en el estado de Sinaloa. - SAPPI

INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL
Centro Interdisciplinario de Investigación para el
CI
I
Desarrollo Integral Regional Unidad Sinaloa
DI
R
REPORTE FINAL (PRIMER AÑO)
TITULO DEL PROYECTO:
Identificación de Variedades Comerciales de Tomate
con Tolerancia a Fitoplasmas y al Virus del
Enrollamiento Amarillo de la Hoja del Tomate (TYLCV)
en el estado de Sinaloa.
Responsable:
Dra. Norma Elena Leyva López
Institución
que
presenta
el
proyecto:
Centro
Interdisciplinario
de
Investigación para el Desarrollo Integral Regional
Institución usuaria del proyecto: Asociación de Agricultores del Rio Sinaloa
Poniente
Colaboradores
Dr. Jesús Méndez Lozano (CIIDIR-IPN, Sinaloa)
Dr. Juan Pablo Martínez Soriano (CINVESTAV-IPN, Irapuato)
Biol. Píndaro Álvarez Ruiz (CIIDIR-IPN, Sinaloa)
M.C. María Elena Santos Cervantes (CIIDIR-IPN, Sinaloa)
Estudiantes Participantes
Jesús Alicia Chávez Medina
Jesús Arturo Fierro Coronado
Mariela Guadalupe Espinosa Mancillas
Fátima del Rosario Rivera Soto
a
Sin
a
lo
BREVE DESCRIPCION DEL PROYECTO
El problema agronómico actual de mayor impacto sobre hortalizas y
frutales en el estado y en el país es el causado por diversas enfermedades
virales y fitoplámicas que producen la pérdida total o parcial de los mismos;
cuyos vectores pueden ser trips, moscas blancas, pulgones, chicharritas y
psílidos.
En el estado de Sinaloa el cultivo del tomate es una de las principales
actividades económicas y durante el ciclo otoño-invierno 2005-2006 se ha visto
afectado por una enfermedad que ha provocado daños de hasta el 100% en
casi la totalidad de los cultivos establecidos en todo el estado de Sinaloa,
desde la región productora de tomate de la Cruz de Elota hasta el Sur de
Sonora, siendo el norte del estado de Sinaloa el más afectado. Es urgente la
realización de investigación que esclarezca los organismos causales de la
enfermedad,
determinación
de
variedades
tolerantes
o
resistentes,
epidemiología y distribución del patógeno, así como métodos de control de la
enfermedad y de sus vectores. Datos preliminares recientes de nuestro grupo
indican que los principales actores en la problemática de este cultivo son
fitoplasmas, crinivirus y geminivirus, habiéndose confirmado ya la presencia del
virus del enrollamiento Amarillo de la hoja del tomate (TYLCV), uno de los
patógenos más devastadores en todos los sitios agrícolas donde se ha
presentado.
El objetivo principal de este proyecto es analizar mediante el uso de
técnicas moleculares el comportamiento de variedades comerciales (para
consumo en fresco e industrial) de tomate al complejo viral que ha causado ya
severas pérdidas a los horticultores en el ciclo O-I 2005. Para la realización de
este proyecto, semilla de tomate de 25 variedades será sembrada en charolas
de germinación en cámara de crecimiento con condiciones de temperatura e
iluminación controlada y aislados de vectores. La selección de la semilla será
de acuerdo a las reportadas con tolerancia a geminivirus, seleccionándose
variedades que han mostrado tolerancia en otras partes del mundo donde se
ha presentado el mismo problema, también serán utilizadas algunas variedades
susceptibles, todas de características de calidad preferidas por los agricultores
locales. Se realizarán dos experimentos en el municipio de Guasave, una de
las localidades donde se ha presentado la más alta incidencia de mosca blanca
y virosis, por lo que es el sitio ideal para evaluar variedades que presenten
tolerancia a alta presión de virosis y mosca blanca, ya que durante el ciclo
actual se ha observado que variedades que en la zona centro y sur mostraron
buen comportamiento, en la región norte no fueron viables.
Estos
experimentos serán establecidos durante los meses de febrero-junio, el primero
y en agosto-noviembre, el segundo. Ambos experimentos serán establecidos
en dos predios, uno en el CIIDIR-IPN y otro con un productor de tomate de la
localidad. Se realizará un diseño experimental de bloques al azar con tres
repeticiones y 25 tratamientos (variedades comerciales de tomate sembradas
en la región y otras que han mostrado tolerancia en otras regiones) en cada
sitio experimental. El manejo del cultivo para el experimento será el mismo que
el agricultor aplique al resto de su lote, pero sin aplicaciones contra vectores.
Se realizará un análisis de suelos completo (microbiológico y químico) antes
de la siembra. Se realizará monitoreo semanal de insectos vectores con
trampas amarillas. Se analizará la incidencia y registro de síntomas de la
enfermedad en campo semanalmente, para posteriormente compararse con los
resultados de laboratorio (pruebas de PCR). El diagnóstico molecular de los
patógenos se realizará a la semilla y durante las diferentes etapas fenológicas
del cultivo, se registrará sintomatología y rendimiento de las diferentes
variedades y será comparada con los resultados del PCR para determinar la
tolerancia de los cultivares al complejo viral.
INTRODUCCION
En México, el estado de Sinaloa ocupa el primer lugar en la producción
de hortalizas, participando con el 40% del total de las exportaciones, siendo el
tomate la hortaliza que mas se cultiva (SAGARPA 2004). El tomate es la
aportación vegetal de México más extendida mundialmente. La aceptación que
tiene en las diversas culturas del mundo se evidencia por ser el segundo
producto hortícola en el consumo mundial. Es un importante generador de
divisas y generador de empleos para el país. Sin embargo la producción de
estas hortalizas se ve afectada por diferentes factores que reducen la
producción y calidad del tomate, dentro de los cuales se encuentran
las
enfermedades causadas por hongos, bacterias, virus y fitoplasmas. Los
fitoplasmas son procariotes pertenecientes a la clase Mollicutes, desprovistos
de pared celular, característica que le confiere gran plasticidad, pleomorfismo,
resistencia a las sustancias antibacterianas y sensibilidad in Vitro (yu, et al.,
1998), son transmitidos por insectos de las familias Cicadellidae y Fulgoridae
comúnmente llamadas chicharritas (Lee et al., 1998) y por material vegetativo
de propagación. Los fitoplasmas se localizan en el floema, a menudo alineados
parentalmente a la longitud de los tubos cribosos (Oshima, et al., 2001).
Actualmente las técnicas principal utilizada para detección de fitoplasmas es la
reacción en cadena de la polimeraza o PCR, ya que es una técnica versátil,
simple, y de alta sensibilidad y especificidad, además de que el patógeno no
requiere de purificación antes del análisis (Grenn et al., 1999; Gundersen y lee,
1996). En Sinaloa en los últimos ciclos de cultivo de tomate, se ha observado
diversos síntomas que se les atribuye a fitoplasmas, estos cultivos se han visto
afectados a tal grado que se han tenido que rastrear para nuevamente plantar
tomate; por lo que se ha dado la necesidad de realizar estudios para identificar
variedades comerciales de tomate con tolerancia a fitoplasmas para disminuir
el presente problema en el cultivo de tomate en el estado de Sinaloa.
ANTECEDENTES Y JUSTIFICACIÓN
Las pérdidas que producen los virus y fitoplasmas en la agricultura, son
cuantiosas. Se estima que las virosis han llegado a producir pérdidas de
muchos miles de millones de pesos, en cultivos protegidos. En general, los
virus provocan un descenso en la fotosíntesis, disminuyen la cantidad de
hormonas de crecimiento, descienden el nivel de nutrientes en la planta y
aumentan la respiración. La mayoría de los fitovirus no suelen ser específicos.
Es decir, uno de ellos puede atacar a distintas especies vegetales, y cada una
de éstas puede sufrir el ataque de diferentes virus. Los virus y fitoplasmas para
sobrevivir deben ser capaces de replicarse en las células del huésped,
expandirse por el mismo y colonizar a nuevas plantas. El proceso de
transmisión de una planta a otra resulta esencial, habiéndose desarrollado
diversas estrategias que, en la mayoría de los casos, involucran un insecto
vector (Martínez-García, 2001). Los virus se pueden transmitir de una planta a
otra por propagación vegetativa, es decir, injertos, esquejes, etc., por
transmisión mecánica provocadas por herramientas agrícolas como tijeras de
podar, por semillas, por polen, pero sobre todo por insectos. Los insectos, son
sin duda los vectores de fitovirus más eficaces.
En el caso de tomate, los problemas virales a nivel mundial se han
incrementado desde los años ochentas por enfermedades causadas por
geminivirus transmitidos por mosca blanca (Género Begomovirus). Dentro de
los begomovirus reportados el Virus del enrollamiento amarillo del tomate
(TYLCV) es uno de los más devastadores en el cultivo del tomate en el mundo
(Bird, J. et al., 2001). Es común, que las pérdidas ocasionadas por el TYLCV
son hasta de un 100% (Cohen, S. et al 1995). El TYLCV fue descrito por
primera vez en 1931 y de ahí se ha distribuido en los diferentes regiones del
Mediterráneo y África ( Cohen, S. et al., 1995). En América, el primer reporte de
este virus fue a principios de 1990 en la República Dominicana (Ancla, M.K. et
al 1993) y posteriormente en Jamaica (MacGlashan, et al., 1994) y Cuba
(Ramos, P.L. et al., 1996). Posteriormente se identificó en Florida, Georgia y
Lousiana en E.U. (Mamol, M.T. et al., 1999 y Polston, J., et al., 1999), la
Bahamas (47), Puerto Rico (4) y en México en la Península de Yucatán
(Ascencio-Ibañez, J.T. et al., 1999). En Sinaloa, recientemente en el ciclo
agrícola 2005 se han presentado daños dramáticos en el cultivo de tomate por
enfermedades causadas por virus en el estado de Sinaloa; siendo el valle de
Guasave el más afectado. En estudios preliminares se ha identificado al virus
del TYLCV como parte de estas enfermedades (Méndez-Lozano, et al., 2005
no publicado). Hasta principios de Noviembre del 2005 se han rastreado
aproximadamente 800 hectáreas de 1500 hectáreas sembradas por los daños
ocasionados por esta enfermedad. La emergencia de nuevos virus como es el
caso del TYLCV es una preocupación de los productores hortícola por las
pérdidas cuantiosas ocasionadas (entre 40 y 100 mil pesos por hectárea).
IDENTIFICACIÓN DEL PROBLEMA
En Sinaloa, el tomate es el principal producto hortícola de exportación, ya que
representa el 37% del valor total de las exportaciones de legumbres y
hortalizas y el 16% del valor total de las exportaciones agropecuarias, solo
superadas por el ganado vacuno. Este hecho, lo ha consolidado como el mayor
productor nacional e internacional; así como soporte fundamental en la
economía del estado. Sin embargo, esta actividad y su producción se ha visto
seriamente dañada en el reciente ciclo agrícola primavera-verano 2005 por
enfermedades causadas por virus y fitoplasmas.
Estudios preliminares de nuestro grupo de trabajo indican la presencia
de un nuevo geminivirus en el estado (del género Begomovirus, transmitido por
mosca blanca). Este es una variante del Virus del enrollamiento amarillo de la
hoja de tomate (Tomato yellow leaf curl virus, TYLCV) originalmente reportado
en Israel y su dispersión que va desde el Medio Oriente, Europa, Asia, el
Caribe E.U. y México con efectos devastadores.
Este proyecto cuenta con el apoyo total de la Asociación de Agricultores
y de agricultores independientes debido al grave problema por el que pasa el
cultivo de tomate durante este ciclo, donde lotes completos han tenido que ser
destruidos, causando severas pérdidas, de hasta el 100% y poniendo el riesgo
el ciclo actual del cultivo por temor a mayores pérdidas ya que siembras
recientes han mostrado el mismo problema, achaparramiento, pérdida de flor,
arrugamiento y en general deficiencia en desarrollo.
OBJETIVO GENERAL
Identificar variedades comerciales de tomate con tolerancia a fitoplasmas y al
virus del enrollamiento Amarillo de la hoja del tomate (TYLCV).
HIPÓTESIS
Existen en el mercado variedades de tomate con tolerancia a fitoplasmas y al
virus del enrollamiento amarillo de la hoja del tomate (TYLCV).
METODOLOGÍA PROPUESTA PARA LLEGAR A LOS RESULTADOS
ESPERADOS
Trabajo de campo:
La semilla de tomate de las diferentes variedades será sembrada en
charolas de germinación en cámara de crecimiento con condiciones de
temperatura e iluminación controlada y aislados de vectores. Posterior a un
mes las plántulas serán llevadas a campo, sembrándose en los campos del
CIIDIR y con dos productores cooperantes. Se realizará un diseño experimental
de bloques al azar con tres repeticiones y
10 tratamientos (variedades
comerciales de tomate sembradas en la región) en cada sitio experimental. El
manejo del cultivo para el experimento será el mismo que el agricultor aplique
al resto de su lote, pero sin aplicaciones contra vectores.
Se realizará un análisis de suelos completo (microbiológico y químico)
antes de la siembra. Se realizará monitoreo semanal de insectos vectores con
trampas amarillas (charolas con agua), los técnicos de campo de la asociación
de Agricultores apoyarán para su colecta y envío al Laboratorio de Biología
Molecular del CIIDIR. Se analizará la incidencia y registro de síntomas de la
enfermedad en campo semanalmente, para posteriormente compararse con los
resultados de laboratorio (pruebas de PCR).
Trabajo de laboratorio:
Experimento 1. Análisis de la semilla: Escrutinio completo (virus, fitoplasmas,
hongos, bacterias) para verificar que el material a sembrar está libre de
patógenos.
Experimento 2: Extracción de DNA de follaje.
Para la extracción de los ácidos nucleicos totales se utilizará material vegetal
(tallos y nervaduras de hojas) ya que es en estas partes de la planta donde se
ha reportado una mayor concentración de virus y fitoplasmas (Chang y col,
1998 y Leyva-López y col., 2002).
Experimento 3. Detección del patógeno por PCR en las variedades de tomate.
Para la prueba de PCR se realizarán tres muestreos durante los diferentes
estados fenológicos de la planta (plántula, floración y producción). Para la
detección del virus TYLCV se utilizará la técnica de PCR con los primers MOTCP (Acencio-Ibañez y col., 1999). La detección de fitoplasmas se utilizará
mediante la técnica de PCR anidado con dos juegos de oligonucleótidos
universales R16mF2/R16mR1, que amplifican un fragmento de 1450 pares de
bases de la región 16S ribosomal y el par R16F2n/R16R2 que amplifica un
fragmento de 1250 pares de bases de la misma región (Gundersen y Lee 1996;
Leyva-López et al., 2002).
Experimento 4. Determinación de calidad y productividad de las diferentes
variedades de tomate. Se determinará color, peso, tamaño, entre otros; del
fruto producido, considerándose 10 plantas individuales por variedad para
medir el efecto de los patógenos sobre el patrón de calidad y productividad de
todas las variedades.
Experimento 5. Monitoreo semanal de insectos vectores. Mediante el uso de
charolas amarillas se registrará semanalmente la incidencia de insectos
vectores en los tres puntos del trabajo de campo. En caso de ser requerido se
utilizará la asesoría de personal especializado para la identificación de algunas
especies de insectos vectores, como M.C. Rebeca Peña Martínez y al M.C.
Antonio Marín Jarillo, especialistas en áfidos y psílidos, respectivamente.
Metas y Actividades.
1.
Identificar variedades con tolerancia a fitoplasmas
Actividades: Experimentos 2, 3 y 4.
2.
Identificar variedades con tolerancia a TYLCV
Actividades: Experimentos 2, 3 y 4.
3.
Conocer la incidencia de vectores, especialmente mosca blanca
Actividades: Experimentos 1 y 5.
4.
Determinar el efecto en productividad de los patógenos en las diferentes
variedades
Actividades: Experimentos 1, 2, 3, 4 y 5.
RESULTADOS
El primer experimento se inició muy tarde en el ciclo de cultivo 2005-06 debido
a la aprobación del proyecto en diciembre y a que fue difícil contar con las
variedades de tomate a tiempo. El experimento se inició hasta marzo y el
desarrollo del cultivo fue muy lento y no se llegó a evaluar hasta producción.
Aún así se hicieron las evaluaciones de incidencia de insectos así como las
pruebas moleculares para la detección de los patógenos. Para evitar los
problemas de este ciclo, ya se inició desde el mes de septiembre con el
segundo experimento (Ciclo 2006-07) y ya se cuenta con 30 variedades
sembradas en el campo experimental del CIIDIR.
1. GERMINACIÓN DE SEMILLAS.
Se sembraron 12 variedades de tomate el día 14 de febrero del 2006,
germinando a los 5 días, el por ciento de germinación se muestra en la
siguiente grafica:
100
TRACIE
8000
BSS 436
TRACIE
SALADETE
BSS 436
# 3811
SALADETE
EL SE„OR
# 3811
#EL
6790
SE„OR
60 80
40
20
60
40
EL
CAPORAL
# 6790
EL
EL PATRON
CAPORAL
20
0
0
VARIEDADES DE TOMATE
V-84
EL PATRON
V-194
V-84
CDX-142
V-194
CDX-142
CDX-152
CDX-152
Figura 1. Gráfico mostrano los resultados de germinación de las variedades de
tomate sembradas en el CIIDIR.
Para el experimento 2006-2007 se contó con el apoyo del Ing. Briceño de
agrícola El Rancho. El apoyo ha consistido en asesoría técnica sobre el
desarrollo del cultivo (nutrición, riegos, manejo, etc.), así como con la
germinación de la semilla en sus invernaderos y con fertilizantes e insumos
agrícolas.
2. Diseño del experimento de Campo
En el campo experimental de CIIDIR-IPN las plántulas germinadas en
semilleros se plantaron en campo el día 30 de marzo del 2006, empleando el
diseño de 3 bloques completamente al asar, con riego por goteo sin aplicación
de insecticidas (Figura 2). En el campo experimental del productor cooperante
se establecieron 20 variedades distribuidas al azar, con una sola repetición,
con riego por goteo y con manejo integrado de plagas (insecticidas y
biológicos) (Figura 3).
Experimento I CIIDIR
A
11
10
11
12
# 3811
II
SALADETE
CDX 142
4
9
III
# 3811
V-84
BSS 436
EL PATRON
10
CDX 152
EL PATRON
8
# 3811
EL CAPORAL
7
6
CDX 142
6
4
V-194
5
8
9
V-194
4
BARRERA
9
2
# 6790
5
8
V-84
# 6790
2
EL PATRON
12
# 6790
CDX 152
EL SEÑOR
1
V-84
BSS 436
6
EL SEÑOR
SALADETE
V-194
3
12
CDX 152
2
3
# 3811
1
EL CAPORAL
EL SEÑOR
3
7
TRACIE
7
SALADETE
CDX 142
10
SALADETE
5
BSS 436
TRACIE
11
EL CAPORAL
1
TRACIE
EL CAPORAL
2m
CDX 152
8m
CDX 142
40 plantas / hilera (5/m)
I
BARRERA
1.6 m
B
II
I
III
PLANTADAS EL 30/mar/06
Figura 2. Diseño del experimento de campo establecido en el campo del
CIIDIR-IPN, Sinaloa. Panel A, esquema mostrando la distribución de las
variedades en campo. Panel B, panorama general del experimento en campo el
primer día de plantación.
Experimento II: Productor
1
2
3
4
5
SERI
B52
CORAZON
7
8
9
CLX 37242
BIBAL
LX 37208
6
II
10 DRK 2178
CLX 38102
j
OS 151122
i
CLX 37284
h
PRK 8526
g
PIKRIPE 461
f
REALEZA
e
151549
d
SERI *B
HA 3523
TYBET
CLX 38104
c
SD 333
b
SUN KIN
a
SERI
A
I
10
SERI
B
Figura 3. Diseño del experimento de campo establecido en el campo del
Productor Cooperante. Panel A, esquema mostrando la distribución de las
variedades en campo. Panel B, panorama general del experimento en campo el
un mes después de plantación.
3. Sintomatología en plantas de tomate.
En general todas las variedades mostraronmuy poca tolerancia a las
condiciones ambientales adversas, así como a la alta presencia de mosca
blanca. Todas presentaron un desarrollo muy lento, principalmente el
experimento del campo experimental del CIIDIR, por lo que a pesar de
desarrollo se decidió continuar con el experimento pero se repetirá en el
siguiente ciclo con variedades que han mostrado buenos resultados en otras
zonas productoras de tomate en el mundo y con tolerancia a TYLCV. A
continuación se muestra la sintomatología observada en ambos experimentos
(Figuras 4 y 5).
10
9
e
j
NECROSIS
j
Figura 5. La fotografía muestra los diferentes síntomas observados en el
cultivo.
4. Monitoreo de insectos en el cultivo de tomate.
La incidencia poblacional de insectos vectores fue monitoreada por
métodos indirectos en ambos experimentos, encontrándose una muy alta
incidencia de mosca blanca durante todo el experimento, sólo disminuyó la
incidencia de mosca blanca al final del ciclo del cultivo, cuando ya
prácticamente habían desaparecido todos los cultivos (Figuras 6 y 7). 7.6.1.
Monitoreo de insectos en campo experimental de CIIIDIR.
MB
200
150
MB
11/06/2006
04/06/2006
28/05/2006
21/05/2006
14/05/2006
07/05/2006
30/04/2006
23/04/2006
16/04/2006
09/04/2006
0
02/04/2006
100
50
12
10
8
6
4
2
0
CH
PU
PA
11/06/2006
04/06/2006
28/05/2006
21/05/2006
14/05/2006
07/05/2006
30/04/2006
23/04/2006
16/04/2006
09/04/2006
02/04/2006
TR
Figura 6. Incidencia poblacional de Insectos vectores en el experimento del
CIIDIR-IPN, Sinaloa. MB. Mosca blanca, Pu, pulgón, ch, chicharrita, Pa,
paratrioza.
07
/0
10 4/ 20
/0 0 6
12 4/ 2
/0 00
6
14 4/ 20
/0 0 6
17 4/ 20
/0 0 6
19 4/ 2
/0 00
6
21 4/ 20
/0 0 6
24 4/ 20
/0 0 6
26 4/ 2
/0 00
4 6
28 / 20
/0 0 6
4
02 / 20
/0 0 6
04 5/ 2
/0 00
6
06 5/ 20
/0 0 6
09 5/ 20
/0 0 6
11 5/ 2
/0 00
6
13 5/ 20
/0 0 6
16 5/ 20
/0 0 6
18 5/ 2
/0 00
6
20 5/ 20
/0 0 6
5
23 / 20
/0 0 6
25 5/ 2
/0 00
5/ 6
20
06
paratrioza. CH= Chicharrita
16
14
12
10
8
6
4
2
0
Figura 7. Incidencia poblacional de Insectos vectores en el experimento del
Productor cooperante. MB. Mosca blanca, Pu, pulgón, ch, chicharrita, Pa,
26/05/2006
24/05/2006
22/05/2006
19/05/2006
17/05/2006
15/05/2006
12/05/2006
10/05/2006
08/05/2006
05/05/2006
03/05/2006
29/04/2006
27/04/2006
25/04/2006
22/04/2006
20/04/2006
18/04/2006
100
90
80
70
60
50
40
30
20
10
0
15/04/2006
13/04/2006
11/04/2006
08/04/2006
06/04/2006
04/04/2006
02/04/2006
No DE INSECTOS
7.6.1. Monitoreo de insectos en campo experimental de CIIIDIR.
RESULTADO S DE LO S MUESTREO S PO R TRAMPAS PEGAJO SAS
NAC HO BO RQ UEZ
FECHA DE CO LEC TA
MB
Serie2
Serie1
Serie4
Serie3
5. Muestreo y Detección de Geminivirus y Fitoplasmas.
Se realizaron tres muestreos en el experimento preliminar sembrado en
etapa tardía. El primero, 30 días después de la germinación, el segundo y
tercero a floración y fructificación. Todos los muestreos fueron procesados para
la extracción de DNA y detección de fitopatógenos.
Detección por la Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR)
Detección de Fitoplasmas. Se realizó la prueba de PCR específica de
fitoplasmas al muestreo posterior a la germinación en cámaras de crecimiento
encontrándose todas las muestras negativas para Fitoplasmas. En el segundo
muestreo, en el campo del productor cooperante y del CIIDIR sucedió lo
mismo.
1 2
3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 - + M
14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 M
Figura 9. Análisis por PCR de las plantas de tomate del productor en la etapa
de producción, y plantas de tomate del campo experimental del CIIDIR en
etapa de desarrollo,
ya 35
que36las37 variedades
utilizadas resultaron muy
31 32 33 34
38 39 40 MPM
susceptibles a las condiciones ambientales adversas. Carriles 1 al 13 son
muestras en etapa de producción del campo del productor por grupos, las
muestras del carril 14 a 23 son muestras del campo experimental de CIIDIRIPN.
Detección de Geminivirus.
Sólo se realizó el análisis por PCR de geminivirus al primer muestreo con incidencia
muy baja en las muestras colectadas. En la detección específica de geminivirus se
observó la amplificación de una banda de tamaño mayor (750 pb) al control que es de
650 pb. El tamaño de esta banda nos indica que puede tratarse de TYLCV un virus del
viejo mundo, puesto que los virus del nuevo mundo que se amplifican con estos primers
deben tener un tamaño de 650 pb como se observa en el control positivo (No mostrado).
7. Detección de virus y fitoplasmas en muestras de diferentes variedades
colectadas en campo.
Resultados del análisis por PCR de híbridos de tomate ciclo O-I 2005-06
Geminivirus
MAYA
MAYA
CAPORAL
Fitoplasmas
Positivas/muestras
analizadas
38/60
10/43
7/11
GAVILAN
SERI
MAYA
0/2
0/1
0/2
0/2
1/1
1/2
LOCALIDAD
VARIEDAD
MOCORITO
GUASAVE
CARRIZO
25/60
8/10
7/11
Resultados del análisis por PCR de híbridos de tomate ciclo O-I 2006-07
Variedad
Geminivirus
Caporal
Fitoplasmas
(Muestras positivas/Analizadas)
7/7
Shanty
4/7
3/7
ATPX
4 / 19
4/15
Seri
3 / 17
14/21
Santo Tomas
13 / 15
13/15
Maya
1 / 45
25/45
Halley
0/9
6/9
Brigade
0/6
4/6
Toro
0/5
3/5
Barbarie
2/5
2/5
Cherry
1/5
3/5
Salades
0/5
0/5
Hazera 3810
0/5
2/5
6/7
Conclusiones
1. Se han detectado fitoplasmas y al virus TYLCV en todas la variedades
comerciales analizadas, con algunas variaciones en el porcentaje de
incidencia.
2. La variedad Seri ha mostrado un buen desarrollo en campo ya que no
presenta síntomas, aún así se ha demostrado la presencia de
fitoplasmas y virus.
3. La variedad maya es una de las variedades que mostró síntomas más
severos en campo y una de las de mayor incidencia de virus y
fitoplasmas.
4. la primera etapa del proyecto se inició demasiado tarde, pero esta
segunda etapa ya se ha establecido en campo con un buen desarrollo y
se espera una mejor evaluación de las características agronómicas y
moleculares.
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