NTE INEN 0760: Carne y productos cárnicos

Re
p
u
b
l
i
co
fEc
u
a
d
o
r
≠ EDI
CTOFGOVERNMENT±
I
no
r
d
e
rt
op
r
o
mo
t
ep
u
b
l
i
ce
d
u
c
a
t
i
o
na
n
dp
u
b
l
i
cs
a
f
e
t
y
,e
q
u
a
lj
u
s
t
i
c
ef
o
ra
l
l
,
ab
e
t
t
e
ri
n
f
o
r
me
dc
i
t
i
z
e
n
r
y
,t
h
er
u
l
eo
fl
a
w,wo
r
l
dt
r
a
d
ea
n
dwo
r
l
dp
e
a
c
e
,
t
h
i
sl
e
g
a
ld
o
c
u
me
n
ti
sh
e
r
e
b
yma
d
ea
v
a
i
l
a
b
l
eo
nan
o
n
c
o
mme
r
c
i
a
lb
a
s
i
s
,a
si
t
i
st
h
er
i
g
h
to
fa
l
lh
u
ma
n
st
ok
n
o
wa
n
ds
p
e
a
kt
h
el
a
wst
h
a
tg
o
v
e
r
nt
h
e
m.
NTE INEN 0760 (1985) (Spanish): Carne y
productos cárnicos. Determinación del cobre
1. OBJETO
1.1 Esta norma establece el método para determinar el contenido de cobre en carne y productos
cárnicos.
2. TERMINOLOGIA
2.1 Contenido de cobre. Es la cantidad de cobre existente en la muestra, determinada bajo las condiciones
descritas en la presente norma.
3. RESUMEN
3.1 Digerir la muestra con ácido nítrico y ácido sulfúrico. Aislar el cobre y determinarlo colorimétricamente
como dietilditiocarbomato a un pH 8,5 cm presencia deI agente quelante EDTA. Se desarrolla color en una
escala entre 0 a 50 µg.
3.1.1 La presencia de carbomatos de bismuto y de los de teluro pueden inducir a un resultado erróneo, ya
que también desarrollan color a pH 8,5 y deberán por lo tanto ser descompuestos a compuestos incoloros
usando solución 1 N de hidróxido de sodio; el complejo de cobre es estable, a este tratamiento.
4. INSTRUMENTAL
4.1 Picadora eléctrica de carne (molino). Tipo laboratorio, provisto de una placa cribada con orificios de un
diámetro no mayor a 4 mm u otro equipo que produzca una pasta homogénea.
4.2 Balanza analítica, sensible a 1 mg.
4.3 Matraces volumétricos, de 100, 200 y 250 cm 3.
4.4 Pipetas volumétricas, de 1,5 cm3, 10 cm 3, 15 cm 3, 20 cm3 y 25 cm 3.
4.5 Pipeta graduada de 5 cm3 .
4.6 Frasco con tapa de vidrio, de aproximadamente 30 cm 3 de capacidad.
4.7 Balones kjeldahl.
(Continúa)
-1-
1984-164
1985-04
INEN 760
3
4.8 Ampollas de decantación, de 100 ó de 250 cm .
4.9 Fotocolorímetro o espectrofotómetro, con una longitud de onda de 400 mm aproximadamente.
4.10 Instrumental de laboratorio, (ver Anexo A).
5. REACTIVOS
5.1 Solución de carbamato. Disolver 1 g de dietilditiocarbamato de sodio (NH2 COO Na) en agua, diluir a
3
100 cm y filtrar. La solución debe guardarse en refrigeradora y prepararse semanalmente.
5.2 Solución de citrato EDTA. Disolver 20 g de citrato dibásico de amonio (NH4) 2 HC6 H5 O7) y
5 g de s al sódica deI ácido etilandiaminatetra-acético EDTA (c 10 H14 N2 Na208. 2H20) en agua y
3
3
diluir a 100 cm . Remover las trazas de cobre adicionando 0,1 cm de la solución de carbamato y
3
extraer con 10 cm de tetracloruro de carbono. Repetir la extracción hasta que el tetracloruro drenado
no tenga color.
5.3 Solución patrón de cobre. Colocar 0,20 g de hilo o lámina de cobre en un Erlenmeyer de 125
cm 3, a gregar 15 cm3 de solución (1 + 4) de ácido nítrico, cubrir el frasco con un vidrio de reloj y disolver
el cobre, calentando. Hervir para eliminar los vapores, enfriar y diluir a 200 cm 3. Esta solución contiene
2 µg por centímetro cúbico. Se debe preparar en el día que se va a usar.
3
3
5.3.1 Solución de trabajo. Diluir 20 cm de la solución patrón estándar (5.3) a 200 cm con agua; esta solución contiene 100 µg de cobre por centímetro cúbico. Luego, diluir 5 cm 3 de esta solución a 250 cm 3
con solución 2 N de ácido sulfúrico. Esta solución contiene 2µg por centímetro cúbico y debe prepararse
el mismo día que se va a usar.
5.4 Solución 6 N de hidróxido de amonio (NH4 OH) para remover las trazas de cobre en la forma
que seindica en 5.2.
5.5 Acido nítrico concentrado (HNO 3) (d = 1,40) (se debe purificar el ácido nítrico y el agua, por destilación, usando un aparato de vidrio pyrex).
5.6 Solución (1 + 4) de ácido nítrico (HNO 3).
5.7 Indicador azul timol, al 0,1%. Disolver en agua 0,1 de azul timo) (C27H30O5S); agregar suficiente solución 0,1 N de Na OH hasta que el color cambie a azul, luego diluir con agua a 100 cm 3.
5.8 Solución al 5% de cianuro de potasio (KCN). Disolver 5 g de cianuro de potasio y completar el
3
volumen a 100 cm .
5.9 Acido sulfúrico concentrado (H2SO4.)d = 1, 84.
(Continúa)
-2-
1984-164
1985-04
INEN 760
5.10 Solución 2 N de ácido sulfúrico (H2SO4)
5.11 Solución 1 N de hidróxido de sodio (NaOH)
5.12 Tetracloruro de carbono (CCI4)
5.13 Algodón absorvente.
6. PREPARACION DE LA MUESTRA
6.1 La preparación de la muestra se realizará de acuerdo al anexo A, de la Norma INEN 776.
7. PROCEDIMIENTO
7.1 La determinación debe efectuarse por duplicado sobre la misma muestra preparada.
7.1.1 Pesar 20 g de muestra preparada con aproximación al 0,1 µg e introducir en el balón kjeldahl. Si la
0
muestra contiene menos deI 75 /o de humedad, deberá adicionar agua para obtener esta concentración de
humedad.
7.1.2 Agregar un volumen inicial de ácido nítrico concentrado, aproximadamente igual a dos veces la
masa de la muestra seca, y 5 cm 3 de ácido sulfúrico, o tantos centímetros cúbicos de ácido sulfúrico
como pese en gramos la muestra seca, pero siempre en cantidad igual o mayor que 5 cm3.
7.1.3 Agitar el matraz y colocarlo en forma inclinada en la hornilla del aparato kjeldhal. Calentar suavemente
el balón, hasta que no se observe formación de espuma, y aumentar el calentamiento hasta que el contenido deI
balón hierva uniformemente, rotándolo de vez en cuando para prevenir que la muestra forme costras sobre la
superficie deI vidrio expuesto a la llama.
7.1.4 Mantener las condiciones de oxidación en el balón durante todo el tiempo que dure la digestión,
agregando pequeños volúmenes de ácido nítrico cada vez que la muestra se oscurezca. Continuar la digestión
hasta que la materia orgánica se destruya completamente y se haya liberado abundante cantidad de vapores de
anhídrido sulfúrico. La solución final debe ser incolora o de un color pajizo claro.
7.1.5 Cuando la muestra contenga alta proporción de grasa, deberá realizarse primeramente una digestión
parcial con ácido nítrico hasta que todo esté disuelto, con excepción de la grasa; luego, enfriar, filtrar para
separar la grasa sólida y lavar el residuo con agua. Adicionar ácido sulfúrico al filtrado y completar la digestión
en la forma descrita anteriormente.
(Cont inúa)
-3-
1984-164
1985-04
INEN 760
7.1.6 Terminada la digestión, enfriar la muestra, adicionar 25 cm
3
de agua y remover el ácido
nitrosilsulfúrico por calentamiento y vaporización. Repetir la adición de 25 cm
3
de agua y el
calentamiento hasta la formación de humos.
7.1.7 Si después de enfriar y diluir la muestra, hay presencia de materia insoluble, se deberá filtrar a través
3
de papel lavado con ácido, diluyendo a 100 cm .
7.1.8 Realizar un ensayo en blanco con todos los reactivos, sin la muestra, y siguiendo el mismo
procedimiento descrito a partir de 7.2 para cada determinación o serie de determinaciones. El blanco tiene
aproximadamente 1 µg de cobre.
7.2 Preparación de soluciones patrón de trabajo y curva patrón
7.2.1 Transferir 0,1 cm3, 2,5 cm3, 5,0 cm 3, 10 cm 3, 15 cm 3, 20 cm 3 y 25 cm 3 de la solución de trabajo (5.3.1)
que contiene 2 µg de cobre por centímetro cúbico, hacia ampollas de decantación, y agregar solución 2 N
3
de ácido sulfúrico hasta completar un volumen de 25 cm en cada ampolla.
3
7.2.2 Luego, agregar 10 cm de la solución de citrato EDTA a cada ampolla y proceder como se anota en
7.3.2.
7.2.3 Sobre un papel gráfico, construir la curva patrón de absorbancia contra microgramos de cobre, tomando en cuenta que las soluciones patrón de trabajo contienen 2,5 10, 20, 30, 40 y 50 µg de cobre. Si
las lecturas obtenidas corresponden a porcentajes de transmitancia, se usará papel semilogarítmico,
empleando la escala logarítmica para la transmitancia.
7.2.4 El trazo de la curva debe hacerse cuidadosamente, ya que algunos puntos pueden sufrir una mayor o
menor desviación.
7.3 Aislamiento y determinación del cobre.
7.3.1 Tomar con pipetas 25 cm3 de solución de la muestra obtenida en 7.1.7 y transferir a la ampolla de
3
3
decantación vástago corto, de 100 ó 250 cm de capacidad, y agregar 10 cm de la solución citrato EDTA.
7.3.2 Agregar 2 gotas deI indicador azul timol y, luego gota a gota, solución 6 N hidróxido de amonio, hasta
3
3
tener un viraje al verde o verde azulado. Dejar enfriar, agregar 1 cm de solución carbamato, 15 cm de
tetracloruro de carbono, y agitar fuertemente el contenido de la ampolla durante 2 minutos.
7.3.3 Dejar en reposo la ampolla hasta que se separen las capas de líquido, y drenar la capa de tetracloruro
de carbono, a través de algodón, hacia un frasco o tubo con tapa de vidrio.
7.3.4 Determinar la absorvancia o transmitancia de la capa de tetracloruro de carbono, en un instrumento
apropiado, a una longitud de onda de 400 mm aproximadamente.
(Continúa)
-4-
1984-164
1985-04
INEN 760
3
7.3.5 Si en la alícuota de 25 cm de la solución de la muestra están presentes más de 50 µg de cobre, se
usarán alícuotas mas pequeñas y se diluirán a 25 cm3 con solución 2 N de ácido sulfúrico. La más alta
exactitud en la determinación se alcanza a un nivel de cobre de aproximadamente 25 µg, teniéndose una lectura de absorbancia aproximadamente de 0,3 en una celda de 1 cm.
7.3.6 Para determinar presencia de bismuto o teluro (ver 3.1.1), regresar la solución de tetracloruro de carbono a la ampolla de decantación, adicionar 10 cm 3 de solución al 5% de cianuro de potasio y agitar durante un minuto. La presencia de bismuto y teluro es negativa si la solución de tetracloruro de carbono se
torna incolora.
7.3.6.1 Si el ensayo realizado en 7.3.6 resulta positivo, deberá desarrollar color en otra alícuota de 25 cm 3,
como se indica en 7.3.1 y 7.3.2.
7.3.6.2 Dejar en reposo la ampolla hasta que se separen las capas de líquido y drenar la capa de tetracloruro de
carbono a una segunda ampolla, agregar a ésta 10 cm 3 de solución 1 N de hidróxido de sodio, agitar
durante un minuto y dejar nuevamente en reposo.
7.3.6.3 Una vez separadas las capas deI líquido, drenar la capa de tetracloruro de carbono a una tercera
3
ampolla, agregar 10 cm de solución 1 N de hidróxido de sodio y agitar durante un minuto.
7.3.6.4 Continuar el ensayo como se indica en 7.3.3 y 7.3.4.
8 . CALCULO S
8.1 El contenido de cobre en carne y productos cárnicos se expresa en miligramos de cobre por kilogramo
de muestra y se calcula de la manera siguiente:
8.1.1 Con la absorbancia leída para la muestra (ver 7.3.4) y la curva patrón, se encuentra el contenido de
cobre, en µg de Cu, y luego se aplica la ecuación siguiente:
Siendo:
Cu = contenido de cobre en la muestra, en miligramos de cobre en 1 000 g de muestra.
1
= lectura en la curva de la concentración de cobre, expresada en µg de Cu (ver 8.1.1).
m = masa de la muestra original que contiene 20 g o menos de sólidos (ver 7.1.1), en gramos.
(Continúa)
-5-
1984-164
INEN 760
1985-04
9. ERRORES DE METODO
9.1 La diferencia entre los resultados de dos determinaciones efectuadas por duplicado no debe ser mayor
del 10% del valor medio; en caso contrario, debe repetirse la determinación.
10. INFORME DE RESULTADOS
10.1 Como resultado final, debe reportarse la media aritmética de las dos determinaciones, siempre que los
requisitos de repetibilidad se hayan cumplido.
10.2 En el informe de resultados, debe indicarse el método usado y el resultado obtenido. Debe mencionarse, además, cualquier condición no especificada en esta norma o considerada como opcional, así como
cualquier circunstancia que pueda haber influido sobre el resultado.
10.3 Debe incluirse todos los detalles para la completa identificación de la muestra.
(Continúa)
-6-
1984-164
1985-04
INEN 760
ANEXO A
A.1 Todo el material de vidrio debe limpiarse con ácido nítrico caliente.
A.2 Usar petrolato blanco para lubricar la llave de paso de las ampollas de decantación.
A.3 No debe usarse uniones de latón ni de cualquier otra aleación que contenga cobre.
(Continúa)
-7-
1984-164
1985-04
INEN 760
APENDICE Z
Z.1 NORMAS A CONSULTAR
INEN 776. Carne y productos cárnicos. Muestreo.
Z.2 BASES DE ESTUDIO
Norma Centroamericana ICAITI 34125 h17. Carne y productos cárnicos. Determinación del contenido de
cobre. Instituto Centroamericano de Investigación y Tecnología Industrial. Guatemala, 1979.
AOAC. Official methods of analysis of the Association of Official analytical chemists. Metals and other
elements as residues in foods. Cooper International union of pure and applied chemistry carbamate method
25.035. Official final Action. AOAC. Washington, DC 20044. 1975.
Norma Sanitaria de Alimentos OFSANPAN-IALUTZ. A015. Norma técnica de métodos físicos y químicos
para determinación de metales. Cobre. OPS/OMS. Oficina Sanitaria Panamericana. Washington, 1968.
-8-
1984-164
INFORMACIÓN COMPLEMENTARIA
Documento:
NTE INEN 760
TITULO: CARNE Y PRODUCTOS CARNICOS.
DE4TERMINACIÓN DEL COBRE.
ORIGINAL:
Fecha de iniciación del estudio:
Código:
AL 03.02-328
REVISIÓN:
Fecha de aprobación anterior por Consejo Directivo
Oficialización con el Carácter de
por Acuerdo No.
de
publicado en el Registro Oficial No. de
Fecha de iniciación del estudio:
Fechas de consulta pública: de
a
LA Dirección General, atendiendo a la necesidad de contar con normas que regulen la calidad de la crne y
productos cárnicos dispuso la elaboración de esta norma.
Por tratarse de la homologación de una norma internacional e metodos de ensayo, el proyecto no fue sometido
a consulta pública ni discutido por el subcomité Técnico.
Subcomité Técnico:
Fecha de iniciación:
Fecha de aprobación:
Integrantes del Subcomité Técnico:
NOMBRES:
INSTITUCIÓN REPRESENTADA:
Otros trámites:
El Consejo Directivo del INEN aprobó este proyecto de norma en sesión de 1985-04-19
Oficializada como: OPCIONAL
Registro Oficial No. 265 de 1985-09-05
Por Acuerdo Ministerial No. 569 de 1985-07-31
Instituto E cuatoriano de Normalización, INEN - Baquerizo Moreno E8-29 y Av. 6 de Diciembre
C asilla 17-01-3999 - Telfs: (593 2)2 501885 al 2 501891 - Fax: (593 2) 2 567815
Dirección G eneral: E-Mail:furresta @ inen.gov.ec
Área Técnica de Normalización: E-Mail:normalizacion @ inen.gov.ec
Área Técnica de C ertificación: E-Mail:certificacion @ inen.gov.ec
Área Técnica de Verificación: E-Mail:verificacion@ inen.gov.ec
Área Técnica de Servicios Tecnológicos: E-Mail:inencati @ inen.gov.ec
Regional Guayas: E-Mail:inenguayas @ inen.gov.ec
Regional Azuay: E-Mail:inencuenca @ inen.gov.ec
Regional Chimborazo: E-Mail:inenriobamba @ inen.gov.ec
URL:www.inen.gov.ec