INSTRUCCIONES DE USO Revisión 1 Feb. 2014 AGAR MACCONKEY Agar MacConkey presentación 500 gramos, 5, 25, 50 kilos. Catálogo 1052 Agar MacConkey presentación placas de 90 mm Caja 20 unidades. Catálogo 900 Agar MacConkey presentación Frascos 100 ml Caja 12 unidades Catálogo 5003 USO PREVISTO Agar MacConkey está recomendado para aislamiento e identificación de Enterobacterias de muestras de heces y orina FORMULA EN g/l Digerido Pancreático de Gelatina 17.00 Sales Biliares 1.50 Lactosa Monohidrato 10.00 Rojo Neutro 0.03 Cloruro sódico 5.00 Cristal violeta 0.001 Peptonas (Carne & Caseína) 3.00 Agar Bacteriológico 13.50 Final pH 7.1 ± 0.2 a 25ºC Escherichia coli Enterobacter aerogenes PREPARACION ATCC 25922 ATCC 13048 Agar MacConkey presentación 500 gramos, 5, 25, 50 kilos. Catálogo 1052 (Medio deshidratado) Suspender 50 gramos del medio en un litro de agua destilada. Mezclar bien. Calentar agitando frecuentemente hasta disolución completa. Dejar hervir durante un minuto. Esterilizar en autoclave a 121°C durante 15 minutos. Enfriar a 45-50°C mezclar bien y verter en placas Petri. Dejar solidificar las placas e invertirlas para evitar el exceso de humedad en la superficie del medio. Las placas preparadas deben conservarse entre 8-15°C. El color del medio preparado es rojo-violeta. El medio deshidratado debe ser homogéneo, libre de floculos y de color beige claro. Si hay algún cambio físico no utilizar el medio. Agar MacConkey placas de 90 mm Caja 20 unidades. Catálogo 900 (medio preparado). Listo para su uso Frascos 100 ml Caja 12 unidades Catálogo 5003. Medio preparado. Listo para su uso. (Fundir y dispensar en placas) PRINCIPIOS Y APLICACIÓN AGAR MACCONKEY es utilizado para el aislamiento selectivo e identificación de Enterobacterias. También es un medio selectivo y diferencial para aislar bacterias gran negativas El Digerido Pancreático de Gelatina y la Mezcla de Peptonas (Carne y Caseína) aportan nitrógeno, vitaminas, minerales y amino ácidos esenciales para el crecimiento. La Lactosa es el carbohidrato fermentable aporta carbono y energía. El Cloruro sódico mantiene el balance osmótico. Las sales biliares y el cristal violeta son los agentes selectivos e inhiben bacterias gran positivas. El rojo neutro es el indicador de pH. Las colonias lactosa positivas son rojas y rodeadas o no de una zona turbia la cual es debida a la precipitación de las sales biliares como resultado de una disminución del pH, Las colonias lactosa negativas son incoloras. TIPO DE MUESTRAS Orina, Heces 1 LABORATORIOS CONDA, S.A. www.condalab.com La recolección, el manejo y el procesamiento de las muestras se llevan a cabo según Recomendaciones y Standards en Microbiología Clínica. PROCEDIMIENTO 1.- Inocular en superficie. Estrías paralelas con el asa o hisopo 2.- Incubar en condiciones aeróbicas a 35 ± 2°C durante 18-24 horas. 3.- Lectura e interpretación de los resultados CARACTERISTICAS DE LAS COLONIAS Organismos Característica colonia Escherichia coli Rojo-Rosa, no mucoide, rodeadas por una zona de precipitado biliar Klebsiella Larga, roja, mucoide Enterobacter aerogenes Rosa-Roja Serratia Roja-Rosa, No mucoide Arizona and Citrobacter Incolora ,transparente roja si fermentan la lactosa Proteus Incolora-Transparente Salmonella Incolora, transparente ó ámbar Shigella Incolora transparente o ligeramente rosa CONTROL MICROBIOLOGICO Los siguientes resultados, fueron obtenidos en el desarrollo del medio a partir de cepas patrón después de incubación a temperatura de 35 ± 2°C y observados después de 18-24 horas. Microorganismos Enterobacter aerogenes ATCC 13048 Escherichia coli ATCC 25922 Escherichia coli ATCC 8739 Proteus vulgaris ATCC 13315 Salmonella enteritidis ATCC 13076 Shigella dysenteriae ATCC 13313 Staphylococcus aureus ATCC 6538 Desarrollo Color Colonia Inoculo(cfu/ml) Recuperación % Bueno Bueno Bueno Bueno Bueno Bueno Inhibido Rosa-rojo Rosa-rojo (precipitado biliar) Rosa-rojo (precipitado biliar) Incolora Incolora Incolora Incolora 103-105 103-105 103-105 103-105 103-105 103-105 >105 ≥ 30 ≥ 30 ≥ 30 ≥ 30 ≥ 30 ≥ 30 ≤ 0.01 BIBLIOGRAFIA MacConkey J. H. 5:33. 1905. Joseph Md. State. Dept. Health. Procedures, 1960. European Pharmocopoeia 6.5 Diagnostico in vitro Solo para uso profesional Ver indicaciones generales de uso y ficha de seguridad www.condalab.com EP ALMACENAMIENTO Una vez abierto guardar el medio cerrado para evitar la hidratación. Utilizable hasta la fecha de caducidad. 25ºC 2ºC Placas preparadas almacenar entre 8-15°C y Frascos preparados almacenar entre 2-8°C Utilizable hasta la fecha de caducidad. Laboratorios Conda S.A C/ La Forja 9 28850 Torrejón de Ardoz Madrid, España 2 LABORATORIOS CONDA, S.A. www.condalab.com