TOMA DE MUESTRAS SR

ACCIONES POR EL LABORATORIO
PARA EL DIAGNOSTICO DE
SARAMPION Y RUBEOLA
LABORATORIO DE SALUD PUBLICA
BOGOTA D.C.
INTRODUCCION
• En Colombia se siguen las recomendaciones de la OPS para el
diagnóstico de sarampión y rubéola, el cual se realiza mediante la
detección de IgM en una muestra de suero tomada al primer contacto con
el paciente y hasta los 30 días de iniciada la erupción.
• En algunas ocasiones se pueden tener resultados positivos o dudosos en
las pruebas de IgM sin que se trate de casos reales de sarampión. Esto
puede presentarse en pacientes con antecedente vacunal reciente, pero
también puede deberse a falsos positivos en las pruebas diagnósticas
utilizadas, principalmente por reacciones cruzadas con otros virus.
• Siempre que una muestra arroje un resultado positivo o dudoso para IgM,
debe solicitarse la recolección de una segunda muestra de suero tomada
12-15 días después de la primera. Esta segunda muestra debe enviarse
inmediatamente al INS para realizar la cuantificación de anticuerpos IgG
en las dos muestras del caso.
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Muestras recibidas en el LSP para SR
 SUERO
 ORINA
 HISOPADO NASOFARINGEO
TOMA DE MUESTRA DE SUERO
La muestra de suero debe recolectarse asépticamente en un volumen de 10
ml de sangre total en tubo seco o con gel .
Las muestras de sangre se deben centrifugar a 1.500 rpm durante 10
minutos, preferiblemente en centrífuga refrigerada a 4°C. Una vez
separado el suero debe ser refrigerado a 4° C hasta el momento del
procesamiento o envío.
Rotular bien el tubo con el nombre del paciente y el documento de
identidad.
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SUERO
DETECCION DE IgM (oportunidad reporte 4 días)
POSITIVO o DUDOSO
NEGATIVO
Envío al INS ( de la primera muestra). ANTECEDENTE DE VIAJE CASO DESCARTADO
Solicitud 2a muestra de suero en15 días
DETECCION DE IgM
(oportunidad reporte 4 días)
sea positivo o negativo
Envío al INS
TOMA DE MUESTRAS PARA AISLAMIENTO
VIRAL
Se debe recolectar una muestra de nasofaringe y de orina a todo caso
sospechoso que se encuentre en el tiempo óptimo para su recolección.
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MUESTRA DE ORINA
5 ML
Centrifugar
2500 RPM, 10 min
Resuspender el sedimento en
0,5-2 mL MTV
Refrigerar
a 4-8 0 C
Enviar al Lab Referencia
con paquetes refrigerantes
lo mas pronto posible
Cuando NO se
pueda centrifugar
Refrigerar de 4-8 0 C si no es
posible enviar en las
primeras 48 horas congelar a
-70°C
Enviar al Lab Referencia con paquetes
refrigerantes
LO MAS PRONTO POSIBLE
Muestra faríngea o nasofaríngea
En lo posible con escobillón de alginato. Pero se puede tomar con escobillón
de madera.
• Frotar con un escobillón las fosas nasales
• Con otro escobillón tomar muestra de garganta
• Colocar el escobillón en el medio de transporte viral, agitando el hisopo y
escurriéndolo contra las paredes.
• Consérvelo refrigerado entre 2 - 8ºC y remítalo en el menor tiempo
posible al Laboratorio de Salud Pública.
• Si no se puede enviar la muestra en las primeras 24 horas, el ideal es
conservar a -70°C y enviarla al laboratorio en hielo seco.
• En caso de no tener disponible el medio de transporte viral se puede usar
de manera opcional solución salina estéril.
Tipo de muestra
Tiempo recomendado para la
toma de muestras para
diagnóstico de sarampión/rubéola
ACEPTABLE hasta 30 días Suero
IDEAL
ACEPTABLE
IDEAL
0
1
2
ACEPTABLE
3
4
5
6
Dias después de la erupción
* Muestra ideal para aislamiento viral
*HNF
Orina
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TECNICA DE LABORATORIO
LSP se realiza la técnica de recomendación internacional para
el diagnóstico de Sarampión y Rubéola: Ensayo inmuno
enzimático para el reconocimiento cualitativo de los
Anticuerpos IgM específicos contra el virus de la Rubéola y el
Sarampión.
Sensibilidad
Sarampión
100 %
Especificidad
100%
Rubéola
98%
97.3%
Investigación en el INS de un caso sospechoso de S Y R
Muestra de suero
POSITIVO
ó DUDOSO
SR IgM (1 y 2
muestra)
Cuantificación de IgG
(sueros pareados)
confirmar
Muestra para
aislamiento
viral(hisopado
y orina)
Disminución
Análisis - DESCARTE
Aumento
Análisis – Confirmación
RT-PCR
prueba
confirmatoria
adicional prueba de Avidez
de anticuerpos IgG
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Casos con resultados de IgM Positivo o Dudoso
Si se tiene un caso con IgM Positiva, desde el laboratorio solo se logra tener
una respuesta concluyente si se tienen muestras de suero pareadas (fase aguda
y fase convaleciente) para la comparación de títulos de IgG.
También se debe contar con muestras para detección viral que son muy útiles
para la configuración final del caso (conocer los genotipos de los virus).
Pruebas adicionales a realizar:
• Diagnósticos diferenciales: Detección de IgM contra Parvovirus B19 (eritema
infeccioso), Herpesvirus tipo 6 (Roseola o exantema súbito), Citomegalovirus y
Dengue. Para casos de SRC en lugar de Herpesvirus 6 se hace Herpesvirus 1 y 2 IgM.
• Determinación de avidez de anticuerpos IgG anti-rubeola  permite definir si el
caso tuvo o no contacto reciente con el virus de rubeola. Muy útil por ejemplo para
casos sin 2ª muestra de suero y sin muestra para detección viral.
• Detección del virus de sarampión o rubeola por RT-PCR
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Cuándo se realiza RT-PCR a partir de muestra
respiratoria y orina
• Si hay una alta sospecha epidemiológica (por ejemplo, posibles casos
importados) se procesa a la par con las pruebas serológicas
• Si no se recolectó muestra de suero
•Caso con resultado de IgM Dudoso o Positivo sin segunda muestra de suero
• Caso con aumento significativo de IgG, sin que tenga un antecedente vacunal
reciente (en los semanas previas a la recolección de la 1ª muestra)
• Cuando por algún otro criterio se considere pertinente
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No podemos olvidar….
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La epidemiología está cambiando, debemos estar preparados
para situaciones que antes no se esperaban
• Cada vez se hace más importante la realización de un mayor
set de pruebas de laboratorio para aportar información que
apoye la confirmación o descarte de los casos.
• Al disminuir la incidencia de las enfermedades el valor
predictivo de las pruebas serológicas disminuye = mayor
probabilidad de falsos positivos. Sin embargo no todos los
positivos van a ser falsos positivos, se debe aportar evidencia
suficiente para demostrarlo.
• Existe la posibilidad de falsos negativos en muestras tomadas
tempranamente (0-3 días de inicio de erupción).
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PARA TENER EN CUENTA……
• En algunas ocasiones se pueden tener resultados positivos o
dudosos en las pruebas de IgM sin que se trate de casos reales de
sarampión o rubéola. Esto puede presentarse en pacientes con
antecedente vacunal reciente, pero también puede deberse a falsos
positivos en las pruebas diagnósticas utilizadas, principalmente por
reacciones cruzadas con otros virus como el dengue, herpes virus
humano tipo 6 (roséola), varicela, parvovirus B19 (eritema infeccioso),
Epstein-Barr, entre otros.
• Para SRC se deben tomar igualmente las 3 muestras.
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PARA TENER EN CUENTA……
• Las muestras para detección viral se deben enviar bien rotuladas,
identificando claramente el nombre del paciente y la fecha de la
toma de la muestra y el tipo de muestra que contiene el tubo.
• Estas muestras se deben remitir empaquetadas dentro de otro
recipiente o contenedor que proteja la muestra durante el viaje y se
debe garantizar las condiciones de refrigeración (con hielo
húmedo) o de congelación (con hielo seco), según sea el caso,
para que las muestras se mantengan homogéneas hasta que se
reciban en el Laboratorio de Referencia.
• Enviar al LSP toda muestra de pacientes residentes en Bogotá con
antecedente de viaje o contacto directo con personas que hayan
viajado al exterior y al cual se le sospeche sarampión y/o rubeola.
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TRIPLE EMBALAJE
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Gracias
[email protected]