Células redondas en semen e infecciones genitales.

CÉLULAS REDONDAS EN SEMEN E INFECCIONES GENITALES
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urología general
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Arch. Esp. de Urol., 53, 2 (101-105), 2000
Células redondas en semen e infecciones genitales.
EDITA AMALIA SOLÍS1, VANDA NORA GATTI1, BEATRIZ REINA BOUVET1, ADRIANA SILVIA
BRUFMAN1, OLGA CATALINA PROVENZAL2 Y RODOLFO FELDMAN2.
1
Laboratorio de Inmunología de la Reproducción. Depto. Bioquímica Clínica. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Universidad Nacional de Rosario.
2
Facultad de Ciencias Médicas. Universidad Nacional de Rosario. Rosario. República Argentina.
Resumen.- OBJETIVO: Sigue siendo controvertida la
relación entre leucocitospermia e infecciones genitales.
Asimismo resulta inexacto considerar el aumento de células redondas (CR) en semen como leucocitospermia. Nos
propusimos determinar la posible asociación entre aumento de CR, leucocitospermia e infección bacteriana en
pacientes infértiles.
MÉTODO: Se analizaron 410 muestras de semen con
las que se llevaron a cabo los estudio de movilidad,
concentración, CR, morfología espermática, según criterios OMS. Se diferenciaron las células germinales
inmaduras (CGI) por tinción con Papanicolau y los
leucocitos polimorfonucleares (PMN) por el método de
Nahoum-Cardozo. Para el examen directo se efectuaron
estudios bacteriológicos en semen, primer chorro de orina
y secreción uretral utilizando coloración de Gram Nicolle.
Los cultivos se realizaron en medios enriquecidos Agar
Columbia sangre, Agar chocolate y Agar Thayer Martin
para gérmenes comunes. Para la identificación de
Mycoplasma se sembró en medios líquidos y sólidos A7
Sheppard. La presencia de Chlamydia trachomatis se
investigó por inmunofluorescencia directa en secreción
uretral.
RESULTADOS: El 79% de las muestras (324) resultado dispérmicas, el 9,02% (37) presentaron más de 10 CR/
campo. De estas últimas sólo el 29,7% (11) presentaban
leucocitospermia. El coeficiente de correlación de
Spearman con el que se midió la asociación entre concentración de CR/campo y leucocitos PMN/ml dio un valor de
0,2705 con una probabilidad asociada de 0,1046 que
refleja la asociación no significativa entre las variables.
En 32 muestras se realizaron estudios bacteriológicos de
los cuales 13 resultaron positivos y sólo el 30,77% (4) se
acompañaron con leucocitospermia. De las 19 muestras
con bacteriología negativa el 15,78% (3) eran leucocitospérmicas. No hubo relación estadísticamente significativa ni entre CR aumentadas y presencia de gérmenes (χ2:
0,14965 p<0,05), ni entre PMN y gérmenes (χ2: 1,0139,
p<0,05).
CONCLUSIÓN: De lo expuesto surge la conveniencia
de efectuar estudios bacteriológicos en el semen de pacientes infértiles independientemente de la presencia de
CR en el examen directo.
Palabras clave: Semen. Leucocitospermia. Infertilidad. Infección genital.
Correspondencia
Edita Solís
Martín Fierro 218
2000 Rosario (Sta. Fe). República Argentina
Trabajo recibido el 27 de septiembre de 1999.
Summary.- OBJECTIVE: The correlation between
leukocytospermia and genital infections remains
controversial. Similarly, it is inaccurate to consider the
increase of round cells (RC) in semen as leukocytospermia.
The purpose of this study was to determine the possible
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E. AMALIA SOLÍS, V. NORA GATTI, B. REINA BOUVET Y COLS.
association between round cells, leukocystospermia and
bacterial infections in infertile patients.
METHODS: 410 semen samples were analyzed to
determine sperm concentration, motility, morphology and
round cells according to standard WHO citeria. Immature
germ cells were differentiated by the Papanicolau stain,
while the Nahoum-Cardozo method was used for
polymorphonuclear leukocytes (PMN). Bacteriological
studies in semen first urine sprout and urethral secretion
were performed. Gram-Nicolle stain was utilized for the
direct examination. Cultures were made in enriched blood
Columbia agar and Thayer Martin agar was used for
common germs. For mycoplasma identification, both A7
Sheppard solid and liquid media were used. Presence of
Chlamydia trachomatis in urethral secretion was
investigated by direct immunofluorescence.
RESULTS: 79% (324) of the samples were dispermic,
9.02% presented more than 106 RC/ml. Of these, only
29.7% (11) presented leukocytospermia. Spearman's
ranked correlation, used to measure association between
RC/field and PMN leukocytes/ml, showed a value of
0.2705 with an associated probability of 0.1046, indicating
a non-significant association between variables.
Bacteriological studies performed in 32 samples showed
13 were positive, but only 4 (30.7%) presented
leukocytospermia. Of the 19 samples with negative
bacteriology, 15.78% were leukocytospermic. There was
no statistically significant correlation between increased
RC and the presence of germs (χ2: 0.14965, p<0.05) or
between PMN and germs (χ2: 1.01390, p<0.05).
CONCLUSIONS: These data suggest the convenience
of performing bacteriological studies in semen in spite of
the presence of RC in the direct examination.
Keywords: Semen. Leukocytospermia. Infertility.
Genital infection.
microscopio óptico, los GB y las células germinales
inmaduras (CGI) son observadas como CR. Sin técnicas apropiadas no es posible identificarlas (1, 2).
En los últimos 20 años la concentración de GB en
semen para el diagnóstico de leucocitospermia fue
variando desde > 500.000 a > 5.000.000/ml.
Comhaire ha establecido un cut off de 1.000.000/ml
de polimorfonucleares neutrófilos (PMN) para diagnosticar leucospermia (3).
Los granulocitos PMN constituyen la principal población de leucocitos presentes en el semen y se
encuentran en todos los eyaculados. Juegan un rol
importante en la inmunovigilancia y aclaramiento
específico de espermatozoides anormales (4).
Algunos consideran que concentraciones elevadas
de GB en semen son importante indicación clínica de
inflamación del tracto genital masculino y puede significar presencia de infección sub-clínica del mismo.
Los estudios realizados para documentar una asociación específica entre bacterias patógenas en semen
y leucocitospermia han producido resultados conflictivos, posiblemente debido al limitado panel de enfermedades de transmisión sexual estudiadas, la poca
sensibilidad de las técnicas ensayadas y el background
de flora normal presente en el tracto genital inferior.
Las infecciones virales sub-clínicas son comunes en el
tracto genital masculino y se asocian con leucocitospermia (5, 6, 7).
Nuestro objetivo fue correlacionar el aumento de
CR con la leucocitospermia y analizar los resultados
de los estudios bacteriológicos de pacientes infértiles
con más de 1.000.000 de CR/ml.
MATERIAL Y MÉTODOS
INTRODUCCIÓN
Leucocitospermia (leucospermia o piospermia), es
el término utilizado para designar concentraciones
anormalmente altas de glóbulos blancos (GB) en semen. Ha sido asociada con pobre calidad del mismo y
afecta la fertilidad potencial del varón.
Convencionalmente se sospecha leucocitospermia
en muestras con más de 10 células redondas (CR) por
campo microscópico de alto poder o más de 1.000.000
de CR/ml de semen.
En un preparado de semen sin teñir, a la luz del
Se analizaron 410 muestras de semen de hombres
cuyas edades oscilaban entre 20-45 años, que consultaron por infertilidad en los Servicios de Reproducción del Hospital Provincial del Centenario de la
ciudad de Rosario y del Hospital Escuela Eva Perón de
Granadero Baigorria, ambos Hospitales Escuela de la
Universidad Nacional de Rosario. Se recogieron por
masturbación, luego de 3 a 5 días de abstinencia
sexual. Los estudios dinámicos fueron realizados antes de la hora de eyaculación. La movilidad progresiva
lineal se determinó mediante observación microscópica con 400 aumentos y la concentración de espermatozoides y CR con cámara de Neubauer.
CÉLULAS REDONDAS EN SEMEN E INFECCIONES GENITALES
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TABLA I
BACTERIOLOGÍA POSITIVA EN TRECE MUESTRAS
GERMENES IDENTIFICADOS
PMN/ml
CR/ml
1. Staphylococus aureus
Ureaplasma aurealitycum
Gardnerella
44.000
180.000
2. Staphylococus aureus
22.000
300.000
3. Staphylococus aureus
5.200.000
7.000.000
4. Mycoplasma
2.300.000
8.000.000
5. Chlamydia trachomatis
Estreptococo β hemolítico
100.000
5.000.000
6. Ureaplasma urealitycum
22.000
8.100.000
7. Ureaplasma urealitycum
2.300.000
4.300.000
8. Ureaplasma urealitycum
11.000
7.300.000
9. Ureaplasma urealitycum
22.000
1.000.000
10. Ureaplasma urealitycum
2.500.000
7.900.000
11. Ureaplasma urealitycum
22.000
8.000.000
12. Chlamydia trachomatis
180.000
600.000
22.000
6.000.000
13. Estroptococo β hemolítico
La morfología espermática y la identificación de
CGI en los extendidos de semen se realizaron mediante tinción de Papanicolau.
El recuento de leucocitos se efectuó mediante el
método de peroxidasas de Nahoum-Cardozo (8), que
identifica granulocitos PMN, células peroxidasas positivas teñidas de color marrón intenso, mientras el
resto de las CR entre ellas las CGI, macrófagos, células
uretrales y linfocitos son peroxidasa negativos.
Los estudios bacteriológicos se efectuaron en semen, primer chorro de orina y secreción uretral utilizando coloración de Gram-Nicolle para el examen
directo. Los cultivos para gérmenes comunes se reali-
zaron en medios enriquecidos de Agar Columbia sangre, Agar chocolate y Agar Thayer-Martin. Para la
identificación de Mycoplasma se efectuó la siembra
en medios líquidos y sólidos A7 Sheppard.
La investigación de Chlamydia trachomatis se llevó
a cabo por técnica de inmunoflourescencia directa, en
secreción uretral.
RESULTADOS
De los 410 sémenes analizados se encontró que el
79% de los pacientes eran dispérmicos. Para definir
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E. AMALIA SOLÍS, V. NORA GATTI, B. REINA BOUVET Y COLS.
normospermia se utilizaron los criterios de la OMS:
concentración de espermatozoides mayor de
20.000.000/ml, movilidad progresiva (A+B) mayor
de 50%, espermatozoides morfológicamente normales mayor de 30%, concentración de leucocitos menor
de 1.000.000/ml y ausencia de aglutinación microscópica. Dado que no existe acuerdo sobre el umbral de
CGI (9) se utilizó un valor de 400.000/ml, que surge
del estudio de una población de hombres fértiles en
nuestro medio. 389.000 +/- 98.000 CGI/ml (media
+/- DS).
Se seleccionaron 37 muestras que presentaron más
de 10 CR por campo (9,02%) en las que se discriminó
concentraciones de CR y el tipo celular (PMN o CGI).
En 11 de las mismas (29,7%) la concentración de
leucocitos PMN fue mayor de 1.000.000/ml (en 3 de
las muestras fue la única población hallada y en las
restantes coexistían con otros tipos celulares).
En 27 eyaculados (72,97%) se hallaron más de
400.000 CGI/ml (en 12 como única población y el
resto coexistieron con otras líneas celulares).
Se analizaron en muestras leucospérmicas y no
leucospérmicas distintos parámetros seminales. Para
la movilidad progresiva la diferencia fue estadísticamente no significativa (χ2: 0,2602 p < 0,05). En forma
similar se obtuvieron diferencias no significativas
para concentración y morfología de los zoides.
A través del coeficiente de correlación de Spearman
(9) se midió la asociación entre concentración de CR/
ml y leucocitos PMN/ml que arrojó un valor de 0,2705
con una probabilidad asociada de 0,1046 que refleja la
asociación no significativa entre las variables. De
igual forma se midió la asociación entre concentración
de CR/ml y CGI/ml obteniendo un coeficiente de
correlación de 0,3347 con una probabilidad asociada
de 0,0446, que refleja asociación significativa entre
ambas variables para la población de hombres infértiles
estudiada.
En 32 muestras se realizaron estudios bacteriológicos de los que hubo 13 resultados positivos y sólo 4
acompañados de leucocitospermia (30,77%).
Hubo 19 muestras con bacteriología negativa; de
los que 3 tenían leucocitospermia (15,78%).
Se relacionó la concentración de CR mayor de
1.000.000/ml con la presencia de gérmenes en semen
y secreción uretral, la que fue estadísticamente no
significativa (χ2 0,14965 p < 0,05). También fue
estadísticamente no significativa la relación entre
leucocitospermia e infección (χ2 1,0139 p < 0,05).
DISCUSIÓN
Se encontró que, en la población estudiada, existe
una relación estadísticamente no significativa entre
CR>1.000.000/ml y leucocitospermia, mientras que la
asociación entre CR y CGI resultó estadísticamente
significativa. La mayoría de las CR presentes en el
semen son células germinales inmaduras.
De la Tabla I surge que: Ureaplasma urealitycum,
cocos Gram positivos como Streptococus y
Staphylococus pueden estar presentes en semen sin
manifestar reacción inflamatoria, por lo que, bajas
concentraciones de leucocitos PMN en el eyaculado,
no implica que las vías seminales estén libres de
infección o de gérmenes que la colonicen.
Además ratifica que la infección por Chlamydia
trachomatis puede cursar en forma silenciosa.
CONCLUSIONES
De lo expuesto surge la conveniencia de efectuar
estudios bacteriológicos en el semen de pacientes
infértiles, independientemente de la observación microscópica de CR en el examen directo.
AGRADECIMIENTOS
Estadística Mercedes Leiva, Bioq. Hebe Bottai.
BIBLIOGRAFÍA Y LECTURAS
RECOMENDADAS (*lectura de interés y
**lectura fundamental)
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cols.: "The removal of morphologically abnormal sperm
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CÉLULAS REDONDAS EN SEMEN E INFECCIONES
CÉLULAS
GENITALES
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