta hierro, Ca++ plasmática) -γ Globulinas (anticuerpos) -Lípidos: Colesterol, Lecitina, Lipoproteínas Glúcidos: Glucosa, Acido Láctico, etc. Gases Respiratorios: O2, CO2. COMPOSICION ELEMENTAL Endógenos: Bilirrubina, Urobilinógeno -Pigmentos: Exógeno: Carotenos (zanahoria, mandarina, etc.) -Elementos Inorgánicos: Iones Difusibles: Na, K, Ca, Cl, ClNa, etc.. Fase Celular : Representa el 45% del volumen sanguíneo total. Constituido por: Eritrocitos ó Glóbulos Rojos ó Hematíes Leucocitos ó Glóbulos Blancos Plaquetas ó Trombocitos Sangre Normal al Microscopio - Glóbulos Rojos (3) -Glóbulos Blancos (1,2,4) - Plaquetas (celulitas a la derecha de 1) - Plasma: Lo amarillo entre los glóbulos. FUNCIONES DE TRANSPORTE GENERAL Transporte de O2-CO2 : Función Respiratoria. Transporte de sustancias nutritivas: proteínas, CHO, lípidos y minerales. Transporte de Vitaminas y Hormonas. Regulación del Equilibrio Acido – Base. Mecanismo de defensa Inmunológica : - Celular - Humoral Participación en el sistema de Coagulación y Fibrinólisis. Regulación de la Temperatura Corporal. Vasocontricción – Vasodilatación : Sudoración Transporte de Sustancias Tóxicas y Desechos. Hacia Riñón - Hígado PROPIEDADES FÍSICAS DE LA SANGRE pH sanguíneo : 7.38 – 7.44 Presión Coloidosmótica. (0ncótica): Sustancias Proteícas. 20.5 – 35.3 mmHg Osmolaridad: Difusión de sustancias ó iones de un medio de menor [ ] a mayor [ ]. Viscosidad : Depende de varios factores: a.- Tamaño y cantidad de los Glóbulos Rojos b.- Contenido CO2 : CO2 > pH ↓ Viscosidad ↑ c.- Contenido Proteico : [ ] Proteínas > Viscosidad ↑ Sedimentación : Descenso de los eritrocitos en el tiempo hasta formar una columna de empaquetamiento en el fondo del tubo. VELOCIDAD SEDIMENTACION GLOBULAR Longitud de la reacción de sedimentación de la sangre (LSRD) Fases : a.- Fase inicial de agregación (Fenómeno de Rouleaux – Pilas de Monedas) b.- Fase de Sedimentación Constante. c.- Empaquetamiento total. Utilidad Clínica: En el diagnóstico de ciertas patologías de tipo inflamatorio e infecciosa. Factores que Afectan la Sedimentación : ↑ Fibrinógeno – globulinas ↑ V.S.G. (sedimentación) ↓ Fibrinógeno – globulinas ↓ V.S.G. ↑ Masa Eritrocitaria ↓ V.S.G. ↓ Masa Eritrocitaria ↑ V.S.G. Anormalidad de forma y Microcitosis del GR ↓ V.S.G CURVA DE SEDIMENTACIÓN 0 Fase de retraso 10 20 Fase de descenso 30 40 Fase de empaquetamiento 50 60 10 60 20 30 40 Tiempo (minutos) 50 VELOCIDAD SEDIMENTACION GLOBULAR Método de Wintrobe : 1 hora posición vertical Valores Referenciales: ♂ : 0 – 7 mm ♀ : 0 – 15 mm HEMATOLOGÍA VELOCIDAD DE SEDIMENTACION, EN MILIMETROS POR HORA MÉTODOS DE DETERMINACIÓN : Método de Wintrobe Método de Westergren VOLUMEN DE LOS ERITROCITOS SEDIMENTADOS, EN CENTIMETROS CÚBICOS POR 100 c.c. DE SANGRE Correccion de V.S.G Hto. X ♂ menor 47% Hto. X ♀ menor 42% VELOCIDAD SEDIMENTACION GLOBULAR Método de Westergren: método de elección Método manual mas empleado (Sistema DISPETTE) Método automatizado mas empleado ( SEDITAINER) VELOCIDAD SEDIMENTACION GLOBULAR 1. 2. 3. 4. Procedimiento: Mezclar bien la sangre con citrato de sodio al 3,8% o sangre con EDTA y mezcla salina. Aspirar la muestra sin burbujas con una pipeta de Westergren, y enrace correcto. Colocar la pipeta en el soporte vertical a 20-25 °C. En una área libre de vibraciones, corrientes y de luz solar directa. Lectura de la prueba a los 60 minutos VELOCIDAD SEDIMENTACION GLOBULAR Valores Referenciales: Adultos (Método de Westergren): • Hombres menores de 50 años: menos de 10 mm/h • Hombres mayores de 50 años: menos de 13 mm/h • Mujeres menores de 50 años: menos de 13 mm/h • Mujeres mayores de 50 años: menos de 20 mm/h VELOCIDAD SEDIMENTACION GLOBULAR • • • • • • • • • • • • • • Un aumento en la tasa de VELOCIDAD SEDIMENTACION GLOBULAR puede deberse a: Hiperfibrinogenemia Mieloma múltiple Macroglobulinemia primaria Vasculitis necrosante Polimialgia reumática Fiebre reumática Artritis reumatoidea Enfermedad renal Osteomielitis Embarazo Sífilis Lupus eritematoso sistémico Enfermedad tiroidea Tuberculosis FUNCIONES GENÉRICAS DE LA SANGRE Volemia : Volumen total de sangre circulante. 6 – 8% del peso corporal. Adultos 5 Lts. Presión Oncótica : Dada por las proteínas (Albúminas) 20,6 – 35,3 torr ó mm Hg. (V.N.) Presión Osmótica : Dada por componentes Cristaloides. V..N. : 6,47 - 6,72 atmósferas. HEMATOCRITO Definición : Relación porcentual entre el volumen eritrocitario y el volumen total sanguíneo. El recuento de hematocrito es la proporción de los glóbulos rojos al plasma (la parte líquida de la sangre). Esto se expresa en un porcentaje. Por ejemplo, si tu hematocrito es 30, significa que 30% de la sangre analizada contiene glóbulos rojos y 70% contiene plasma. Utilidad Clínica : Diagnóstico de Anemias y Policitemias HEMATOCRITO Métodos de Determinación : Microhematocrito Wintrobe Microhematocrito : Llenar con sangre con ó sin anticoagulante las 2/3 partes de un capilar con franja azul ó roja respectivamente. Sellar uno de sus extremos con plastilina y llevar a una microcentrifuga (8.000 – 10.000 r.p.m.) por 5´. Leer en un lector de hematocrito y reportar en porcentaje. HEMATOCRITO PROCEDIMIENTO 1.- Desinfectar la yema del dedo con alcohol, secándola posteriormente con algodón. Utilizar siempre guantes y lancetas estériles. Los tubos de microhematocrito deben de ser preferiblemente heparinizados. 2.- Punzar la yema del dedo con la lanceta y presionar el mismo para que salga sangre. HEMATOCRITO PROCEDIMIENTO 3.- Llenar el capilar del micro-hematocrito apoyando uno de los extremos sobre la gota de sangre del dedo. 4.- Taponar el extremo más próximo a la sangre con plastilina.. 5.- Centrifugar el capilar durante 5 minutos a 12000 r.p.m en una centrífuga específica para microhematocrito. HEMATOCRITO PROCEDIMIENTO 6.- Lectura : MICROHEMATOCRITO Ventajas : 1. Utiliza poca cantidad de sangre. 2. Menor tiempo de procesamiento. 3. Se obtiene mejor empaquetamiento Desventajas : 1. No se puede observar claramente las muestras con Leucocitosis. Valores Referenciales : Recién Nacidos : 54% - 62% Pre-escolar – escolar (hasta 7 años) : 36% - 44% Adultos : Mujer : 37% - 45% Hombre : 42% - 52% ANTICOAGULANTES Definición : Toda aquella sustancia capaz de impedir de una u otra forma la coagulación de la sangre. Clasificación según Mecanismos de Acción: 1. Anticoagulantes que captan el calcio precipitándolo en forma de sal. Ej. : Mezclas de Oxalatos, Oxalato de K, Citrato de Na 3,8% ó 3,2 %. 2. Anticoagulantes que captan el calcio por Quelación en forma no iónica. Ej. EDTA 3. Anticoagulantes Antitrómbínicos. Ej. : Heparina 4. Anticoagulantes Desfibrinadores. Ej. : Perlas de Vidrio ANTICOAGULANTES Mezclas de Oxalatos : Ventajas : 1. Fácil preparación 2. Económico 3. Útil para hacer determinaciones bioquímicas. 4. No afecta el VCM y puede usarse para la dosificación de Hb, Hto y cuenta Blanca. Desventajas : 1. No se pueden hacer frotis después de varios minutos de tomada la muestra; provoca alteraciones morfológicas en las células sanguíneas. 2. No evita la agregación plaquetaria 3. No debe usarse en el tipiaje de grupos sanguíneos. Proporción : 2 mg/ml de sangre. ANTICOAGULANTES Citrato de Na 3,8% ó 3,2% : Ideal para realizar estudios de coagulación. Proporción : 1 parte de citrato en 9 partes de sangre. Heparina : Ventajas : 1. Útil para estudios de hemólisis y hemoglobinopatías. 2. No afecta el tamaño corpuscular. Desventajas : 1. No se pueden hacer recuentos Leucocitarios. 2. Le da un fondo azul a las preparaciones teñidas con Wright. Proporción : 0,1 – 0,2 mg/ml de sangre. ANTICOAGULANTES EDTA : Ventajas : 1. Ideal para hacer determinaciones hematológicas de rutina. 2. Evita la agresión plaquetaria y útil por ende para hacer contajes plaquetarios. 3. Se obtienen buenos extendidos sanguíneos, luego de dos horas de haber sido tomada la muestra. 4. Es útil para extracciones de ADN y ARN. Proporción : 0,1 – 0,2 ml./ml. de sangre 1 – 2 mg./ml. de sangre INDICES ERITROCITARIOS Los índices eritrocitarios : son de extrema utilidad para clasificar a los eritrocitos de acuerdo con su tamaño y contenido de Hb. Utilidad Clínica : estudio de tipos de anemias. Se usan la Hb, el Hto. y el contaje de GR para calcular los tres índices mas utilizados : VCM (Volumen Corpuscular Medio) : indica el volumen promedio de los eritrocitos individuales. Expresado en femtolitros (fl). V.R : 80 – 100 fl CHCM (Concentración de Hemoglobina Corpuscular Media) : Es la concentración media de Hemoglobina expresada en un decilitro de eritrocitos. V.R : 32 – 36 g/dl HCM (Hemoglobina Corpuscular Media) : indica la hemoglobina promedio contenida en un eritrocito. Se expresa en picogramos (pg). V.R : 26 - 34 pg. INDICES ERITROCITARIOS HEMATOLOGÍA AUTOMATIZADA Los sistemas de recuento electrónicos se basan en diferentes métodos de los cuales destacamos : Método de la resistencia eléctrica. Método de campo obscuro. Método del rayo láser. Citrometría de flujo. HEMATOLOGIA AUTOMATIZADA HEMATOLOGIA AUTOMATIZADA El recuento y análisis de células sanguíneas se hacen en aparatos cuyo principio de funcionamiento se basa en uno o en los principios señalados: 1. 2. Resistencia eléctrica por impedancia Difracción de la luz en citrometría de flujo. Resistencia eléctrica por impedancia : Las células en suspensión pasan a través de una apertura situada entre dos electrodos, entre los que existe una corriente eléctrica continua de intensidad constante; cada célula al pasar produce un incremento momentáneo de la resistencia eléctrica que se traduce en un impulso eléctrico. El numero de pulsos generados es proporcional al de las células que pasan. La amplitud de cada pulso es proporcional al volumen celular.