RECOPILADO POR: EL PROGRAMA UNIVERSITARIO DE ALIMENTOS NMX-F-273-1976. ALIMENTOS PARA USO HUMANO. DETERMINACIÓN DE MATERIA GRASA EN GRANOS DE CACAO SIN CÁSCARA. FOODS FOR HUMAN USE. METHOD OF GEST FOR FATTY MATTER OF CACAO BEAN WITHOUT SHELL. NORMAS MEXICANAS. DIRECCIÓN GENERAL DE NORMAS. PREFACIO En la elaboración de esta Norma participaron los siguientes Organismos: Secretaría de Salubridad y Asistencia Dirección de Control de Alimentos, Bebidas y Medicamentos Comisión Nacional del Cacao La Azteca, S.A. de C.V. Compañía Nestle, S.A. La Suiza, S.A. de C.V. 1. OBJETIVO Y CAMPO DE APLICACIÓN Esta Norma Mexicana establece un método de prueba para determinar la cantidad de materia grasa en granos de cacao sin cáscara. 2. REACTIVOS Y MATERIALES Los reactivos que a continuación se mencionan deben ser grado analítico a menos que se indique otra cosa; cuando se habla de agua se debe entender agua destilada. • Ácido clorhídrico 8 N Diluir a 1 litro 662 ml de HC1 - 37 % • • Éter de petróleo, con intervalo de ebullición de 40 a 60ºC Nitrato de plata 0.1N Diluir a 1 litro 17 g de AgNO3 • • Ácido nítrico 1:1 (v/v) Gel de sílice con indicador de humedad 3. APARATOS Y EQUIPO • • • Balanza analítica con precisión de 0.0001 g Molino de aspas para productos secos o mortero Aparato Soxhlet con matraz de fondo plano de 250 ml y junta esmerilada • • • • • Papel filtro de poro cerrado que no permita el paso de la grasa 24/40 Cartuchos de extracción de 94 x 33 mm Baño María, placa de calentamiento o canasta de calentamiento Estufa con control de temperatura Equipo de uso común el laboratorio 4. PREPARACIÓN DE LA MUESTRA Mezcle cuidadosamente el lote de muestra. Por reducciones sucesivas de la muestra mezclada, obtenga aproximadamente 10 g de granos de cacao, elimine la cáscara, muela estos granos en un mortero o molino durante un minuto, de tal manera que las dimensiones de las partículas mayores no excedan de 5 mm, evitando la formación de una pasta. Si se usa mortero es conveniente moler los granos individualmente. 5. PROCEDIMIENTO Pesar en un matraz Erlenmeyer, con una precisión de 0.1 mg, de 2 a 4 g de la muestra molida. Añadir unas perlas de vidrio, 55 ml de ácido clorhídrico 8 N y 45 ml de agua hirviente. Cubrir el Erlenmeyer con un vidrio de reloj o un pequeño embudo. Calentar lentamente hasta ebullición y mantener la ebullición suavemente durante 15 minutos. Enjuagar el vidrio de reloj o el embudo con agua destilada hirviente, recogiendo las aguas de lavado en el recipiente. Filtrar el líquido todavía hirviente a través de un filtro plegado desengrasado previamente humedecido. Lavar el recipiente, el filtro y la fracción insoluble conteniendo la grasa con una cantidad abundante de agua destilada hirviente hasta que el filtrado no de la reacción de cloruros con nitrato de plata en presencia de ácido nítrico. Transferir el filtro y su contenido todavía húmedo a un cartucho de extracción desengrasado, cubrir con un poco de algodón desengrasado y colocar sobre un vidrio de reloj o en un pequeño vaso. Dejar secar a 103 ± 2ºC de 6 a 18 horas, adicionar unas perlas de vidrio al matraz del Soxhlet, secar durante una hora a 100ºC. Enfriar a temperatura ambiente en un desecador y pesar. Colocar el cartucho conteniendo la muestra seca en el Soxhlet. Enjuagar el vaso de digestión, el vaso de secado y el vidrio de reloj con 3 porciones de 50 ml de éter de petróleo, y adicionar los lavados al Soxhlet Reflujar la muestra digerida durante 4 horas ajustando el calentamiento de manera que sifonee por lo menos 30 veces. Desmontar el extractor y evaporar el solvente en un baño de vapor, secar el matraz a 100-105ºC a peso constante (1.5-2 horas). Enfriar en desecador hasta temperatura ambiente y pesar. 6. CÁLCULOS % Materia grasa = Peso de la grasa en g x 100 Peso de la muestra en g 7. REPRODUCIBILIDAD La diferencia máxima permisible en determinaciones efectuadas por duplicado no debe ser mayor de 0.1 % del contenido en materia grasa. En caso contrario repetir la determinación. APÉNDICE A. A.1 Observaciones Después de desmontar el extractor, destilar lentamente el éter de petróleo con ebullición regulada en un aparato con refrigerante. Recuperando así el éter de petróleo, puede verificarse la limpieza del destilado sobre 10 ml del mismo. Un ligero residuo graso sobre un vidrio de reloj indica un arrastre de materia grasa, debido a una ebullición demasiado viva o irregular. En este caso, hay que repetir la determinación. Eliminar los últimos vestigios de éter de petróleo y de humedad calentando el matraz en posición horizontal durante una hora en una estufa a 103ºC ± 2ºC.