Laboratorio de Análisis Electroquímico y Cromatográfico

BENÉMERITA UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE PUEBLA
VICERRECTORÍA DE DOCENCIA
DIRECCIÓN GENERALDE EDUCACIÓN SUPERIOR
FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS
LICENCIATURA EN FARMACIA
ÁREA: QUÍMICA ANALÍTICA
ASIGNATURA: LABORATORIO DE
ANÁLISIS ELECTROQUÍMICO
Y
CROMATOGRÁFICO
CÓDIGO: FARM-009 L
ELABORADO POR:
Eber Ruth Rodríguez Gutiérrez
Pilar Trujillo García
Carlos Gracia Vázquez
Alejandro Gómez Sainz
José Luis Garate Morales
Jorge Cerna Cortéz
MAYO 2008
PE: “LICENCIATURA EN FARMACIA”
CUADERNO DE LABORATORIO
CARACTERISTICAS
En el cuaderno de laboratorio se tienen que incluir todos los detalles necesarios para que otro
técnico pueda repetir la práctica tal como se realizó. Todas las medidas han de quedar
incluidas en el cuaderno. Si es necesario realizar cálculos numéricos, indicar los resultados y al
menos una nota acerca de cómo se han realizado los cálculos.
Usar una libreta encuadernada, no de hojas sueltas. Hay que tomar desde el principio la
costumbre de apuntar los datos y observaciones en el cuaderno a medida que se van
obteniendo.
La escritura debe ser clara, precisa y limpia. Usar tinta, nunca lápiz. No borrar nunca.
Simplemente trazar una línea simple sobre las anotaciones no deseadas, de modo que puedan
seguir siendo leídas. Es posible que sea necesario reflexionar acerca de los resultados, tanto
los malos como los buenos ( los resultados borrados se han perdido para siempre ).
Cuando sea posible, preparar tablas de antemano para recoger los datos y observaciones, de
modo que las lecturas o comentarios puedan anotarse de forma simple y rápida.
Finalmente anotar los datos y observaciones exactamente tal y como se hayan leído u
observado, jamás se deben cambiar las cifras o modificar los datos porque se piense que los
datos corregidos son “los que debían haber sido”. Si un práctica termina por un derramamiento
o ruptura, anotarlo así en el cuaderno y volver a repetir la práctica desde el principio.
ORGANIZACIÓN DEL CUADERNO
En la primera página debes escribir tu nombre, el nombre del módulo y la fecha en que empezó
el curso. Esto irá seguido en la página siguiente por un INDICE GENERAL, que es una lista de
cada una de las prácticas y la página en la que empieza. Cada vez que se termine una
práctica, hacer una nueva adición en el índice general.
Escribir sólo en una cara de cada página (la situada a mano derecha cuando está abierto el
cuaderno)
Cuando se termine una práctica y aún quede espacio, en las partes bajas de las hojas deben
ser cruzadas por una línea diagonal, para así indicar que no se ha añadido nada con
posterioridad
Al final de las anotaciones de cada día, escribir la fecha i firmar
Cada práctica hecha en el laboratorio se describe por separado usando todas las páginas que
sea necesario. Para cada práctica debe incluirse la siguiente información.
1.- Número de la página.
2.- Título de la práctica
3.- Objetivo de la práctica
4.- Procedimiento o parte experimental
5.- Datos y observaciones
6.- Cálculos
7.- Conclusiones
PE: “LICENCIATURA EN FARMACIA”
FUNDAMENTOS PARA EL MANEJO DEL PEACHIMETRO
OBJETIVO.- Que el alumno sea capaz de manejar el peachímetro.
INTRODUCCIÓN.- El pH de la solución se puede medir con rapidez y exactitud por medio de
un medidor de pH. En forma breve, un medidor de pH se compone de un par de electrodos
conectados a un medidor capas de medir voltajes pequeños, por orden de milivolts. Cuándo los
electrodos se colocan en una solución se genera un voltaje, el cual varía con el pH. El medidor
lee ese voltaje y esta calibrado para mostrar el pH.
Los electrodos que se usan con los medidores de pH son de diversas formas y tamaños, según
al uso que se les destine, Se han desarrollado incluso electrodos tan pequeños que se pueden
insertar en células vivas individuales para vigilar el pH del medio celular.
MATERIAL
REACTIVOS
Peachimetro
Vasos de precipitados
Probeta
Agitador
Papel de pH
Piceta
Agua destilada
Shampoo (caprice )
Pinol
Jugo de naranja
Fabuloso
Vinagre (blanco)
Agua jabonosa
Shampoo (fiesta americana
Jugo de limón (natural)
Alkazeltzer
Agua de Jabón (neutro)
Shampoo (palmolive)
PROCEDIMIENTO
1.- Con el papel de pH se mide la solución problema
2.- Se ajusta la temperatura del Peachimetro a 25ºC
3.- Se introduce el electrodo en la solución buffer
4.- Se oprime el botón de "pH"
5.- Se calibra de acuerdo al pH de la solución buffer
6.- Se oprime el botón de " Stand-by"
7.- Se oprime nuevamente el botón y se lava el electrodo con agua destilada, secándolo
8.- Se introduce el electrodo en la solución problema
9.- Se oprime el botón de "Stand-by" y se anota el pH
10.- Se oprime nuevamente el botón y se lava el electrodo con agua destilada, secándolo
NOTA. Los pasos pueden variar según el Peachimetro
CUESTIONARIO
1.- Anote los diferentes valores de pH obtenidos en el Peachímetro. Obtenga los valores de
pOH
2.- Trasforme los valores de pH, obtenidos en molaridad.
3.- Explique las características de un electrodo de referencia y de un electrodo indicador.
SOLUCION
TEMP.
pH
pH
pOH
Molaridad
PE: “LICENCIATURA EN FARMACIA”
TITULACIÓN DE UN ÁCIDO FUERTE CON BASE FUERTE
OBJETIVO.- Titulación de HCI con NaOH usando el Peachimetro
INTRODUCCIÓN.- Esta valoración es enteramente análoga a la de un ácido fuerte con una
base fuerte, excepto en el sentido de la valoración al comienzo (disolución alcalina), la
disolución tiene una elevada concentración de OH- y, por tanto un pH alto. El pH decrece
gradualmente al principio, después rápidamente en las aproximadamente del punto
estequiométrico y de nuevo gradualmente después de dicho punto.
El pH es un término que indica la concentración de iones hidrogenados en una disolución. Se
trata de una medida de la acidez de la disolución. El termino (del francés pouvoir hydrogéne,
'poder del hidrogeno') se define como el logaritmo de la concentración de iones H+ (protones)
cambiando de signo:
pH= -log qH+ r , donde q H+ r es la concentración de iones
H+ en moles por litro. Debido a que los iones H+ se asocian con las moléculas de agua para
formar iones hidronio, (H3O+), el pH también se expresa a menudo en términos de
concentración de iones hidrónio.
El pH de una disolución puede medirse mediante una titulación, que consiste en la
neutralización del ácido ( o base ) con una cantidad determinada de base ( o ácido ) de
concentración conocida, en presencia de un indicador ( un compuesto cuyo valor varia con el
pH ) . También puede determinarse midiendo el potencial eléctrico que se origina en cierto
electrodo especial sumergido en la solución.
MATERIAL
REACTIVOS
Peachimetro
Bureta con llave
Vaso de precipitado
Agitador
Pipeta
Probeta
Piceta
Agua destilada
Solución de NaOH 0.1N
Solución problema de HCI
Solución Buffer
PROCEDIMIENTO
1.- Se mide 10 ml de solución HCI y se le agregan 40 ml de agua destilada
2.- Se calibra el Peachimetro con el Buffer
3.- Se llena la Bureta con la solución de NaOH 0.1N
5.- Se agrega 1ml de NaOH a la muestra
6.- Se agita perfectamente para homogeneizar y se mide nuevamente el pH de la solución
8.- Se agrega otro ml de NaOH a la muestra.
9.- Se mide nuevamente el pH
10.- Cuándo la lectura de un salto es más de una unidad de pH, se sigue agregando 3 o más
ml hasta lectura constante
11.- Al terminar se lava el electrodo con agua destilada y se seca perfectamente
CUESTIONARIO Y ACTIVIDADES
1.- Se gráfica en papel milimetrico los valores de pH en función de los mililitros de NaOH
adicionados
2.- Encontrar en la gráfica el punto de equivalencia:
a) Por el método del paralelogramo
b) Por el método de la 1ª derivada
c) Por el método de la 2ª derivada
3.-Determine la concentración del ácido
PE: “LICENCIATURA EN FARMACIA”
TÍTULACIÓN DE UN ÁCIDO DÉBIL CON BASE FUERTE
OBJETIVO.- Titulación de un ácido acético con NaOH usando el pechimetro
INTRODUCCIÓN.- La reacción de neutralización de una titulación de ácido acético con hidróxido de sodio es:
HOAc + NaOH
H2O + Na+ +OAcEl ácido acético se encuentra ionizado en un porcentaje bajo, dependiendo de su concentración, y se neutraliza
produciendo agua y una cantidad equivalente de la sal acetato de sodio. Una vez iniciada la titulación, parte del HOAc y
se convierte en NaOAc y se genera un sistema amortiguador. Al avanzar la titulación, el pH aumenta lentamente al
variar la relación q Oac- r / q HOAc r. En el punto intermedio de la titulación el pH será igual a la pKa, y
qOAc- r = qHOAcr
En el punto de equilibrio se tiene una solución de NaOAc; como es una base Bronsted (se hidroliza), el pH en el punt o
de equilibrio será alcalino. El pH dependerá de la concentración de NaOAc- y mientras mayor sea la concentración,
más elevado será el pH, se determina solamente para la concentración del exceso de OH-. Por otro lado la curva de
titulación más allá del punto de equivalencia será igual a la titulación de ácido fuerte.
La región que se eleva lentamente después del punto de equivalencia se llam a región amortiguadora, y es mayor al pH
que corresponde a pKa. La capacidad amortiguadora depende de las concentraciones de HOAC y OAc-, y la capacidad
amortiguadora total aumenta conforme aumenta la concentración.
Dicho de otra forma, la distancia de la parte plana de ambos lados de pKa aumentará al aumentar q HOAc r y q
OAc- r. Al desviarse el pH hacia el lado ácido de pKa, el amortiguador tolerará más base pero menos ácido; el cambio
de pH igual pKa, debido a que la curva no es tan plana. Por el contrario, en el lado alcalino de pKa se puede tolerar
más ácido pero menos base.
El punto de equilibrio para titulación de cualquier ácido débil con base fuerte será alcalino. Mientras más débil sea el
ácido (menor Ka) mayor será Kb de la sal y más alcalino el punto de equilibrio.
La valoración de un ácido débil y base fuerte difiere a comparación de un ácido fuerte en:
1.- La concentración de ion hidrógeno al comienzo es considerablemente más pequeña ( pH más grande ) que para el
ácido fuerte.
2.- En los primeros momentos de la valoración de pH de la disolución aumenta con relativa rapidez debido a que la
ionización del ácido débil está restringida por efecto del ion común del anión ( sal altamente ionizada ) formada en la
neutralización.
3.- Para zonas distanciadas del punto de semineutralización y a ambos lados de él (es decir, entre el 10% y 90% ó
entre 20% y 80% del reactivo total necesario para la neutralización, según el valor de Ka del ácido), la curva de
valoración es aproximadamente lineal debido a que representa una región tamponada.
4.- El punto estequiom etrico no corresponde a un pH de 7.0, pues la reacción inversa según a la cual el anión A- (base
conjugada de HA) toma cierto numero de protones del agua , hace la disolución ligeramente alcalina.
MATERIAL
Peachimetro
Bureta con llave
Vaso de precipitado
Agitador
Pipeta
Probeta
Piceta
REACTIVOS
Agua destilada
Solución de NaOH 0.1N
Solución de VINAGRE
Solución buffer
PROCEDIMIENTO
1.- Medir 10 ml de ácido acético o de solución problema y agregarle 40ml de agua destilada
2.- Calibrar el Peachimetro con la solución Buffer
4.-Se llena la Bureta con colusión de NaOH 0.1N
5.- Se agrega 1ml de NaOH a la solución problem a
6.- Se agita perfectamente para homogeneizar y se mide nuevam ente el pH de la solución
8.- Se agrega otro ml de NaOH a la solución
9.- Se mide nuevamente el pH
10.- Cuando la lectura de un salto en el pH, se sigue agregando 3 ó 5 ml más hasta lectura constante.
11.- Al terminar se lava el electrodo con agua destilada y se seca perfectamente.
CUESTIONARIO Y ACTIVIDADES
1.- Gráfica en papel milimetrico los valores de pH en función de los mililitros de NaOH adicionados
2.- Encontrar en la gráfica los puntos de equivalencia
a) Por el método del paralelogramo
b) Por el método de la primera derivada
c) Por el método de la segunda derivada
3.- Determine la normalidad del ácido
PE: “LICENCIATURA EN FARMACIA”
TITULACIÓN DE UNA BASE DEBIL CON UN ACIDO FUERTE
OBJETIVO.- Titulación de NH4OH con HCl usando el Peachimetro
INTRODUCCIÓN.- En una titulación ácido-base se efectúa una reacción de neutralización en la
cuál un ácido reacciona con una cantidad equivalente de base. Las curvas de titulación se
construyen graficando el pH de la solución como función del volumen de titulantes añadidos. El
titulante siempre es un ácido fuerte o una base fuerte. La sustancia analizada puede ser ácido
o base débil.
La titulación de una base débil contra un ácido fuerte es análoga a la de un ácido débil contra
una base fuerte, pero las curvas de titulación es la de amoniaco con ácido clorhídrico. La
reacción de neutralización es:
NH3 + H + CL ---------- NH4 + CL
Al comienzo se tiene NH3, tan pronto se añada un poco de ácido, parte del NH3 se convierte a
NH4 y comienza a aparecer la región amortiguada. En el punto intermedio de la titulación
(NH4) = (NH3). En el punto de equivalencia se tiene una solución de NH4Cl, un ácido de
Brönsted débil que se hidroliza para producir una solución ácida. Más allá del punto de
equivalencia el H libre evita la ionización. Por tanto la curva de titulación más allá del punto de
equivalencia será igual a la titulación de una base fuerte. Debido a que por coincidencia el Kb
del amoniaco es igual al Ka del ácido acético, la curva de titulación del amoniaco contra ácido
fuerte es la imagen inversa de la titulación de ácido acético contra base fuerte.
El indicador para la titulación debe tener un grado de transición de pH 4 a 7, el rojo de metilo
llena este requisito.
MATERIAL
Peachimetro
Bureta con llave
Vaso de precipitados
Agitador
Pipeta
Probeta
Piceta
REACTIVOS
Agua destilada
Solución de HC1 0.1N
Solución problema de NH40H
Solución Buffer
PROCEDIMIENTO
1.- Se miden 10 ml de Hidróxido de amonio y se le agregan 40 ml de agua destilada
2.- Calibrar el Peachimetro con la solución Buffer
3.- Medir el pH inicial de la solución de Hidróxido de amonio
4.- Llena la Bureta con solución de HC1 0.1 N
5.- Se agrega 1 ml de HCl a la solución de amonio
6.- Se agita perfectamente para homogeneizar
7.- Se mide nuevamente el pH de la solución
8.- Se agrega otro ml de HCl y se mide el pH
9.- Cuando la lectura dé un salto en una unidad, se agregan 3 ó más mililitros hasta lectura
constante
10.- Al terminar se lava el electrodo con agua destilada y se seca perfectamente.
CUESTIONARIO Y ACTIVIDADES
1.- Gráfica en papel milimetrico los valores de pH en función de los mililitros de NaOH
adicionados.
2.- Encontrar en la gráfica el punto de equilibrio
a) Por el método de paralelogramo
b) Por el método de primera derivada
c) por el método de segunda derivada
3.- Determinar la normalidad del Amonio
PE: “LICENCIATURA EN FARMACIA”
TITULACIÓN DE UN ACIDO POLIPROTICO CON BASE FUERTE
OBJETIVO.- Titular H3PO4 con NaOH usando el Peachimetro
INTRODUCCIÓN.ACIDO POLIPROTICO
Muchas sustancias son capaces de suministrar más de un protón al agua, las sustancias de
este tipo se conocen con el nombre de ácido poliprótico.
Como ejemplo tenemos los ácidos poliproticos que pueden reaccionar con el agua en tres
fases sucesivas:
-1
-3
H3PO4 ---------- H+ +
H2PO4
K1 = 7.5 X 10
-2
-8
H2PO4 1 ------ H+ +
HPO4
K2 = 6.2 X 10
-3
-13
HPO4 2 = ----- H+ +
PO4
K3 = 9.7 X 10
Los valores de Ka en cada caso muestran que la versión es incompleta, obsérvese que la
perdida del tercer protón se lleva acabo mucho menos fácilmente aunque el segundo y este
ultimo, mucho menos como el primero que se muestra en los valores tan pequeños de la Ka en
la tercera reacción.
Esto puede considerarse intuitivamente razonable; en base en las atracciones electrostáticas
podríamos esperar que los protones cargados positivamente se pierden más fácilmente de la
1molécula neutra, H3PO4 que del ion cargado negativo H2 PO4 .
MATERIAL
REACTIVOS
Peachimetro
Bureta con llave
Vaso de precipitado
Pipeta
Probeta
Piceta
Agua destilada
Solución problema de H3PO4
Solución Buffer
Solución de NaOH 0.1N
PROCEDIMIENTO
1.- Se miden 5 ml de H3PO4 y se le agregan 40 ml de agua destilada
2.- Calibrar el Peachimetro con la solución Buffer
3.- Medir el pH inicial de la solución ácida
4.- Se llena la Bureta con la solución de NaOH
5.- Se agrega 1ml de solución de NaOH
6.- Se agita perfectamente para homogeneizar
7.- Se mide nuevamente el pH de la solución
8.- Se agrega otro ml de NaOH y se mide el pH
9.- Cuando la lectura de un salto se agrega otros ml hasta la lectira constante
10.- Se sigue agregando hasta observar otro salto
11.-Se sigue agregando hasta la lectura constante
12.- Al terminar se lava el electrodo y se seca
CUESTIONARIO Y ACTIVIDADES
1.- Gráfica en papel milimetrico los valores de pH en función de los mililitros de NaOH
adicionados.
2.- Encontrar en la gráfica el punto de equivalencia
a).- Por el método del paralelogramo
b).- Por el método de primera derivada
c).- Por el método de segunda derivada
3.- Determinar la concentración del ácido en el primero y segundo punto de equivalencia.
PE: “LICENCIATURA EN FARMACIA”
DETERMINACION DE LA CAPACIDAD REGULADORA
OBJETIVO.- Determinar el número máximo de moles de base o de ácido que una solución
reguladora (buffer) puede aceptar sin cambiar su pH en una unidad
INTRODUCCIÓN.- Las soluciones reguladoras mantienen el pH de la solución constante, la
capacidad que tiene de hacerlo se define como la cantidad de equivalentes ácido-base que
pueden aceptar sin que cambie el pH de la solución más de una solución pH.
Una solución amortiguadora es una mezcla de un par ácido-base conjugado capaz de resistir
cambios grandes de pH cuando se agregan cantidades pequeñas de otro ácido o base.
MATERIAL
REACTIVOS
Peachimetro
Bureta con llave
Vaso de precipitado
Agitador
Pipeta
Probeta
Piceta
Agua destilada
Solución Buffer
Solución reguladora
Solución de HCl 0.1M
PROCEDIMIENTO
1.- Calibrar el pechimetro con la solución buffer
2.- Se agrega 1ml de NaOH
3.- Se agita perfectamente para homogeneizar
4.- Se mide nuevamente el pH
5.- se agrega otro ml de NaOH y se agita
6.- Se mide nuevamente el pH
7.- Se continúan las adiciones hasta que el pH obtenido difiera en una unidad del pH inicial
8.- Al terminar se seca el electrodo
CUESTIONARIO Y ACTIVIDADES
1.- Gráfica en papel milimetrico los valores de pH en función de los mililitros de NaOH
adicionales
2.- A partir de estos datos obtenga la capacidad reguladora de la solución problema
3.- Cual es el pH sanguíneo que puede ser mortal para el ser humano
4.- La sangre posee varios reguladores, mencione 3 de ellos y escriba su ecuación de
equilibrio.
PE: “LICENCIATURA EN FARMACIA”
CROMATOGRAFIA
OBJETIVO.- Al final el alumno podrá observar la importancia de seleccionar adecuadamente el solvente al efectuar un
cromatograma
INTRODUCCIÓN.- Una pequeña introducción de la muestra en disolución se evapora cerca del borde o del ángulo de
una tira de papel fieltro. El cromatograma se desarrolla sumergiendo el borde del papel por acción capilar.
Durante el desarrollo, la tira de papel esta suspendida verticalmente colocándose junto con el disolvente en un
recipiente cerrado, de forma que el espacio del mismo queda saturado con vapor del disolvente.
En la cromatografía ascendente la muestra se coloca en la parte del papel, que se sumerge en el disolvente revelador
que en el fondo del recipiente; en cromatografía descendente, la muestra se coloca cerca del borde de la parte más
alta del papel, que se desliza sobre la pared de la cubeta que contiene el líquido revelador (sujeto en la parte alta del
recipiente cerrado que aísla a todos el sistema).
A medida que el disolvente se desplaza a lo largo del papel los componentes de la muestra se extienden y se separan
en función de sus adsorbabilidades diferentes sobre las fibras de celulosa.
Los componentes separados pueden identificarse sobre el papel mediante reactivos capaces de originar productos
coloreados con los componentes de la muestra; si se desea, puede cortarse el papel en trozos de forma que cada uno
de éstos componentes tenga un solo componente para un análisis posterior.
MATERIAL
Tubos de ensayo
Tapón de hule
Papel filtro
Plumones o marcadores
REACTIVOS
Agua destilada
Alcohol
Benceno
Eter
Acetona
Metanol
Cloroformo
Otros
PROCEDIMIENTO
1.- Trace una línea base en una tira de papel filtro y deposite un punto de muestra, deje secar
2.- En un tubo de ensayo deposita unos 2 ml de solvente, tape el tubo
3.- Introduce el papel, procurando que toque el solvente
4.-Dejar que corra el crom atograma hasta 1 cm antes del final del papel
5.- Marca con lápiz hasta donde llega el solvente
6.- Repita los mismos pasos con los demás solventes
7.- Mida para cada paso la distancia que recorren los solutos.
CUESTIONARIO Y ACTIVIDADES
1.- Medir en cada uno de los cromatogram as la altura para cada una de las m anchas (desde el punto de aplicación
hasta su altura)
Anexar los cromatogramas realizados:
Agua
destilada
Alcohol
Benceno
Eter etilico
Acetona
Metanol
Cloroformo
2.- Calcular la relación de frentes (RF) para cada solvente
3.- Explica brevemente en que consisten los siguientes tipos de operación en técnicas de crom atografía
Elusión
Análisis frontal
Técnicas de desplazamiento
PE: “LICENCIATURA EN FARMACIA”
CROMATOGRAFIA
OBJETIVO.- Conocer la técnica bidimensional para la obtención de cromatogramas
INTRODUCCIÓN.- La cromatografía abarca una gran variedad de técnicas de separación
sumamente efectivas, las características común de todas ellas es que los componentes de la
muestra se distribuyen entre dos fases, una de las cuales es estacionaria y al otra se filtra a
través de los intersticios o sobre la superficie de la base fija. El desplazamiento de la base
móvil se manifiesta e una migración diferencial de los componentes de la muestra.
Cromatografia en Papel bidimensional: El papel que normalmente se emplea es de celulosa
muy pura. La celulosa tiene una gran afinidad por el agua y por otros diferentes polares y los
retiene fuertemente a través de puentes de hidrógeno.
Entre todos los otros métodos cromatograficos, previamente descrito, el disolvente de elución
se desplaza únicamente en una dirección, a lo largo del papel. En una superficie plana es
posible efectuar una secuencia de desarrollo en dos direcciones. La muestra se aplica en un
punto cercano a una esquina y el cromatograma se desarrolla en forma normal, con técnicas
ascendentes o descendentes, hasta que la mancha que se desplace más rápido se acerque a
la orilla del papel. Entonces se saca éste y después de dejar evaporar el disolvente, se gira 90º
y se desarrolla una segunda vez con otro disolvente que tenga propiedades eluentes
diferentes. En esta forma, las muestras que solo se pueden separar parcialmente con
cualquiera de los dos disolventes, se separan totalmente con la combinación de ambos.
MATERIAL
REACTIVOS
Vasos de precipitados (10 cm de altura) Solvente A (etanol)
Frasco con tapa (10 cm de altura)
Solvente B (acetona)
Papel filtro (cuadro de 10 cm.)
Solución problema (plumón de agua)
PROCEDIMIENTO
1.- Marca los extremos
2.- Colocar la muestra en una de los extremos
3.- Introducir el papel en el frasco con el solvente A
4.- Deja que corra el cromatograma
5.- Sacamos y dejamos secar
6.- Introducir en el frasco con el solvente B
7.- Dejar que corra el cromatograma
8.- Secamos y dejamos secar
CUESTIONARIO Y ACTIVIDADES
1.- Anexar el cromatograma realizado
PE: “LICENCIATURA EN FARMACIA”
CROMATOGRAFIA
OBJETIVO.-Conocer
cromatogramas
las técnicas de
Cromatografia
circular
para la
obtención
de
INTRODUCCIÓN.- En esta técnica la muestra se debe colocar en el centro, ya sea por medio
de un punto o un circulo. Para hacer contacto con el disolvente se puede utilizar una mecha de
algodón o bien, se puede sortar una tira al centro.
MATERIAL
Caja de petri
Papel filtro
Algodón
REACTIVOS
solvente A (etanol)
solvente B (acetona)
Soluciones problema
PROCEDIMIENTO
1.- Con cuidado marca el centro del papel filtro
2.- Se coloca la muestra al centro
3.- Se coloca una pequeña mecha de algodón
4.- Se coloca en una caja de petri con el solvente A o el solvente B
5.- Con cuidado se coloca la tapa
6.- Se detiene hasta que llegue cerca del borde
7.- Se saca y se deja secar
8.- Realiza otros cromatogramas
CUESTIONARIO Y ACTIVIDADES
1.- Anexar cromatogramas realizados
PE: “LICENCIATURA EN FARMACIA”
CROMATOGRAFIA
OBJETIVO.- Que el alumno aprenda la técnica de preparación de placas para cromatrografia
en capa delgada
INTRODUCCIÓN.- Cuando se necesitan separar pequeñas cantidades de una mezcla (hasta
100 mg) o averiguar el numero de sus componentes e identificarlos por Cromatografia, se
puede usar una capa delgada de absorbente adherida sobre un soporte rígido. La técnica se
denomina CROMATOGRAFIA EN CAPA DELGADA. (CCD). El absorbente más empleado es
la Silica Gel. Para que los absorbentes se adhieran a la superficie se mezclan con un poco de
yeso.
La Cromatografia es una capa fina es una variante de la Cromatografia de adsorción, de
partición con fase estacionaria. Se pueden aplicar diferentes absorbentes como son : oxido de
silicio, alúmina, tierra de infusorios, carbonato de calcio, almidón, magnesio, celulosa y como
fase móvil dependiendo la naturaleza de los compuestos que se van a separar se pueden usar
hexano, cloroformo, benceno, éter de netróleo, agua, acetona....
La capa delgada se puede aplicar en placas, de plástico de metal, el tamaño de la placa es
variable dependiendo del tamaño de la cámara cromatografica que se tenga para el revelado.
El método que se emplea generalmente es la técnica ascendente aunque también se puede
emplear técnica bidimencional.
MATERIAL
Estufa
Porta objeto
Cámara cromatográfica
REACTIVOS
Solución problema
Suspensión adherente
-Silica Gel, Carbonatos, etc.
Solvente
PROCEDIMIENTO
1.- Se utilizan dos portaobjetos perfectamente lavados, se juntan, se meten ( lo más profundo
posible ) en una mezcla de sílice gel o Alúmina
2.- Se secan, se separan y se eliminan de las orillas el exceso de dicha mezcla
3.- Se secan durante 30 min. a 50º en la estufa
4.- Después de haberlo dejado secar se sacan y se coloca la muestra en la parte inferior del
porta objetos
5.- Se coloca dentro de la cámara la cual contendrá el solvente el cual se utiliza como fase
estacionaria para el corrimiento del cromatograma
6.- Se deja correr el cromatograma sin olvidar observar constantemente para checa que la fase
móvil no llegue hasta el tope
7.- Al termino del corrimiento se sacan las placas, se seca
8.- Se mide la distancia para cada mancha y se sacan del RF respectivamente
CUESTIONARIO Y ACTIVIDADES
1.- Dibuje las manchas obtenidas en su cromatograma
2.- Calcular los RF
3.- Que tipo de reveladores se deben usar cuando las manchas no se pueden observar
PE: “LICENCIATURA EN FARMACIA”