PRUEBA BIOLOGICA E INMUNOLOGICADEL EMBARAZO:

PRUEBA BIOLOGICA E INMUNOLOGICA DEL EMBARAZO:
DR. V. DE SANCTIS S"
1.- PRUEBA BIOLOGICA:
HISTORIA:
El deseo de diagnosticar el embarazo en sus etapas iniciales seremonta
al año 5,000 antes de la Era Cristiana
y así encontramos papiros egipcios
que decían que determinadas simientes se desarrollaban más, cuando eran
regados con orina de mujer embarazada.
Al Comienzo del siglo veinte aparece la reacción de Abderhalden basada
en respuestas del organismo materno,
por la invasión de extrañas albúminas
que proceden de las vellosidades coriales y son arrastradas al torrente sanguíneo. En el año 1925 García Triviño
presentó a la Academia Médica Española de Cirugía su prueba basada en
que ratoncitos de no más de seis semanas, inyectados con suero de mujer
embarazada, provocaba modificaciones en los ovarios. Posteriormente trabajos más completos, dos años después, los de Aschhein y Zondek en ra-
ton es inmaduros de 5 - 8 grs. de peso;
pero la prueba con sus varias modificaciones, presenta la dificultad de ser
tardía en su lectura y además tener
que usar orina de 24 horas y lectura
microscópica. La técnica es la siguiente: inyectar no menos de 3 ratoncitos
con 0.1, 0.2 y 0.4 m!. de orina en el
dorso del animal, repitiendo las inyecciones a intervalos regulares 4 veces
durante 48 horas; a las 100 horas de la
última inyección, se sacrifican los animales para hacer la lectura de sus ovarios; sin embargo dió la pauta a futuras pruebas desde el momento que demostrQ la existencia de las gonadoestim ulinas-coriónicas.
Simultáneamente,
Freidman y
Adela Brouha en el año 1931 dan a
conocer su prueba con la coneja, la
cual usaron como animal reactivo, con
peso de 1,500 a 2,000 grs. (unos dos
kilos) y de 18 semanas de nacida,
aprovechando la cualidad de este animal que ovula con facilidad. Así se
acortó el tiempo de obtener resultados
macroscópicos, cuando estos animales
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son inyectados por la vena marginal de
la oreja con orina de mujer embarazada (unos 15 m!.), se obtenían resultados positivos a los dos días de inyectados. (de 36 a 48 horas).
Se presentaba la dificultad de tener
que intervenir o sacrificar al animal,
además el inconveniente de que algunos anestésicos, como el éter, producen congestiones ováricas, lo que
daba motivo a interpretaciones erróneas; los ovarios de las conejas impúberes son de color blanco o rosado ligero. Es positiva cuando se observan
de 1 a 14 cuerpos hemorrágicos y
cuerpos lúteos en ambos ovarios. Sensibilidad 95 - 97 % en embarazos
normales. Se pueden realizar pruebas
cuantitativas diluyendo la orina en
suero fisiológico al l/50; 1/100;
1/1000.
A partir del año 1932 comienzan
las pruebas con peces, en ese año
Fleischamann, aprovechando que en el
Rhin habita un pez: el "Rhoheus
Armarus" con la cualidad de que por
su transparencia abdominal puede verse el aumento de tamaño del tubo de
puesta ovular y así con echar orina de
mujer embarazada se conseguía la respuesta positiva; pero la dificultad de
conseguir estos peces, por su escasez,
impidió realizarla en América.
En el año 1933 Shapiro y
Zwarnstein usan los bat.racios en esta
prueba biológica, siendo los primeros
al usar el "Xenopus Laevis Daudin",
que abunda en la ciudad del Cabo y se
le conoce con el nombre de "Sapo Garras", por tener uñas en las ancas. Se
usa la hembra y se inyecta orina o
suero en el saco linfático dorsal del
animal. Si es positiva dá respuesta con
postura ovular entre las 4 y 18 horas.
Esta especie favorece el que llevan
huevos todo el año y los expulsa en el
momento de emparejarse o después de
inyectarle orina que contenga una
buena cantidad de gonadotropinas
coriónicas.
Hasta el año 1947 no es usado el
batracio macho gracias a las experiencias de los profesores Galli-Mainini de
la Argentina, basado en los trabajos
del profesor Bernardo Houssay fisiólogo eminente; se usa por primera vez
una especie de la familia Bufonidea, el
"Bufo arenarum Hensel" realizando su
muy conocida prueba; posteriormente
se usaron otras especies de batracios.
En la República Dominicana por
vez primera el 13 de Abril de 1949,
gracias al interés científico del colega
Dr. Luis A. Betances R. Comenzamos
en Santo Domingo la prueba de GalliMainini, a los dos años de su descubrimiento, con sapos traídos desde Cuba.
Se trata del sapo "Toro" muy abundante en dicha nación. Apenas llegaron los animales de experiencia, comienza nuestra labor, cuyo inicio es
muy halagador, pues diferente a las
pruebas que realizábamos en aquellos
días, con ésta obteníamos respuesta
positivas en la mayoría de los casos,
antes de las dos horas de ser inyectados. Pronto se nos planteó el problema de no tener disponibles más animales de experiencia, debido a que los
animales traídos de Cuba habían sido
usados más de dos veces y a que su
sensibilidad disminuye después de ser
usados varias veces.
El 26 de mayo de 1949, debido al
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inconveniente ya mencionado, comenzamos a probar animales nativos. Dicho comienzo fué poco halagador porque no podíamos distinguir los caracteres diferenciales entre los dos sexos;
y como Galli-Mainini en su trabajo recomendaba animales de un peso de
100 grs., nosotros los obteníamos más
grandes, como son en nuestra especie
las hembras, razón por la cual la mayoría no reaccionó.
Luego nos lanzamos a obtener los
sapos al azar y al inyectarles orina de
mujer embarazada, constatamos que
las especies medianas, de 60 a 80 grs.
reaccionaban con mayor frecuencia.
Pronto pudimos distinguir los caracteres exteriores de los dos sexos y continuamos sin tropiezos nuestra investigación, llegando a ensayar con más de
500 animales, y así fué posible presentar al VI Congreso Médico del 1950
un trabajo del Dr. Luis A. Betanc~
R., con nuestra colaboración técnica,
sobre la ventaja de la prueba con relación a las que conocíamos entonces.
La prueba puede ser realizada con
orina o con suero sanguíneo; basta
con tomar orina en determinadas condiciones e inyectar 10cc en el espacio
linfático abdominal. Alrededor de 2
horas después se obtienen resultados
positivos, cuando la mujer está embarazada. Se recomienda nó usar analgésicos, hormonas e hipnóticos.
Para realizar dicha prueba, se toma
la primera orina de la mañana; si la
densidad es inferior a 1010, se usa un
método de concentración, o de lo contrario, suero sanguíneo (2 a 3 cc.). Tomadas estas precauciones se escogen
dos sapos en buenas condiciones físicas, previo examen de la orina de los
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sapos (es rara la espermatorrea en el
batracio).
Las principales hormonas producidas a nivel de la placenta son los Estrógenos, la Progesterona, y muy especialmente la Gonadotrofina coriónica,
cuya presencia en la orina de las mujeres embarazadas es la responsable de la
positividad de la prueba que nos ocupa. Por otra parte, esta última hormona es producida en gran cantidad por
la Mola Hidatiforme, el Corioepitelioma, el coriocarcinoma. Puede ser producida también por el carcinoma embrionario del testículo y por algunos
teratomas; cuando estas condiciones
existen se obtienen reacciones positivas, simulando un embarazo.
Nosotros usamos el Galli-Mainini
en 500 casos y obtuvimos un 98.7 %
de seguridad.
Las pruebas negativas que se realizan antes de 10 días después de la primera falta menstrual, no son defmitivas y se recomienda realizarlas de nuevo a partir de los 15 días. Es frecuente
tener reacciones positivas después de
la muerte fetal durante una semana, si
queda tejido placentario, y alrededor
de un 50 % en los embarazos ectópicos,. igual que en la prueba de
Freidman y menos frecuentes en los
abortos de implantación normal.
Cuando después de la extirpación
de una Mola, persiste la reacción positiva por más de dos semanas, se debe
sospechar la existencia de un Corioepitelioma. Hemos realizado unas 125
pruebas cuantitativas en caso de sospecha de Mola, Corioepitelioma,
obteniendo un rendimiento positivo en un
80 %" cuando reaccionaba el sapo
con dosis inferiores de 0.1 mI. de ori-
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na; es una prueba semi-cuantitativa.
2-PRUEBA INMUNOLOGICA
Prueba
rápida en lámina para
diagnóstico del embarazo; métodos
biológicos han sido por años el producto de elección para el ensayo de
varias hormonas proteínicas en la orina y en el suero.
En vista de que estas hormonas
han sido probadas que son antígenos
ha sido posible el obtener un antisuero
a la gonadotropina coriónica humana.
Varios métodos inmunológicos han sido usados experimentalmente
para detectar
la gonadotropina
coriónica;
estos han utilizado los principios de
complemento-fijación,
hemoaglutinación - inhivición y reacciones de precipitina. Los resultados de estos métodos cuando los comparamos con pruebas biológicas,
tales como la de
Friedman, Aschein Fondek, y GalliMainini, han mostrado una correlación
significante.
El laboratorio
recientemente
ha
completado una evaluación de una
prueba inmunológica para el embarazo
que es sencilla y rápida de ejecutar.
Esta prueba representa una hazaña definida sobre las ténicas enfadosas y
tardias
usadas experimentalmente.
Esta prueba inmonológica en la lámina
está basada en el principio de aglutinación inhibición. Utiliza las particulas
de látex recubiertas con gonadotropina coriónica humana como antigeno.
Una gota de la orina de la paciente es
colocada en una lámina y mezclada
con una gota del antisuero coriónico
gonadotropico.
Si la orina es de una
mujer embarazada la gonadotropina
coriónica presente, neutralizan el anti-
suero asi que ya no esta libre para
reaccionar con las particulas de látex
para formar aglutinación. El punto final de la reacción tomada al final de
los dos minutos se interpreta como si~e:
Aglutinación Positiva:
No embarazo
N o aglutinación:
Embarazo
RESUMEN
En 1000 casos vistos por nosotros
en los últimos 5 años, la prueba inmunológica, para detectar el embarazo,
no dependió de la gravedad específica
de la orina. Tampoco se alteró por
cierto tipo de terapia hormonal.
Nosotros la preferimos por su rápidez, por su fácil realización y por su
elevado índice de se~ridad.
SUMMARY
In 1,000 cases we have seen in the last
5 years, the inmunologic test to detec
pregnancy, did not depend on the
specific gravity of the urine. It was
not
altered by hormonal
therapy
either.
We prefer it for its rapidity and easy
execution and for its accuracy.
BIBLIOGRAFlA
García Triviño
Shapiro-Zwarnstein
Aschehein-Zondek
Hoghen
Freidrnan
Kupperman
Hoffmann
Galli-Mainini
(Xenopus-Laevis)
Adela Brouha
Bemard-Hussay
Fleischmann
Collip
Jackson Memorial Hospital Vol. No. 1, No. 4
Omo Pharmaceutical Corp., EUA.
Archivo del autor, años 1951, 1955 Y 1967.