MARCADORESCARDÍACOS. IMPORTANCIADELLABORATORIO Título original: Cito-Diagnóstico del Aparato Genital Femenino Autores: Rosario Cano Medina. Facultativo Especialista en Ginecología y Obstetricia Eduardo Villar Álvarez. Facultativo Especialista de Área de Anatomía Patológica. Adjunto FEA Edita e imprime: FESITESS ANDALUCÍA C/ Armengual de la Mota 37 Oficina 1 29007 Málaga Teléfono/fax 952 61 54 61 www.fesitessandalucía.es Diseño y maquetación: Alfonso Cid Illescas Edición Octubre 2011 ÍNDICE UNIDADDIDÁCTICAI PRESENTACIÓNYMETODOLOGÍADELCURSO 1.1 Sistema de Cursos a Distancia 5 7 1.2 Orientaciones para el estudio 8 1.3 Estructura del Curso UNIDADDIDÁCTICAII ELAPARATOGENITALFEMENINO.GENERALIDADES 2.1 Anatomía, fisiología e histología UNIDADDIDÁCTICAIII PATOLOGÍAGINECOLÓGICA 10 13 15 3.1 Trastornos infecciosos 21 23 3.2 Enfermedades inflamatorias 25 3.3 Tumores benignos y lesiones seudo-tumorales 27 UNIDADDIDÁCTICAIV PROCESAMIENTODELOSFROTISGINECOLÓGICOS 4.1 Técnica de la triple toma UNIDADDIDÁCTICAV CITO‐DIAGNÓSTICO 31 33 41 5.1 Citología vaginal normal 43 5.2 Variaciones citológicas hormonales 59 5.3 Alteraciones de los frotis citológicos 66 UNIDADDIDÁCTICAVI SISTEMABETHESDA 6.1 Introducción 81 83 6.2 Conceptos precursores 83 6.3 Sistema displasia-carcinoma insitu 83 6.4 Neoplasia intraepitelial cervical (NIC-CIN) 84 6.5 Lesión intraepitelial escamosa (Alto-bajo grado) 84 6.6 Anomalías celulares epiteliales 85 6.7 Otras neoplasias malignas (Especificar) 85 6.8 Sistema Bethesda 87 BIBLIOGRAFÍA Bibliografía CUESTIONARIO Cuestionario 89 91 93 95 UNIDADDIDÁCTICAI PRESENTACIÓNYMETODOLOGÍADELCURSO Cito‐DiagnósticodelAparatoGenitalFemenino Presentación,normasyprocedimientosdetrabajo. Introducción Antes de comenzar el Curso, es interesante conocer su estructura y el método que se ha de seguir. Este es el sentido de la presente introducción. Presentación 1. Sistema de Cursos a Distancia En este apartado aprenderá una serie de aspectos generales sobre las técnicas de formación que se van a seguir para el estudio. 2. Orientaciones para el estudio. Si usted no conoce la técnica empleada en los Cursos a Distancia, le recomendamos que lea atentamente los epígrafes siguientes, los cuales le ayudarán a realizar el Curso en las mejores condiciones. En caso contrario, sólo tiene que seguir los pasos que se indican en el siguiente índice: Se dan una serie de recomendaciones generales para el estudio y las fases del proceso de aprendizaje propuesto por el equipo docente. 3. Estructura del Curso Mostramos cómo es el Curso, las Unidades Temáticas de las que se compone, el sistema de evaluación y cómo enfrentarse al tipo test. 1.1SistemadeCursosaDistancia 1.1.1RégimendeEnseñanza La metodología de Enseñanza a Distancia, por su estructura y concepción, ofrece un ámbito de aprendizaje donde pueden acceder, de forma flexible en cuanto a ritmo individual de dedicación, estudio y aprendizaje, a los conocimientos que profesional y personalmente le interesen. Tiene la ventaja de estar diseñada para adaptarse a las disponibilidades de tiempo y/o situación geográfica de cada alumno. Además, es participativa y centrada en el desarrollo individual y orientado a la solución de problemas clínicos. La Formación a Distancia facilita el acceso a la enseñanza a todos los Técnicos Especialistas/Superiores Sanitarios. 1.1.2CaracterísticasdelCursoydelalumnadoalquevadirigido Todo Curso que pretenda ser eficaz, efectivo y eficiente en alcanzar sus objetivos, debe adaptarse a los conocimientos previos de las personas que lo estudiarán (lo que saben y lo que aún no han aprendido). Por tanto, la dificultad de los temas presentados se ajustará a sus intereses y capacidades. Un buen Curso producirá resultados deficientes si lo estudian personas muy diferentes de las inicialmente previstas. Los Cursos se diseñan ajustándose a las características del alumno al que se dirige. 7 TécnicoSuperiorSanitariodeAnatomíaPatológicayCitología 1.1.3OrientacióndelosTutores Para cada Curso habrá, al menos, un tutor al que los alumnos podrán dirigir todas sus consultas y plantear las dificultades. Las tutorías están pensadas partiendo de la base de que el aprendizaje que se realiza en esta formación es totalmente individual y personalizado. El tutor responderá en un plazo mínimo las dudas planteadas a través de correo electrónico exclusivamente. Diferenciamos para nuestros Cursos dos tipos de tutores: Académicos. Serán aquellos que resuelvan las dudas del contenido del Curso, planteamientos sobre cuestiones test y casos clínicos. El tutor resuelve las dudas que se plantean por correo electrónico. Orientadores y de apoyo metodológico. Su labor se centrará fundamentalmente en cuestiones de carácter psicopedagógicas, ayudando al alumno en horarios, métodos de trabajo o cuestiones más particulares que puedan alterar el desarrollo normal del Curso. El tutor resuelve las dudas que se plantean por correo electrónico. 1.2Orientacionesparaelestudio Los resultados que un estudiante obtiene no están exclusivamente en función de las aptitudes que posee y del interés que pone en práctica, sino también de las técnicas de estudio que utiliza. Aunque resulta difícil establecer unas normas que sean aplicables de forma general, es más conveniente que cada alumno se marque su propio método de trabajo, les recomendamos las siguientes que pueden ser de mayor aprovechamiento. Por tanto, aún dando por supuestas la vocación y preparación de los alumnos y respetando su propia iniciativa y forma de plantear el estudio, parece conveniente exponer algunos patrones con los que se podrá guiar más fácilmente el desarrollo académico, aunque va a depender de la situación particular de cada alumno y de los conocimientos de la materia del Curso: Decidir una estrategia de trabajo, un calendario de estudio y mantenerlo con regularidad. Es recomendable tener al menos dos sesiones de trabajo por semana. 8 Elegir el horario más favorable para cada alumno. Una sesión debe durar mínimo una hora y máximo tres. Menos de una hora es poco, debido al tiempo que se necesita de preparación, mientras que más de tres horas, incluidos los descansos, puede resultar demasiado y descendería el rendimiento. Utilizar un sitio tranquilo a horas silenciosas, con iluminación adecuada, espacio suficiente para extender apuntes, etc. Estudiar con atención, sin distraerse. Nada de radio, televisión o música de fondo. También es muy práctico subrayar los puntos más interesantes a modo de resumen o esquema. Cito‐DiagnósticodelAparatoGenitalFemenino a) Fase receptiva. Observar en primer lugar el esquema general del Curso. Hacer una composición de lo que se cree más interesante o importante. Leer atentamente todos los conceptos desarrollados. No pasar de uno a otro sin haberlo entendido. Recordar que en los Cursos nunca se incluyen cuestiones no útiles. Anotar las palabras o párrafos considerados más relevantes empleando un lápiz o rotulador transparente. No abusar de las anotaciones para que sean claras y significativas. Esquematizar en la medida de lo posible sin mirar el texto el contenido de la Unidad. Completar el esquema con el texto. Estudiar ajustándose al horario, pero sin imbuirse prisas o impacientarse. Deben aclararse las ideas y fijarse los conceptos. Resumir los puntos considerados primordiales de cada tema. Marcar los conceptos sobre los que se tengan dudas tras leerlos detenidamente. No insistir de momento más sobre ellos. b) Fase reflexiva. Reflexionar sobre los conocimientos adquiridos y sobre las dudas que hayan podido surgir, una vez finalizado el estudio del texto. Pensar que siempre se puede acudir al tutor y a la bibliografía recomendada y la utilizada en la elaboración del tema que puede ser de gran ayuda. Seguir paso a paso el desarrollo de los temas. Anotar los puntos que no se comprenden. Repasar los conceptos contenidos en el texto según va siguiendo la solución de los casos resueltos. c) Fase creativa. En esta fase se aplican los conocimientos adquiridos a la resolución de pruebas de autoevaluación y a los casos concretos de su vivencia profesional. Repasar despacio el enunciado y fijarse en lo que se pide antes de empezar a solucionarla. Consultar la exposición de conceptos del texto que hagan referencia a cada cuestión de la prueba. Solucionar la prueba de cada Unidad Temática utilizando el propio cuestionario del manual. 9 TécnicoSuperiorSanitariodeAnatomíaPatológicayCitología 1.3EstructuradelCurso 1.3.1ContenidosdelCurso Guía del alumno. Temario del curso en PDF, con un cuestionario tipo test. FORMULARIO, para devolver las respuestas al cuestionario. ENCUESTA de satisfacción del Curso. 1.3.2LosCursos Los cursos se presentan en un archivo PDF cuidadosamente diseñado en Unidades Didácticas. 1.3.3LasUnidadesDidácticas Son unidades básicas de estos Cursos a distancia. Contienen diferentes tipos de material educativo distinto: Texto propiamente dicho, dividido en temas. Bibliografía utilizada y recomendada. Cuestionario tipo test. Los temas comienzan con un índice con las materias contenidas en ellos. Continúa con el texto propiamente dicho, donde se desarrollan las cuestiones del programa. En la redacción del mismo se evita todo aquello que no sea de utilidad práctica. El apartado de preguntas test serán con los que se trabajen, y con los que posteriormente se rellenará el FORMULARIO de respuestas a remitir. Los ejercicios de tipo test se adjuntan al final del temario. Cuando están presentes los ejercicios de autoevaluación, la realización de éstos resulta muy útil para el alumno, ya que: Tienen una función recapituladora, insistiendo en los conceptos y términos básicos del tema. Hacen participar al alumno de una manera más activa en el aprendizaje del tema. Sirven para que el alumno valore el estado de su aprendizaje, al comprobar posteriormente el resultado de las respuestas. Son garantía de que ha estudiado el tema, cuando el alumno los ha superado positivamente. En caso contrario se recomienda que lo estudie de nuevo. Dentro de las unidades hay distintos epígrafes, que son conjuntos homogéneos de conceptos que guardan relación entre sí. El tamaño y número de epígrafes dependerá de cada caso. 10 Cito‐DiagnósticodelAparatoGenitalFemenino 1.3.4SistemadeEvaluación Cada Curso contiene una serie de pruebas de evaluación a distancia que se encuentran al final del temario. Deben ser realizadas por el alumno al finalizar el estudio del Curso, y enviada al tutor de la asignatura, con un plazo máximo de entrega para que pueda quedar incluido en la edición del Curso en la que se matriculó y siempre disponiendo de 15 días adicionales para su envío. Los tutores la corregirán y devolverán al alumno. Si no se supera el cuestionario con un mínimo del 80% correcto, se tendrá la posibilidad de recuperación. La elaboración y posterior corrección de los test ha sido diseñada por el personal docente seleccionado para el Curso con la intención de acercar el contenido de las preguntas al temario asimilado. Es IMPRESCINDIBLE haber rellenado el FORMULARIO y envío de las respuestas para recibir el certificado o Diploma de aptitud del Curso. 1.3.5Fechas El plazo de entrega de las evaluaciones será de un mes y medio a partir de la recepción del material del curso, una vez pasado este plazo conllevará una serie de gestiones administrativas que el alumno tendrá que abonar. La entrega de los certificados del Curso estará en relación con la fecha de entrega de las evaluaciones y NUNCA antes de la fecha de finalización del Curso. 1.3.6Aprendiendoaenfrentarseapreguntastipotest La primera utilidad que se deriva de la resolución de preguntas tipo test es aprender cómo enfrentarnos a las mismas y evitar esa sensación que algunos alumnos tienen de “se me dan los exámenes tipo test”. Cuando se trata de preguntas con respuesta tipo verdadero / falso, la resolución de las mismas está más dirigida y el planteamiento es más específico. Las preguntas tipo test con varias posibles respuestas hacen referencia a conocimientos muy concretos y exigen un método de estudio diferente al que muchas personas han empleado hasta ahora. Básicamente todas las preguntas test tienen una característica común: exigen identificar una opción que se diferencia de las otras por uno o más datos de los recogidos en el enunciado. Las dos palabras en cursiva son expresión de dos hechos fundamentales con respecto a las preguntas tipo test: Como se trata de identificar algo que va a encontrar escrito, no va a ser necesario memorizar conocimientos hasta el punto de reproducir con exactitud lo que uno estudia. Por lo tanto, no debe agobiarse cuando no consiga recordad de memoria una serie de datos que aprendió hace tiempo; seguro que muchos de ellos los recordará al leerlos formando parte del enunciado o las opciones de una pregunta de test. El hecho de que haya que distinguir una opción de otras se traduce en muchas ocasiones en que hay que estudiar diferencias o similitudes. Habitualmente se les pide recordar un dato que se diferencia de otros por 11 TécnicoSuperiorSanitariodeAnatomíaPatológicayCitología ser el más frecuente, el más característico, etc. Por lo tanto, este tipo de datos o situaciones son los que hay que estudiar. Debe tenerse siempre en cuenta que las preguntas test hay que leerlas de forma completa y fijándose en determinadas palabras que puedan resultar clave para la resolución de la pregunta. La utilidad de las preguntas test es varia: Acostumbrarse a percibir errores de conceptos. Adaptarse a los exámenes de selección de personal. Ser capaces de aprender sobre la marcha nuevos conceptos que pueden ser planteados en estas preguntas, conceptos que se retienen con facilidad. 1.3.7Envío Una vez estudiado el material docente, se contestará la encuesta de satisfacción, la cual nos ayudará para evaluar el Curso, corregir y mejorar posibles errores. Cuando haya cumplimentado la evaluación, envíe las respuestas a la dirección indicada. 12 UNIDADDIDÁCTICAII ELAPARATOGENITALFEMENINO.GENERALIDADES Cito‐DiagnósticodelAparatoGenitalFemenino APARATO GENITAL FEMENINO: VULVA, VAGINA, CÉRVIX Y ENDOMETRIO 2.1Anatomía,fisiologíaehistología El aparato genital femenino es un tubo que comunica una cavidad serosa con el exterior y que se divide en órganos genitales externos e internos. 2.1.1Genitalesexternos Los genitales externos comprenden, la vulva y el perineo ginecológico, si bien bajo el punto de vista del cito-diagnóstico nos interesa estudiar con detenimiento solo la vulva. 2.1.1.1Vulva La vulva está ocupada, en su parte media por una depresión mediana en el fondo de la cual se abren la uretra y glándulas parauretrales de Skene. Esta depresión se denomina vestíbulo y está limitada a cada lado, por dos anchos repliegues cutáneos yuxtapuestos, los labios mayores por fuera y los labios menores por dentro. Los labios mayores se pierden hacia delante en un saliente medio llamado monte de Venus. Los labios menores están unidos por su extremidad anterior a un órgano eréctil llamado clítoris. El clítoris está constituido por dos cuerpos eréctiles que son los cuerpos cavernosos. Al fondo del vestíbulo y a cada lado del orificio vaginal, se hallan situados otros dos órganos eréctiles denominados bulbos vestibulares o vulvares. Las formaciones labiales: – El monte de Venus es un saliente redondeado, constituido por un cojinete adiposo, situado por delante de la sínfisis pubiana y cubierto por piel con pelos. 15 TécnicoSuperiorSanitariodeAnatomíaPatológicayCitología – Los labios mayores son pliegues cutáneos. La piel contiene numerosas glándulas sudoríparas, sebáceas y pelo. Forma un pliegue alrededor de un abundante tejido conjuntivo laxo muy rico en células adiposas y conteniendo fibras elásticas y algunas células musculares lisas. – Los labios menores son pliegues cutáneos. La epidermis está débilmente queratinizada y la dermis está muy vascularizada e inervada, contiene glándulas sudoríparas y sebáceas pero carece de pelo. – El espacio interlabial o vestíbulo, esta tapizado por una mucosa que consta de un epitelio pavimentoso estratificado no queratinizado, desembocando el meato urinario por delante y el orificio inferior de la vagina por detrás. En resumen debido a la presencia del orificio uretral y del orificio vaginal, la vulva desempeña un papel en la eliminación urinaria y en el parto. Fig. Corte medio sagital de la pelvis, mostrando la situación de los órganos genitales. 2.1.2Genitalesinternos 2.1.2.1Vagina Desde el punto de vista anatómico, dentro de los genitales internos nos encontramos con la vagina que es un conducto que pone en comunicación el útero con la vulva, por ella salen las secreciones normales y patológicas del útero y el feto y sus anexos durante el parto. Es un tubo aplastado en sentido antero posterior, excepto en su porción superior que rodea al exocervix, estando orientada hacia arriba y hacia atrás, con una longitud de 7 a 8cm, siendo la pared posterior más larga que la anterior y con una anchura de 2,5 a 3 cm., Internamente su superficie es rugosa, formada por pliegues longitudinales y trasversales, de tejido elástico, que permiten que el órgano tenga una gran extensibilidad. En la línea media de ambas caras existe un espesamiento de las rugosidades llamadas columnas rugosas anterior y posterior. 16 Cito‐DiagnósticodelAparatoGenitalFemenino La columna rugosa anterior termina en su porción superior bifurcándose y construyendo dos lados de un triángulo equilátero cuya base forma un repliegue transversal de la mucosa, este triángulo se denomina triangulo de Pawlick con mucho valor clínico y quirúrgico. La cara anterior de la vagina está en relación, de abajo a arriba, con la uretra y la vejiga, La posterior con las zonas perineal, rectal y peritoneal, la extremidad superior se inserta en el cuello uterino formando una bóveda o cúpula, en la que se distinguen cuatro porciones o fórnices o fondos de sacos vaginales. 2.1.2.2Cérvix La porción del cuello uterino situada por debajo de la inserción vaginal se llama hocico de tenca o segmento intravaginal, esta es la que vemos al poner el especulo. El orificio cervical externo, es la desembocadura de un conducto que recorre el cuello, denominándose conducto cervical, mide tres cm. de largo y termina en el orificio interno donde la cavidad del útero se hace canalicular y donde el epitelio endocervical, que veremos en la descripción histológica, sustituye a epitelio del istmo que es de tipo endometrial. Desde el punto de vistas histológico, la vagina es un conducto impar y medio que se extiende desde el útero hasta la vulva. La pared de la vagina comprende tres capas dispuestas concéntricamente desde la luz hasta la periferia, mucosa, muscular y adventicia. 1. La mucosa, consta de epitelio que descansa sobre un corion de tejido conjuntivo, el epitelio es pavimentoso estratificado, no queratinizado, en un corte se pueden distinguir tres capas: Capa basal: formada por varias capas celulares, la más profunda descansa sobre la lámina basal. Las células cúbicas o poliédricas, poseen un núcleo redondeado bastante voluminoso y un citoplasma basófilo. Capa intermedia está formada por algunas capas de células ligeramente aplanadas, de contorno poligonal, citoplasma claro, excepto en la periferia y núcleo más pequeño que en la capa basal. Capa superficial formada por varias capas celulares de forma muy aplanada y alargada, de núcleo pequeño y pignótico y con citoplasma mas o menos eosinófilo que a veces contienen gránulos de queratohialina. Cualquiera que sea la forma y el aspecto de su citoplasma y de su núcleo, las células del epitelio vaginal poseen un cierto número de caracteres comunes como la presencia de tonofilamentos en su citoplasma, la adhesión de sus membranas celulares por medio de desmosomas y la abundancia de glucógeno en su citoplasma, sobre todo en las células de la capa intermedia. El corion de tejido conjuntivo donde descansa el epitelio, se caracteriza por la abundancia de fibras elásticas, células linfoides, y capilares sanguíneos, que forman plexos en la zona profunda del corion, y, la ausencia de glándulas. 17 TécnicoSuperiorSanitariodeAnatomíaPatológicayCitología 2. La muscular propiamente dicha está formada por haces de células musculares lisas circulares y sobre todo longitudinales mezcladas, pero en la periferia se añaden formaciones musculares estriadas que forman parte de los músculos del periné. 3. La adventicia es una capa delgada de tejido conjuntivo denso que contiene vasos y nervios y se continúa sin límites precisos con el tejido conjuntivo laxo que une la vagina a los órganos vecinos. A nivel del fondo de saco vaginal posterior, la adventicia está sustituida por la serosa peritoneal, (fondo del saco de Douglas) El cérvix y endometrio pertenecen al cuello uterino, o sea, al útero. 18 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. Conducto Endocervical. Pared de la Vagina. Cavidad Vaginal. Parte central del Cuello. Glándulas Endocervicales. Mucosa Endocervical. Corion. Fondo de Saco Vaginal. Epitelio Vaginal Pavimentoso. Cito‐DiagnósticodelAparatoGenitalFemenino Desde el punto de vista anatómico, el útero comprende cuatro partes: - El fondo - El cuerpo - El istmo - El cuello La pared del útero está constituida por tres túnicas concéntricamente dispuestas de la luz a la periferia: mucosa, muscular y serosa. La mucosa (o endometrio), está formada por un epitelio que descansa, por medio de su lamina basal, sobre un corion de tejido conjuntivo. La mucosa experimenta importantes variaciones relacionadas con la edad y el ciclo hormonal. La muscular (o miometrio), está formada por células musculares lisas dispuestas en haces entre los que se hallan espacios conjuntivos. Los haces de células musculares lisas están diversamente orientados y agrupados. Los espacios conjuntivos que separan a los haces musculares lisos contienen: - Fibroblastos - Macrófagos - Mastocitos - Haces de fibras colágenas - Fibras elásticas sobre todo en la capa periférica - Sustancia fundamental 2.1.2.3Endometrio El Endometrio presenta una estructura básica sujeta a numerosas modificaciones relacionadas con la edad y el ciclo hormonal. El epitelio es cilíndrico simple, formado por células ciliadas y células secretoras desprovistas de cilios. El corion está constituido por un tejido conjuntivo bastante particular que recuerda al mesénquima embrionario (células estrelladas, irregulares, con un gran núcleo ovoide, fibras de reticulina y sustancia fundamental rica en polisacáridos.) Contiene numerosos vasos sanguíneos, linfáticos y glándulas exocrinas, formadas por un epitelio idéntico al de la superficie (representa una invaginación) con una porción más débil de células ciliadas. 2.1.2.4Miometrio Los haces de células musculares lisas se hallan esquemáticamente dispuestos en tres capas bastante mal individualizado: - Una capa interna de predominio longitudinal. - Una capa media, la más gruesa, de predominio circular y oblicuo. - Una capa externa de predominio longitudinal. 19 TécnicoSuperiorSanitariodeAnatomíaPatológicayCitología La envoltura conjuntiva está representada por: – La serosa peritoneal a nivel del fondo y la cara posterior del cuerpo del útero, y una adventicia, a nivel del resto del cuerpo uterino, uniendo el útero a la vejiga por delante y a los ligamentos anchos lateralmente. – El istmo uterino, su estructura es muy similar a la del fondo y del cuerpo, sin embargo la mucosa del istmo se distingue por su poco espesor, su corion denso que contiene pocas glándulas. – El cuello uterino es un conducto cilíndrico que pone en comunicación a la cavidad uterina con la cavidad vaginal. Su pared comprende una mucosa que bordea su cara interna (endocervix) y luego se refleja a nivel del orificio cervical externo para bordear su cara externa y una porción central que se continúa con el miometrio. La mucosa del endocervix está fruncida y no experimenta modificaciones cíclicas y comprende: Un epitelio (que se continua con el del Istmo), simple, cilíndrico, formado por células secretoras de mucus. Un corion de tejido conjuntivo denso que contiene las glándulas endocervicales (ramificadas, mucosas puras y a veces quísticas o huevos de Navoth.) La mucosa del exocérvix continua con la del endocérvix, presenta una brusca transición a nivel del orificio externo, en donde el epitelio se convierte en pavimentoso estratificado, no queratinizado, igual al de la vagina. La porción central del cuello está constituida por un tejido conjuntivo denso y un número variable de células musculares lisas con una orientación predominantemente circular, que hace que el cuello sea más consistente que el cuerpo. La histofisiología del útero es muy amplia y creemos que con el leve repaso de su estructura, forma y componentes que hemos realizado, podemos abordar con más detenimiento las patologías ginecológicas. 20 UNIDADDIDÁCTICAIII PATOLOGÍAGINECOLÓGICA Cito‐DiagnósticodelAparatoGenitalFemenino 3.1Trastornosinfecciosos Patología de la infección por agentes vivos. La entrada de microorganismos en los tejidos de un individuo, se llama infección, produciendo una reacción patógena. Las infecciones por agentes vivos son la causa más común de inflamación clínica. La inflamación depende de la naturaleza del agente y de la reacción del organismo contra el mismo. Entre los agentes vivos que infectan al hombre se encuentran las bacterias, los hongos, los protozoos, los helmintos, los artrópodos y los virus. En general la infección va seguida de una respuesta inespecífica mediada por leucocitos polimorfonucleares, neutrófilos y monocitos, y de una respuesta especifica con la puesta en marcha de la inmunidad humoral y celular contra antígenos del microorganismo. Los trastornos infecciosos del aparato genital femenino son frecuentes y obedecen a una amplia variedad de microorganismos patógenos, la mayor parte de estos agentes patógenos se adquieren durante las relaciones sexuales, por lo que son agrupadas como enfermedades de transmisión sexual y enfermedades no trasmitidas sexualmente. 3.1.1Enfermedadesdetransmisiónsexualporbacterias 3.1.1.1GranulomaInguinal:(C.Granulomatis.) Bacilo gramnegativo, que provoca el Granuloma inguinal, la frecuencia de esta enfermedad afecta por igual a ambos sexos y comienza por un nódulo ulcerado que afecta a la piel genital, inguinal o perianal, puede invadir los linfáticos y en el epitelio estratificado plano de limitación al área afectada puede aparecer una severa hiperplasia, que a veces en tan importante como para ser erróneamente interpretada como un carcinoma epidermoide. 3.1.1.2InfecciónporGardnerella Es un cocobacilo gramnegativo, es responsable del 90% de casos de vaginosis inespecífica, la biopsia en general es normal, porque el organismo no penetra en la mucosa, el diagnóstico se realiza a través del citodiagnóstico con la tinción de Papanicolaou, observándose unas células pavimentosas cubiertas por cocobacilos y que no se acompañan de reacción inflamatoria significativa. 3.1.1.3Chancroblando Es un bacilo gramnegativo que provoca el chancro blando o chancroide, es una enfermedad rara, observándose pequeñas lesiones vesiculopostulosas en el cuello uterino, vagina vulva o región perianal, pueden formar una ulcera purulenta, dolorosa que sangra con facilidad. El examen histológico muestra una infección severa granulomatosa, él diagnóstico se confirma mediante cultivo. 3.1.1.4Gonorrea Es un diplococo Gram negativo, es una enfermedad de transmisión sexual y es causa frecuente de salpingitis aguda y de enfermedad inflamatoria de la pelvis. 23 TécnicoSuperiorSanitariodeAnatomíaPatológicayCitología El epitelio vulvar y vaginal adulto son resistentes a la infección por parte de este agente, los microorganismos se adhieren a las membranas mucosas del aparato genital inferior y llegan en forma directa a la luz tubaria por vía ascendente provocando, estos cocos en su paso, endometritis. 3.1.1.5Sífilis Es una enfermedad provocada por una bacteria delgada y con una configuración espiralada (espiroqueta), la infección es adquirida en el útero y seria congénita, o por contacto sexual con una persona infectada, la sífilis no tratada puede llegar a tres fases, siendo la tercera muy complicada incluso puede tener manifestaciones cardiovasculares y neurológicas. 3.1.1.6ClamidiayLinfogranulomaVenéreo Es una bacteria gramnegativa intracelular que fue considerada un virus por su pequeño tamaño y la capacidad de replica que posee, es la forma más común de infección genital, observándose una mucosa cervical inflamada y células pavimentosas metaplasicas endocervicales conteniendo pequeños cuerpos de inclusión. Las complicaciones posibles incluyen infecciones ascendentes de endometrio, trompas y ovarios. 3.1.2Enfermedadesdetransmisiónsexualporvirus 3.1.2.1Condilomaacuminado(PapilomavirusHumano) El agente del papiloma humano es un DNA virus, hay identificados más de 40 tipos los tipos 6 y 11 se asocian con el Condiloma acuminado, lesión que cada vez se asocia más a una forma frecuente de enfermedad de transmisión sexual. Esta lesión es muy importante detectarla a tiempo porque puede ir asociada a la displasia cervical, el carcinoma in situ y el carcinoma epidermoide cervical En la gran mayoría de las lesiones precancerosas de alto grado y de los carcinomas cervicales invasores se han identificado los tipos 16 –18 y 31 del virus. Los condilomas voluminosos, benignos, son detectados a simple vista, pero muchas lesiones son pequeñas y deben ser detectadas a través del colposcopio. Estas lesiones se observan en la vulva, región perianal, vagina y cuello uterino. Durante el examen microscópico, lo más notable es que veremos la proliferación papilomatosa del epitelio pavimentoso, la célula epitelial característica es el coilocito, célula que tiene un núcleo arrugado que contiene partículas virales. La demostración de secuencias de DNA viral en las lesiones preneoplasicas, cancerosas e incluso en las metástasis del epitelio plano, nos hacen afianzarnos en la posibilidad de que el virus del papiloma humano desempeñe un papel etiológico en el desarrollo del cáncer cervical. 3.1.2.2HerpesSimple El virus del herpes simple tipo 2, es un virus DNA de doble cadena e intranuclear y es una de las causas frecuentes de la infección genital trasmitida sexualmente. El diagnóstico se realiza mediante la interpretación del frotis vaginal o cervical (citología) o por biopsia, las complicaciones comprenden una posible relación con el desarrollo del cáncer del cuello uterino. 24 Cito‐DiagnósticodelAparatoGenitalFemenino 3.1.2.3EnfermedadporinclusiónCitomegálica. Los citomegalovirus son raros patógenos del aparato genital femenino, aunque estos microorganismos provoquen endocervicitis y endometritis. Las células infectadas muestran inclusiones intranucleares eosinofilas grandes (imagen en “ojo de perdiz”) y en ocasiones inclusiones citoplasmáticas. Enfermedades por protozoarios: la tricomoniasis (Trichomonas vaginalis) es un protozoario flagelado grande que con frecuencia causa vaginitis, enfermedad de transmisión sexual que en muchos casos, la mujer portadora es asintomática. La infección se presenta con secreción vaginal densa y espesa de color amarillo grisáceo, el diagnóstico se confirma con el extendido en fresco examinado al microscopio en el cual se pueden identificar tricomonas móviles o bien mediante frotis vaginal. 3.1.3 Enfermedades no trasmitidas sexualmente producidas por bacterias 3.1.3.1SíndromedeShockTóxico Fue identificado en 1978 en mujeres que utilizaban tampones, los síntomas incluyen fiebre, diarrea, exantema difuso y shock, el riesgo de contraer la enfermedad aumenta con el empleo de fibras que absorben magnesio, al bajar la concentración de magnesio se genera una condición ideal para producir toxinas por parte de la bacteria, originando perivasculitis en diferentes órganos y alteraciones asociadas. 3.1.3.2Actinomicesyotrosmicroorganismosemparentados Los actinomices o actinomicosis del aparato genital, es infrecuente, si bien ha aumentado por la utilización del dispositivo intrauterino, aunque es posible que existan otros focos. Otro microorganismo es la tuberculosis (mycobacterium tuberculosis) puede infectar cualquier porción del aparato genital, la mayoría de las infecciones son diseminación de un foco de la trompa de Falopio, que a su vez son diseminadas por los pulmones. El rasgo microscópico típico es el granuloma necrosante, en el endometrio no se instauran porque este se renueva cíclicamente y no da tiempo a necrosarse. 3.1.3.3ProducidasporHongoscomoCandidiasis(cándidaalbicans.) Casi el 10% de las mujeres portadoras de los hongos vulvovaginales, son asintomáticas, la infección se presenta con purito vaginal y secreción blanquecina, el examen clínico presenta pequeñas placas blancas fuertemente adheridas. La biopsia revela un infiltrado inflamatorio y un considerable edema en el tejido, y en el frotis citológico, observaremos esporas y seudohifas. 3.2Enfermedadesinflamatorias La inflamación es una reacción focal morfológica y bioquímica de los tejidos vivos, de carácter predominantemente vascular y desencadenada por distintos agentes patógenos de acción local. La inflamación surge de un foco, a partir del cual, se extiende al mismo tiempo que pierde intensidad. La inflamación consta de una reacción bioquímica y una reacción morfológica con salida de células y otros elementos de la sangre. Lo que caracteriza morfológicamente una inflamación es la presencia en el foco de las células de la sangre, especialmente leucocitos polimorfonucleares, monocitos y linfocitos, y de otras células como las plasmáticas, los fibroblastos y las endoteliales. 25 TécnicoSuperiorSanitariodeAnatomíaPatológicayCitología Las manifestaciones clínicas focales de la inflamación son los que describió Celso como los cuatro signos cardinales de la inflamación: calor, rubor, dolor y tumor, y Virchorw, añadió un cuarto signo: functio laesa, o alteración del órgano o tejido afectado. El calor es debido a hiperemia activa del foco. El rubor se debe a la vasodilatación y extravasación de hematíes. El dolor aparece como consecuencia de la destrucción y aumento de la presión sobre las terminaciones nerviosas. El tumor es producido por la exudación y emigración leucocitaria. La inflamación es un proceso predominantemente vascular y para que exista, tiene que producirse un cambio en el calibre de los vasos y el flujo de la sangre. De acuerdo con la intensidad de la inflamación aguda, hay tres patrones básicos de respuesta de la permeabilidad vascular: Reacción inmediata pasajera, dura de 15 a20 minutos y la salida de líquidos y solutos se produce principalmente a través de uniones interendoteliales, que se forman por contracción del endotelio. Reacción inmediata mantenida, puede durar varias horas, se debe a una lesión directa que se necrosa, y los líquidos extravasados van acompañados de células incluidos los hematíes. Reacción tardía mantenida, puede durar varios días, hay una lesión directa del endotelio y la salida de células y líquidos se realizan principalmente por uniones interendoteliales. La inflamación tiene tendencia a necrosar los tejidos en los que se asienta, pudiendo sufrir, las fibras elásticas y de colágeno, un proceso de hidrólisis, en algunas ocasiones se puede liberar material fibrinoide que altera los tejidos hasta necrosarlos. Con frecuencia es imposible determinar la causa que produce la inflamación con el estudio morfológico, si bien, la reacción inflamatoria se altera dependiendo del agente causante y de la capacidad de respuesta del huésped. 3.2.1Cervicitisagudaycrónica Son el resultado de infección por parte de algunos microorganismos trasmitidos sexualmente, mientras que otros son introducidos por cuerpos extraños como tampones etc. El cuello uterino presenta un aspecto congestivo y edematoso, causado por la inflamación, como las muestras de biopsias del cuello uterino con frecuencia presentan un grado de inflamación, para diagnosticar cervicitis crónica, es imprescindible la presencia de numerosas células linfoides. 3.2.2Endometritisaguda Se caracteriza por la presencia de leucocitos polimorfonucleares y se produce cuando asciende una infección desde cuello uterino. 3.2.3Piómetra También denominada pus en la cavidad endometrial, puede asociarse entre otros con el desarrollo del cáncer epidermoide endometrial. 3.2.4Endometritiscrónica Se detectan células plasmáticas en el endometrio. 26 Cito‐DiagnósticodelAparatoGenitalFemenino 3.2.5Tuberculosis En general como consecuencia de una siembra desde las trompas de Falopio, produciendo un tipo específico de endometritis crónica. 3.3Tumoresbenignosylesionespseudo‐tumorales 3.3.1Distrofiavulvar Son lesiones benignas y se define como un trastorno de la proliferación epitelial, suele aparece como una lesión blanquecina. La distrofia hiperplásica se caracteriza por proliferación del epitelio estratificado plano, con el consiguiente aumento de tamaño de este epitelio. 3.3.2Póliposfibroepiteliales Son pólipos vaginales, normalmente solitarios y con un diámetro menor de un centímetro. Suele aparecer en las mujeres embarazadas, este pólipo es blanquecino y esta formado por tejido conectivo, siendo su estructura corta y elástica revestida por epitelio pavimentoso. Los pólipos son lesiones benignas y deben ser diferenciados del rabdomiosarcoma embrionario, neoplasia altamente maligna. 3.3.3Tumoresmesenquimáticosdiversos Diversos tumores vaginales benignos se asemejan a los de otras regiones del aparato genital femenino, estas lesiones incluyen tumores musculares lisos (leomiomas) y del músculo estriado (rabdomioma benigno) y neurofibromas. Estos tumores submucosos sólidos son menores de 2 cm. de diámetro. Una neoplasia poco frecuente es el tumor de células granulares, puede alcanzar hasta 5cm. De diámetro y sus células se caracterizan por un citoplasma granular abundante y bordes mal definidos. En la actualidad se sabe que estos tumores son lesiones benignas originadas en las células de Schwann. Cuando estos tumores, al crecer, empujan al epitelio pavimentoso, pueden inducir a hiperplasia seudoepiteliomatosa y ser confundidos con carcinomas epidermoides. 3.3.4Póliposendocervicales Son pólipos que constituyen las lesiones tumorales endocervicales mas frecuentes, se presentan con hemorragias o secreciones vaginales y se manifiestan con una masa solitaria lisa o lobulada, menor de 3cm. El epitelio de revestimiento es mucinoso con diversos grados de metaplasia pavimentosa y el estroma aparece edematoso y contiene vasos sanguíneos y paredes engrosadas. Estos pólipos raras veces dan origen a un carcinoma. 3.3.5Hiperplasiamicroglandular La hiperplasia microglandular casi siempre se presenta asintomática, es provocada por estimulación por progestágenos. Por este motivo se observa durante el embarazo, durante el periodo puerperal y en mujeres que usan anticonceptivos orales. 27 TécnicoSuperiorSanitariodeAnatomíaPatológicayCitología La lesión puede ser confundida con adenocarcinoma bien diferenciado ya que las glándulas se encuentran densamente agrupadas sin separaciones por un estroma. Es una lesión benigna y no hay indicios que ninguna de estas lesiones se conviertan en malignas. La hiperplasia microglandular va disminuyendo su aparición, debido a la reducción de progesterona en los anticonceptivos orales. 3.3.6Leiomioma El Leiomioma del cuello uterino es un tumor que puede ser asintomático por la hemorragia o el prolapso, estas complicaciones producen contracciones uterinas dolorosas. 3.3.7Tumoresbenignosoriginadoseneltejidoconectivo En el cuello uterino pueden aparecer numerosos tumores semejantes a los hallados en otras partes del cuerpo, como los hemangiomas, neurofibromas, glanglioneuromas, adenofibromas y adenomiomas. 3.3.8Lesionespremalignasyneoplasiasmalignas 3.3.9Patologíadelepitelioplanoestratificado Hiperplasia atípica y carcinoma in-situ. Desde la llegada de los programas de detección masiva, con la técnica de coloración de Papanicolaou en extendidos cervicales, se ha registrado un incremento notable de la frecuencia de la detección de la displasia y el carcinoma in situ cervical, acompañado del descenso en la incidencia del carcinoma invasor. La displasia es un crecimiento anormal e implica una alteración del desarrollo y maduración del epitelio como respuesta a irritación o inflamación crónica. La displasia no progresa obligatoriamente a cáncer. Los cambios en el epitelio son reversibles, al disminuir las causas desencadenantes. La neoplasia cervical intraepitelial se define como una gama de alteraciones intraepiteliales, que comienza como una atípia global y progresiva a través de los estadios de mayor anormalidad intraepitelial hasta un carcinoma epidermoide invasor. Las alteraciones se clasifican: – CIN-I: Displasia leve. – CIN-II: Displasia moderada. – CIN-III: Displasia severa y carcinoma in-situ. Se considera que más de la mitad de las displasias no evolucionan a carcinoma, si bien casi el 10% evoluciona al carcinoma in-situ, y el 2% hacia un cáncer invasor. El índice de progresión hacia una lesión maligna depende del grado de displasia existente, cuanto más alto sea el grado de displasia, más rápido progresa hacia un carcinoma in-situ, por todo esto, la importancia en la detección precoz de estas lesiones, a través de la citología ginecológica. Uno de los agentes responsables de estas lesiones es sin duda el virus del herpes simple tipo 2 y el papilomavirus humano (HPV). 28 Cito‐DiagnósticodelAparatoGenitalFemenino El virus del herpes simple tipo 2 (HSV-2), puede actuar como un desencadenante de las displasias, detectándose la presencia del DNA del virus incluso en cultivos de carcinomas epidermoides y una elevación de anticuerpos contra el virus, en mujeres que padecen estos tumores. El papilomavirus humano es un agente etiológico que puede desencadenar un carcinoma epidermoide cervical, habiéndose detectado DNA de HPV en células de cultivo, del cáncer cervical y en metástasis ganglionares linfáticas de pacientes con este tipo de carcinoma cervical. Además, las células epiteliales casi en todos los grados de CIN y carcinoma invasor, contienen DNA del HPV. Los grados más bajos de displasia muestran todos los tipos de HPV, por lo tanto, la displasia cervical sería una manifestación de una infección por HPV. En la Displasia Leve (CIN-I) las alteraciones más significativas se encuentran en el tercio basal del epitelio, pero las células con núcleos anormales migran hacia la superficie, desprendiéndose, siendo las células displásicas que observamos en los extendidos citológicos, en general en las células de los dos tercios superiores del epitelio, se observa una diferenciación citológica marcada. En la Displasia Moderada (CIN-II), las alteraciones más importantes se encuentran en los tercios inferior y medio del epitelio, también se observa cito-diferenciación en células del tercio superior, pero en menor magnitud que en la displasia leve. En la Displasia Severa (CIN-III) y en el carcinoma in-situ, las alteraciones nucleares se aprecian en todas las capas epiteliales y la cito-diferenciación es mínima. Todas las mujeres deben de ser sometidas a exámenes periódicos de citologías cervicales desde los 18 años de edad, de esta forma se detectan estadios iniciales con la consiguiente resolución del problema. El termino carcinoma “in-situ”, designa una lesión maligna confinada en el epitelio, es decir, una lesión que no ha invadido el estroma subyacente. 3.3.10Carcinomaepidermoidemicroinvasor El carcinoma microinvasor representa un estadio temprano en el espectro del cáncer cervical (estadio I), caracterizándose por la invasión mínima del estroma por parte de células neoplásicas (menos de 3 mm.), sin invasión vascular ni metástasis ganglionares linfáticas, por lo que no requieren un tratamiento radical. 3.3.11Carcinomaepidermoide El signo clínico más frecuente es la hemorragia vaginal después del acto sexual o del lavado vaginal. Al cáncer que se produce sobre todo en la zona de trasformación del epitelio (unión escamo-columnar) puede ser exofítico o endofítico. Se pueden apreciar tres patrones microscópicos principales. 1º Patrón. El carcinoma de células grandes, no queratinizante, se caracteriza por nidos sólidos de células epiteliales voluminosas malignas que no pasan de una queratinización celular individual. 2º. Patrón. El carcinoma de células grandes queratinizante presenta nidos de células queratinizadas organizadas en remolinos concéntricos y llamadas perlas corneas. 29 TécnicoSuperiorSanitariodeAnatomíaPatológicayCitología 3º. Patrón. Es el menos frecuente, es el carcinoma de células pequeñas, se compone de masas infiltrantes de células malignas pequeñas y cohesivas sin indicios de cohesivas sin indicios de queratinización. El cáncer cervical se propaga por extensión directa y por vía linfática, raramente, la diseminación neoplásica ocurre por vía hematógena. La extensión focal en los tejidos circundantes trae como consecuencia una compresión ureteral. El compromiso de la vejiga y del recto conduce a la formación de fístulas. Las metástasis hacia los ganglios linfáticos regionales afectan los ganglios paracervicales, hipogástricos e iliacos externos. El estadio clínico del tumor es el mejor indicador pronóstico de sobrevida. Estadio 0. Carcinoma in-situ. Estadio I. Carcinoma confinado en el cuello uterino. Estadio II. Carcinoma invasor que se extiendo más allá del cuello uterino, pero que no llega a la pared lateral de la pelvis. Estadio III. Carcinoma invasor que se extiende hasta la pared lateral de la pelvis o compromiso del tercio inferior de la vagina. Estadio IV. Diseminación extendida que afecta a la mucosa de la vejiga o del recto. 3.3.12Carcinomaverrugoso Es una variante del carcinoma epidermoide bien diferenciado, se observa con mayor frecuencia en la vulva, pero en ocasiones aparece en el cuello uterino. 3.3.13Adenocarcinoma El adenocarcinoma endocervical a nivel macroscópico presenta un aspecto polipoide o papilar. Es importante diferenciar los adenocarcinomas originados en el endocérvix de los originados en el endometrio, que se extienden hacia el interior del cuello uterino. El tumor se disemina de forma similar al carcinoma epidermoide. 30 UNIDADDIDÁCTICAIV PROCESAMIENTODELOSFROTISGINECOLÓGICOS Cito‐DiagnósticodelAparatoGenitalFemenino 4.1Técnicadelatripletoma 4.1.1Introducción El epitelio vaginal es de tipo pavimentoso que posee tres propiedades biológicas fundamentales; proliferación, diferenciación y descamación. Histológicamente, la biopsia vaginal permite el estudio muy detallado de las dos primeras propiedades, la proliferación y la diferenciación, pero descuida la descamación. La recogida de las células descamadas nos permite un estudio detallado de la célula individual intacta, y las investigaciones combinadas histológicas y citológicas, han demostrado que la citología exfoliativa no solo permiten un estudio directo puramente citológico, sino también numerosas deducciones directas e indirectas, acerca de la proliferación y diferenciación del epitelio vaginal. Actualmente se puede pretender que el estudio de la citología exfoliativa, o sea, el citodiagnóstico, permita un examen biológico mucho más matizado y mucho más detallado de la biología del epitelio vaginal que la biopsia histológica. Las células que se recogen con la toma, corresponden a las células de las capas externas del epitelio vaginal. El tipo de células que se encuentran en el frotis permiten de esta forma sacar conclusiones sobre el grado de desarrollo y de diferenciación del epitelio vaginal, al igual que la biopsia vaginal, pero el frotis nos ilustra mejor sobre las diferentes modalidades de descamación que, como se verá más adelante, proporcionan indicaciones complementarias sobre los estímulos hormonales a los que está sometido el epitelio vaginal. El diagnóstico cito-hormonal por el método de los frotis vaginales consiste en el estudio del contenido vaginal obtenido en determinadas zonas de la vagina, extendido sobre el que realizaremos el procesamiento adecuado. 4.1.2Técnicadelatoma En la toma vaginal, para facilitar su lectura, el frotis debe de estar bien extendido, sin que sea demasiado grueso, y las células no deben de ser alteradas por la forma de efectuar la extensión. Además la zona de la vagina donde es tomado el producto tiene gran importancia, ya que no todas las zonas de este conducto poseen la misma sensibilidad a los estímulos hormonales. Como el tercio posterior es la región donde el epitelio presenta las mayores variaciones cíclicas en relación con las de los estímulos hormonales la toma debe de hacerse a este nivel y preferentemente en el fondo del saco lateral. Para los diagnósticos hormonales solo nos interesan las reacciones de la mucosa vaginal, la toma deberá recoger el líquido vaginal, menospreciando las secreciones del cuello, estas tienen una gran importancia en la detección del cáncer cervical. Así el lugar de la toma dependerá de los resultados que persigamos en este examen. La toma para el citodiagnóstico hormonal debe ser efectuada siembre con la ayuda de un especulo a nivel de un fondo de saco lateral de la vagina y en su cara externa. El mayor factor de riesgo que puede inducir a errores diagnósticos es la contaminación de la toma ya sea por material exocervical o por contaminación externa. 33 TécnicoSuperiorSanitariodeAnatomíaPatológicayCitología La toma se realizará con control visual, colocando un especulo sin lubricante, introduciendo una espátula de Ayre o un simple depresor de lengua. En la triple toma, se tomará muestra de vagina, exocérvix y endocérvix, este orden es el más habitual, aunque puede haber variaciones, siempre hay que tener un protocolo de acuerdo con el clínico que realiza la toma. La toma se puede realizar con espátula de Ayre, asa de platino, torunda de algodón, o cepillos endocervicales, dependiendo de la zona donde realizaremos la toma. Los extendidos en los portas se harán lo más fino posible y siguiendo su orden, todos los portas tendrán en un extremo una banda con los datos de la enferma (nombre, apellidos y fecha de la toma) procediendo posteriormente a su fijación. Todas las tomas se remitirán al laboratorio con su informe adjunto indicando: Datos personales: – Nombre – Apellidos – edad Datos clínicos: – Fecha de menarquia. – Fórmula menstrual. – Fórmula obstétrica. – Fecha ultima regla, o en su caso, fecha de la menopausia. – Fecha de la toma. – Resumen de la historia clínica y sugerencias diagnósticas. 4.1.3Fijación La fijación inmediata de la toma es una condición primordial para la obtención de buenos frotis. La menor desecación anterior provoca una pseudoeosinofilia, que puede inducir a error diagnóstico. Existen varios fijadores con buenos resultados para la toma citológica: A) Alcohol de 96º/ éter al 50% según la fórmula de Papanicolau, es un excelente fijador, pero no se conserva durante mucho tiempo, si la mezcla ha servido durante más de una semana, puede presentar las siguientes alteraciones: La composición de la mezcla puede cambiar por la evaporación más rápida del éter. Expuesto a la luz, el éter puede descomponerse y el pH de la mezcla, que al principio es de 6’9 a 7, puede descender a 6 incluso a 5’8. Estas modificaciones del pH del fijador pueden dar lugar a variaciones sensibles del índice eosinofílico, sobre todo cuando se emplea la coloración de Papanicolau. La mezcla fijadora de alcohol /éter, debe ser, por lo tanto, siempre reciente y preparada con productos puros. 34 Cito‐DiagnósticodelAparatoGenitalFemenino B) Cito spray: es un fijador excelente en forma de spray, se utiliza inmediatamente después de hacer las extensiones y a unos 25 o 30 cm de distancia para evitar el arrastre celular. Es muy recomendable para las citologías que han de ser trasportadas de centros periféricos al laboratorio, evitando así pérdidas de líquido fijador y su posterior desecación por zonas de los frotis celulares. Antes de proceder a la tinción se deben de introducir en varios cambios de alcohol de 96º para eliminar los restos de fijador. C) Laca del pelo con contenido elevado en alcohol y el mínimo contenido en aceite y lanolina, es un buen fijador y económico, al alcance de todos, en este caso se procede igual que con el cito spray, fijando la extensión rápidamente y aplicando el spray a una distancia de 25 a 30 cm. La laca es retirada de las extensiones introduciendo los portas en alcohol de 96º durante al menos unos 15 minutos, y para evitar interferencias en los colorantes de la tinción, se realizaran los lavados antes del colorante, muy abundantes con agua corriente. Los alcoholes utilizados para retirar los fijadores, se tienen que filtrar muy frecuentemente y cambiarlos a menudo para evitar restos de estos fijadores cuando realizamos la tinción que interferirían en los resultados técnicos de procesamiento. Se pueden utilizar también como fijadores citológicos: Alcohol de 96º, es un fijador muy empleado en citologías, por sus buenos resultados, si bien se utiliza menos en citología ginecológica. El procedimiento es el mismo, inmediatamente después de hacer la extensión, se introducen los portas en dicho alcohol durante 10-15 minutos, el tiempo máximo de permanencia no se ha podido definir, pues se ha demostrado que incluso después de 1015, las células se conservan bien. 4.1.4Trasportedelosfrotisallaboratorio El procedimiento más antiguo y más conocido es el de Ayre y Dakin (1946). Después de la fijación suficiente de los frotis en la mezcla fijadora, los portaobjetos son sacados del frasco y cada uno es cubierto inmediatamente por una gota de glicerina, colocándose para el trasporte, un segundo portaobjetos sobre el frotis glicerinado, sujetando los dos portaobjetos con clip, o una gomilla, pudiendo ser enviados incluso por correo. Esta técnica de la glicerina conserva muy bien las células en lo que concierne a sus reacciones tintoriales, pero una vez en el laboratorio, los portas tienen que ser separados y eliminada la glicerina mediante un lavado especial con alcohol. Estas manipulaciones condicionaban a menudo una pérdida de células, para impedir estos inconvenientes se ensayó otra forma de trasporte con satisfacción. Después de una permanencia de alrededor de 25 minutos en la mezcla fijadora habitual, los porta se colocan durante un minuto en la mezcla de Hinglais, compuesta por cuatro partes de alcohol etílico al 90% y una parte de glicerina pura. Se retiran los portas de la mezcla alcohol / glicerina y se dejan secar. 35 TécnicoSuperiorSanitariodeAnatomíaPatológicayCitología Como solo se evapora el alcohol, queda una película muy fina de glicerina que recubre las células impidiendo su desecación al aire. Los portaobjetos quedan prácticamente secos, no se pegan y se pueden enviar en las cajitas. Cuando se reciben en el laboratorio se vuelven a colocar en el fijador. Como podemos apreciar es necesario la información del fijador utilizado, para proceder a su eliminación. Actualmente el trasporte al laboratorio ha evolucionado mucho, de forma que las extensiones citológicas obtenidas incluso en consultas cercanas al propio laboratorio, se utiliza para su fijación, Laca o cito-spray, y solo hay que tener en cuenta el envío identificado y bien fijado, junto con su informe, introduciéndolo en un frasco hermético o bien en carterillas diseñadas para el trasporte de los frotis, evitando su rotura y roce de la muestra con la consiguiente pérdida de material, dando lugar a un frotis no valorable. 4.1.5Recepcióndelatomayregistro En el laboratorio de Anatomía Patológica, la recepción de muestras es muy importante, centrándonos en la recepción de citologías, hay que tener en cuenta que: Todas las muestras que se reciben estarán identificas. Cada muestra tiene que adjuntar su informe clínico cumplimentado. Los portas tienen que estar sin roturas, o sea, bien conservados. Cuando las muestras no reúnen todas estas condiciones, se procederá a remitirlas a su lugar de procedencia, indicando el motivo. Si las muestras cumplen todos los requisitos, se les adjudicara un número de registro procediendo a su entrada a la sección de citología para su coloración y montaje. 4.1.6Coloraciónymontaje Actualmente la coloración y montaje de las citologías, se realiza automáticamente casi en todos los laboratorios del S.N.S. si bien, los Técnicos en Anatomía Patológica y Citología debemos tener los conocimientos y manejo de los colorantes y montajes manuales para actuar ante cualquier necesidad institucional que sea necesaria. Los colorantes también se adquieren comerciales, pero ello no conlleva que se ignoren los componentes y procedimientos para realizarlos. La elección de la hematoxilina representa un papel primordial, no solamente en el citodiagnóstico cancerológico, ya que también en el diagnóstico hormonal, el estudio del núcleo es un elemento importante, y por otra parte, la coloración con hematoxilina puede, en ciertos casos influir sobre la coloración citoplasmática. Una buena hematoxilina debe cumplir los siguientes requisitos: 36 Colorear perfectamente el núcleo. Colorear al mínimo el citoplasma. No cambiar la coloración en el curso de las tinciones citoplasmáticas posteriores. Cito‐DiagnósticodelAparatoGenitalFemenino No modificar con las diferentes manipulaciones de viraje que ella exige o por sus componentes, las reacciones tintoriales de las células o la coloración citoplasmática en general. La hematoxilina de Harris no acidificada, da coloraciones nucleares excelentes y no influye sobre la coloración citoplasmática, sin embargo hay que tener en cuenta que: Los tiempos de coloración deben alargarse con el tiempo de utilización Exige un viraje con carbonato de litio o con alcohol amoniacal. Esta hematoxilina, como hemos indicado, se puede usar comercial o hacerla nosotros en el laboratorio. La fórmula y método de la Hematoxilina de Harris es conveniente que cada técnico la mantenga a su alcance, pues a través de estos conocimientos, nunca se detendrá el procesamiento, en este caso, de las extensiones citológicas. Esta se realiza con: o Método: Solución A: Sulfato alumínico potásico 80gr Agua destilada 800cc Solución B: Hematoxilina 4gr Alcohol absoluto 40cc Disuelta la solución A, se agrega la solución B poniéndose al hervir, después de 5 minutos de ebullición, se aparta del calor, incorporándole poco a poco 2 gr de Oxido rojo de mercurio muy lentamente evitando las salpicaduras (el papel que desempeña este oxido, es la aceleración en la maduración de la hematoxilina) manteniendo la ebullición una hora. Se deja enfriar y se filtra. También existen otros colorantes nucleares en citología como la hematoxilina al sulfato de zinc de Papamiltiadés (1953), hematoxilina de Lillie-Mayer o hematoxilina de Ehrlich etc. o Colorantes citoplasmáticos Un buen colorante citoplasmático, debe reunir las siguientes condiciones: – Permitir una neta distinción entre las células eosinófilas y basófilas sin dar demasiados matices intermedios. – Dar una coloración homogénea, estable y transparente. – No disminuir la coloración del núcleo (por la hematoxilina) a causa de una excesiva acidez. – No sobrecolorear el núcleo o volverlo opaco. Una buena coloración citoplasmática depende en último lugar, no solo de los la elección de los colorantes, entre los cuales hay que evitar sobre todo los colorantes inestables como la fucsina ácida, sino también de la coloración precedente (hematoxilina) 37 TécnicoSuperiorSanitariodeAnatomíaPatológicayCitología En 1951. Papamiltiadés y Corré, hicieron un estudio bastante grande de las técnicas de coloración válidas para la citología, llegando a la conclusión que las mejores técnicas por sus características y resultados eran: – S-3 de Shorr. – Papanicolau, esta técnica es la que se usa actualmente. Esta técnica usa como colorantes citoplasmáticos, el Orange G (comercialmente OG-6) tiñe de color naranja los citoplasmas y él EA-36, EA-50 ó EA-65, (contienen verde luz y pardo Bismark) éste es el más usado en las extensiones ginecológicas por tener menos verde y en las preparaciones gruesas no sobre tiñe el fondo. o Procedimiento Alcohol de 96º 15 Inmersiones aprox. 30 segundos. Alcohol de 80º 15 Inmersiones aprox. 30 segundos. Alcohol de 70º 15 Inmersiones aprox. 30 segundos. Alcohol de 50º 15 Inmersiones aprox. 30 segundos. Agua 15 Inmersiones aprox. 30 segundos. Hematoxilina de Harris A partir de 1 minuto. Dependiendo de la madurez y el tiempo de utilización, este tiempo irá aumentando. Lavar en agua 3 minutos Diferenciar con ácido Clorhídrico al 0’25% 1 o 2 inmersiones. Virar con Carbonato de Litio 45 segundos. Lavar en agua. Deshidratar hasta el Alcohol de 96º 15 inmersiones en cada alcohol Orange G 2 minutos. EA-65 3 minutos Alcohol absoluto. Alcohol/Xilol. Xilol y montar. Los tiempos de tinción varían, estos son orientativos, el Técnico los adaptara según la utilización de los colorantes. PH del agua y de los resultados 38 Cito‐DiagnósticodelAparatoGenitalFemenino 4.1.7Archivodepreparaciones Después del Citodiagnóstico, se llevará a cabo el archivo de las preparaciones, en este apartado tenemos que tener en cuenta la importancia de la conservación de las extensiones citológicas, que son el único material que disponemos para una posterior consulta del diagnóstico emitido y como valor comparativo para posteriores citologías de la misma enferma. Este se realizará por orden del número que se le adjudicó en el Registro de Entrada al Laboratorio. – Cito-diagnóstico. – Citología vaginal normal. La citología vaginal comprende las células de diversos orígenes como: – Epitelio vaginal. – Epitelio cervical. – Mucosa cervical. – Endometrio. – Polinucleares, linfocitos, glóbulos rojos, histiocitos y gérmenes de la flora vaginal. Todo este conjunto constituye un grupo de elementos normales. Las células vaginales provienen de la descamación fisiológica del epitelio vaginal, hemos visto que éste se halla compuesto de numerosas capas celulares, por tanto encontraremos en la citología vaginal diversas formas de células bien distintas, según de la capa que procedan. Estas capas descamadas no solo tienen una morfología especial, sino que se pueden comprobar también particularidades de descamación, ya sea en células aisladas o células en agrupaciones más o menos grandes, con gran importancia en el citodiagnóstico hormonal, pues las variaciones hormonales no solamente influyen en las células que se descaman, sino también en su forma de descamación. La forma de descamación en células aisladas o en agrupamientos, no constituyen un artefacto ni de extensión ni de fijación, lo mismo ocurre con el plegamiento celular post-ovulatorio o luteínico, siendo adaptaciones normales de las células. Las células vaginales pueden clasificarse en tres grupos, por analogía con las tres capas principales del epitelio vaginal. Estos grupos se distinguen por la maduración o la diferenciación celular, las células basales son las más jóvenes, siendo más diferenciadas las de la forma superficial, y entre ellas se sitúa la forma intermedia. 39 UNIDADDIDÁCTICAV CITO‐DIAGNÓSTICO Cito‐DiagnósticodelAparatoGenitalFemenino 5.1Citologíavaginalnormal 5.1.1Célulasdeorigenvaginal 5.1.1.1CélulasBasales Se distinguen dos tipos de células basales, según procedan de una o de otra de las dos capas de la zona basal del epitelio vaginal. A) Células Basales Profundas Son células aún indiferenciadas, pequeñas, redondeadas u ovaladas, con un núcleo grande, en general de la misma forma que la célula de la cual ocupan aproximadamente la mitad. El citoplasma y el núcleo son cianófilos y tienen aproximadamente doble volumen que un polinuclear. Estas células no se encuentran en los frotis procedentes de mujeres sanas con actividad hormonal, las podemos encontrar en: – Frotis de mujeres castradas o menopaúsicas con atrofia vaginal muy acentuada. – En los casos de lesiones infecciosas ó traumáticas de la vagina, que han puesto al descubierto la capa basal del epitelio. En los frotis de menopausia avanzada y de posparto inmediato, se puede ver una forma particular de estas células; son mas pequeñas, tienen un citoplasma eosinófilo y su núcleo es pignótico. B) Células Basales Externas o Parabasales. Son igualmente de forma ovalada o redondeada, pero mayores que las células basales profundas. A veces pueden presentar principios de angulaciones o estiramientos citoplasmáticos. En el citoplasma, que en general es cianófilo, pueden verse vacuolas. Con frecuencia los núcleos son voluminosos, de forma oval o redondeada, algunas veces estos núcleos pueden presentar signos del comienzo de la pignosis, entonces pueden observarse unos plegamientos o escotaduras nucleares. 43 TécnicoSuperiorSanitariodeAnatomíaPatológicayCitología 1. Núcleo: Redondo o elíptico, más grande que en células superficiales. 2. A veces el núcleo se encuentra desplazado hacia el borde celular. 3. El núcleo de la célula basal es mayor que en la célula parabasal. 4. Citoplasma. Menos abundante que en las células superficiales. 5. Forma: redonda o elíptica. 6. Membrana poligonal. 7. Membrana ligeramente engrosada. 8. Fondo de la preparación con leucocitos. Rara vez se encuentra una verdadera pignosis. Papanicolaou hizo una distinción entre este tipo de células de tres formas diferentes: 1) Las células atróficas, con frecuencia redondeadas o ligeramente ovaladas. Los núcleos son grandes, vesiculosos, pero los signos de degeneración nuclear (pignósis degenerativa y cariorrexis) no son raros, y nos las podemos encontrar en frotis: – De mujeres con menopausia acentuada. – En la infancia. – En mujeres con amenorrea marcada. 2) Células de tipo cervical: El origen de estas células seria según Papanicolaou, el epitelio de revestimiento cervical. Son un poco mayores que el tipo precedente, aunque de volumen variable. Son ricas en vacuolas que a veces rodean completamente el núcleo. Éste es grande, situado en el centro o desplazado por las vacuolas hacia la periferia. Sin embargo, los signos de degeneración nuclear son más frecuentes y a menudo se observan plegamientos, escotaduras nucleares o incluso una completa pignósis. Habitualmente el citoplasma es cianófilo, al igual que los núcleos, pero a veces estas células pueden presentar una reacción eosinófila. Se las encuentra en casos de hipertrofia epitelial localizada de cuello y cuando el epitelio vaginal normal ha sufrido lesiones de las capas superficiales. Se las puede observar en número reducido durante el ciclo normal, a menudo acompañadas de abundante secreción de moco. 44 Cito‐DiagnósticodelAparatoGenitalFemenino 3) Células de tipo Post-Parto. Son muy parecidas a las células precedentes, pero su volumen es aun más variable. Con frecuencia contienen vacuolas que pueden rechazar el núcleo hacia la periferia y conferirle una forma alargada, afilada. El núcleo es habitualmente muy grande, pero puede presentar los mismos signos de prepignosis que en las células de tipo cervical. El citoplasma es en general cianófilo, pero las células de este tipo que son eosinófilas con un núcleo prepignótico no son raras, y se encuentran en los frotis post parto. 5.1.1.2CélulasIntermedias Las células intermedias son células procedentes de la descamación de la capa intermedia. Se distinguen de las basales por su mayor dimensión y su forma alargada, elíptica o en huso, aunque a veces las células basales pueden rebasarlas en volumen. A menudo encierran voluminosas vacuolas, ya sea una vacuola o varias pequeñas. Con frecuencia presentan una coloración más oscura de sus bordes celulares, dejando en el centro un citoplasma claro. Desde luego, las células basales pueden presentar un borde más oscuro, pero la diferencia entre los bordes y el centro de las células no es tan pronunciada como en este último tipo. A menudo los núcleos son todavía grandes, pero muchos de ellos están ya en estado de prepignosis (de 6 a 9 u), frecuentemente son excéntricos. 1. Núcleo. Mayor que las células superficiales. 2. Menos cromatina que en las células superficiales. 3. El borde nuclear es difuso. 4. Citoplasma de forma variada. 5. Borde celular plegado. 45 TécnicoSuperiorSanitariodeAnatomíaPatológicayCitología En el grupo de las células intermedias se pueden distinguir dos tipos de células: Células Intermedias propiamente dichas: que son grandes, extendidas, de forma redondeada, ovalada o ligeramente poliédrica, con un núcleo frecuentemente grueso, vesicular. Es la forma de transición entre las células basales y las superficiales. Células Naviculares; que se distinguen por su forma en navecilla y su borde más coloreado que el centro de la célula. El núcleo es a menudo, excéntrico, rechazado por una gran vacuola, mide entre 6 y 9 u. Con frecuencia presenta plegamientos y escotaduras veces se halla particularmente alargado, sobre todo durante el embarazo. Esta forma navicular no se encuentra habitualmente más que por la acción de la progesterona, es tanto más frecuente cuanto más importante resulta dicha acción. Según Papanicolaou (1943), aún pueden distinguirse dos formas, las células naviculares del ciclo menstrual, y las del embarazo que son más alargadas y su borde se colorea con mayor intensidad. Por lo general las células intermedias son cianófilas, también se pueden observar células intermedias con citoplasma eosinófilo, en el post parto con lactancia y en ciertas infecciones vaginales. En este último caso, se trata de una pseudoeosinofilia no fisiológica de origen inflamatorio o irritativo. Las células intermedias se encuentran en: - Durante el embarazo y post parto. - En la fase premenstrual y postmenstrual, y durante las reglas, igualmente las podemos encontrar en los frotis, en número más reducido, durante todo el resto del ciclo. - Después de la hipofoliculínicas. menopausia y en el curso de las amenorreas - En el caso de lesiones del epitelio vaginal normal con desprendimiento de la capa superficial. - Durante la administración de andrógenos. 5.1.1.3CélulasSuperficiales Las células superficiales son células plenamente diferenciadas de las capas epiteliales superficiales. Tienen forma poliédrica, son de gran tamaño (35 a 60u) y a lo largo del ciclo menstrual presentan diferentes aspectos, Durante la fase folicular, son aplanadas y con frecuencia contienen pequeñas granulaciones citoplasmáticas. El citoplasma es cianófilo o eosinófilo y se tiñen fuertemente por los colorantes. Durante la fase lútea, las células superficiales están habitualmente plegadas y con bordes irregulares. El Citoplasma es también eosinófilo o cianófilo, pero toma menos intensidad de los colorantes, apareciendo más pálido. La característica de las células superficiales es por tanto, la presencia de un núcleo pignótico, puntiforme, que mide de 3 a 5u de diámetro. 46 Cito‐DiagnósticodelAparatoGenitalFemenino Existen dos tipos diferentes de células superficiales: - Células Superficiales Cariopignóticas Cianófilas. - Células Superficiales Cariopignóticas Eosinófilas. 1.Núcleo: Redondo o Elíptico. 2.Cromatina. 3.Citoplasma delgado y transparente. 4.Bordes que pueden estar plegados. La morfología celular es idéntica para estos dos tipos, se distinguen únicamente por la reacción tintorial opuesta del citoplasma cuando se colorea el frotis con técnicas diferenciales. Si se utiliza una coloración monocroma, por ejemplo, el azul de toluidina o la fucsina, es prácticamente imposible diferenciarlas, ya que tienen la misma morfología general. Con la hematoxilina-eosina, se pueden reconocer las células eosinófilas, por el hecho de que toman más intensamente la eosina que las basófilas, pero la diferencia tintorial en estas condiciones es insuficiente e inviable, no utilizándose en la práctica. A veces los autores americanos e ingleses utilizaban el término “Células Cornificadas” (cornified cells) para designar las células superficiales. En citología vaginal humana, el término célula cornificada debe de ser abandonado totalmente porque no está comprobado que exista realmente una cornificación en dichos elementos. De hecho, esta denominación no sería realmente exacta más que para unas células completamente queratinizadas, pero a diferencia de lo que ocurre en la rata y en el ratón, en la mujer no existe una verdadera queratinización vaginal fisiológica. Una forma especial de estas células es el tipo anucleado, que se consideran unos elementos en los cuales la queratinización es completa. Son más pequeñas que las células superficiales normales, debido a un plegamiento celular que les confiere aspecto apergaminado, a veces, se puede encontrar el antiguo emplazamiento del núcleo bajo la forma de una pequeña mancha clara. Como estas células se tiñen intensamente por la eosina, los autores americanos las han denominado células eosinófilas. Durante el ciclo normal solo se encuentran en un número muy reducido, y su aparición en mayor cantidad es siempre un signo de queratinización patológica de la vagina o del cuello en los casos de prolapso o de leucoplasia, así pues representan una forma de transición entre las 47 TécnicoSuperiorSanitariodeAnatomíaPatológicayCitología células normales y las patológicas de la vagina, pueden también proceder de la vulva, habiendo sido arrastradas fortuitamente al interior de la vagina al realizar la toma. Como ya hemos puesto de manifiesto en la histología vaginal, las tres capas principales del epitelio vaginal no presentan entre ellas una línea de separación neta y las modificaciones morfológicas se desarrollan de una manera progresiva, en sentido de una maduración, partiendo de las capas basales hacia las zonas superficiales. Las células descamadas pueden igualmente presentar tipos de transición por lo que resulta prácticamente imposible definir con exactitud de que capa procede cada célula. Por ejemplo en el curso de la actividad genital de la mujer, a veces se ven elementos de transición entre el tipo superficial y el intermedio, son células de núcleo prepignótico. Pueden tener el aspecto general de las células superficiales, o ser aun ovaladas y acercarse al tipo intermedio. Arbitrariamente situamos las primeras en el grupo superficial y las segundas en el tipo intermedio. Esquema del epitelio vaginal normal bien diferenciado y de los diferentes tipos de células vaginales (Basales, Parabasales, Intermedias y superficiales) Las descripciones que hemos comentado se refieren exclusivamente a células vaginales. Las células del epitelio pavimentoso de revestimiento externo del cuello presentan en general, las mismas características, de manera que no nos parece útil hacer una descripción especial de las células descamadas a este nivel, y por otra parte, con frecuencia es imposible distinguir unas de otras. Algunos autores hacen una clasificación especial para las células granulosas. Estas son células epiteliales, cuyo citoplasma encierra granulaciones a veces finas, a veces mayores, y que se colorean muy bien con la hematoxilina ya sean en azul o en rojo, pero no son más que estructuras pasajeras que se encuentran en ciertos periodos del ciclo vaginal, sobre todo hacia la ovulación, mientras que, durante otros periodos, pueden estar ausentes. 48 Cito‐DiagnósticodelAparatoGenitalFemenino Tales células granulosas no deben confundirse con las células con granulaciones a pigmento sanguíneo que se encuentran a menudo en el curso de los abortos acompañados de pérdidas sanguíneas repetidas, en el curso de metrorragias prolongadas, y a veces en el curso de la menstruación o en la fase postmenstrual inmediata. Se distinguen de las células con granulaciones de queratohialina gracias a la coloración parda de las granulaciones que son también mayores. Como puntos principales en el Citodiagnóstico práctico podemos destacar: Las Células Epiteliales Pavimentosas Estratificadas de la vagina. Se clasifican en: - Células Superficiales. - Células Intermedias. - Células Basales y Parabasales Fig. Células Epiteliales Pavimentosas Estratificadas de la vagina. 5.1.1.4CaracterísticasGenerales Dentro del aspecto general de las células podemos decir: El tamaño: Diámetro de 10 a 40 o 50 micras siendo las células superficiales de mayor tamaño que las profundas. Su forma es redondeada o más bien elíptica. Las células superficiales pueden ser poligonales. Características del núcleo: Normalmente solo tiene un núcleo, si bien, en casos inflamatorios pueden aparecer células multinucleadas. Se localiza aproximadamente en el centro de la célula. Su tamaño es mediano, más pequeño en las células superficiales y mayor en las profundas. 49 TécnicoSuperiorSanitariodeAnatomíaPatológicayCitología El núcleo es redondo, pequeño y pignótico en las células superficiales, y la relación núcleo- citoplasma es mayor en las células profundas. Su forma es redonda o elíptica, como hemos descrito anteriormente, tanto más redondeadas cuanto más superficial es la célula, y tanto más elíptica cuanto más profundas. El contorno nuclear tiene mayor nitidez en las células más profundas. El nucleolo normalmente no se ve. La vacuolización no existe a no ser que se trate de células en estado de degeneración. Características del citoplasma: - En las células superficiales es mayor que en las células más profundas. - La forma es redondeada o elíptica con tendencia poligonal en la más superficial y más redonda o más elíptica en la de mayor profundidad. - El contorno en las células superficiales está con frecuencia plegado, siendo esta tendencia más marcada en la fase secretora del ciclo. - El citoplasma es más grueso en las células profundas y más delgadas cuanto más superficiales. - Es homogéneo y transparente a veces puede haber vesiculaciones. - Las células superficiales normalmente son eosinófilas, mientras que las más profundas son basófilas, aunque diversos factores pueden modificar estas propiedades tintoriales. - Normalmente las vacuolizaciones no existen, aunque en ocasiones pueden observarse en casos de degeneración o en células más profundas. - Inclusiones citoplasmáticas: A veces, en el seno del citoplasma de las células superficiales, pueden existir sustancias de fragmentación nuclear que se presentan en forma de diminutos gránulos que se tiñen intensamente. - En estados inflamatorios, a veces se presenta un fino halo perinuclear. 5.1.2Célulasdeorigenextravaginal 5.1.2.1CélulasdelaMucosaCervicalyEndometrial Las células de origen cervical y endometrial que provienen de la descamación de un epitelio cilíndrico, tienen un aspecto idéntico. Son células redondeadas u ovaladas, a veces incluso cilíndricas, cuyo núcleo, frecuentemente redondeado, ocupa su mayor parte. 5.1.2.2CélulasEndocervicales Son redondeadas u ovaladas, a veces incluso cilíndricas, sobre todo si la descamación las ha desprendido en amasijos. Generalmente su volumen es el doble del de un polinuclear, pero son frecuentes las variaciones de tamaño. Sus bordes celulares son siempre definidos, su citoplasma se colorea en azul pálido. El núcleo es grande, redondeado, pálido, finamente granuloso y contiene un nucleolo bien visible, puntiforme. A veces, lo más a menudo, al final de la fase foliculínica, 50 Cito‐DiagnósticodelAparatoGenitalFemenino se pueden ver los núcleos sin citoplasma que provienen de una citólisis fisiológica particularmente intensa en dicho estadio. Con frecuencia, tales células contienen vacuolas que, si son grandes, rechazan el núcleo hacia uno de los polos, estas son células caliciformes. Con técnicas especiales como el mucicarmin, se puede demostrar que dichas vacuolas contienen moco, y tal particularidad permite distinguirlas, en fase proliferativa, de las células endometriales que no contienen moco más que en la fase secretora. Las células de forma cilíndrica pueden tener en uno de sus polos una franja de cilios; los bordes de estas células ciliadas son gruesos y a menudo el núcleo está rodeado por una vacuola bien visible. Estas células las podemos encontrar: - Durante todo el ciclo normal en número variable, con frecuencia, poco abundante, pudiendo ser más numerosas durante la fase foliculínica. - Durante el embarazo, en número más elevado. - En las lesiones inflamatorias y cancerosas del cuello, donde pueden igualmente adquirir aspectos especiales. Desde el punto de vista del citodiagnóstico practico podemos decir como características generales que las células endocervicales tienen el aspecto de una elipse elongada o globulosa; son del tamaño de las células parabasales, y el núcleo, que es grande y de forma elíptica, está situado cerca de un extremo. Frecuentemente, las células se observan agrupadas en placas y a veces se ven núcleos aislados y privados de citoplasma. 51 TécnicoSuperiorSanitariodeAnatomíaPatológicayCitología Características del núcleo: - Redondo o elíptico. - Grande para el tamaño de la célula. - El contorno es nítido y la membrana nuclear es gruesa. - La cromatina es finamente granular, aunque en ocasiones se presente en forma de conglomerados granulares. - No se ven nucleolos. - A veces hay más de dos núcleos sobrepuestos. Características de citoplasma: - Su forma es típicamente alargada, elíptica o globulosa. - En las células ciliadas, el borde celular en el que se implantan los cilios, está discretamente engrosado y es más marcado. Los otros bordes celulares son, a veces, confusos especialmente en los estados de degeneración tienen un aspecto evanescente. - Basófilo y discretamente vacuolado. - Cuando las células se reúnen para formar placas, su conjunto toma el aspecto de panal de miel. 5.1.2.3CélulasEndometriales Son casi exclusivamente de forma redondeada y pueden encontrarse aisladas o agrupadas. Su volumen celular, que por lo general es el doble del de un leucocito, puede presentar igualmente variaciones en relación con la fase del ciclo. Las células que proceden de un endometrio en estado de reposo proliferación son pequeñas. o de El núcleo es bastante pequeño, oval e hipercromático, con frecuencia excéntrico, situado en un polo de la célula, rechazando el citoplasma hacia el otro polo. El nucleolo no se visualiza bien y el citoplasma es basófilo pálido. En la fase secretora, las células son mucho más parecidas a las células endocervicales y un poco mayores que durante la fase proliferativa, El núcleo es redondeado, más grande, pálido y rodeado por una membrana nuclear bien visible. El citoplasma igualmente basófilo, contiene con frecuencia pequeñas vacuolas que pueden rodear por completo al núcleo. 52 Cito‐DiagnósticodelAparatoGenitalFemenino Las células endometriales las podemos ver en: Durante la menstruación, hallándose aisladas o agrupadas. Hacia el tercero o cuarto día de la regla, cuando la descamación endometrial es muy abundante, se encuentran en los frotis aglomeraciones de células endometriales que aun conservan la disposición tisular de las glándulas uterinas, pudiendo encontrar adheridas a ellas, células conjuntivas del estroma. Un cierto número de células endometriales pueden hallarse alteradas por la citólisis, adoptando formas como histiocitos, pudiendo ver núcleos aislados sin citoplasma. Cuando existen lesiones endometriales, sobre todo si se acompañan de células sanguíneas, como pólipos de endometrio, hiperplasia endometrial y endometritis, pueden presentar formas patológicas. En las neoplasias de cuello uterino, en el momento de la menstruación, se pueden encontrar importantes colgajos de mucosa uterina que si son grandes no dejan percibir los detalles histológicos ni citológicos. 53 TécnicoSuperiorSanitariodeAnatomíaPatológicayCitología En la observación de los frotis vaginales las células endometriales son ciliadas, epiteliales cilíndricas que proceden de la superficie interna de la cavidad uterina, o sea, de las células glandulares y de la estroma. En los frotis vaginales es difícil distinguir las células glandulares de las epiteliales superficiales, no distinguiéndose con frecuencia los cilios. 5.1.2.4DiferenciaciónentrelasCélulasEndocervicalesyEndometriales Aunque las células endometriales varían dependiendo de la fase del ciclo menstrual, y puede ser difícil su distinción en los frotis vaginales, en las siguientes características, podemos aprecias dichas diferencias. Aspecto General Células Endocervicales Más grandes. Ligeramente más pequeñas. Un poco más sueltas cuando están en un grupo. Más densas, con frecuencia sobrepuestas unas a otras. De forma cilíndrica. Núcleo Ligeramente más grande Más pequeño Redondo u oval, frecuentemente múltiple. Irregular, habitualmente único. Gránulos de cromatina finos y débilmente teñidos Gránulos gruesos, teñidos más intensamente en la fase proliferativa. Situados excéntricamente en las células cilíndricas. Citoplasma Células Endometriales Más abundante. Menos abundante. Ligeramente teñido. Intensamente teñido. Basófilo y en ocasiones eosinófilo No siempre definido Los bordes son netos, mostrando su estructura en panal. A veces los bordes son difusos debido a la degeneración. Ocasionalmente ciliados. 5.1.2.5CélulasGlandulares Las células glandulares pueden aparecer, como hemos comentado, en las extensiones realizadas durante la menstruación o incluso hasta el día 12 del ciclo menstrual. Estas células pueden estar aisladas o en grupos, amontonadas unas sobre otras, a veces su conjunto toma el aspecto de un aro rodeando células del estroma. Las células que se extraen directamente del endometrio, por legrado o aspiración, están mejor conservadas que aquellas que se descaman en la vagina, y de acuerdo con ello sus formas varían notablemente en apariencia. 54 Cito‐DiagnósticodelAparatoGenitalFemenino Características del núcleo: Su forma es redonda. Su tamaño es uniforme siendo de 1 a 3 veces mayor que los leucocitos. Su contorno es nítido. Normalmente su aspecto es granular fino (fase secretora) o de granos más gruesos (fase proliferativa). Frecuentemente se observan cúmulos de cromatina. A veces se visualiza el nucleolo. Ausencia de vacuolas. En los frotis vaginales raramente se ven mitosis. En las extensiones vaginales es difícil distinguir los cambios cíclicos en los núcleos de las células que sufren una descamación natural y que además pueden estar ya degeneradas. Sin embargo, los cambios físicos se ven con claridad, en las células que se obtienen directamente por aspiración o por legrado. Características de citoplasma: Los contornos celulares son confusos cuando las células se hallan agrupadas. El citoplasma aparece tenue y en ocasiones es eosinófilo. Cuando el citoplasma está degenerado se ven vacuolas de un tamaño más bien grande conteniendo leucocitos y otras sustancias. Los cambios cíclicos que se observan en las extensiones de células obtenidas en la fase proliferativa y en la fase secretora, se pueden apreciar en la tabla siguiente: Célula Aspecto General Núcleo Citoplasma Fase Proliferativa Fase Secretora Más bien densa en placas celulares Suelta en un grupo celular 1 a 3 veces mayor que los Leucocitos Mayor que en la Fase Proliferativa Redondo, Elíptico o Poligonal Más redondeado La Cromatina es regular De Gránulos Finos. Se tiñe intensamente Poco teñido El borde es difuso El borde es neto, con frecuencia la cromatina aumenta hacia el borde. Es menos abundante Más abundante El borde es difuso El borde es neto Denso Estructura en forma de panal. Aspecto de madeja. 55 TécnicoSuperiorSanitariodeAnatomíaPatológicayCitología Las células del estroma, es difícil identificarlas en frotis vaginales, aunque si las células se han obtenido por aspiración, es más fácil su identificación. Su aspecto general es habitualmente de conformación más bien elongada. Su núcleo varia en tamaño y es elíptico o elongado, la cromatina es groseramente granular y se halla repartida por todo su interior. Su contorno nuclear no se ve nítido. El citoplasma es más bien denso y elongado, ligeramente basófilo y con un contorno difuso. 5.1.2.6CélulasSanguíneasyTisulares Las células de este grupo que se pueden observar en los frotis son los eritrocitos, los polimorfonucleares, los linfocitos y los histiocitos. Aparecen en el contenido vaginal, ya sea por hemorragia uterina, cervical o vaginal, o por trasudación a través de un epitelio patológico. 5.1.2.7GlóbulosRojos Pueden ser de forma normal, como en los frotis sanguíneos, o con signos de degeneración como retracción, plegamiento y en caso de hemólisis, no se encuentran nada más que la fina membrana celular que adquiere aspectos muy variables. Cuando existen pérdidas sanguíneas muy prolongadas, se pueden observar granulaciones de pigmento sanguíneo. En los frotis vaginales aparecen: Durante la menstruación. En mujeres con epitelio vaginal atrófico debido a su gran friabilidad. En el diagnóstico del cáncer, su presencia es un elemento importante, porque encontrar un frotis neoplásico sin su presencia, es raro. 5.1.2.8Polinucleares Con frecuencia se ve gran cantidad de leucocitos polimorfonucleares en las extensiones vaginales, siendo especialmente abundantes en las cervicitis, aunque es difícil establecer una clara relación dependiente entre el número de leucocitos y el grado de inflamación. La importancia de la presencia de leucocitos en las extensiones, se basa en que se puede usar como pauta para determinar el tamaño y densidad del núcleo o citoplasma. 5.1.2.9Linfocitos Conservan el mismo aspecto que en los frotis sanguíneos, acompañan a los polinucleares, y pueden ser muy frecuentes en los procesos inflamatorios. 5.1.2.10Histiocitos Son células migratorias del tejido conjuntivo que aparecen en los procesos inflamatorios. Su propiedad principal es la fagocitosis, siendo las mitosis muy raras. 56 Cito‐DiagnósticodelAparatoGenitalFemenino Histiocitos en una extensión vaginal Por su morfología, que puede ser muy variada, estas células a veces dan lugar a dificultades en el diagnóstico, sobre todo en el caso de lesiones inflamatorias, en las que pueden adquirir formas atípicas. Cuando son típicos tienen forma de riñón (arriñonado), siendo su localización fácil. Se pueden observar tres clases de histiocitos: - Células pequeñas. - Células grandes. - Células gigantes. Su forma es redondeada o elíptica, y el núcleo es excéntrico en el seno del citoplasma. Aspecto del núcleo: - Lo más frecuente es que el núcleo tenga forma arriñonada, aunque puede presentarse redondeada o elíptica. - Cada célula tiene un núcleo, pero en el caso de los histiocitos gigantes, pueden aparecer con varios núcleos redondos y excéntricos. - El contorno nuclear es más bien neto. - Presenta una cromatina nuclear finamente granular, formándose a veces pequeños cúmulos irregularmente repartidos. - No hay nucleolos. Aspecto del citoplasma: - El contorno que presenta un histiocito bien conservado es nítido, pero se torna difuso en estado de degeneración. - El citoplasma puede variar de forma y tamaño. - Las diversas formaciones citoplasmáticas son esponjosas, basófilas y se tiñen débilmente. 57 TécnicoSuperiorSanitariodeAnatomíaPatológicayCitología - El citoplasma de los histiocitos gigantes es más bien denso, algunas veces podemos observar leucocitos fagocitados o vacuolas. Los histiocitos los encontraremos en: - Durante la menstruación en ciclo normales. - En los procesos inflamatorios del tracto genital, pueden aparecer en número elevado, sobre todo en la adsorción de infiltrados situados en la vecindad de la vagina, como en los procesos de hematocele o en el hematoma de Douglas, que con frecuencia acompaña al embarazo extrauterino. - En el post-parto. - En las neoplasias genitales. - Después de radioterapia genital. 5.1.2.11ElementosnoEpitelialesdelFrotisVaginal:Moco. Según Papanicolaou, la fase folicular se caracteriza por la aparición de moco en gran cantidad, pero otros autores como Roth y Burger, hablan de la aparición de moco en la fase post-ovulatoria, menstrual y post-menstrual. Estos criterios, si bien parecen contradictorios, no lo son, pues el primero lo describe como sustancia transparente que proviene del moco cervical, excepto si existe cervicitis coloreándose en azul muy pálido con la hematoxilina, aunque es prácticamente invisible por su transparencia, los otros autores lo describen como una sustancia granulosa y amorfa, confiriéndole un aspecto de fondo sucio, por esto, el termino moco es utilizado en un sentido amplio y no en el sentido histológico propiamente dicho. Actualmente se describe como una sustancia mucosa que contiene en suspensión algunos elementos del líquido vaginal (agua, ácido láctico y restos de la descomposición celular y bacteriológica. 58 Cito‐DiagnósticodelAparatoGenitalFemenino Se recomienda examinar esta sustancia de base a gran aumento, porque si ella es granulosa puede ser debido a la precipitación amorfa del líquido vaginal rico en materias orgánicas, pero las granulaciones pueden ser únicamente masas de flora vaginal rica en cocos. Esta flora de cocos puede dar lugar a aspectos citológicos muy particulares, de tal manera que ciertos autores han querido hablar incluso de frotis de tipo mucoso (tipo mucoso cornificado de Nieburgs, en el curso del embarazo, o tipo postmenopausico mucoide de Papanicolaou. Como hemos comprobado con Wied, estas imágenes no tienen nada que ver con el moco, sino que resultan de esta flora de cocos particularmente abundantes y que son estreptococos o el Haemophylus vaginalis. 5.2Variacionescitológicashormonales 5.2.1Estrógenos Los estrógenos naturales o sintéticos provocan: - En el epitelio vaginal atrófico, una proliferación intensa y de aspecto normal, cuando las dosis son suficientes. El epitelio formado en estas condiciones presenta las dos capas principales y en la capa superficial se desarrollan los signos de queratinización observados en el epitelio normal. - Aumentando las dosis de estrógenos, se puede provocar una verdadera hiperplasia epitelial con aumento de la queratinización. - Esta proliferación va acompañada de una capa de glicógeno importante. - En los frotis atróficos, una desaparición de las células basales que son sustituidas por células superficiales. Al mismo tiempo disminuye el número de leucocitos, teniendo una reacción glucogénica fuertemente positiva. - Las células superficiales de estimulación estrogénica pura se caracterizan por su descamación en elementos aislados y aplanados, presentan cariopicnosis importante y la mayoría de las células tiene una afinidad eosinofílica. - Si el estímulo estrogénico es importante y persiste durante mucho tiempo, más de tres semanas, las células pueden presentar plegamientos aunque normalmente permanecen aisladas. - En la mujer menopaúsica, los estrógenos dan lugar a la aparición de células superficiales. 5.2.2Progesterona La administración aislada de progesterona en una mujer con frotis vaginal atrófico, da lugar a la aparición de células intermedias y superficiales, plegadas y agrupadas. Las células son especialmente cianófilas. Las pequeñas cantidades de estrógenos administrados simultáneamente favorecen dichas reacciones apareciendo imágenes típicas de la fase lútea del ciclo menstrual. La disminución de las células eosinófilas y picnóticas por la acción de la progesterona no es debida a un fenómeno de antagonismo directo, sino solamente a la propiedad particular de la progesterona de provocar una intensa descamación epitelial. 59 TécnicoSuperiorSanitariodeAnatomíaPatológicayCitología Las células epiteliales descaman antes de que hayan tenido tiempo de llegar a su plena madurez. En vez de volverse eosinófilas, se descaman ya en el estadio de células intermedias, aunque esto no implica que el aumento del grosor que sufre el epitelio se detenga. Por tanto, la progesterona produce a nivel vaginal, descamación y proliferación epitelial, pudiendo ser acentuado este efecto, si actúan conjuntamente progesterona y estrógenos. En resumen, la progesterona si se administra sola, se observa una acción proliferativa en el epitelio vaginal. Cuando las condiciones son fisiológicas, su acción no es aislada, sino que es combinada con la acción de la foliculina. Los criterios citológicos de esta acción son la descamación masiva de células plegadas y reunidas en grumos, junto con abundantes células intermedias, que son el resultado de una intensa descamación. 5.2.3Andrógenos En la menopausia avanzada, con atrofia vaginal, los andrógenos provocan una proliferación epitelial de la capa basal e intermedia, con una fuerte carga de glucógeno, pero sin diferenciación completa hasta llegar a formar una capa superficial identificable. Se ha comprobado que estas modificaciones citológicas se corresponden perfectamente con las modificaciones que se observan en los cortes histológicos. Los frotis vaginales que eran atróficos, después de un tiempo, con la administración de testosterona empiezan a cambiar su aspecto. Los leucocitos disminuyen, el frotis aparece más limpio, desapareciendo los glóbulos rojos y restos celulares. Las células vaginales aumentan volviéndose cianófilas, a estos frotis los llamaremos frotis androgénicos. Aunque los niveles hormonales se realizan actualmente por determinaciones específicas en el laboratorio, es preciso tener en cuenta las variaciones que sufre el epitelio vaginal por los cambios en los niveles de dichas hormonas. Actualmente se realizan menos valoraciones hormonales sobre los frotis vaginales, si bien, hay algunos clínicos que las solicitan, por ello los Cito-Técnicos tienen que estar puestos al día en estos conocimientos. Para realizar el diagnóstico hormonal en el frotis vaginal, la toma de muestra debe realizarse de la pared lateral de la vagina que es donde se aprecian los cambios de plegamiento, agrupamiento y maduración. Tenemos que recibir un amplio resumen de su historia clínica como: edad, fecha de la última regla, tipo menstrual, día que se toma la muestra y si toma algún tratamiento hormonal. Sobre la elección de la técnica de tinción, la idónea es la de Papanicolaou, aunque se pueden observar con otras técnicas (Shorr). Los índices para valoración hormonal se basaran en: 1) Índice de actividad estrogénica: - Índice de cariopicnosis, (células que muestran núcleo picnótico). - Índice de eosinofilia / células con citoplasma eosinófilo) 60 Cito‐DiagnósticodelAparatoGenitalFemenino 2) Índice de actividad progesterónica: - Índice de agrupamiento (grupos celulares con más de cuatro células cada uno). - Índice de plegadura citoplasmáticos. (porcentaje de células con plegamientos 3) Índice de maduración (porcentaje de células basales, intermedias y superficiales.) Atrófico Luteínico Inespecífico Estrogénico SMITT Basales Intermedias Superficiales Valor Maduración 1 +50% ‐50% 0% ‐ 25% 1 ‐ 2 50‐30% 50‐70% 0% 25‐35% 2 – 1 30‐10% 70‐90% 0% 35‐45% 2 10% 90‐70% 10‐30% 45‐55% 2 ‐ 3 0% 60‐70% 30‐40% 55‐60% 3 – 2 0% 60‐50% 40‐50% 60‐65% 3 0% 50‐40% 50‐60% 65‐70% 3 ‐ 4 0% 40‐30% 60‐70% 70‐75% 4 – 3 0% 30‐20% 70‐80% 75‐80% 4 0% ‐20% +80% +80% 5.2.3.1Lospatroneshormonalesfisiológicos. En estos patrones incluimos desde el epitelio vaginal que presenta la recién nacida hasta el epitelio que presenta una mujer en menopausia. Recién nacida: A través de la placenta, la recién nacida, ha tenido un nivel de hormonas que le dura aproximadamente hasta los 10 días después de su nacimiento, bajando después por lo tanto, su patrón epitelial o grado de maduración es parecido al de una mujer embarazada a término. En la infancia el epitelio tiene un aspecto atrófico porque en índice de hormonas es bajo hasta la pubertad, siendo el índice de maduración muy bajo. La pubertad, con la subida del nivel de estrógenos durante todo el ciclo menstrual, aunque los primeros ciclos son anovulatorios, la citología nos mostrará un patrón estrogénico. La mujer adulta con ciclo menstrual normal, durante los primeros seis días el frotis será hemático, se pueden ver células endometriales aisladas y leucocitos polimorfonucleares. A partir del sétimo día el epitelio escamoso presenta células con núcleos pignóticos hasta el día catorce o quince cuando está el efecto estrogénico mayor. La segunda mitad del ciclo, se caracteriza por el predominio de la progesterona siendo muy frecuentes las plegaduras y la tendencia a la agrupación celular. 61 TécnicoSuperiorSanitariodeAnatomíaPatológicayCitología En la menopausia, hay una disminución importante de la actividad estrogénica, disminuye el epitelio y disminuye la maduración de las células, en las extensiones podemos observar Células parabasales y basales porque el frotis atrófico se instaura progresivamente. Lo más fácil sería pensar que la célula toma un aspecto atrófico después de la menopausia, sin embargo, el epitelio vaginal a veces, puede mostrar cambios cíclicos incluso después de la menopausia, pero la completa atrofia solamente puede presentarse algunos años después de su instauración. Durante la menopausia se pueden ver tres clases de extensiones vaginales, pudiéndose clasificar, a grosos modo, en: ─ Extensiones que pertenecen al comienzo de la menopausia cuando el epitelio escamoso, está todavía proliferando suficientemente. El frotis vaginal es similar al que se presenta en el periodo premenstrual, predominando las células intermedias y superficiales, siendo más pálidas, pequeñas y basófilas. Los núcleos son vesiculares. Los bacilos de Döderlein pueden ser abundantes, acentuándose la citólisis, pudiéndose ver algunos núcleos desnudos. ─ Extensiones cuando está la menopausia instaurada: Cambios celulares en la menopausia. Por tanto la proliferación disminuye, predominando las células intermedias que son más pequeñas que al principio de la menopausia, presentándose agrupadas. El citoplasma se tiñe tenuemente y es basófilo con contornos netos. Los núcleos son vesiculares con un tamaño uniforme y fácilmente reconocibles. Se observan algunos núcleos desnudos por la citólisis. Abundan los leucocitos y los bacilos de döderlein. Cuando en este tipo de frotis aparecen células superficiales y parabasales entre las células intermedias, se denomina de tipo mixto. ─ Extensiones en las que ha cesado la proliferación: Se observan frotis puramente atróficos apareciendo principalmente células parabasales con variaciones en el tamaño tanto de núcleos como de las células. Los citoplasmas son redondos o elípticos y de tamaño uniforme, basófilos, con bordes nítidos incluso se pueden apreciar más gruesos. El citoplasma en su totalidad es denso y homogéneo. Los núcleos son relativamente grandes y redondeados. Algunas células son fuertemente eosinófilas y se tiñen de un color naranja intenso, siendo los núcleos de estas células, pequeños y tienen un aspecto pignótico. 62 Cito‐DiagnósticodelAparatoGenitalFemenino En el frotis se pueden apreciar leucocitos, viejos componentes sanguíneos o sustancias nucleares rotas por cariorrexis, formando estructuras filamentosas. También observaremos núcleos desnudos a causa de la citólisis. Habitualmente no se ven bacilos de döderlein. En algunas preparaciones se ven pequeñas células angulares, eosinófilas teñidas de color naranja. En algunas ocasiones podemos apreciar formaciones globulosas de color azul oscuro redondas o elípticas, hay que tener cuidado porque se pueden confundir con núcleos de células malignas, pero se pueden diferenciar de ellos por una sustancia de color azul oscuro, redonda, que se asemeja a un núcleo amorfo y se encuentra en el centro de cada formación. Estas tres fases de la menopausia aparecen sucesivamente por lo que es difícil a menudo diferenciar donde empieza y termina cada uno. 63 TécnicoSuperiorSanitariodeAnatomíaPatológicayCitología La citología vaginal durante la menopausia provocada por irradiación no es siempre igual, difiere, dependiendo si la menopausia es de origen ovárico o endometrial. En ambos casos la descripción de los frotis vaginales durante la menopausia natural no es aplicable porque la irradiación puede afectar de una forma directa a las células vaginales. 64 Cito‐DiagnósticodelAparatoGenitalFemenino 5.2.4Citologíadelembarazoylactancia 5.2.4.1Característicasdelascélulasvaginalesduranteelembarazo Durante el embarazo podemos ver células intermedias fuertemente agrupadas, aparecen en forma de nave o a veces redondeada, por lo que reciben el nombre de células naviculares. Los bordes de estas células son marcados, engrosados y a veces dobles, presentan un gran cúmulo de glucógeno, que parece como si desplazara al citoplasma hacia los bordes. Se observan gran número de bacilos de döderlein por lo que la citólisis es pronunciada. También aparecen células endocervicales en mayor número de lo habitual por los cambios que sufre el cérvix. Cuando en una mujer gestante se observa un frotis atrófico, tiene gran importancia pues puede ser debido a una insuficiencia placentaria. Raramente podremos ver células trofoblásticas, son células gigantes multinucleadas de citoplasma denso y núcleos abigarrados, aunque las células del sincitiotrofoblasto se pueden presentar también en algunos casos de tumores malignos. 5.2.4.2Aspectodelaextensióncitológicaenelaborto. Cuando en los frotis con células naviculares y citólisis comienzan a aparecer de repente células de aspecto más maduro, ello puede indicar una tendencia hacia el aborto, sin embargo este hecho carece de confirmación porque los frotis típicos de embarazo aparecen a partir del cuarto mes. Aunque el estudio de frotis citológicos no se suele realizar en periodos de amenaza de aborto o aborto en curso, a continuación a modo de esquema describimos los signos que podemos observar en estas preparaciones. Numerosos leucocitos y restos celulares. Presencia de células superficiales eosinófilas con núcleo pignótico. Aumento en gran cantidad de moco y de histiocitos. En los casos de muerte del feto, las extensiones pueden presentar un aspecto de citología del posparto. Después del aborto, la citología puede presentar restos aislados de trofoblasto, en el caso de un aborto incompleto. Si existe un aborto retenido, se pueden encontrar fibras musculares sobre todo en la segunda mitad de la gestación. 5.2.4.3Trofoblastos En algunos casos como el aborto incompleto, a veces vemos trofoblastos en las extensiones vaginales, estos los podemos clasificar como: sincitio y citotrofoblastos. 5.2.4.4Sincitiotofoblasto El sincitiotofoblasto es grande, redondo o elíptico y con abundantes núcleos. Los núcleos son de forma redonda y su tamaño es uniforme. 65 TécnicoSuperiorSanitariodeAnatomíaPatológicayCitología Se localizan hacia el centro de la célula, estando incluso sobrepuestos. La cromatina es finamente granular y su distribución es uniforme. El citoplasma es más bien denso, su tensión es basófila intensa. Se pueden observar vacuolizaciones delicadamente espumosas. En el fondo se puede apreciar sangre con numerosos eritrocitos, leucocitos etc. Los citotrofoblastos (células de tipo Langhans).A diferencia del tipo de célula gigante del sincitiotrofoblasto, los citotrofoblastos aparecen como grupo de células individuales. Su núcleo está situado cerca del centro de la célula. No poseen un tamaño uniforme (anisonucleosis). Su configuración no es uniforme (pleomorfismo. Se ve un contorno nuclear claro y tiene sincitiotrofoblasto, de aspecto finamente granulosa. menos cromatina que un A veces se ve un nucleolo. Su citoplasma no es uniforme, a menudo es poligonal. El citoplasma es escaso en relación con el tamaño del núcleo, pudiendo ver los bordes aunque no claros. El citoplasma es de aspecto espumoso, basófilo y se tiñe suavemente. En el fondo, con frecuencia se observan componentes sanguíneos. 5.2.4.5Aspectodelfrotisenlaroturadebolsa Cuando hay una rotura de bolsa, aparece el líquido amniótico en la vagina. Si bien no se suele realizar ningún estudio citológico en este cuadro clínico, pero como ampliación de nuestros conocimientos, destacaremos que en el frotis vaginal tomado con rotura de bolsa, es característico que veamos células del vérmix caseoso o células anucleadas de revestimiento fetal. 5.2.4.6Aspectodelosfrotisenelposparto El posparto se caracteriza por la ausencia de actividad estrogénica, dando una imagen de frotis atrófico, si bien esta inactividad se mantiene durante seis meses, pasados los cuales el epitelio recupera paulatinamente su aspecto. Si después de este periodo, la citología sigue mostrando un frotis atrófico, o sea, sin actividad estrogénica, la mujer debe de ser sometida a estudios hormonales de estimulación con hormonas como hemos descrito anteriormente. 5.3Alteracionesdelosfrotiscitológicos 5.3.1Alteracionesenlosfrotiscitológicosdecausahormonal 5.3.1.1Amenorreaoausenciademenstruación La amenorrea puede ser espontánea o sea sin causa aparente que la justifique, o Inducida por métodos clínicos o quirúrgicos, en las espontáneas no se incluyen amenorreas debidas a embarazo, lactancia y menopausia, el frotis tendrá características 66 Cito‐DiagnósticodelAparatoGenitalFemenino estrogénicas, excepto en algunas situaciones fisiológicas (menopausia) y patológicas en la que es atrófico. En las amenorreas esporádicas se pueden distinguir dos grupos: 1) Amenorrea Primaria Se le denomina a las pacientes que no han tenido nunca la regla, o sea en su historia nos dicen que la menarquia no ha aparecido, con la citología se detecta el grado de maduración del epitelio, pues la mayoría de las pacientes padecen algún trastorno endocrino (hormonal). Síndrome de Turner Los frotis vaginales de las mujeres que padecen este síndrome aparecen como atróficos, siendo una deficiencia cromosómica, correspondiéndose a un genotipo XO, en el que existe una ausencia de uno de los cromosomas sexuales y de cromatina sexual. Con frecuencia presentan otras anomalías asociadas congénitas. Síndrome de feminización testicular Es una enfermedad poco habitual, son pacientes con XY, con fenotipo de hembra al nacer. Tienen vagina pero carecen de ovarios que son sustituidos por testículos, generalmente intrabdominales, hay desarrollo de las mamas pero también amenorrea. El frotis vaginal presenta una maduración del epitelio escamoso a veces importante con ausencia de cromatina sexual. Insuficiencia hipofisiaria Los frotis vaginales de estas enfermas presentan cromatina sexual y una maduración del epitelio escamoso variable. Ausencia congénita de útero Son enfermas con amenorrea primaria, si bien presentan una maduración del epitelio normal y poseen cromatina sexual. 2) Amenorrea Secundaria Se considera amenorrea secundaria a la desaparición de la regla en aquellas mujeres que han tenido reglas normales y que no es provocada por gestación. En este tipo de amenorreas se engloban, las producidas por alteraciones ováricas y en la función hipofiso-ovárica como el Síndrome de Stein-Leventhal (poliquistosis ovárica), hirsutismo, obesidad y esterilidad, llamadas amenorreas secundarias espontáneas y amenorreas secundarias inducidas a las producidas por terapia como radioterapia, cirugía o administración de hormonas. Tumores ováricos Los tumores de la granulosa y de la teca producen sustancias que se comportan en el epitelio escamoso como estrógenos, apareciendo en los frotis un aspecto estrogénico anormal, teniendo mucha importancia en los frotis de mujeres menopaúsicas. Pubertad precoz Aparece en niñas jóvenes y presentan frotis vaginales normales con sus variaciones cíclicas. Es una enfermedad poco frecuente, de causa desconocida, lo más probable es que exista una alteración del hipotálamo-hipofisiaria que acelera la iniciación de la pubertad. 67 TécnicoSuperiorSanitariodeAnatomíaPatológicayCitología Insuficiencia hepática Cuando existe una insuficiencia hepática hay en ocasiones un déficit del metabolismo de los estrógenos, aumentando y produciendo en estas enfermas frotis vaginales de tipo estrogénico. Cambios citológicos inducidos por el tratamiento hormonal Dependiendo del tipo de hormonas que se administren a la enferma, las extensiones citológicas serán de aspecto estrogénico o progesterónico, incluso cuando se administren andrógenos. El efecto dependerá del grado de maduración del epitelio sobre el que va a actuar. 5.3.2Otrasalteracionesdelosfrotiscitológicos Como en la unidad didáctica número dos, hemos descrito las patologías ginecológicas, solo nos queda hacer hincapié en la observación de esas patologías y componentes a través del microscopio en la tomas o frotis citológicos. 5.3.2.1BacilosdeDöderlein Son bacilos gran positivos que se observan en los frotis vaginales rutinarios, se tiñen de color azul claro con la Técnica de Papanicolaou. Estos bacilos degradan el glucógeno que existe en las células escamosas convirtiéndolo en ácido láctico, que mantiene el pH vaginal. Son más abundantes durante la segunda mitad de ciclo, en la fase secretora. Se les hace responsable de la citólisis, por eso cuando hay un aumento de bacilos de Döderlein se observan en las tomas citológicas abundantes núcleos desnudos. 5.3.2.2Espermatozoides Carecen de importancia diagnostica, si bien los podemos observar en los frotis vaginales. Con la Técnica de Papanicolaou la mitad superior de la cabeza se tiñe débilmente, y la mitad inferior se tiñe en azul oscuro, si están bien conservados se les puede apreciar la cola que se teñirá de color rosa pálido. 5.3.2.3Inflamación En los procesos fisiopatológicos, la aparición aislada de leucocitos no es señal de inflamación porque ocurre normalmente en algunas fases del ciclo. Si en un frotis citológico se observan muchos leucocitos polimorfonucleares (después del décimo día del ciclo) indican una inflamación aguda. En los frotis se pueden observar superposiciones de leucocitos, que impida la valoración de muchas zonas, cuando esto ocurre esta indicado repetir la toma citológica después del tratamiento antiinflamatorio. En las inflamaciones crónicas aparecen abundante linfocitos y células plasmáticas, los linfocitos y linfoblastos pueden presentar en ocasiones una cromatina de grano grueso con nucleolos prominentes, hay que tener el máximo cuidado para no confundirlos con células carcinomatosas de epitelio plano y maduras, o con células de linfoma. La presencia de histiocitos en la extensión indica una inflamación crónica, pudiendo ser de forma grandes y pequeñas, con citoplasma espumoso, pálido y cianófilo con contornos celulares y precisos. 68 Cito‐DiagnósticodelAparatoGenitalFemenino Se pueden ver núcleos de forma y tamaño variables como redondos y ovales con finos, pequeños y redondos micro-nucleolos. Es frecuente encontrar células gigantes histiocitarias polinucleares después de la radioterapia o en el proceso de una colpitis crónica en una mujer menopausica. Estas células gigantes histiocitarias conservan la relación núcleo citoplasma. Las cervicitis aguda y crónica son el resultado de procesos infecciosos por parte de numerosos micro-organismos como estafilococos, estreptococos o enterococos. Aunque algunos de estos micro-organismos pueden ser trasmitidos por vía sexual, otros son por cuerpos extraños como fragmentos residuales de tampones etc. Un signo claro es la secreción vaginal purulenta. El cuello uterino inflamado aparece congestionado con edema. Los síntomas que aparecen en los procesos inflamatorios e infecciosos se pueden resumir en dolor local, prurito y leucorrea. Bajo el punto de vista citológico, podemos decir que en estos procesos observaremos Células inflamatorias en alguna medida, cambios en el epitelio escamoso. Como hemos descrito aparecen leucocitos e histiocitos. Las células escamosas pueden presentar cambios degenerativos como halos perinucleares, algunas áreas del citoplasma aparece con eosinofilia y otras cianófilas, núcleos pignóticos intensamente basófilos, cariorrexis, células multinucleadas. El epitelio cuando es atacado por un proceso infeccioso, aparte de estos cambios, puede reaccionar efectuando otros cambios como: 5.3.2.4MetaplasiaEscamosa El epitelio endocervical es sustituido por epitelio escamoso, de menor tamaño que las células escamosas maduras, estas también pueden sufrir unos cambios inflamatorios y fenómenos de queratinización. 5.3.2.5CélulasReparativas Estas células descaman en grupos y afectan a un solo plano, los bordes citoplasmáticos están mal definidos, se observan núcleos voluminosos, hay un refuerzo de la membrana nuclear, y se pueden ver algunas figuras de mitosis. 5.3.2.6Hiperqueratosis. Se observan células en grupos o aisladas, sin núcleo y con citoplasmas eosinófilos. 5.3.2.7Hiperplasiadecélulasdereserva. Observaremos células parecidas a las metaplásicas, con bordes bien definidos y más pequeñas. A continuación describiremos algunos trastornos infecciosos (vaginitis inespecífica) que pueden ser producidos por, bacterias, hongos parásitos, y virus. 69 TécnicoSuperiorSanitariodeAnatomíaPatológicayCitología 5.3.2.8Leptothrixvaginalis Los Leptothrix son poco frecuentes y tienen poca importancia clínica. Esquema de Leptothix vaginalis. En los frotis vaginales podemos observar su presencia en grupos o individuales, no se dividen en ramas y al microscopio tienen un aspecto de pelos, a más aumento podemos observar que estos filamentos están segmentados. 5.3.2.9InfecciónporGardnerella.(Bacteria) Es un cocobacilo gramnegativo responsable de una parte importante de las vaginitis inespecíficas. La biopsia en general es normal porque este microorganismo no penetra en la mucosa ni produce una reacción inflamatoria. El diagnóstico se establece por una citología con la tinción de Papanicolaou donde se observa que las células pavimentosas están cubiertas por cocobacilos (células clave) y no se acompañan de reacción inflamatoria significativa 5.3.2.10CándidaalbicansoMoniliaalbicans La Cándida albicans o Monilia albicans es una clase de hongo con pseudo micelios, están formados por hongos ramificados en forma de yemas ovales y por hifas, alargadas en forma de cañas de bambú, Gram positivas. La candidiasis o moniliasis es una infección producida por este hongo. Con la Técnica de Papanicolaou se observan las esporas pequeñas y elípticas, con un color rojizo- marrón y presentando doble refracción, moviendo el foco hacia arriba y hacia abajo podremos identificar los bordes. Las hifas se tiñen suavemente, son mucho más evidentes con la tinción de Gram. 5.3.2.11Actinomyces. La actinomicosis está asociada al dispositivo intrauterino, aunque es posible que existan otros focos. Esta infección no es frecuente, se trata de un bacilo Gram-positivo que penetraría en el tracto genital a través de la cola del DIU. Los microorganismos ascienden para infectar las trompas de Falopio y los ovarios. 70 Cito‐DiagnósticodelAparatoGenitalFemenino En las triples tomas citológicas y con la tinción de Papanicolau, podemos observar varias formaciones como, colonias densas y que están en su periferia rodeados de filamentos, en otros frotis se pueden observar como esos filamentos son más largos y gruesas dando una imagen de proyecciones abundantes hacia el exterior. Este tipo de infección depende mucho o mejor dicho, está en estrecha relación con el tiempo de inserción y tipo de DIU. 5.3.2.12Trichomonasvaginalis. Las Trichomonas son protozoos de forma elíptica o de pera con un núcleo situado cerca de un extremo. Presentan cuatro flagelos con capacidad para moverse, y con una membrana ondulante. En la citología vaginal las Trichomonas se observan del mismo tamaño que el núcleo de una célula parabasal, y con una forma elíptica con un extremo puntiagudo, siendo su contorno difuso y adquiriendo un color azul-gris claro. A veces se nos presenta en extensión de forma desperdigada pero lo más frecuente es verlos rodeando a una célula superficial escamosa. En la preparación podemos observar al mismo tiempo leucocito polimorfonucleares, exudado y moco teñido de azul claro, lógicamente se aprecia un fondo de aspecto sucio incluyendo algunas células epiteliales degeneradas. 5.3.2.13Tuberculosis Citológicamente es muy difícil hacer el diagnóstico de tuberculosis en las tomas vaginales. Las células gigantes de Langhans raramente se encuentran en los frotis vaginales de rutina, sin embargo en las mujeres que se sospeche tuberculosis se pueden ver las Células gigantes de Langhans en la toma cervical o toma endometrial que se haga durante o inmediatamente después de la menstruación. 71 TécnicoSuperiorSanitariodeAnatomíaPatológicayCitología Al microscopio podemos observar una célula gigante con borde difuso y citoplasma homogéneo, los núcleos serán redondos o elípticos sobre puestos unos y otros, la cromatina es uniforme y de granos gruesos. En la preparación se puede apreciar numerosos linfocitos, Células plasmáticas y epiteliales. 5.3.2.14Infecciónvírica Herpes Las infecciones por herpes en la vagina y en los órganos genitales está adquiriendo cada día mayor importancia en el campo del citodiagnóstico clínico. Sobre un fondo inflamatorio se observan Células gigantes multinucleadas, con borde relativamente definido, los núcleos son grandes con forma redondeada u oval y rara vez pueden aparecer con forma arriñonada, la membrana nuclear esta engrosada y el interior se tiñe débilmente observándose una cromatina borrosa El hecho más llamativo en esta enfermedad es la aparición de cuerpos de inclusión que pueden dar al núcleo un aspecto de “cristal esmerilado”. Las alteraciones que se presentan en el citoplasma son muy variadas y no tan específicas como las alteraciones nucleares, los citoplasmas pueden verse con diferente tamaño y con cambios tintoriales que, junto con las alteraciones nucleares, tenemos que tener cuidado para no hacer una interpretación de proceso neoplásico. Como hemos descrito, núcleos en cristal esmerilado, multinucleación y cuerpos de inclusión con fondo inflamatorio, diagnóstico de herpes. El herpes simple es un gran patógeno del aparato genital femenino, siendo el tipo II el causante del llamado herpes genital que afecta a vulva, vagina y cérvix. Virus del papiloma humano o papavavirus. El VPH o virus del papiloma humano, tiene mucha importancia en el diagnóstico citológico de la triple toma, pues es un patógeno que se relaciona con el desarrollo de las lesiones precancerosas. Todos estos virus están relacionados con el desarrollo de papilomas que tienden a degenerarse, ya sea a una formación benigna o maligna. Se consideran dos tipos de virus según su agresividad, la secuencia 6 y 11, se pueden considerar de bajo riesgo, mientras la 16 y 18, son de alto riesgo. La transmisión del VPH es por vía sexual, aunque solo se produce cuando el virus está en forma de virión. La infección por este virus induce a cambios característicos del epitelio escamoso. Se pueden definir tres tipos de lesiones, si bien para su observación y diagnóstico, lo que vamos a distinguir son los coilocitos, estas son células escamosas, con núcleos grandes e hipercromáticos, presentando membranas nucleares irregulares, aunque lo mas característico es unos evidentes halos claros, traslúcidos y grandes perinucleares. En las células del cérvix se puede apreciar una paraqueratosis/disqueratosis, o sea, las células escamosas del cérvix sufren una queratinización anormal, estas células se pueden observar aisladas o en grupos, con la tinción de Papanicolaou presentan un citoplasma orangófilo, con núcleos picnóticos, que a veces, son difícil de apreciar por el agrupamiento con que en ocasiones se presentan. 72 Cito‐DiagnósticodelAparatoGenitalFemenino En esta infección se pueden distinguir tres tipos de lesiones: ─ Lesión plana, es la más frecuente, se observan abundantes coilocitos y Células queratinizadas con núcleos picnóticos, en la toma del cérvix. ─ Lesión exofítica o papilar, se diferencia en que en esta lesión aparecen finas proyecciones papilares, centradas por un vaso, llamados condilomas acuminados, esta lesión es más frecuente en vulva que en cérvix. ─ Lesión invertida, es rara verla en cérvix, y se le denomina invertida por ser una lesión con presencia de epitelio escamoso con cambios de VPH en las estructuras glandulares. 5.3.2.15LesionesPrecancerosas Dentro de estas lesiones podemos enumerar el VPH que aparte de ser un virus, que ocasiona las lesiones descritas anteriormente con imágenes de coilocitos etc., se considera una de las lesiones más frecuentes que pueden degenerar en neoplasia. La displasia se caracteriza por la alteración en la maduración y proliferación del epitelio, acompañada de atipias nucleares. Papanicolau ya describió las displasias, dividiéndolas en leves, moderadas y graves, esta relación sufrió cambios sobre todo para relacionar las atipias celulares con el pronóstico de la enfermedad, quedando como CIN-I o displasia leve, CIN-II o displasia moderada y CIN-III o displasia grave, incluyendo en este grupo el carcinoma in-situ. Bethesda introdujo el concepto de SIL o lesión intraepitelial escamosa, reflejando datos morfológicos de las lesiones escamosas, preinvasivas e invasivas, estableciendo los riegos de malignización, modificando la clasificación en: ─ SIL de bajo grado que corresponde a displasia leve o CIN -I, engloba las lesiones que regresan o no progresan aunque persistan en su estado y a las lesiones producidas por VPH ─ SIL de alto grado que corresponde a displasia moderada o CIN-II y displasia grave o CIN-III, engloba a lesiones que pueden evolucionar a carcinoma invasor. En los frotis citológicos se puede observar: CIN-I o SIL de Bajo Grado. Aparecen células semejantes a células escamosas superficiales, en grupos o sueltas, con citoplasmas claros y bien definidos. Los núcleos se ven ligeramente aumentados de tamaño, con cromatina de gránulos finos y distribución homogénea, con tinción ligeramente hipercromática. CIN-II o SIL de Alto Grado. Dentro de este grupo se observan imágenes de displasia leve (atipias en células superficiales) y células con la relación núcleo / citoplasma que esta alterado, o sea, aumento del núcleo con cromatina de distribución homogénea, al mismo tiempo que disminuye el citoplasma, se observan atipias en células intermedias y parabasales altas, con núcleos hipercromáticos. 73 TécnicoSuperiorSanitariodeAnatomíaPatológicayCitología CIN-III o SIL de Alto Grado o Carcinoma in-situ. Se observan células de aspecto parabasal, de forma irregular y variable (redondeadas, ovales y fusiformes), los citoplasmas son pequeños y tienen un discreto anillo alrededor del núcleo, los núcleos están aumentados de tamaño e hipercromáticos, con cromatina tosca, granular y con una distribución no homogénea. En las lesiones queratinizante se ven células grandes con citoplasmas amplios y eosinófilos, los núcleos están muy aumentados alcanzando las dos terceras partes del total de la superficie celular. 5.3.2.16LesionesPre‐NeoplásicasdelEpitelioGlandular. Adenocarcinoma in-situ. En los frotis podemos observar el fondo limpio, o mas frecuentemente un fondo sucio, aunque citológicamente lo más llamativo es la disposición celular, con células glandulares formando placas y los bordes se ven seudo estratificados y con núcleos amontonados. Diagnóstico de las neoplasias. Se deben hacer toda clase de esfuerzos para evitar un diagnostico incorrecto, como falso positivo o falso negativo. Por lo tanto en el examen de un frotis tiene que tenerse en cuenta varias cosas fundamentales como: El objetivo del examen de la extensión citológica, es ayudar a detectar una tumoración maligna en sus estadios iniciales. Por lo que carece de sentido hacer frotis solamente a enfermas en las que el diagnóstico de carcinoma se puede hacer de una manera obvia, ya sea clínica o microscópicamente. Por ejemplo, en el caso de un carcinoma del epitelio escamoso en estado avanzado, a veces se hace imposible obtener células representativas para hacer el diagnostico por el necrosamiento que aparece en este estadio, en estos casos se debe de dar más importancia al diagnóstico histológico y clínico. Las extensiones se deben de examinar primero a bajo aumento, para obtener una impresión del conjunto de todas las células. Cuando se encuentra una célula de aspecto dudoso, no se debe hacer un diagnóstico hasta que no se halla revisado toda la extensión, si a bajo aumento(x 100) encontramos dicha células, hay que revisar los detalles citoplasmáticos y nucleares a mayor aumento. Cuando se encuentre una sola célula sospechosa se pasará al patólogo para su valoración casi siempre en estos casos los frotis citológicos se repiten. El grado de tinción y el tamaño del núcleo se deben comparar con leucocitos y otras células repartidas en la extensión, no es correcto hacer el diagnostico de hipercromatismo basándose en la observación de una célula aislada. Cuando una célula confunde y hay duda siempre hay que ser honestos y pasar al patólogo para su valoración. Un diagnostico negativo en citología no supone la exclusión de un tumor maligno, sino que en esa toma no se observan células malignas. 74 Cito‐DiagnósticodelAparatoGenitalFemenino Tanto los falsos negativos como los falsos positivos hay que evitarlos si bien en los falsos negativos se puede retrasar el diagnostico de un carcinoma a veces con resultados trágicos por dicho retraso. El papel del Citotécnico por estas razones tiene que ser responsable al 100% pues en nuestras manos está el eliminar los falsos negativos. La historia clínica, dan una información valorable, por lo que es irresponsable despreciarlas y valorar solo la extensión citológica. A veces los diagnósticos pueden ser complicados por las alteraciones citológicas que presenten, tales como fijación, coloración etc… que pueden alterar las formas y tinciones de las células, dando una imagen distinta de la real. De células escamosas normales a células malignas. Cuando se tiene mucha experiencia podemos realizar diagnósticos aunque las preparaciones presenten algunas alteraciones, siempre que estas no influyan el la observación general. En los laboratorios hay que tener en cuenta que aparte de los artefactos por el procesamiento del frotis citológico, puede aparecer contaminantes que tienen que ser muy observados y detectados para evitar los falsos positivos en el diagnostico por contaminación de otros frotis 5.3.2.17CriteriosDiagnósticosparaCélulasMalignas. El Citotécnico debe examinar cada célula con alteraciones para poder apreciar si corresponde a células con perfiles de malignidad. 75 TécnicoSuperiorSanitariodeAnatomíaPatológicayCitología Los conocimientos que el Citotécnico adquiere en la teoría no puede nunca sustituir a la práctica, pues además de adquirir velocidad en su valoración, cogerá soltura diagnostica, sabiendo valorar cualquier frotis con células dudosas. Anormalidades del núcleo. El tamaño no es uniforme y generalmente está aumentado. Su forma es irregular alargadas, en forma de huso o bizarra. El tamaño nuclear es grande perdiendo la relación n/c en algunos casos el núcleo carece de citoplasma. Los núcleos se ven hipercromáticos con cromatina irregular y con frecuencia se aprecian acúmulos de cromatina, esta tiende a agruparse hacia el contorno nuclear. Se pueden observar a veces nucleolos sobre todo si se trata de células procedentes de un adenocarcinoma. Se pueden observar mitosis en células escamosas que nos indican malignidad, pero no guardan una relación directa con el estado del carcinoma. La mitosis en una célula endocervical tiene poco significado diagnóstico. Anormalidades del Citoplasma. Su forma puede ser variada, (fusiforme, elongada o de bastón) no se le suele observar uniforme, tenemos que prestar mucha atención en las células cuando aparecen con un citoplasma pequeño en relación con el tamaño del núcleo y con bordes citoplasmáticos mal definidos Presenta vacuolización siendo características de las células procedentes de un adenocarcinoma, aunque también indican degeneración, y procesos inflamatorios benignos o metaplásicos. Se pueden observar algunos cambios tintoriales con la tinción del citoplasma de una forma más intensa. En los frotis puede haber signos de inflamación o de hemorragia, aumentando los leucocitos polimorfonucleares, linfocitos, eritrocitos e histiocitos, apareciendo la extensión con fondo sucio. Se observa una marcada maduración del epitelio escamoso, apareciendo células superficiales aunque la paciente sea menopausica, esto se pude apreciar en el adenocarcinoma. El Carcinoma in-situ. El carcinoma in-situ es una lesión carcinomatosa confinada a los límites del epitelio de la mucosa. Nunca invade el estroma por debajo de la membrana basal. Las características citológicas de la lesión son: ─ Estas células se encuentran más frecuentemente en las extensiones cervicales, porque no es frecuente que descamen por si solas y aparezcan en los frotis vaginales. ─ A veces se observan signos de necrosis e inflamación que se limitan exclusivamente al fondo de la preparación, por ello la preparación tiene 76 Cito‐DiagnósticodelAparatoGenitalFemenino apariencia de limpia y raramente incluye sucios fragmentos celulares, leucocitos polimorfonucleares y eritrocitos. Todo esto tiene menos valor cuando existe una cervicitis al mismo tiempo que el carcinoma in-situ. Estas células son células parabasales discarióticas con escasas células malignas que son acompañadas por abundantes células escamosas benignas. Característica del carcinoma in-situ Núcleo El tamaño es ligeramente aumentado pero no es muy grande a menudo. Su forma es muy variable, puede ser elíptico, redondo, poligonal, y otras formaciones bizarras, a veces se ven los bordes pero cuando hay degeneración no se pueden distinguir. La cromatina es abundante e hipercromática, lo que hace que el núcleo se tiña hipercromático e irregular, perdiendo su configuración normal. Cuando el núcleo está degenerado es hipocromático y está degenerado. En los frotis con estas características se pueden observar mitosis y nucleolos, apareciendo también células multinucleadas. Por lo general observaremos que el núcleo de la célula maligna del carcinoma insitu, es más uniforme ya sea en tamaño o en forma que los núcleos de las células de un carcinoma invasor. Esquema del tejido del cérvix uterino. 77 TécnicoSuperiorSanitariodeAnatomíaPatológicayCitología Citoplasma Como hemos comentado la relación núcleo/ citoplasma está alterada, esta proporción aumenta a medida que disminuye el grado de diferenciación. Su forma es variada acompañando al núcleo, a veces es fusiforme, de todas formas estas variaciones son menores que en el carcinoma invasor. Algunas veces veremos células con bordes citoplasmáticos difusos, que pueden ser delgados y gruesos. La tensión suele ser basofilia fuerte, azul, aunque a menudo se tiñe de naranja, eosinofilia cuando la queratinización es acentuada. Cuando hay degeneración se ve vacuolización. En ocasiones, una célula maligna está englobada en otra de su misma naturaleza. Carcinoma Invasor Observaremos en conjunto, que la célula es más pequeña que la célula pavimentosa normal, porque la célula maligna indiferenciada es más pequeña que la célula diferenciada queratinizada. Algunos autores describen que el número de células malignas que se ven en el frotis vaginal, pueden tener una relación directa con el estado de la lesión maligna o carcinoma. Una de las características de estas células es que se pueden presentar aisladas o agrupadas. En los frotis podemos observar también fragmentos celulares, por la necrosis que produce y leucocitos polimorfonucleares debido a la inflamación. En este carcinoma (invasor), es característica la presencia de células malignas de todo tipo, y por supuesto algunas veces se ven células discarióticas. En ocasiones las células malignas forman perlas. Las propiedades tintoriales son: Los nucleolos eosinófilos se ven claramente. Los citoplasmas son basófilos en el 50% de las extensiones, con frecuencia en los carcinomas indiferenciados. El 25% se tiñe de eosinófilo naranja, rojo y amarillo, presentándose con frecuencia en un carcinoma diferenciado queratinizado, el otro 25% no muestra una coloración definitiva. Una vacuola citoplasmática puede observarse en la célula degenerada, pero es más a menudo en el adenocarcinoma. 78 Cito‐DiagnósticodelAparatoGenitalFemenino Esquema de Células malignas de varios tipos. 79 UNIDADDIDÁCTICAVI SISTEMABETHESDA Cito‐DiagnósticodelAparatoGenitalFemenino 6.1Introducción El problema básico de la comunicación es una elección correcta de las palabras por lo que todo lo concerniente a la nomenclatura de las lesiones cervicales no es un asunto banal. La importancia de este hecho está perfectamente ejemplificada por la inacabable controversia respecto a los términos que deben ser utilizados para designarlas lo que ha originado, con el paso del tiempo, una amplia y a veces confusa terminología, utilizándose diferentes denominaciones para una misma lesión o, más rara vez, nombrando con el mismo término lesiones diferentes. Por otra parte, si exceptuamos la Clasificación numérica de Papanicolaou en 5 clases o grados progresivos (I, II, III, IV, V), por ser exclusivamente citológica, la nomenclatura de los hallazgos en citología ha ido siempre estrechamente ligada a la histológica, de manera que, con esta excepción comentada, la evolución histórica de ambas puede abordarse conjuntamente y esquematizarse de la siguiente manera: 6.2Conceptosprecursores En 1910, Rubin (Nueva York) habla de cáncer incipiente para nominar el concepto de transformación neoplásica confinada al espesor del epitelio. En 1912, Schottländer y Kermauner (Berlín) utilizan el término de carcinoma temprano para designar los cambios que observaban en el epitelio adyacente al carcinoma cervical invasor. Veinte años mas tarde, Broders (Nueva York), basándose en su experiencia en Dermatopatología, emplea el de carcinoma in situ (CIS) al describir este cuadro histológico. Otros términos utilizados fueron el de enfermedad de Bowen cervical por Lecène (París), también en 1932, y el de carcinoma intraepitelial no invasor por Galvin y Te Linde (Nueva York) en 1933. Pese a la proliferación de estos y otros muchos sinónimos, el término acuñado por Broders es el que ha permanecido para designar estas lesiones caracterizadas por la completa sustitución del epitelio por células anómalas semejantes a las células del carcinoma invasivo. Es de resaltar que, de forma paradójica, en el trabajo inicial del afortunado Broders no figuraba la localización cervical dentro de los ejemplos de CIS. 6.3Sistemadisplasia‐carcinomainsitu Con la progresiva introducción de la citología y biopsia sistemáticas se vio con claridad que el espectro de anomalías del epitelio cervical era mucho más amplio, siendo frecuentes otros cambios epiteliales menos severos que el CIS. En 1949, Papanicolaou introduce los términos de «displasia» en histopatología y «discariosis» en citología para designar dichos cambios. Posteriormente, en 1953, Reagan (Cleveland) consagra el término en histopatología cervical al denominar a estas lesiones, menos severas que el CIS, hiperplasias atípicas o displasias, señalando que la mayoría de ellas, dejadas a su evolución, regresan o permanecen inalteradas por mucho tiempo. Así pues, contrariamente a lo que se piensa y como bien señala Peluffo en su revisión del tema, es Papanicolaou y no Reagan el que introduce por primera vez el término «displasia» en patología cervical. En 1961, en el Primer Congreso Internacional de Citología celebrado en Viena, se acuerda que los términos para designar citológicamente las tres lesiones cervicales mayores sean: carcinoma invasor, carcinoma in situ y displasia. Esta última fue graduada como leve, moderada, y severa o grave, a las que habría que añadir el CIS ya definido. La clasificación, utilizada tanto en material histológico como citológico, tuvo dos 83 TécnicoSuperiorSanitariodeAnatomíaPatológicayCitología problemas fundamentales; por un lado, el gran desacuerdo respecto a cuándo una lesión debía ser considerada displasia grave o CIS, y por otro, el que muchos clínicos asumían que el CIS y la displasia eran dos lesiones biológicamente distintas e independientes, con distinto potencial maligno, no requiriendo tratamiento las lesiones displásicas. 6.4Neoplasiaintraepitelialcervical(NIC‐CIN) Para solventar estos problemas Richart (Nueva York), en 1967, propuso el término de neoplasia intraepitelial cervical (NIC-CIN) con tres grados progresivos (1, 2,3), incluyéndose en el grado 3 la displasia grave y el CIS de la clasificación anterior (9,10). La ventaja principal, sobre esta, es el reconocimiento de la unidad del proceso patológico lo cual conlleva una relación con las técnicas terapéuticas. Esta clasificación ha sido considerada bastante adecuada durante más de 20 años y por lo tanto la más utilizada internacionalmente. No obstante, un número creciente de publicaciones señalaron el hecho de la sorprendentemente baja seguridad diagnostica, tanto en material cito como histológico, en la parte menos severa del espectro. Se sugirió, por lo tanto, que este sistema de gradación debía ser modificado y sustituido por un sistema binario que segregara los procesos con atipia celular muy discreta de aquellos con atipia franca. 6.5Lesiónintraepitelialescamosa(Alto‐bajogrado) Las razones anteriormente expuestas, junto con los avances en el conocimiento de la carcinogénesis cervical y en el diagnóstico citológico, motivaron una reunión de representantes de organismos internacionales, científicos y profesionales, en el Instituto Nacional del Cáncer de Estados Unidos en Bethesda (Maryland). Fruto de dicha reunión fue un nuevo sistema de nomenclatura para informes citológicos ginecológicos (Sistema o Clasificación de Bethesda), en el que se unificó criterios y se adoptaron recomendaciones que la experiencia general acumulada aconsejaba. La parte fundamental de esta nueva clasificación fue la elaboración de un sistema binario para catalogar las anormalidades celulares preneoplásicas en el extendido citológico, denominándolas lesiones intraepiteliales escamosas de alto o bajo grado (L.I.P.S.I.L.). El término «alto grado» incluye el CIN 2 y CIN 3 de la clasificación de Richardt, y el término «bajo grado» el CIN 1 y las alteraciones celulares producidas por papilomavirus (PVH). Esta clasificación fue difundida en 1988, mínimamente modificada en 1991, y actualizada recientemente en 2001. Es preciso comentar aquí que el sistema Bethesda, aunque universalmente conocido y ampliamente utilizado, no ha sido adoptado en todos los países. Así, en Inglaterra, se sigue utilizando la nomenclatura «B.S.C.C».; en los países de habla alemana, el «Sistema Munich»; en Australia, una modificación del propio Sistema Bethesda etc. La Sociedad Española de Citología (SEC), consciente de la necesidad de unificar criterios y considerando que son más las ventajas que aporta que los inconvenientes que suscita, adoptó esta clasificación como su nomenclatura oficial aconsejando su utilización a todos sus miembros. Aparte de los datos de identificación y de localización de la toma, la clasificación de Bethesda en su versión de 2001 tiene los siguientes apartados por lo que respecta a las lesiones cervicales: 84 Cito‐DiagnósticodelAparatoGenitalFemenino Negativo para lesiones intraepiteliales o malignidad (Se utiliza esta categoría cuando no hay evidencia de neoplasia, independientemente de si se observan, o no, microorganismos u otros hallazgos no neoplásicos). 6.6Anomalíascelularesepiteliales 6.6.1Encélulasescamosas •Célulasescamosasatípicas(ASC). ─ De significado indeterminado (ASC-US). ─ No puede excluirse H-SIL (ASC-H). •Lesiónintraepitelialescamosadebajogrado(L‐SIL),comprendiendo: ─ Displasia leve/CIN 1. ─ PVH. •Lesiónintraepitelialescamosadealtogrado(H‐SIL),comprendiendo: ─ Displasia moderada, severa y CIS/CIN 2 y 3. ─ Con características sugestivas de invasión (si se sospecha invasión). •CarcinomaEpidermoide. 6.6.2Encélulasglandulares •Célulasglandularesatípicas(AGC). ─ Endocervicales (NOS o especificar en comentarios). ─ Endometriales (NOS o especificar en comentarios). ─ Glandulares (NOS o especificar en comentarios). •Célulasatípicas,sugestivasdeneoplasia. ─ Endocervicales. ─ Glandulares. •Adenocarcinomaendocervicalinsitu(AIS). •Adenocarcinoma. ─ Endocervical. ─ Endometrial. ─ Extrauterino. ─ No específico (NOS). 6.7Otrasneoplasiasmalignas(Especificar) Como se observa en la clasificación, el apartado “lesión de alto grado” incluye el término de displasia moderada (CIN 2) y los de displasia severa y carcinoma in situ (CIN 3), recogiéndose, de esta forma, la premisa básica sugerida para simplificar el sistema de tres grados propuesto por Richardt. Por otra parte, en el apartado “lesión de bajo grado” se 85 TécnicoSuperiorSanitariodeAnatomíaPatológicayCitología incluye la displasia leve (CIN1) y los cambios celulares asociados a infección por PVH , existiendo sólidos argumentos a favor de esta agrupación ya que ambas lesiones presentan la misma tasa de progresión y regresión y, también en ambas, los tipos de PVH aislados son similares. Estos resultados son lógicos ya que la mayoría de las lesiones de bajo grado, especialmente en mujeres jóvenes, representan una infección por PVH autolimitada. El término «lesión» en lugar de «neoplasia», aunque etimológicamente es poco específico (significa «cualquier daño»), es utilizado para resaltar el potencial biológico incierto del proceso. Otra de las aportaciones importantes del sistema Bethesda es el concepto de «atipia escamosa» que en la reciente modificación de 2001 incluye los dos apartados siguientes: Atipia escamosa de significado indeterminado (ASC-US) ASC-US son las siglas de «Atypical Squamous Cells of Undetermined Significance» ó células escamosas atípicas de significado indeterminado o incierto. El término fue introducido para intentar acotar con más precisión la «zona gris» entre los cambios celulares benignos y la lesión intraepitelial, por lo que la catalogación de un proceso como ASCUS se realiza por exclusión. Es decir: los cambios observados pueden deberse a un proceso benigno, pero intenso, o a una lesión potencialmente grave; por lo tanto, y debido a que no pueden ser inequívocamente clasificados, son interpretados como de significado indeterminado o incierto. Desde el punto de vista morfológico, estos cambios deben ser más acusados que los de un proceso reactivo pero, bien cuantitativamente o cualitativamente, insuficientes para clasificarlos con seguridad como SIL. Como se puede deducir de la definición, esta categoría no es reproducible y algunos autores piensan que es una invención norteamericana como parte de una práctica citológica a la defensiva para evitar, en la medida de lo posible, falsos negativos que puedan conllevar acciones legales. No obstante, se ha comprobado que un 10/20% de casos de ASCUS corresponden realmente a una lesión intraepitelial, incluso de alto grado, que no se ha puesto en evidencia en el extendido citológico, por lo que eliminar el término no parece prudente. Todos estos datos han sido contemplados en la versión 2001 de Bethesda en la que el término ASCUS pasa a ser definido como «alteraciones citológicas sugestivas de una LIP pero cuantitativamente y/o cualitativamente insuficientes para una interpretación definitiva». Es decir, se elimina el ASCUS- probablemente reactivo, reservándose el término únicamente para cuando exista sospecha de lesión intraepitelial. Como consecuencia, no debe malograrse el interés práctico del mismo siendo exageradamente utilizado. Como guía de frecuencia, se recomienda que no debiera exceder en 2-3 veces la tasa de SIL de un laboratorio determinado. Atipia escamosa. No puede excluirse H-SIL (ASC-H) Este término sustituye al previo «ASCUS-posible SIL». En él se recogen aquellos casos en los que las alteraciones celulares son bastante acusadas pero, bien por las características de la extensión (inflamación, hemorragia, etc.) o bien por la escasez de estas células, no pueden considerarse totalmente conclusivas. Como se comprueba también en el apartado de «anomalías celulares epiteliales», el término «AGUS» (células glandulares atípicas de significado indeterminado) de la versión anterior, ha sido sustituido en la de 2001 por el de «células glandulares atípicas» 86 Cito‐DiagnósticodelAparatoGenitalFemenino solamente, con ello desparece esta sigla de sonido gutural no demasiado eufónico, lo cual es un motivo de satisfacción, evitándose su confusión con ASCUS Por último, es preciso comentar que aparte de la elaboración de este sistema de nomenclatura, la opinión unánime de los expertos reunidos en Bethesda fue indicar que el informe citológico es un acto médico cuyo responsable final es el especialista citopatólogo. En esta evolución histórica de las clasificaciones podemos comprobar la tendencia marcadamente reduccionista y simplificatoria de las mismas, ya que de los cuatro grados de la primera se ha llegado a las dos categorías del Sistema Bethesda pasando por los tres grados de Richardt, con una duración media de unos 20 años para cada una de ellas. También podemos intuir que la tercera modificación de dicho Sistema Bethesda no va a ser probablemente la última, abriéndonos el camino a la especulación sobre su evolución en el futuro. Como es sabido, las lesiones intraepiteliales son clasificadas como de «alto o bajo grado» atendiendo al potencial relativo de las mismas para desarrollar una lesión infiltrante. 6.8SistemaBethesda 6.8.1Calidaddelamuestra ─ Satisfactorio para el Estudio. ─ Satisfactorio para el Estudio pero Limitada por (especificar razón). ─ Insatisfactorio para el Estudio. ─ División General en Categorías (opcional). ─ Cambios Celulares benignos (ver diagnóstico descriptivo). 6.8.2Divisióngeneralencategorías(opcional) ─ Dentro de los Límites Normales. ─ Cambios Celulares Benignos (ver diagnóstico descriptivo). ─ Alteraciones de las Células Epiteliales (véase diagnóstico descriptivo). 6.8.3Diagnósticosdescriptivos o CambioCelularesBenignos. Infecciones. ─ Trichomonas vaginales. ─ Microorganismos compatibles con cándidas. ─ Predominio de cocobacilos compatibles con cambios en la flora vaginal. ─ Microorganismos con morfologías compatibles con actinomices. ─ Cambios celulares asociados con virus herpes. ─ Otros. 87 TécnicoSuperiorSanitariodeAnatomíaPatológicayCitología o CambiosReactivos. Cambios Celulares reactivos asociados con: ─ Inflamación (incluye reparación típica). ─ Atrofia con inflamación. ─ Cambios por radioterapia. ─ Cambios por dispositivos intrauterinos. ─ Otros. 6.8.4Alteracionesdelascélulasepiteliales o CélulasEscamosas. ─ Células Escamosas Atípicas de significado incierto. ─ Lesión Escamosa Intraepitelial de Bajo Grado (LSIL) que comprende Displasia Leve, CIN-I, cambios celulares por infección por VHP. ─ Lesión Escamosa Intraepitelial de Alto Grado (HSIL) que comprende Displasia Moderada y Grave, Carcinoma in situ, CIN-II y CIN-III. ─ Carcinoma Epidermoide. o CélulasGlandulares. ─ Células Endometriales posmenopáusicas. citológicamente benignas en mujeres ─ Células Glandulares Atípicas de significado incierto: en este caso, debe hacerse constar en el informe si el observador las considera probablemente reactivas o probablemente correspondientes a lesiones preneoplásicas o neoplásicas. ─ Adenocarcinoma Endocervical. ─ Adenocarcinoma Endometrial. ─ Adenocarcinoma Extrauterino. ─ Adenocarcinoma sin especificar el origen. 6.8.5Otrostumoresmalignosdelcérvix(Especificar) o EvaluaciónNormal. ─ Aplicarse únicamente a las tomas de cara lateral de vagina. 88 BIBLIOGRAFÍA Cito‐DiagnósticodelAparatoGenitalFemenino Bibliografía Patología de Rubin / Farber, Panamericana 1990. Citología, Ediciones Omega S.A.1979. Anatomía Patológica General, Ediciones Doyma 1991. Lecciones de Histología, L. Díaz Flores. Lecciones de Citología, L Díaz Flores Laboratorio y Atlas de Citología, Interamericana, Jose Mª Viger y García del Moral. 91 CUESTIONARIO Cito‐DiagnósticodelAparatoGenitalFemenino Cuestionario 1. Desde el punto de vista Histológico, la pared de la vagina cuantas capas dispuestas concéntricamente tiene: a. Mucosa y muscular b. Mucosa, muscular y adventicia c. Adventicia y mucosa 2. La mucosa del exocérvix continúa con: a. La del endocérvix b. Con tejido conjuntivo c. Con el orificio externo 3. La mucosa del endocérvix comprende: a. Un epitelio b. Un corion de tejido conjuntivo denso c. Todas son correctas 4. La Gardnerella se diagnóstica a través del frotis citológico con: a. La tinción de Papanicolau b. Mediante cultivo c. Ninguna es correcta 5. La Gonorrea es una enfermedad producida por un agente que causa Salpingitis aguda. Cuál es? a. Cocobacilo gramnegativo b. Diplococo Gram.-negativo c. Bacilo Gram.-negativo 6. El agente del papiloma humano que se asocia con el condiloma acuminado son los tipos: a. 22 Y 26 b. 16 Y 18 c. 6 Y 11 7. El virus del herpes simple tiene una posible relación con el desarrollo del: a. El cáncer del cuello de útero b. Metástasis en el cuello de útero c. El cáncer cervical 95 TécnicoSuperiorSanitariodeAnatomíaPatológicayCitología 8. ¿Qué son microorganismos relacionados con la utilización del dispositivo intrauterino? a. Los Actinomices b. Las actinomicosis c. Todas son correctas 9. La Endometritis aguda se produce cuando asciende una infección: a. Desde la vagina b. Desde el cuello uterino c. Desde la cavidad endometrial 10. Los Pólipos son lesiones: a. Neoplasias malignas b. Tumorales c. Benignas 11. En el cuello uterino pueden aparecer tumores como: a. Hemangiomas b. Neurofibromas c. Todas son ciertas 12. El virus del Herpes Simple tipo II (HSV-2) puede actuar como un desencadenante de: a. Las displasias b. Carcinoma c. Metástasis ganglionares 13. Las alteraciones en el tercio inferior y medio del epitelio se encuentran en la displasia: a. En la Displasia Leve CIN II b. B: En la displasia Moderada CIN II c. En la Displasia Severa CIN II 14. ¿Cuantos patrones se pueden apreciar en el Carcinoma epidermoide? a. Tres patrones b. Dos patrones c. Cinco patrones 15. Cual es una propiedad biológica del epitelio vaginal: a. Tipo pavimentoso b. Exfoliación c. Proliferación 96 Cito‐DiagnósticodelAparatoGenitalFemenino 16. El Cito spray: es un fijador excelente en forma de spray, se utiliza inmediatamente después de hacer las extensiones a qué distancia: a. 40 cm b. Unos 25 o 30 cm c. Unos 5 o 10 cm 17. Para retirar los fijadores de las extensiones se utiliza: a. Agua b. Alcohol de 50 c. Alcohol de 96º 18. Cuantos tipos de células basales se distinguen: a. Profundas y externas b. Profundas y atróficas c. Células post-parto 19. Las células superficiales son células plenamente diferenciadas de: a. La descamación de la capa intermedia b. Las capas epiteliales superficiales c. Del núcleo 20. Las Células Epiteliales Pavimentosas Estratificadas de la vagina son: a. Triangulares b. Ovaladas c. Redondeada o más bien elíptica 21. Las células glandulares pueden aparecer en las extensiones realizadas hasta: a. El último día del ciclo b. el día 15 del ciclo c. El día 12 del ciclo 22. En las extensiones vaginales, las células sanguíneas y tisulares que podemos observar en la frotis son: a. Histiocitos b. polimorfonucleares, c. Ambas 23. En algunos casos como aborto incompleto aparecen: a. Trofoblasto b. Leucocitos c. Fibras musculares 97 TécnicoSuperiorSanitariodeAnatomíaPatológicayCitología 24. Los bacilos de Döderlein degradan el glucógeno convirtiéndolo en: a. Células escamosas b. Ácido láctico c. Ninguna es correcta 25. ¿Qué patología está producida por un hongo en forma de yemas ovales y por hifas? a. La actinomicosis b. La candidiasis o moniliasis c. Las vaginitis inespecíficas 26. El VPH se transmite por: a. Producirse infecciones continuadas b. Utilización de Tampones c. Vía sexual 27. En los perfiles de malignidad en el diagnóstico observamos el núcleo: a. Con forma irregular y de huso o bizarra b. No se altera su tamaño c. Con forma redondeada 28. ¿El carcinoma in situ invade el estroma por debajo de la membrana basal? a. En estadio avanzado b. En todos los casos c. Nunca 29. Que siglas son de Atipia Escamosa de Significado Indeterminado a. ASC-H b. ASC-US c. ASC 30. ¿Qué sistema es el que se usa actualmente para la emisión de informes citológicos ginecológicos? a. Sistema Bethesda b. Sistema de Richardt c. Sistema Averrohes 98