XVII Congreso Nacional de Ingeniería Bioquímica VI Congreso Internacional de Ingeniería Bioquímica VIII Jornadas Científicas de Biomedicina y Biotecnología Molecular OPTIMIZACIÓN DEL PRETRATAMIENTO ALCALINO PARA LA PRODUCCIÓN DE AZUCARES REDUCTORES PARA LA PRODUCCION DE ETANOL AUTORES: Soto-Alvarez, Claudia Elena; López-Miranda, Javier; Rosales Castro, Martha DIRECCIÓN: Centro Interdisciplinario de Investigación para el Desarrollo Integral Regional, C.P. 34220. Durango, Dgo., México. Email: [email protected] INTRODUCCIÓN La producción de etanol de segunda generación, es proveniente de residuos lignocelulósicos (residuos agrícolas, pastos, aserrín, astillas de madera), los cuales son de bajo costo, abundantes y; renovables, ya que no alteran el ciclo del CO2 (Tiffany y Edman, 2005). Todos los procesos biológicos de conversión para la producción de bioetanol, requieren de etapas múltiples. Esto es: pre-tratamiento (físicos, químicos y/o biológicos) e hidrolisis de la celulosa en monómeros de azucares, que son fermentados en alcohol por la actividad fermentativa de las levaduras (Venkatesh et al.,2010). El presente trabajo tuvo como investigación, obtener el mayor concentrado de azúcares reductores, sometiendo el material lignocelulósico a pretratamiento químico e hidrolisis enzimática. METODOLOGÍA Pretratamiento. Se mezclaron cinco gramos de muestra con 50 mL de solución de NaOH ó CaOH (0.5, 1.0 y 1.5% m/v), calentándose a 60, 90 y 120°C, durante 30,60 y 90 min; posteriormente del sobrenadante, se tomaron alícuotas para determinar su contenido de azúcares reductores por el método de Miller (1959). Hidrólisis enzimática. Se mezcló 1 g de muestra pretratada con el volumen de concentrado enzimático (Celluclats 1.5L de NOVOZYME), necesario para suministrar 25 UPF/g de celulosa, 2mL de azida de sodio y el volumen necesario de tampón de acetatos para logar un volumen de reacción de 10 mL. Las muestras fueron incubadas (130 horas a 80 rpm y 50°C). Del sobrenadante, se tomaron alícuotas de 0.1 mL para determinar su contenido de azúcares reductores por el método de Miller (1959). Fermentación. Un concentrado de 106 células/mL de Saccharomyces ,10 ml del hidrolizado enzimático y nutrientes (0.34 gr/ L (NH4)2PO4, 0.027 gr/L MgSO4 y 0.023 gr/L de ZnSO4) se sometieron a 28°C, sin agitación por 72 horas. RESULTADOS Pretratamiento alcalino Se obtuvo un rendimiento máximo de 35.58%(m/m), con NaOH, mientras que para el pretratamiento con el CaOH el rendimiento máximo obtenido fue de 6.42% (m/m). Hidrolisis Enzimática En las muestras pretratadas con NaOH, se logró obtener un rendimiento máximo de azucares reductores de 20.62% (m/v), con CaOH, un máximo de 13.57% (m/v).C CONCLUSIONES La temperatura y la concentración desempeñan un papel importante en la producción de AR, lográndose obtener una producción de etanol de 13.28 g/100g. REFERENCIAS 1. Miller G L., Use of dinitrosalicylic acid reagent for determination of reducing sugars.Anal. Chem 31, 426-428 (1959). 2. Tiffany D. y Edman V. Agriculture as a producer and consumer of agriculture. CABI, Cambridge, MA. 2005. 3. Venkatesh PS., Volker SU., Heller WT., McGaughey J., Miller S., Hester R. Concentrated Acid Conversion of Pine Softwood to Sugars. Part I: Use of a Twin- Screw Reactor for Hydrolysis Pretreatment. Chemical Engineering Communications 194, 85-102 (2010).