DETERMINACIÓN DE ETANOL EN SANGRE TOTAL

Actividad 2: Protocolo (Curso sobre ECOE)
Martín
Antonio Gómez
DETERMINACIÓN DE ETANOL EN SANGRE TOTAL
FUNDAMENTO
El método que se propone (Técnica de Truhaut-Boudene) es un semimicrométodo
basado en la reducción de un reactivo nitro-crómico por el alcohol destilado de la sangre. A
pesar de la inespecificidad del método (ya que no distingue entre etanol, metanol u otras
sustancias reductoras) es ideal para los análisis cuantitativos de rutina. El reactivo nitro-crómico
sobrante se titula con tiosulfato mediante una yodometría, según las siguientes reacciones:
1)
Cr2O7K2 + CH3-CH2OH -----------> Cr+++ + CH3-CHO
2)
Cr2O7= + 6 I- + 14 H+ --------------> 2 Cr+++ + 3 I2 + 7 H2O
3)
6 S2O3= + 3 I2 --------------------> 3 S4O6= + 6 I-
MATERIAL

Tubo aforado de 25 ml

Montaje

Pipeta graduada de 10 ml (1) y 2 ml (1)

Destilador

Recipiente de plástico (hielo picado)

Jeringa de insulina

Bureta de 25 ml

Matraz de fondo redondo de 250 ml

Hornillo eléctrico

Soporte para el matraz

Placa de aluminio

Tubos de ensayo

Pipeta pasteur desechable

Gradilla

Probeta graduada de 25 ml (1), 50 ml
(1) y 100 ml (1)
REACTIVOS

Solución saturada de ácido pícrico: 20 g/litro de agua destilada. Disolver en caliente y filtrar.

Reactivo nitro-crómico 0,087N: 4,263 g de dicromato potásico/1 litro de ácido nítrico (d =
1,4)

Tiosulfato sódico 0,087N: 21,565 g/ litro de agua destilada. El título debe ajustarse
exactamente con una solución valorada de yodo o con el reactivo nitro-crómico ya
preparado.

Solución de yoduro potásico al 1% en agua destilada. Preparación extemporánea.

Almidón soluble 2% en agua destilada. Preparación extemporánea. Mezclar 1 g de almidón
con 50 ml de agua en un mortero y pasarlo a un matraz de 50 ml. Llevar la mezcla a
ebullición unos segundos hasta su disolución.

Hielo picado

Perlas de vidrio
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Actividad 2: Protocolo (Curso sobre ECOE)
Martín

Antonio Gómez
Agua destilada
METÓDICA
1. Depositar con la jeringa de insulina 2 ml de sangre total, exactamente medidos, en el
matraz de fondo redondo, lavando la jeringa con 5 ml de agua destilada que se añaden
a la sangre.Esperar unos minutos para que la sangre se hemolice.
2. Añadir unos 20 ml de ácido pícrico (precipitación de proteínas) y unas perlas de vidrio
para controlar la ebullición. Ajustar el matraz al resto del aparato destilador.
3. En un tubo aforado de 25 ml depositar 10 ml exactos de solución nitro-crómica y
sobre ella 2 ml de agua destilada (dejándola resbalar por las paredes con sumo cuidado
para evitar que se mezclen). Ajustar el tubo a la salida del destilador. Este tubo debe
mantenerse sumergido en frío (hielo picado/agua) mientras dura la destilación.
4. Destilar hasta la señal del tubo (13 ml). Se retira el tubo, se tapa y se mezcla por
inversión. Esperar 15 minutos.
5. Verter el contenido del tubo en un matraz Erlenmeyer y enjuagar con 30 ml de agua
destilada. Añadir 100 ml de la solución de yoduro potásico (la mezcla tomará color rojo).
Esperar 3 minutos.
6. Titular con tiosulfato utilizando como indicador 7-8 gotas de almidón (La solución
toma un color azul que permanece mientras existen indicios de yodo sin reaccionar con
el tiosulfato ). Agregar tiosulfato hasta que la solución quede transparente. Anotar el
volumen de tiosulfato gastado.
Esquema del destilador:
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