Producto 5 PROTOCOLOS DE CAMPO Introducción Un protocolo de campo es un documento estandarizado y validado respecto al trabajo de campo para el establecimiento de parcelas centinela, que permita homogenizar los datos que se subirán a las plataformas de información de plagas, para el seguimiento fitosanitario motivo de Vigilancia Epidemiológica. Sirve como un plan escrito y detallado de las actividades o procedimientos para la ubicación y selección de parcelas centinela, métodos de muestreo, identificación de signos y síntomas, así como la determinación de daño y severidad, toma y envío de datos de campo, que el personal de los organismos auxiliares de sanidad vegetal deben llevar a cabo para alimentar el SCOPE. Esto debido a que se requiere la estandarización en la toma, captura y envío de datos a la plataforma de información con el fin de que los resultados de las observaciones tengan validez y puedan ser comparados y analizados, así como la inclusión de procedimientos validados para evidenciar, evaluar y dar seguimiento a las plagas bajo control oficial. Protocolo de campo Este producto tiene como objetivo apoyar a la DGSV a través de los organismos auxiliares de sanidad vegetal para llevar a cabo actividades en campo con el propósito de mejorar y hacer eficiente la vigilancia epidemiológica fitosanitaria. 1 Sistema Nacional de Vigilancia Epidemiológica Fitosanitaria Puccinia graminis f. sp. tritici (Ug99) Roya del tallo de trigo A. Plaga En 1999 una nueva raza altamente virulenta TTKS (Ug99) fue identificada en Uganda y desde entonces se ha propagado, provocando una creciente epidemia en Kenia y Etiopia1. Informe 2009 A.1. Ubicación taxonómica Dominio: Eucariota Reino: Fungí Phylum: Basidiomicota Clase: Urediniomicetes Orden: Uredinales Familia: Pucciniaceae Género: Puccinia (CABI 2007) A. 2. Morfología P. graminis f. sp. tritici es una roya macro cíclica, heterotalica, con cinco diferentes fases de esporas (uredial, telial, basidiospora, espermagonio y aecial). Las características y la ontogenia de cada una de las fases fueron descritas hasta nivel ultra estructural por Harder (1984). Las urediosporas de P. graminis f. sp. tritici son dicariotas (n+n), deshicente, de pared gruesa y cubiertas de espinas. Son elípticas y alrededor de 20 X 30 micras (Fig. 1). Fig. 1 Urediosporas de Puccinia graminis Créditos: http://www.broadinstitute.org 1 www.globalrust.org Las teliosporas son dos unicelulares de pared gruesa (con más de cinco capas) y se engrosan en el extremo apical (fig.2) (CABI 2007). Fig. 2 Teliospora de Puccinia graminis Créditos: www.fgsc.net/ B. Hospederos P graminis f sp. tritici se encuentr:S:a limitada a especies de Triticum, sin embargo infecta de manera natural a plantas de Secale cereale, Hordeum vulgaris, H. jubatum, H. pusillum, Elymus junceus occur. Muchos géneros de la tribu Hordeae son infectados mediante inoculaciones artificiales (USDA 2009). Los hospederos principales del hongo son: Hordeum vulgare (cebada), Secale cereale (centeno), Triticum aestivum (trigo), Triticum turgidum (trigo durum). Además presenta hospederos silvestres como: Berberis vulgaris (agracejo Europeo), Elymus repens (hierba quack), Lolium multiflorum (centeno Italiano) (CABI, 2007). B.1 Distribución de Hospederos en México El principal hospedero de importancia económica en México es el Trigo (Triticum aestivum) donde se tienen 23 estados productores de trigo, los cuales suman una superficie sembrada con alrededor de 845,000 de las cuales se cosechan 828,725 hectáreas con una producción de 4,213,545 toneladas cuyo valor de producción supera los 15 mil millones de pesos (SIAP, 2008). En la tabla 1 se 2 Producto 5 representan los estados de la Republica Mexicana con mayor importancia en la producción de trigo. resultado de la basidiospora, y se le conoce como picnidio. En la fase aecial (CABI, 2007). Tabla 1.Principales estados productores de Trigo en México Estado SONORA 288,677.00 1,764,136.07 7,190,140.87 GUANAJUATO BAJA CALIFORNIA ZACATECAS TLAXCALA 144,045.00 809,153.99 2,716,276.80 96,491.00 49,382.00 46,062.00 535,201.11 114,703.70 121,923.21 2,007,488.75 349,104.06 277,557.92 CHIHUAHUA 37,699.93 188,776.58 642,350.38 Producción (Ton) C. Distribución Geográfica La raza Ug99 fue detectada por primera vez en Uganda en 19992. Tras su detección, las investigaciones en los países vecinos de África Oriental revelo que la misma raza pudo haber migrado hacia sitios en Valle Rift provincia de Kenya central en 1998/1999, con un posterior avance hacia el este de Kenya en el 2001. En el 2003 la raza Ug99 fue detectada en Etiopia. La evidencia disponible sugiere que el Ug99 se ha establecido y esparcido en el oriente, tierras altas de África, más recientemente la raza se ha confirmado estar presente en Irán (Singh et al., 2006; FAO 2009). En base a los modelos de dispersión se pueden inferir que las regiones de alta vulnerabilidad a Ug99 son el Este de África, Oeste de Asia y potencialmente Sur de Asia, sin embargo estos pueden ser transportados a través del viento hacia otras rutas (Hernández y Hodson 2009). D. Aspectos biológicos y dispersión El ciclo biológico de este hongo consta de cinco fases, la uredial donde invade el tejido del hospedero y forma urediosporas; la fase telial comienza con la formación de teliosporas, en esta etapa las infecciones adquieren un color negro. En la etapa de basidio se producen cuatro basidiosporas que son depositadas en hospederos alternantes (eje. Berberis vulgaris) La estructura de fructificación se forma como 2 Condiciones favorables La roya es más importante al final del periodo de crecimiento, en finales de siembra y en cultivos de maduración tardía a demás de altitudes bajas. El trigo de primavera es vulnerable en altas latitudes si se encuentran fuentes de inoculo en el viento. En climas cálidos y húmedos la roya es más severa, debido a que se presentan condiciones más favorables (CIMMYT, 2005). De acuerdo con Cook y colaboradores (2006) Puccinia graminis f. sp. tritici tiene un periodo de latencia de 7-9 días, el periodo de infección se lleva a cabo durante 26 días, la esporulación diaria es de aproximadamente 20-30 esporas por lesión, la eficiencia de la infección es de 20-45 lesiones por espora. La roya requiere tejido de plantas verdes para ser capaces de infectar. Las condiciones de temperatura requeridas por P. graminis f. sp. tritici para la infección son como mínimo 4 °C, máximo 29°C y la temperatura optima son 23.5°C (Cook et al., 2006). Jin y colaboradores (2008) reconocen la nueva virulencia en Sr31 y los diferentes aislados de la raza TTKS en tres razas separadas: TTKSK, TTKST y TTTSK. Con pocas excepciones, las razas virulentas en Sr24, Sr31 están ausentes o son poco frecuentes en la roya del tallo en América del Norte, así como en todo el mundo. Además de las variantes de TTKS detectadas en el Este de África que están muy relacionadas con las razas de P graminis f sp. tritici encontradas en Sudáfrica. La raza TTKSF es similar a TTKSK, fue detectada en el 2000. En el 2007 un aislado de P. graminis f. sp. tritici fue caracterizado como TTKSP, con una virulencia adicional a Sr24 pero sin virulencia www.globalrust.org 3 Protocolo de campo Valor producción (Miles de pesos) Superficie sembrada (ha) Informe 2009 Sistema Nacional de Vigilancia Epidemiológica Fitosanitaria para Sr31 fue colectado de trigo de primavera en Western Cape. Las variantes de TTKS de Sudáfrica son significativamente diferentes de otras razas descritas para la región (Jin et al., 2008). El primer método de dispersión es a distancias extremadamente largas (normalmente atraviesa continentes), esta dispersión tiene como resultado la colonización del patógeno en nuevas regiones. Este tipo de dispersión es poco frecuente bajo condiciones naturales. Sin embargo las royas son un grupo patogénico con una dispersión a grandes distancias de las urediosporas y aeciosporas bajo condiciones naturales del viento. La dispersión a grandes distancias puede ocurrir a través de la ropa de turistas o material propagativo infectado, este es un elemento importante en la colonización de agentes patógenos hacia nuevas áreas (Singh et al., 2006; USDA 2009). El segundo método de dispersión ocurre normalmente en distancias cortas, dentro de un país o región y es más probable que ocurra que la dispersión a grandes distancias. Este representa el más común de los métodos normales de dispersión de las royas (Singh et al., 2006). El tercer método de dispersión es “extinción y recolonización”, puede ser considerado un submecanismo de dispersión. Este mecanismo ocurre en áreas bajo condiciones desfavorables para el hongo, normalmente zonas templadas con invierno inhóspito o con ausencia de plantas hospederas (Singh et al., 2006).Con cualquiera de los mecanismos de dispersión descritos, el establecimiento de las poblaciones patogénicas depende de la presencia de plantas hospederas y condiciones ambientales adecuadas (Singh et al., 2006). E. Daños y síntomas Las uredias generalmente aparecen como lesiones ovaladas (pústulas que contienen masas de uredosporas) en las vainas foliares, tallo verdadero y la espiga. Las uredias son de color café-rojizo y generalmente penetran para esporular en ambos lados de las hojas, tallos y espiga. Si la infección es leve, por lo general las pústulas se encuentran dispersas, pero se aglutinan cuando la infección es intensa (Fig. 4). Previo a la formación pústulas y, antes de que las masas de esporas emerjan a través de la epidermis, pueden aparecer "pecas"; a medida que emergen las masas de esporas, los tejidos superficiales adquieren una apariencia áspera y se puede observar la ruptura del tejido de la planta (CIMMYT 2009; USDA 2009). Fig.4. Pústulas café obscuras de Puccinia graminis f. sp. tritici créditos: CIMMYT. F. Importancia económica Las pérdidas son a menudo severas (50 a 70%) sobre grandes extensiones y los campos individuales pueden ser totalmente destruidos. Los daños son mayores cuando la enfermedad se vuelve severa y previo a la completa formación del grano (USDA, 2009). Una combinación de ambiente favorable y los datos sobre la migración histórica resultan en un riesgo potencial que abarca las principales áreas de cultivo de trigo del este de África en el Valle del Nilo, del Medio Oriente hasta el Norte como el sur de Turquía y toda la llanura Indo-Ganges. La producción de trigo en esta zona potencial de riesgo, representa aproximadamente el 19% de la producción mundial (Hodson et al., 2005). Existen datos de variedades susceptibles donde revelan que la mayoría del germoplasma se desarrolla en zonas con riesgo potencial donde cualquiera puede ser susceptible (36%) a Ug99 o la susceptibilidad es actualmente desconocida (63%). Solo el 0.3% del total de la superficie reporta más de 44 millones de hectáreas con variedades conocidas que fueron clasificadas como moderadamente resistentes (Hodson et al., 2005). 4 Producto 5 Puccinia graminis f. sp. tritici (Ug99) no se encuentra actualmente en México y no existe una regulación establecida para dicha enfermedad. H. Estrategias para la vigilancia La principal estrategia de vigilancia de la roya, es mediante recorridos mensuales, en zonas productoras del cultivo de trigo, para buscar signos sospechosos a los ocasionados por la roya auxiliándose de una guía de síntomas donde se muestran los daños característicos ocasionados por la roya. En los casos donde se presenten síntomas similares a los ocasionados por la roya, se procederá a la toma de muestra de acuerdo a lo mencionado en el protocolo para la toma de muestra de la roya negra del tallo del trigo UG99 y dichas muestras serán enviadas al Centro Nacional de Referencia Fitosanitaria (CNRF) para su análisis. Toda vez que se confirme la presencia de la roya se realizara una evaluación de la enfermedad donde de acuerdo a lo observado se asignará un grado a la intensidad de ataque, el cual es la relación entre el porcentaje de tejido vegetal afectado con respecto a la superficie total de este mediante la aplicación de cinco grados o niveles de ataque según su porcentaje de superficie afectada por la enfermedad. De esta manera se podrá detectar de manera oportuna la presencia de la roya y efectuar las acciones para el manejo, confinamiento y erradicación de la enfermedad. A. Alerta Fitosanitaria Ante la sospecha de la presencia la roya en base a los signos que presenta el cultivo. La Dirección General de Sanidad Vegetal a través del Centro Nacional de Referencia Fitosanitaria, ha establecido la comunicación pública mediante el servicio telefónico 01 800 987 987 9 para la atención personalizada. I. Estrategias y tácticas de control Control Genético La mejor estrategia para el control genético duradero es iniciar a través de la búsqueda de genes resistentes que presentan efectos acumulativos. El gen resistente Sr2, transferido a trigos hexaploides de trigos tetraploides, es un buen ejemplo de genes resistentes. Sr2 cuando se encuentra solo confiere resistencia intermedia que no es suficiente bajo una alta presión de la enfermedad, pero se cree que interactúa con genes desconocidos, de razas-especificas o de roya lenta, para otorgar altos niveles de resistencia, conocidos comúnmente como complejo-Sr2. Esta combinación de genes probablemente contribuyo a la resistencia a largo plazo de la roya en el germoplasma del CIMMYT, hasta la amplia utilización de la translocacion 1B.1R. Ante la presencia de Sr31 es difícil mantener la combinación de Sr2 con otros genes de resistencia menor. Algunos viejos cultivares como Plum de Kenya y Pavon 76 han mostrado una resistencia adecuada a la raza Ug99 en Kenya y Etiopia (CIMMYT, 2005) Control químico Los fungicidas pueden reducir los niveles de pústulas, pero no podrá erradicar al patógeno, además de resultar costoso (CSL, 2008). En experimentos realizados por Wanyera y colaboradores (2009) encontraron que los fungicidas azoxystrobin a 200 g/litro + cyproconazole a 80 g/litro (AmistarXtra 280 SC), tebuconazole (Folicur 250 EC), tebuconazole + tridimenol (Silvacur 375 EC), y tebuconazole (Orius 25 EW) fueron efectivos en la reducción de la roya en los sitios probados. Los Fungicidas trifloxystrobin + propiconazole (Stratego 250 EC), hexaconazole (Cotaf 5 EC), epoxiconazole + carbendazim (Swing 250 EC), cyproconazole a 80 g/litros + propiconazole a 250 g/litro (Artea 330EC), y epoxiconazole a 125 g/litro + carbendazim a 125 g/litro (Soprano C 250 EC) fueron inconsistentes en la reducción de la enfermedad. Los resultados sugieren que los fungicidas utilizados pueden ser efectivos en la reducción de la severidad de la roya e incrementa el rendimiento de cultivares de trigo susceptibles en zonas de riesgo. Control cultural Se pueden implementar diversas prácticas culturales para reducir la intensidad de la enfermedad o proporcionar un control parcial a largo plazo. Una plantación tardía en otoño o una temprana en primavera utilizando variedades de maduración temprana, ayudara a reducir el tiempo de exposición del cultivo al patógeno Mediante el control de hospederos alternantes como el agracejo (Berberis). Los programas de erradicación de hospederos alternativos tienen efectos importantes en la limitación de las epidemias de la roya del tallo en América del Norte y en Europa (CABI 2007). 5 Protocolo de campo G. Estatus cuarentenario de la plaga en México. Sistema Nacional de Vigilancia Epidemiológica Fitosanitaria Vigilancia El Centro Internacional de Mejoramiento de Maíz y Trigo (CIMMYT, México), en el área de Sistemas de Información Geográfica se desarrolla el proyecto RustMapper, que es una herramienta que provee información del estatus actual y potencial de expansión de la plaga de trigo Ug99 y sus derivados (Hernández y Hodson 2009). Monitoreo Debido a que la roya se dispersa por el viento y presenta variabilidad genética, el monitoreo de la enfermedad se realiza por medio de “cultivos trampa”. El establecimiento de un sistema de alerta basado en los modelos de información utilizando programas como GIS u otra herramienta útil (CIMMYT, 2005). J. Literatura citada Informe 2009 Admassu, B., Lind, V., Friedt, W., Ordon, F. 2009. Virulence analysis of Puccinia graminis f.sp. tritici populations in Ethiopia with special consideration of Ug99. Plant Pathology, Volume 58, Number 2, April, pp. 362-369(8). CABI. 2007. Crop Protection Compendium. Global Module 7nd. Edition. CAB Internacional. UNK. CIMMYT. 2009. Enfermedades causadas por hongos (En línea: http://www.cimmyt.org/spanish/docs/field_guides /enfplagastrigo/Hongos.pdf consultado el 28 de Diciembre de 2009) CIMMYT. 2005. Sounding the Alarm on Global Stem Rust. An Assessment of Ug99 in Kenya and Ethiopia and Potential for Impact in neighbouring Regions and Beyond. 29 May 2005. 26pp. Cooke, B.M.; Jones, D. Gareth; Kaye, B. 2006. The Epidemiology of Plant Diseases. Springer. (2nd edition). CSL 2008. Information note for stem rust/black rust of wheat: Ug99 - a new virulent strain FAO. 2009. (En línea: www.fao.org/ citado el 28 de Diciembre de 2009) Hernández R. V. M., y Hodson D.P. Modelación de dispersión y métodos de difusión de información de la plaga del trigo Stem Rust (Puccinia graminis). Centro Internacional de Mejoramiento del Maíz y Trigo (CIMMYT) (En línea http://egal2009.easyplanners.info/area04/4060_ HERNANDEZ_R__VICTOR_M_.pdf citado el 28 de Diciembre de 2009). Hodson D.P., Singh R.P., Dixon J.M. 2005. An initial assessment of the potential impact of stem rust (race Ug99) on wheat producing regions of Africa and Asia using GIS. In: Absts. of the 7th International Wheat Conference, Mar del Plata, Argentina.. p. 142. Jin Y, Singh RP. 2006. Resistance in US wheat to recent eastern African isolates of Puccinia graminis f. sp. tritici with virulence to resistance gene Sr31. Plant Diseases. ;90:476–80. Jin, Y., Szabo, L.J., Pretorius, Z. 2008. Virulence Evolution Within the Ug99 Lineage. Wheat Genetics International Symposium Proceedings. En lineae: http://hdl.handle.net/2123/3435. Siap. 2008. Anuarios Estadísticos de la Producción Agrícola en México. Secretaria de Agricultura, Ganadera, Desarrollo Rural, Pesca y Alimentación. Versión Electrónica. Singh, P, R., Hodson, P, D., Jin, Y., Huerta, E, J., Kinyua, G, M., Wanyera, R., Njau, P., and Ward, W, R. 2006. Current status, likely migration and strategies to mitigate the threat to wheat production from race Ug99 (TTKS) of stem rust pathogen. CAB Reviews: Perspectives in Agriculture, Veterinary Science, Nutrition and Natural Resources 1, No. 054USDA. 2009 (En línea: http://www.ars.usda.gov/Main/docs.htm?docid=9 910 citado el 28 de Diciembre de 2009)Wanyera, J. K. Macharia, S. M. Kilonzo, J. W. Kamundia 2009. Foliar Fungicides to Control Wheat Stem Rust, Race TTKS (Ug99), in Kenya Plant Disease, September 2009, Volume 93, Number 9, Pages 929-932 (doi: 10.1094/PDIS-93-90929) Globalrust. 2009 (En línea: www.globalrust.org citado el 28 de Diciembre de 2009) 6