Diapositiva 1
Anuncio
Anemia Hemolítica Autoinmune Diagnóstico inmunohematológico Dr. Arturo Pereira S. de Hemoterapia y Hemostasia AHAI Introducción Anemia Hemolítica Autoinmune (AHAI) • Es la causa más frecuente de anemia hemolítica en el adulto. • Es la más facil de diagnosticar. • Son frecuentes los errores diagnósticos inducidos por laboratorio – Falsos negativos – Falsos positivos – Diagnóstico etiológico erróneo AHAI Clasificación Anemia Hemolítica Autoinmune (AHAI) Por "anticuerpos calientes" (IgG). Por crioaglutininas (IgM). • Idiopática (mayoría) • Idiopática (crónica) • Secundaria • Secundaria – Síndrome linfoproliferativos (LLC, ...) – Síndrome linfoproliferativos (crónica) – Conectivopatías (LES,...) – Infecciones (aguda y transitoria) – Fármacos • Micoplasma pneumoniae • Virus de Epstein-Barr, etc. Hemoglobinuria paroxística "a frigore" (IgG) • Asociada a la lues (crónica; muy rara) • Postviral (aguda; en niños) AHAI Clasificación Anemia Hemolítica Autoinmune (AHAI) Por "anticuerpos calientes" (IgG). Por crioaglutininas (IgM). • Idiopática (mayoría) • Idiopática (crónica) • Secundaria • Secundaria – Síndrome linfoproliferativos (LLC, ...) – Síndrome linfoproliferativos (crónica) – Conectivopatías (LES,...) – Infecciones (aguda y transitoria) – Fármacos • Micoplasma pneumoniae • Virus de Epstein-Barr, etc. Hemoglobinuria paroxística "a frigore" (IgG) • Asociada a la lues (crónica; muy rara) • Postviral (aguda; en niños) AHAI Diagnóstico AHAI: pruebas para el diagnóstico de laboratorio Principal: Test de Coombs directo. Objetivo: Demostrar la presencia de IgG y/o Complemento (C3b/C3d) sobre la membrana del hematíe Complementarias: Eluido: Confirmar que la IgG es un autoanticuerpo Test de Cooms indirecto: Presencia de anticuerpos en el suero (plasma) Prueba de Crioaglutininas: Presencia de crioaglutininas en suero (plasma) Test de Donath-Landsteiner: Hemolisinas bifásicas (HPF) AHAI Diagnóstico Test de Coombs directo Anti-IgG / -C3b/C3d Hematíes del paciente Aglutinación AHAI Diagnóstico Test de Coombs directo: ¿qué mide y qué no mide? Auto-Ac C3b/C3d Coombs indirecto AHAI Diagnóstico TCD falsamente positivo: adsorción inespecífica de IgG IgG Alteración membrana - Medicamentos - Ribavirina - Cis-DTT - Cefalosporinas -Talasemia, drepanocitosis, - Otros Hipergammaglobulinemia - Cirrosis hepática - Enf. infecciosas crónicas - Enf. inflamatorias crónicas AHAI TCD falsamente positivo Cirrosis hepática - Hemólisis (acantocitosis) - Hiper-ɣglobulinemia - TCD-positivo IgG Diagnóstico AHAI TCD falsamente positivo Paludismo crónico - Hemólisis crónica - Hiper-ɣglobulinemia - TCD-positivo IgG Diagnóstico AHAI Diagnóstico TCD: error en el diagnóstico etiológico Reacción transfusional hemolítica retardada Autólogos no sensibilizados Transfundidos sensibilizados por alo-Ac Aglutinación SOLO de los transfundidos Se ve como TCD + débil o doble población AHAI Diagnóstico Reacción transfusional hemolítica retardada Tx CH Jka + Anti-Jka Hto Tendencia a la resolución espontánea Nivel de detectabilidad en las pruebas de compatibilidad pretransfusional - Anemia - Signos de hemólisis - Coombs + AHAI Diagnóstico Diagnóstico de la AHAI: importancia del eluido ¿Como distinguir si el TCD+ para IgG se debe a... Auto-AC ? Alo-AC ? Falso + ? (hiper-γglob) Respuesta: investigar el eluido Pannaglutinina IgG Alo-AC con especificidad definida Negativo AHAI Diagnóstico ¿En qué consiste el eluido? Consiste en "despegar" el anticuerpo unido al hematíe para confirmar su presencia e identificar la especificidad (auto-Ac o alo-Ac). Identificación del anticuerpo Estromas de los hematíes - Congelación-descongelación - Cloroformo-tricloroetileno - Acidos, etc. AHAI Diagnóstico El eluido puede detectar hasta un 1% de hematíes sensibilizados con IgG AHAI Diagnóstico TCD: resultado falso negativo + - Acidez - Lavado excesivo - Baja temperatura Antiglobulina Neutralización antiglobulina Lavado insuficiente AHAI Diagnóstico TCD: resultado falso negativo Sospechar si datos de hemólisis y microesferocitos en sangre Normal Esferocitos y policromasia AHAI Diagnóstico AHAI por crioaglutininas Auto-Ac C3b/C3d Zonas acras (Tº < 37º C) Circulación general (Tº = 37º C) Clínica - Acrocianosis Laboratorio general - Muestra "coagulada" - Δ Hematimetría Inmunohematología - TCD + C3d/C3b - Crioaglutininas en plasma Hemólisis extravascular (CR3 - C3b) Hemólisis intravascular (C5-9) AHAI Diagnóstico AHAI por crioaglutininas: extensión de sangre Artefactos - ↑↑↑ VCM - ↑↑↑ CCMH AHAI Diagnóstico AHAI por crioaglutininas: diagnóstico inmunohematológico Escrutinio de crioaglutininas - Plasma paciente (1:32) - Htíes OI, Oi, Osialidasa - Sedimentación a 4º C en BSA + Especificidad y amplitud térmica - Titulación del plasma paciente - Tº: 4ºC, 22ºC, 30ºC, 37ºC - Htíes OI, Oi, Osialidasa - Sedimentación en BSA AHAI Diagnóstico Crioaglutininas: especificidad y amplitud térmica 4º C 2 4 8 16 32 64 128 256 512 1024 2048 4096 8000 O Adulto + + + + + + + + + + + - - O R.N. + + + + + - - - - - - - - O Sial + + + + + + + + + + + + + 22º C 2 4 8 16 32 64 128 256 512 1024 2048 4096 8000 O Adulto + + + + + + + + - - - - - O R.N. + + - - - - - - - - - - - O Sial + + + + + + + + + + + - - 30º C 2 4 8 16 32 64 128 256 512 1024 2048 4096 8000 O Adulto + + + + + - - - - - - - - O R.N. - - - - - - - - - - - - - O Sial + + + + + + + - - - - - - 37º C 2 4 8 16 32 64 128 256 512 1024 2048 4096 8000 O Adulto + + - - - - - - - - - - - O R.N. - - - - - - - - - - - - - O Sial + + + + - - - - - - - - - Conclusión: crioaglutinina anti-I, amplitud térmica > 30ºC. AHAI Diagnóstico Crioaglutininas: especificidad y amplitud térmica 4º C 2 4 8 16 32 64 128 256 512 1024 2048 4096 8000 O Adulto + + + + - - - - - - - - - O R.N. + + + + + + + + + + - - - O Sial + + + + + - - - - - - - - 22º C 2 4 8 16 32 64 128 256 512 1024 2048 4096 8000 O Adulto + - - - - - - - - - - - - O R.N. + + + + + + + - - - - - - O Sial + + + - - - - - - - - - - 30º C 2 4 8 16 32 64 128 256 512 1024 2048 4096 8000 O Adulto - - - - - - - - - - - - - O R.N. + + + + + - - - - - - - - O Sial + - - - - - - - - - - - - 37º C 2 4 8 16 32 64 128 256 512 1024 2048 4096 8000 O Adulto - - - - - - - - - - - - - O R.N. + + + - - - - - - - - - - O Sial - - - - - - - - - - - - - Conclusión: crioaglutinina anti-i, amplitud térmica > 30ºC. AHAI Diagnóstico Crioaglutininas: especificidad y amplitud térmica 4º C 2 4 8 16 32 64 128 256 512 1024 2048 4096 8000 O Adulto + + + + + + + + + + - - - O R.N. + + + + + + + + + + - - - O Sial + - - - - - - - - - - - - 22º C 2 4 8 16 32 64 128 256 512 1024 2048 4096 8000 O Adulto + + + + + + + - - - - - - O R.N. + + + + + + + - - - - - - O Sial - - - - - - - - - - - - - 30º C 2 4 8 16 32 64 128 256 512 1024 2048 4096 8000 O Adulto + + + + + - - - - - - - - O R.N. + + + + + - - - - - - - - O Sial - - - - - - - - - - - - - 37º C 2 4 8 16 32 64 128 256 512 1024 2048 4096 8000 O Adulto + + + - - - - - - - - - - O R.N. + + + - - - - - - - - - - O Sial - - - - - - - - - - - - - Conclusión: crioaglut, Sia-dependiente (anti-Pr, anti-Gd, anti-Sa, etc). AHAI Diagnóstico Hemoglobinuria paroxística "a frigore“ (HPF) Auto-Ac C3b/C3d C5-C9 Zonas acras (Tº < 37º C) Laboratorio general - Muestra hemolizada Inmunohematología - TCD + C3d/C3b - Test de Donath-Landsteiner + Circulación general (Tº = 37º C) Hemólisis intravascular - Hemoglobinemia - Hemoglobinuria AHAI Diagnóstico HPF: test de Donath-Landsteiner Test de hemólisis mediada por complemento - Suero extraído en caliente - Hematíes grupo O, P1 Suero paciente Suero paciente + suero fresco Suero fresco Incubación 4ºC x 60 mn. 37ºC x 30 mn. 4º C x 90 mn. 37ºC x 90 mn. AHAI HPF: test de Donath-Landsteiner Diagnóstico AHAI HPF: extensión de sangre Diagnóstico AHAI Diagnóstico AHAI: diagnóstico diferencial en el laboratorio de Inmunohematología COOMBS DIRECTO IgG C3 ELUIDO DIAG. DIFERENCIAL Panaglutinina AHAI por IgG “calientes” Alo-Ac RTHR Adsorción IgG Negativo Fármacos (Haptenos) Crioaglutininas Donath-Lansteiner C3b/C3d No procede Fármacos (ICC) AHAI "IgM caliente" Inespecífico Hospital Clínic de Barcelona. Laboratorio de Inmunohematología
