UNIVERSIDAD VERACRUZANA FACULTAD DE BIOLOGÍA PRESENCIA DE COLIFORMES TOTALES Y FECALES EN EL AGUA DEL RÍO MATLACOBATL, XICO, VERACRUZ, MÉXICO. TESIS TRABAJO DE EXPERIENCIA RECEPCIONAL QUE PRESENTA: CARLOS JAVIER RAMOS PÉREZ DIRECTOR: M. en C. Margarito Páez Rodríguez. XALAPA, VER MARZO 2011. Carlos Javier Ramos Pérez. Dedicatoria y Agradecimientos. A MI FAMILIA. Les agradezco su respeto, su apoyo, comprensión. Los momentos compartidos, las enseñanzas aprendidas, su paciencia, pero lo principal, su amor y su tiempo, ya que gracias a ello he logrado comprender mis errores, les agradezco de todo corazón que siempre estén conmigo. A MI MADRE. Gracias señora incansable, luchadora invencible, gracias por creer en mí, gracias por tus consejos, muy sabios, por tu amor, por todos y cada uno de los bellos momentos que he compartido contigo, por tus regaños, que gracias a ellos he podido valorar más la vida. Gracias por preocuparte por mí, por enseñarme que si uno cae tiene que levantarse, que no hay peor lucha que la que no se hace, gracias por darme el regalo más grande que jamás vaya a recibir, la vida. Gracias a ti madre mía, gracias por todo esto y más… A MI DIRECTOR DE TESIS. Gracias por su paciencia, por aportar conocimientos muy valiosos para mí, gracias por creer en mí, gracias M. en C. Margarito Páez Rodríguez, muchas gracias por todo su valioso tiempo, por sus atenciones, muchas gracias. A MIS PROFESORES. Agradezco a todos y cada uno de los profesores que han formado parte no solo de la carrera, sino también de mi vida, con sus consejos, que me hacían comprender mejor las cosas, con sus conocimientos que alimentaban mi mente con nuevas ideas, nuevas inquietudes. Gracias por su amistad. A MIS AMIGOS. Me siento muy contento de haber encontrado personas tan maravillosas como ustedes, aprender de sus disgustos, llorar con nuestras tristezas, reír con nuestras locuras, gracias por formar parte de mi vida, gracias por todo. 1 Carlos Javier Ramos Pérez. Índice. Resumen……………………………………………………………………………………...3 1. Introducción……………………………………………………………………………....4 2. Generalidades.…...……………………………………………………………………......7 2.1 Concepto de calidad....................................................................................................... 7 2.1.1 Calidad del agua….……..…………………………………………………………....7 2.2 Características del agua…………….…………………………………………………..8 2.3 La contaminación del agua..……….……….……………….……………………...…. 9 2.4 Indicadores de contaminación..…….……………………………………………...….11 2.5 Coliformes……………….………….………………………………………………....12 2.6 Ecoturismo...………………………..………………………………………………....14 2.7 Marco normativo.…………………………………………………………………......16 3. Antecedentes……………………………………………………………………………..20 4. Objetivos………………………………………………………………………………....24 5. Ubicación de la zona de estudio..................................................................................... 25 5.1 Localización geográfica……………………………………………………………... 25 5.2 Sitio Ramsar…………………………………………………………………………. 28 5.3 Valores Socioeconómicos….………………………………………………………....28 6. Materiales y Métodos….....……………………………………………………………..29 6.1 Trabajo de campo……………………………………………………………………. 29 6.2 Procedimiento………………………………………………………………………....33 7. Resultados………………………………………………………………………………..34 8. Discusión………………………………………………………………………………....54 9. Conclusión……………………………………………………………………………….57 10. Recomendaciones……………………………………………………………………....58 11. Bibliografía……………………………………………………………………………..59 Anexo……………………………………………………………………………………….63 2 Carlos Javier Ramos Pérez. Resumen. Las descargas de aguas residuales son la principal fuente de contaminación de los cuerpos de agua, ocasionando enfermedades gastrointestinales a todo el que consuma agua en condiciones no saludables para la vida. El objetivo del estudio fue evaluar la presencia bacteriológica del agua del Río Matlacobatl en el municipio de Xico, Veracruz, México mediante la norma NMX-AA-042-1987, la cual establece la técnica para la determinación del número más probable (NMP) de coliformes totales, coliformes fecales y Escherichia coli presuntiva. El río que se estudio pertenece a un sitio Ramsar denominado “Texolo y su entorno” donde se han llevado a cabo trabajos de investigación relacionados con flora y fauna, siendo este trabajo el primero en materia de calidad de agua. Se realizó un análisis bacteriológico de 40 muestras de agua comprendido en cinco estaciones y ocho fechas de muestreo: Octubre, Noviembre y Diciembre en el año 2008 y Enero, Mayo, Junio, Julio y Septiembre para el 2009. Se tomaron parámetros in situ, como pH, el cual registro un valor de 6 para todas las fechas de muestreo y todas las estaciones; temperatura, con variaciones entre fechas de muestreo, comprendidas en un mínimo de 16°C y un máximo de 19°C, siendo los meses de Noviembre, Diciembre y Enero los más fríos; el oxígeno disuelto registro variaciones que van desde los 5 mg L-1 a10 mg L-1. Los resultados obtenidos para coliformes fueron muy variados, siendo las fechas de 26 de Enero y 30 de Mayo de 2009 las que presentaron mayor concentración de microorganismos, con la presencia de el número más probable de 2400 NMP/100mL. coliformes totales para todas las estaciones en Enero y de 1100 NMP/100mL. a 2400 NMP/100mL. coliformes totales para Mayo. En los meses de Julio y Septiembre de 2009, se realizó la prueba E.C. en la cual se obtuvo la presencia de organismos coliformes fecales. 3 Carlos Javier Ramos Pérez. 1. Introducción. El agua es una sustancia abiótica, la más importante de la tierra y uno de los principales constituyentes del medio en que vivimos y de la materia viva. En estado líquido aproximadamente ¾ partes de la superficie terrestre está cubierta por agua. Es probablemente el recurso natural más importante del mundo, ya que sin ella no podría existir la vida y la industria no funcionaria. El 97.5 % del agua en el planeta es salada y mientras solo el 2.5% del agua es dulce. Del total del agua dulce en el planeta el 70% se encuentra congelada en los glaciares y nieves perpetuas y un poco menos del 30% es correspondiente al agua que se encuentra subterránea y en humedad del suelo, alrededor del 0.01% corresponden al agua superficial y del agua disponible para ecosistemas y población humana corresponde el 0.01% aproximadamente (Tebbutt, 1998). Los ríos y los lagos son importantes fuentes de abastecimiento de agua para consumo y para riego desde los comienzos de la civilización. Se puede privar de ciertos lujos, pero nadie puede prescindir del agua para vivir. Sin embargo, los ríos, los lagos y aún los mares, fueron los primeros receptáculos donde se vertieron los desechos humanos, tanto locales como industriales y todas las otras aguas servidas. La contaminación del agua ocurre por la introducción de materiales extraños a sus propiedades naturales, la cual se lleva a cabo por medio de diferentes actividades humanas como la deforestación, la agricultura, las aguas negras y desechos industriales, en la cual los contaminantes más frecuentes son: materias orgánicas y bacterias, hidrocarburos, desperdicios industriales, productos pesticidas y otros utilizados en la agricultura, productos químicos domésticos y desechos radioactivos (Lomelí, 1999). 4 Carlos Javier Ramos Pérez. El agua puede estar contaminada por microorganismos patógenos de origen fecal, por las filtraciones que pudiera tener a través de su curso o por descargas directas en ella, trayendo grandes repercusiones a la salud humana. Muchas enfermedades importantes se asocian a contaminación del agua por desechos humanos. Algunas de estas enfermedades, como las gastrointestinales, ocupan altos índices de mortalidad infantil, en lugares donde la pobreza y la desnutrición son comunes (Alvizar, et al. 1994). Las aguas superficiales de los continentes fueron las más visiblemente contaminadas durante muchos años, pero precisamente al ser tan visibles los daños que sufren, son las más vigiladas y las que están siendo regeneradas con más eficacia en muchos lugares del mundo, especialmente en los países desarrollados. En la actualidad la contaminación resultante por las actividades humanas (industrialización, agricultura, urbanización), ha generado la necesidad de valorar rigurosamente la calidad del agua. Con relación a los usos del agua en México, el mayor volumen que se consume se destina al riego agrícola (83%), abastecimiento de agua a las poblaciones (12%), abastecimiento de las industrias (3%) y acuacultura (2%). La demanda de agua ha aumentado con el desarrollo económico y con el incremento de la población. Sin embargo el agua que utilizamos la estamos contaminando día a día más y es por ello que se realizan diversos trabajos de investigación en materia de calidad de agua para conocer la condición bacteriológica, física y química en la cual se encuentran nuestros cuerpos de agua y de alguna manera remediar los cambios que le hemos ocasionado. El Rio a estudiar (Matlacobatl) pertenece al municipio de Xico, Veracruz, México ubicado en la cuenca de las faldas bajas del volcán Cofre de Perote, perteneciendo a un sitio Ramsar, denominado “Texolo y su entorno”, nombre que recibe debido a una convención de humedales realizada en Ramsar, Irán en 1971, donde se elaboró un tratado intergubernamental cuya misión es “la conservación y el uso racional de los humedales mediante acciones locales, regionales y nacionales y gracias a la cooperación internacional, como contribución al logro de un desarrollo sostenible en todo el mundo” (Secretaria de la 5 Carlos Javier Ramos Pérez. convención de Ramsar, 2007). La ficha para designar este lugar como sitio Ramsar se lleno el 11 de mayo de 2005, quedando así bajo la categoría de humedal continental. El sitio de estudio presenta una belleza paisajística visual, conformada por rocas, vegetación propia de bosque mesófilo, donde el viento mese las ramas emitiendo un sonido sin igual, cuenta con una gran variedad de fauna, donde destaca el cantar y el colorido de una variedad de aves, lo cual representa un concierto que con solo cerrar tus ojos te pone en paz y armonía con la naturaleza, todo eso sumado con el sonido que emite el agua al recorrer su cauce. Siendo así un placer de muchos visitantes que viven en las cercanías y de otras personas que van de paso, sumándose a la actividad turística, recrearse en estas aguas o darles uso para sus actividades domésticas. “Texolo y su entorno” se encuentra formado por dos Ríos, Texolo y Matlacobatl, jugando un papel muy importante en la recarga de acuíferos, ya que estos dos ríos al igual que otros de menor tamaño, son tributarios del Río Los Pescados. Las cañadas por donde corren estos ríos funcionan como zonas de refugio para diversas especies de fauna, especialmente de aves. Sin embargo se presenta un problema de contaminación por descargas residuales de los asentamientos humanos cercanos, surgiendo así la necesidad de realizar un estudio bacteriológico para determinar su calidad y regular la no transmisión de enfermedades gastrointestinales a la población que depende de este recurso en la parte baja del río o bien brindar protección a los bañistas que ocurren al río para recrearse. 6 Carlos Javier Ramos Pérez. 2. Generalidades. 2.1 Concepto de calidad. La calidad es el nombre que se le atribuye al conjunto de características que reúnen las cosas con la finalidad de brindar una mejora, las cuales pueden ser comparadas. La norma ISO 8402 define a la calidad como un conjunto de características de un elemento que le confieren la aptitud para satisfacer necesidades explícitas e implícitas. 2.1.1 Calidad del agua. Cuando el agua está siendo expuesta a diferentes sustancias debido a las diferentes actividades humanas (domésticas, industria, agricultura), se dice que está perdiendo sus propiedades físicas, químicas y biológicas, al verse alterada ha perdido su calidad. La tabla número 1 muestra los principales contaminantes que modifican la calidad natural de las corrientes de agua y el daño que ocasionan. Tabla 1. Principales contaminantes que modifican la calidad natural de las corrientes de agua. Contaminante. Daño. Materia orgánica. Disminución de oxigeno disuelto. Nutrientes. Eutrofización. Grasas y aceites. Oclusión de oxígeno en peces y disminuyen la transferencia de oxígeno. Organismos patógenos. Afecta la salud de humanos, flora y fauna acuática y terrestre. Metales pesados. Afecta la salud de humanos, flora y fauna acuática y terrestre. Detergentes y plaguicidas. Afecta la salud de humanos, flora y fauna acuática y terrestre. 7 Carlos Javier Ramos Pérez. La calidad de agua que se encuentra en la naturaleza es muy variable y depende fundamentalmente, de las condiciones geográficas, geológicas y climáticas, de la oportunidad que tenga para disolver gases, sustancias minerales y orgánicas o para mantenerlas en suspensión o en estado coloidal, también depende de su temperatura, volumen, flora microbiana y de la contaminación producida por las actividades del ser humano. 2.2 Características del agua. Las características del agua potable se clasifican en físicas, químicas y microbiológicas, cuyos valores máximos permisibles para consumo humano se encuentran establecidos en la Norma Oficial Mexicana NOM-127-SSA-1-1994, con su última modificación que fue publicada en el Diario Oficial de la Federación en Junio del 2000. Estas características se describen a continuación: Características físicas.- Son aquellas que se detectan sensorialmente. Para efectos de evaluación, el sabor y olor se ponderan por medio de los sentidos y el color y la turbiedad se determinan por medio de métodos analíticos en laboratorio. Los parámetros físicos son color, turbiedad, olor, sabor y temperatura. Los tratamientos que se deben seguir, cuando alguna de las características físicas y organolépticas se encuentran fuera de lo que marca la normatividad mexicana vigente son: coagulación-floculación-precipitación-filtración; cualquiera o la combinación de ellos, adsorción en carbón activado u oxidación. Características químicas.- son aquellas sustancias minerales contenidas en el agua debidas a elementos o compuestos químicos, que como resultado de investigación científica, se ha comprobado que puede causar efectos nocivos a la salud humana, por lo que deben quedar comprendidas entre los limites que la experiencia ha encontrado necesaria o tolerable para el consumo humano, las cuales en su mayor parte han sido establecidas en la Norma Oficial Mexicana. Los contaminantes más comunes en el agua natural son: arsénico, aluminio, cadmio, cianuros, cobre, cromo total, plomo, dureza, conductividad, sólidos, hierro, manganeso, cloruros, pH, nitrógeno total, sulfatos, fluoruros, nitratos, nitritos, sodio y zinc. 8 Carlos Javier Ramos Pérez. Características microbiológicas.- Son aquellas que se refieren a la presencia de microorganismos nocivos a la salud humana. Para efectos de control sanitario, se determina específicamente organismos coliformes totales y Escherichia coli o coliformes fecales. 2.3 La contaminación del agua. La LGEEPA (1988) nos menciona que contaminación es la presencia en el ambiente de uno o más contaminantes o de cualquier combinación de ellos que cauce desequilibrio ecológico; teniendo así que contaminantes son todas aquellas materias o energías en cualquiera de sus estados físicos y formas, que al incorporarse o actuar en la atmósfera, agua, suelo, fauna, flora o cualquier elemento natural, altere o modifique su composición y condición natural. La contaminación del agua es una modificación artificial de las características fisicoquímicas de la misma. De procedencia variada, los focos de contaminación del agua son fundamentalmente tres: 1. Industrias, que producen contaminantes muy diversos y de forma localizada. Su tratamiento es costoso pero ineludible. 2. Vertidos producidos en los núcleos urbanos, con contaminantes orgánicos que se tratan en depuradoras de aguas residuales, de costo alto pero imprescindibles hoy en día para mantener adecuadamente la calidad del agua de los ríos. 3. Vertidos de explotaciones agropecuarias, que se producen de manera muy difusa y llegan al agua a través de la escorrentía y las aguas subterráneas. 9 Carlos Javier Ramos Pérez. La tabla número 2 muestra los principales contaminantes del agua, su procedencia y los efectos que tienen sobre el medio ambiente y la salud humana (Alarcón, 2005). CONTAMINANTE Tabla 2. Principales contaminantes del agua, procedencia y efecto. PROCEDENCIA EFECTOS Metales pesados. Fundamentalmente de la industria. Son bioacumulables. Afectan al sistema neuromuscular y pueden ser letales. Compuestos órgano halogenados. Productos fitosanitarios. Muy tóxicos. Usos industriales. Bioacumulables. Producen mutaciones genéticas. Materia orgánica. Explotaciones agropecuarias. Procesos de eutrofización. Doméstica. Industrial. Nutrientes. Detergentes domésticos. Procesos de eutrofización. Industriales. Fertilizantes agrícolas. Compuestos orgánicos. Fugas y limpieza industrial. Impiden el paso de la luz y alteran (fenoles, petróleo,…) Refinerías. la fotosíntesis. Aceites desechados. Contaminación térmica. Refrigeración de la industria. El aumento Centrales térmicas y nucleares. disminuye la de temperatura solubilidad del oxígeno y puede hacer variar la fauna y la flora local. Contaminación bacteriológica. Redes de saneamiento. 10 Epidemias de cólera, tifus, etc. Carlos Javier Ramos Pérez. 2.4 Indicadores de contaminación. En los cuerpos de agua podemos encontrar diversas bacterias, las cuales pueden ser propias de ellos, por lo tanto pueden ayudar en procesos de autopurificación y otras que tienen su origen en las excretas de humanos y animales de sangre caliente (mamíferos, aves) las cuales contaminan el agua. Los indicadores bacteriológicos, son organismos de un grupo específico, el cual por su sola presencia demuestra que ocurrió contaminación y en ocasiones, sugiere el origen de dicha contaminación. Debido a los altos costos que representa la caracterización bacteriológica de las aguas, es necesario realizar pruebas que permitan evidenciar la magnitud y origen de la contaminación bacteriana, esto es, la determinación de indicadores bacteriológicos de contaminación. Tradicionalmente, los coliformes totales, coliformes fecales y estreptococos fecales, son los grupos de bacterias indicadoras que se consideran en los estudios y trabajos de evaluación de calidad del agua (IMTA, 1991). El IMTA (1991) y SARH (1979) establecen las características que debe poseer un indicador ideal de contaminación por excreciones humanas y de animales: 1. Ser de origen animal (del aparato digestivo). 2. Estar presentes en el agua cuando las bacterias patógenas estén presentes. 3. No reproducirse en el agua. 4. Su densidad debe tener alguna relación directa con el grado de contaminación fecal. 5. Debe sobrevivir en el agua más tiempo que los patógenos entéricos, pero su desaparición debe ser inmediatamente posterior a la de aquellos ya sea de manera natural (autopurificación) o en procesos creados por el hombre (tratamiento). 6. Estar siempre ausente en aguas bacteriológicamente potables. 7. Las técnicas para su análisis deben ser sencillas, rápidas y aplicables a todo tipo de agua y las pruebas no deben presentar interferencia por otras bacterias. 11 Carlos Javier Ramos Pérez. 8. No reproducirse en el ambiente. 9. Ser inofensivo para el hombre y animales. La determinación de indicadores es de utilidad en múltiples ocasiones de acuerdo al IMTA (1991): 1. Evaluación de la calidad del agua para definir su uso (agrícola, doméstico, recreativo, potable, riego de áreas verdes, etc.). 2. Evaluación de la eficiencia de plantas de tratamiento de aguas residuales y plantas potabilizadoras. 3. Determinación del efecto de agentes tóxicos y orgánicos en la flora bacteriana. 4. Identificación de fuentes de contaminación. Diagnósticos relativamente rápidos de calidad bacteriológica del agua (IMTA, 1991). 2.5 Coliformes. Las bacterias del grupo coliforme se refieren al grupo de bacterias gram-negativas aerobias y anaerobias facultativas, no formadoras de esporas, tiene una forma de bacilo corto no esporulado, que fermentan la lactosa. Este grupo de bacterias se encuentran altamente distribuidos en la naturaleza, las podemos encontrar en el agua, suelo y en la vegetación de manera natural y no solo como contaminante, además forma parte de la flora intestinal de los seres humanos y de animales de sangre caliente (Guinea, 1979). La prueba estándar para el grupo coliforme puede realizarse mediante una técnica de fermentación en tubos múltiples (a través de las pruebas presuntivas y confirmatorias o prueba completa) o por la técnica del filtro de membrana (FM). El método de filtración de membrana, es muy reproducible y puede ser empleado para probar volúmenes relativamente grandes de muestra. Sin embargo, la turbiedad causada por la presencia de algas y otros materiales, pueden interferir con la prueba. En algunas 12 Carlos Javier Ramos Pérez. ocasiones, la estimación de cantidades bajas de coliformes, puede deberse a la presencia de gran cantidad de bacterias no coliformes y la presencia de sustancias tóxicas. Sin embargo el método de tubos múltiples, el cual también se conoce con el nombre de número más probable (NMP), porque está basado en una evaluación indirecta de la densidad microbiana de la muestra de agua, con referencia a los cuadros estadísticos, para determinar el número más probable de microorganismos presentes en la muestra original. Este método es indispensable para el análisis de las muestras muy turbias que no pueden analizarse con el método de filtración de membrana. La norma NMX-AA-042-1987 establece la técnica para la determinación del número más probable (NMP) de coliformes totales, coliformes fecales termotolerantes y Escherichia coli presuntiva. El método del número más probable (NMP) de acuerdo a la NMX-AA-042-1987 se basa en la inoculación de alícuotas de la muestra, diluida o sin diluir, en una serie de tubos de un medio de cultivo líquido conteniendo lactosa. Los tubos se examinan a las 24 y 48 horas de incubación ya sea en un rango de 35 ó 37ºC. Cada uno de los que muestran turbidez con producción de gas se resiembra en un medio confirmativo más selectivo y, cuando se busca E. c oli presuntiva, en un medio en el que se pueda demostrar la producción del indol. Se lleva a cabo la incubación de estos medios confirmativos hasta por 48 horas ya sea a 35 ó 37ºC para la detección de organismos coliformes y a 44ºC para organismos coliformes termotolerantes y E. coli. Mediante tablas estadísticas, se lleva a cabo el cálculo del número más probable (NMP) de organismos coliformes, organismos coliformes termotolerantes y E. coli que pueda estar presente en 100 cm3 de muestra, a partir de los números de los tubos que dan resultados confirmativos positivos. Los coliformes están ampliamente distribuidos, se encuentran universalmente en las vías intestinales del hombre y animales, tanto de sangre caliente como fría (Freeman, 1984). 13 Carlos Javier Ramos Pérez. Los coliformes totales son organismos en forma de bacilos cortos no esporulados, aerobios y anaerobios facultativos, se pueden desarrollar en presencia de sales biliares u otros agentes tensoactivos a 35°C +/- 0.5°C produciendo gas y acidez en un plazo de 24 a 48 horas. Los coliformes fecales presentan similitudes con los totales en lo que se refiere a morfología, la capacidad de fermentar lactosa, ser aerobios y anaerobios, pero difieren en la capacidad de soportar temperaturas, a diferencia de los totales, los fecales pueden fermentar la lactosa con producción de ácido y gas en periodos de incubación de 24 a 48 horas a una temperatura de 44.5 °C en condiciones de laboratorio. 2.6 Ecoturismo. El ecoturismo hoy en día juega un papel muy importante en las relaciones personasnaturaleza pues es el encargado de una interacción entre ambas sin afectar la belleza natural y así conservar las áreas verdes. El ecoturismo no es urbanización, es paisaje y naturaleza no alterada, es toda aquella actividad turística que apoya la conservación de la naturaleza; es la actividad de viajar a zonas relativamente intactas para estudiar, admirar, disfrutar y recrearse en la vegetación, la fauna y la cultura humana de la zona visitada. Hoy en día la palabra ecoturismo nos es muy familiar, suena a aventura, diversión, paisajes un sinfín de placeres que la misma naturaleza nos brinda. El ecoturismo es concientización, es aprender a vivir en armonía con la naturaleza. Un crecimiento ecoturistico trae sus consecuencias, los grandes desarrollos turísticos tienen un impacto negativo en la naturaleza, con prácticas como la deforestación, la eliminación de la cubierta vegetal, la desecación y relleno de humedales para la edificación, entre otros, los cuales provocan la destrucción y modificación de hábitats, lo que invariablemente afecta la biodiversidad: las especies animales tienden a emigrar de sus 14 Carlos Javier Ramos Pérez. ambientes naturales si ya no encuentran las especies base de su alimentación; es decir, las cadenas alimenticias se desequilibran y fracturan, además de que se reducen los sitios de resguardo para la fauna (INE,2000). Es por ello que el desarrollo de áreas verdes y recreativas forma un papel importante dentro de la ecología. Las aguas destinadas para uso recreacional pertenecen a cuerpos superficiales que se utilizan principalmente para baño y actividades deportivas estas deben reunir los siguientes requerimientos generales (CNA, 2002): 1. Su calidad debe observar pautas microbiológicas y fisicoquímicas que no involucren riesgo para la salud de las personas expuestas. (Parámetros de calidad con significación para la salud humana). 2. Debe reunir características relativas a su calidad estética, vinculadas a variables de percepción organoléptica (parámetros de calidad con significación estética). El agua además de ser un recurso es un valor, forma parte del patrimonio natural. Dada la importancia del agua para la vida de todos los seres vivos y debido al aumento de las necesidades de ella, por el continuo desarrollo de la humanidad, el hombre está en la obligación de proteger éste recurso y evitar toda influencia nociva sobre las fuentes del preciado líquido (Mendivil, 1996). El valor estético del agua se debe a que es un elemento del paisaje, es un elemento emocional, el agua es el alma de los paisajes y el paisaje es una de las riquezas naturales más preciadas que tenemos. Es parte de nuestra propia naturaleza física y la de los demás seres vivos, pero también contribuye al bienestar general de las actividades humanas. 15 Carlos Javier Ramos Pérez. Los paisajes con agua son escenarios de vida y portadores de identidad. El valor que se le pueda dar conlleva a lo menos tres valores: como patrimonio cultural e histórico, como indicador de calidad ambiental y como recurso económico (turismo). La presencia de contaminantes reduce el valor estético del agua hasta casi hacerlo desaparecer. Más aún la conciencia del daño que puede causar el agua sucia hace que el hombre le rehúya, perdiendo así su valor recreativo. Esta contaminación puede ser aparentemente cuando las aguas contienen desechos que la tornan desagradable a la vista o estar oculta cuando no se aprecia a simple vista, pero se sabe que contiene elementos peligrosos para la salud, químicos o bacteriológicos (SEMARNAT, 2006). 2.7 Marco normativo. En la actualidad existen distintos estudios sobre la calidad del agua, es por ello que se crean distintas leyes y normas con la finalidad de estandarizar y mantener lo más limpio posible los cuerpos de agua, que son de vital importancia para la vida en la tierra. Hoy en día existen una variedad de leyes y normas de las cuales destaca la Ley General del Equilibrio Ecológico y Protección al Ambiente (LGEEPA), la cual se considera pionera pues desde su publicación en 1998 cambio el panorama en nuestro país dando importancia la problemática de crear leyes y reglamentos que regulen el uso y protejan el recurso hídrico. A continuación se mencionan una serie de leyes y normas en materia de calidad de agua las cuales son de suma importancia pues regulan los estándares adecuados para una calidad óptima del agua: 1. Ley de Aguas Nacionales y su Reglamento: Titulo séptimo, la cual fue publicada en el Diario Oficial de la Federación el 18 de abril de 2008, que trata entre otros temas de la prevención y control de la contaminación, de la regulación de la explotación del recurso y del uso o aprovechamiento de dichas aguas. 16 Carlos Javier Ramos Pérez. 2. Ley de Aguas Nacionales, 29 de agosto de 2004, Jesús Becerra Pedrote, son aplicables a todas las aguas nacionales, sean superficiales o del subsuelo, para la conservación y control de la calidad del agua. 3. Ley Federal de Derecho, 13 de noviembre de 2008, que en materia de agua establece que se pagará por el uso o aprovechamiento de los bienes del dominio público de la Nación, así como recibir servicios que presta el Estado en sus funciones de derecho público. Para complementar las leyes antes mencionadas, existen las Normas Oficiales Mexicanas en materia de agua: Norma Oficial Mexicana NOM-001-SEMARNAT-1996, publicada en el Diario Oficial de la Federación el 6 de enero de 1997. Esta norma establece los límites máximos permisibles de contaminantes en las descargas de aguas residuales en aguas y bienes nacionales con el objeto de proteger la calidad del agua de los cuerpos receptores y posibilitar sus usos, siendo de observancia obligatoria para los responsables de dichas descargas. Esta Norma Oficial Mexicana no se aplica a las descargas provenientes de drenajes separados de aguas pluviales. Norma Oficial Mexicana NOM-002-SEMARNAT-1996, publicada en el Diario Oficial de la federación el 3 de junio de 1998. Establece los límites máximos permisibles de contaminantes en las descargas de aguas residuales a los sistemas de alcantarillado urbano o municipal, con el fin de prevenir y controlar la contaminación de las aguas y bienes nacionales, así como proteger la infraestructura de dichos sistemas y es de observancia obligatoria para los responsables de dichas descargas. Esta Norma no se aplica a la descarga de aguas residuales domésticas, pluviales, ni a las generadas por la industria, que sean distintas a las aguas residuales de proceso y conducidas por drenaje separado. 17 Carlos Javier Ramos Pérez. Norma Oficial Mexicana NOM-003-SEMARNAT-1997, publicada en el Diario Oficial de la Federación el 21 de septiembre de 1998. Esta norma establece los límites máximos permisibles de contaminantes para las aguas tratadas que se rehúsen en servicios al público con el objeto de proteger el medio ambiente y la salud de la población y es de observancia obligatoria para las entidades públicas responsables de su tratamiento y reutilización. Además de las normas antes mencionadas en México existen marcos de referencia para evaluar la calidad del agua de acuerdo a las siguientes normas: Norma Oficial Mexicana NOM-127-SSA-1-1994 “Salud ambiental, agua para uso y consumo humano-límites permisibles de calidad y tratamientos a que se debe someter el agua para su potabilización”, la cual establece los límites permisibles en cuanto a las características bacteriológicas, físicas, organolépticas, químicas y radiactivas para establecer la calidad adecuada para uso y consumo humano para prevenir y evitar la transmisión de enfermedades gastrointestinales. Norma Técnica NMX-AA-42-1987 “Calidad del agua determinación del número más probable (NMP) de coliformes totales, coliformes fecales (termotolerantes) y Escherichia coli presuntiva”, la cual establece la técnica estandarizada para la determinación de coliformes en el agua. 18 Carlos Javier Ramos Pérez. La Organización Mundial de la Salud (OMS) establece criterios de calidad del agua mediante términos bacteriológicos para la destinación del recurso hídrico en los diferentes usos que le da el hombre, como se muestra en la tabla 3, así como también las categorías en las que se divide de acuerdo al grado de contaminación por presencia de coliformes fecales como se muestra en la tabla 4. Tabla 3. Usos y valores bacteriológicos del recurso hídrico. Usos. Valores. Coliformes totales. Coliformes fecales. Riego Agrícola. X 1’000 NMP/100 ml. Recreacional mediante 2’000 NMP/100 ml. 1’000 NMP/100 ml. 5’000 NMP/100 ml. X 20’000 NMP/100 ml. 2’000 NMP/100 ml. 2’000 NMP/100 ml. X Categoría. Observaciones. 0 A Sin riesgo. 1-10 B Poco riesgo. 10-100 C Riesgo mediano. 100-1000 D Alto riesgo. ≥1000 E Riesgo muy alto. contactoprimario. Recreacional mediante contacto secundario. Potable por tratamiento convencional. Potable por desinfección. Tabla 4. Categorías de contaminación. Bacterias Coliformes fecales NMP/100 ml. 19 Carlos Javier Ramos Pérez. 3. Antecedentes. En la actualidad existen muchos estudios sobre bacterias, gracias a la invención del microscopio por Anton Van Leeuwenhoek en el siglo XVII, desde entonces la Biología y en particular la Citología han experimentado un avance espectacular. Martínez en 1988 nos menciona que la bacteriología sanitaria se inicia cuando Von Fristsch describe a Klebsiella pneumoniae y K. rhinoesclreomatis como característicos de contaminación fecal humana. En el IMTA (1991) se menciona que Escherich en 1885 aisló en heces humanas bacterias que se encontraban de manera consistente en gran cantidad, por lo que las llamó “organismos caracteristicos de las heces humanas” dándoles el nombre de Bacterium coli commune y Bacterium lactis aerogenes. Nos menciona que Migula en 1895, designó a la primera como Escherichia coli commune, posteriormente se demostró que en realidad estas especies eran un conjunto bacteriano de especies y variedades de especies. Martínez Quiroz en 1994, realizó el “Análisis y posible tratamiento de las aguas residuales provenientes del laboratorio estatal de la comisión nacional del agua en Xalapa Veracruz”. Realizó estudios de parámetros fisicoquímicos, así como la presencia de organismos de origen fecal, llegando a encontrar la presencia de dichos microorganismos y concentraciones altas de los parámetros fisicoquímicos, como pH, alcalinidad, nitratos, dureza, cloruros y color mediante la técnica de platino-cobalto. Llegando a la conclusión que los resultados a penas rebasan lo establecido por la norma de la CNA y por la NMXAA-042-1987-que establece la técnica y el Número Más Probable para coliformes totales y fecales. Marcelo en 1994, realizó el “Análisis de los coliformes (Enterobacteraceae) en cuerpos de agua del estado de Veracruz, su relación con parámetros fisicoquímicos y determinación de géneros más frecuentes”. Para su estudio realizó análisis fisicoquímicos como pH, sólidos sedimentables, Demanda Bioquímica de Oxígeno (DBO), nitritos, nitratos, fosfatos, 20 Carlos Javier Ramos Pérez. sustancias activas al azul de metileno (SAAM), turbiedad, dureza, sulfatos, color, cloruros, acidez, alcalinidad, sólidos totales (ST), sólidos totales fijos (STF), sólidos totales volátiles (STV), sólidos suspendidos totales (SST), sólidos suspendidos fijos (nSSF), sólidos suspendidos volátiles (SSV), sólidos disueltos totales (SDT), sólidos disueltos fijos (SDF), sólidos disueltos volátiles (SDV) y conductividad, Demanda Química de Oxígeno (DQO) y Oxigeno Disuelto (OD). Realizó un análisis bacteriológico mediante el Número Más Probable (NMP) de acuerdo a la APHA. Estableció relación entre los parámetros y la presencia de bacterias coliformes. Encontró 72 colonias de las cuales 29 (40.2%) pertenecen a Escherichia sp., 26 (36.1%) pertenecientes a Klebsiella sp., 7 (9.7%) pertenecientes a Enterobacter sp., 4 (5.5%) Citrobacter sp., 1 (1.3%) Serratia sp., 5 (6.9%) no fue posible identificar por la técnica empleada. Llegó a la conclusión de que los resultados dependían mucho de las condiciones hidrometeorológicas, y a las actividades humanas, pero también concluyo que hay ciertas bacterias coliformes autóctonas que cumplen una función específica dentro de los cuerpos de agua y por ello los resultados siempre variarían en caso de repetirse las pruebas. Robles del Ángel L. en 1994, elaboró un “Análisis retrospectivo y descripción de los sistemas de agua operados por la Comisión Estatal del Agua y Saneamiento en la zona norte del estado de Veracruz”. Realizó un estudio de desinfección del agua por cloro, para uso potable. Tomo lecturas de parámetros fisicoquímicos y bacteriológicos, así como monitoreo del cloro residual, basándose en las normas de la SSA y la NMX-042-1987 para coliformes totales y fecales. Hizo corrección de los sistemas de cloración inmediatamente al encontrar fallas. Determinó que en el agua cruda existía la mayor presencia de coliformes totales y fecales tanto en agua superficial como subterránea, que posiblemente era consecuencia de contaminación por aguas negras como producto de actividad por el hombre y por escurrimientos de heces fecales de animales. Alvízar y Gutiérrez en 1995 “aislaron y cuantificaron coliformes totales y fecales en el agua potable, del municipio de Fortín, Veracruz por el método de filtro de membrana”. Llegando a encontrar la presencia de contaminación de origen fecal, encontraron bacterias de dicha contaminación como Escherichia coli, llegando a la conclusión de que la calidad 21 Carlos Javier Ramos Pérez. del agua potable es mala, que rebasa la concentración de lo establecido por la norma de la CNA y SSA. Luna Huerta en 1998 realizó un estudio titulado “Determinación de coliformes totales y Vibrio cholerae en Crasssostrea virginica comercializados en la ciudad de Xalapa, Veracruz. En su estudio realizo encuestas para conocer las pescaderías de mayor consumo de Crassostrea virginica (ostiones), en donde encontró que las pescaderías que prefería la población son 12, de las cuales debido a permisos solo pudo encuestar 9, de donde obtuvo un total de 16 muestras. Realizo la técnica del número más probable (NMP) para la prueba bacteriológica mediante los líquidos que sueltan estos moluscos bivalvos debido a su naturaleza, también hizo la prueba para Vibrio cholerae mediante la técnica establecida por la NOM-031-SSA-1993. Encontró que hay una presencia de coliformes fecales superior a lo establecido por la norma de la SSA, de lo cual sugiere realizar estudios más a fondo tanto de establecimientos que venden este producto, como de zonas de captura de estos moluscos bivalvos para conocer con certeza el origen de su contaminación. Patiño en 1999, realiza un estudio para determinar la “Calidad microbiológica (mesófilos aerobios) de agua purificada que se expende en envases menores en la ciudad de Xalapa, Veracruz. En su investigación analiza agua embotellada en presentación de 500 ml de 6 marcas diferentes, Bonafont, Santa María, Xallapan, Freskagua, Estrella y Coyame; obteniendo 20 muestras por marca. Su estudio se llevo a cabo por medio del método de plaqueo directo a caja con uso de agar suave, para visualizar las colonias fácilmente sobre la superficie. En su investigación detecta en las marcas Freskagua un 5% de organismos mesófilos aerobios, en Estrella un 10%, siendo estas marcas consideradas dentro de las normas, pero la marca Coyame presenta un alarmante 80% superando lo establecido por la norma. Concluye que las empresas encargadas en purificar agua deben tener un mayor control tanto en el trato con el agua, como vigilancia y capacitación del personal que entrega el agua a las tiendas pues podrían estar llenando el agua de otras fuentes no seguras. 22 Carlos Javier Ramos Pérez. Pineda, Rendón y Ricaño en el 2004 realizan el “Diagnóstico de la calidad del agua del río Naolinco en el tramo Santa Cruz-Naolinco, Veracruz, México”. En su diagnóstico hicieron la lectura de parámetros fisicoquímicos como temperatura, pH, conductividad, Demanda Bioquímica de Oxígeno (DBO), alcalinidad, nitratos, dureza, cloruros y color mediante la técnica de platino cobalto, todo esto de acuerdo a la NMX-AA-17-1980; hicieron las pruebas establecidas por la NMX-042-1987 para la detección de coliformes totales y fecales; tomaron muestras de sedimentos para la detección de Bentos, ya que dichos organismos son considerados muy importante para determinar la calidad del agua mediante su presencia. Llegaron a la conclusión de que el agua está en parámetros aceptables, mas no recomendables. Continuando con los estudios realizados en la ciudad de Xalapa, Veracruz, México, tenemos un estudio realizado por Cruz en el 2009 el cual se titula “Análisis Bacteriológico de los embalses del campus para la cultura, las artes y el deporte de la Universidad Veracruzana en Xalapa, Veracruz. En su estudio surge la necesidad de conocer el estado bacteriológico de los embalses, debido a que su composición paisajística atrae a muchos habitantes a disfrutar de los bellos momentos y tranquilidad que nos regala esta zona de estudio. Mediante la técnica del número más probable (NMP) y de acuerdo a la NMX-0421987, determina la presencia de coliformes totales. En su estudio encuentra presencia de coliformes totales en los diferentes puntos de muestreo debido a las descargas residuales que efectúan las casas de una colonia vecina a estos cuerpos. Con los resultados obtenidos, determina de acuerdo a la OMS que la calidad del agua para estos embalses es aceptable. Todos los trabajos antes mencionados son de mucha importancia pues determinan la calidad del agua mediante diferentes métodos, permitiendo así conocer diferentes técnicas para determinar el estado bacteriológico de los cuerpos de agua, tomas de agua, descargas, alimentos, flora y fauna y así poder utilizarla en las diferentes actividades que el hombre realiza con ella. Es por ello que se considera de suma importancia realizar un estudio de calidad bacteriológica en el rio Matlacobatl pues representa una fuente de abastecimiento de agua para actividades (agricultura, doméstico, recreativo) que realizan con ella visitantes y pueblos pertenecientes al municipio de Xico. 23 Carlos Javier Ramos Pérez. 4. Objetivos. Objetivo General: Determinar si la calidad bacteriológica del agua del río Matlacobatl se encuentra en condiciones óptimas para el aprovechamiento humano (actividades recreativas, uso doméstico y riego). Objetivos Particulares: Determinar la presencia de bacterias coliformes totales en las aguas del Río Matlacobatl. Comparar el nivel de contaminación bacteriana de los distintos puntos de muestreo. Valorar si las actividades recreativas, uso doméstico y riego que se realizan con las aguas del río Matlacobatl, pueden seguir llevándose a cabo. 24 Carlos Javier Ramos Pérez. 5. Ubicación de la zona de estudio. 5.1 Localización geográfica. El área de estudio se localiza en el municipio de Xico, Ver., entre las coordenadas 19° 24’ 05.6’’N ,96° 59’ 45.4’’W en la zona centro del estado de Veracruz, México y prácticamente sobre las estribaciones Orientales del Volcán Parque Nacional Cofre de Perote. Pertenece a la provincia del Eje Neovolcánico Transversal. Las localidades importantes más cercanas son Xico a tres kilómetros de distancia en dirección noroeste de la cascada; Teocelo se encuentra a 3 Km. Al sureste de la cascada; Coatepec a 11 Km al noreste; y la ciudad de Xalapa a 19 Km al noreste. Geomorfología y Geología. El municipio de Xico se divide en dos grandes zonas geomorfológicas: faldas altas y bajas del Volcán Cofre de Perote. El área donde se ubica la cascada de Texolo pertenece a la zona conocida como faldas bajas, la cual se ubica entre los 700 y 1,500 msnm, con pendientes generalmente suaves (3%). Constituye una zona de transición, la cual se caracteriza por presentar mesetas planas y onduladas, disectadas por barrancas profundas. Incluye algunos conos volcánicos y pequeñas terrazas para la parte más baja de la zona. Dentro de ésta se encuentran las áreas de mayor capacidad agrícola. Las partes medias se constituyen por flujos piroclásticos brechoides y coladas andesíticas muy alteradas, recubiertos por cineritas riolíticas y cenizas volcánicas recientes. Hidrografía. La franja oriental del Volcán Cofre de Perote constituye la reserva de agua más importante para una gran parte de la región centro del Estado, ya que alimenta los Ríos Bobo, Actopan y Los Pescados. Los ríos más importantes de la zona son Calpixcan, Hueyapan, Matlacobatl y La Funda, siendo tributarios todos ellos del Río Los Pescados. El 25 Carlos Javier Ramos Pérez. Río Matlacobatl es de los más grandes en cuanto a su longitud en el municipio y es el que da origen a las cascadas La Monja y Texolo. Tipo de Suelo Entre 1,400 y 1,100 m de altitud, los suelos que se desarrollan van desde andosoles diferenciados y húmicos (profundos, muy porosos, limosos), hacia suelos ferralíticos (profundos, arcillosos, poco porosos) con varios integrados, tales como andosoles empardecidos y ferralíticos ándicos; se encuentran también ferralíticos desaturados a seudogley y litosoles. En las barrancas profundas, los suelos han sido poco erosionados y cuentan con afloramientos rocosos. Clima García en 1987 nos describe el tipo de clima registrado, de acuerdo a los descritos y simbolizados con la modificación del Sistema Climático de Köppen, los cuales son representados por las letras Cfb; donde la primera letra (C) se refiere al tipo de clima, siendo para esta zona templado con temperaturas medias mensuales del mes más frío menor a 18 °C y mayor a -3 °C; la segunda letra (f), se refiere al régimen de lluvias, el cual se caracteriza por un régimen constante durante todo el año por lo que no se puede hablar de un periodo seco; la tercera letra (b), explica el comportamiento de las temperaturas, siendo clasificada como templado, con veranos suaves y temperaturas medias mensuales del mes más cálido menores a los 22 °C, superando los 10 °C al menos 4 meses al año. Gómez en 1991, en el Atlas climático del municipio de Xico, Veracruz, México, menciona que el tipo de clima presente en la zona es templado, con temperatura media anual de 19° C; con precipitación total anual de 1,200 a 1,500 mm; la temperatura del mes más frío varía entre 3° y 18° C, teniendo similitud en lo descrito por García en 1987 en base a la modificación del Sistema Climático de Köppen. 26 Carlos Javier Ramos Pérez. En la figura 1 se muestra la localización geográfica de la zona de estudio obtenida de la cartografía de la Comisión Nacional de Aguas Naturales Protegidas. Figura 1. Ubicación geográfica de la zona de estudio. Tomado de la cartografía de la comisión nacional de áreas naturales protegidas. Escala 1:67’000. 27 Carlos Javier Ramos Pérez. 5.2 Sitio Ramsar. Texolo y su entorno debido a su gran importancia ecológica se declara sitio Ramsar y el 11 de mayo de 2005 es llenada la ficha y considerada como un humedal continental. Cuenta con una altitud máxima de 1’164 y una mínima de 1’093 msnm, además de contar con un área de 500 hectáreas. Este sitio Ramsar se encuentra formado por los Ríos Matlacobatl y Texolo, siendo el primero el que da origen a las cascadas La Monja y Texolo, la primera con una caída de ocho metros aproximadamente, mientras que la segunda cuenta con una caída de 20 metros. El cauce de ambos ríos es variable, siendo en promedio de tres a cuatro metros de ancho aproximadamente; el lecho es rocoso formado principalmente por rocas basálticas de gran tamaño. Las paredes de las cañadas por donde fluyen estos ríos llegan a tener hasta 200 metros de altura. La zona juega un papel importante en la recarga de acuíferos, ya que estos dos ríos al igual que otros de menor tamaño, son tributarios del Río Los Pescados. Las cañadas por donde corren estos ríos funcionan como zonas de refugio para diversas especies de fauna, especialmente de aves. La cascada de Texolo y su entorno contiene ecosistemas representativos del bosque mesófilo de montaña el cual mantiene una gran biodiversidad y es sumamente importante por los servicios ambientales que proporciona a los asentamientos humanos, tales como captación de agua y captura de carbono, debido a lo relativamente bien conservado de las áreas boscosas circundantes. 5.3 Valores Socioeconómicos. Existe una derrama económica para el lugar, debido a los visitantes tanto Nacionales como Internacionales, manteniéndose desde restaurantes hasta pequeños locales donde se vende artesanía elaborada por habitantes del lugar. La tierra se utiliza para actividades agropecuarias como cultivo de café de sombra, maíz y plátano así como también el desarrollo de la ganadería intensiva y extensiva contribuyendo a la economía del lugar. 28 Carlos Javier Ramos Pérez. 6. Material y Métodos. 6.1 Trabajo de campo. Se realizó un recorrido prospectivo con la finalidad de conocer el área de estudio y así determinar los sitios de muestreo, tomando en cuenta la accesibilidad al sitio y ubicadas en diferentes áreas con características particulares tales como entradas y salidas del cuerpo de agua. Se eligieron 5 estaciones de las cuales se realizarán 8 muestreos, uno por mes (Octubre, Noviembre y Diciembre de 2008 y Enero, Mayo. Junio, Julio y Septiembre de 2009) durante el periodo otoño 2008-verano 2009. En la figura 2 se muestran los sitios de muestreo de acuerdo a la accesibilidad y cercanía de la población. Se colectaron muestras de agua en frascos estériles de 250 ml de capacidad, sumergiendo el frasco por lo menos 50 cm. de profundidad, en el caso de las estaciones 2 y 4 por su difícil acceso se colecto agua en una cubeta y de ahí se procedió a tomar la muestra con la finalidad de obtener una muestra más representativa, las cuales fueron colectadas entre el rango de las 10:00 y 12:00 horas aproximadamente; teniendo un total de 40 muestras para todo el periodo. Todas las muestras fueron debidamente etiquetadas con plumón a prueba de agua las cuales llevaron la fecha, el lugar de colección, número de muestra, pH, temperatura y gasto de oxigeno (O2), una vez etiquetadas se trasladaron en hieleras hacia el laboratorio donde se efectuaron los análisis correspondientes el mismo día de la colecta. (Fig. 3) La tabla número 5 muestra la localización geográfica de las estaciones de muestreo y su altura en las aguas del río Matlacobatl. Estación. 1 2 3 4 5 Tabla 5. Localización geográfica de las estaciones. Latitud Norte. Longitud Oeste. 19°24’8.46” 96°59’30.67” 19°24’5.48” 96°59’41.17” 19°24’4.35” 96°59’46.66” 19°24’1.59” 96°59’51.52” 19°24’0.53” 96°59’53.93” 29 Altura (msnm) 1123 1155 1164 1177 1184 Carlos Javier Ramos Pérez. Figura 2. Localización geográfica de los sitios de muestreo en el RíoMatlacobatl, Xico, Veracruz, México. Tomado de Google earth (2010). 30 Carlos Javier Ramos Pérez. Figura 3. Diagrama de actividades. 31 Carlos Javier Ramos Pérez. La estación 1 se ubicó en las cercanías de la planta hidroeléctrica “Texolo”, después de la unión de los cauces de los Ríos Matlacobatl y Texolo. La estación 2 se ubicó debajo del puente antes de la caída de la cascada de “Texolo”. La estación 3 se ubicó río arriba en donde se encontró la unión de un arrollo con el cauce del río. La estación 4 se ubicó a unos metros después de la caída de la cascada de “La Monja”. La estación 5 se ubicó río arriba de la cascada de “La Monja”. (Fig. 4) Figura 4. Ubicación de las estaciones. 32 Carlos Javier Ramos Pérez. 6.2 Procedimiento. Para la determinación de la contaminación bacteriológica del agua se realizó la técnica de tubos múltiples de fermentación, descrita en la NMX-AA-42-1987. “Calidad del agua determinación del número más probable (NMP) de coliformes totales, coliformes fecales y Escherichia coli presuntiva” la cual nos permitirá obtener la densidad probable de bacterias (Anexo 1). Además se realizó la lectura de parámetros físicos y químicos in situ tales como la temperatura, pH y oxígeno disuelto. Para la toma de la temperatura se utilizó un termómetro de mercurio que va de los -20°C a los 110°C, el pH se tomó con papel tornasol y para la determinación de los valores de la concentración de oxígeno se realizó mediante el método de Winkler modificado. 33 Carlos Javier Ramos Pérez. 7. Resultados. Los resultados de las muestras fueron analizados individualmente por cada sitio de muestreo para determinar el grado de contaminación y posteriormente hacer la comparación entre cada sitio por medio de gráficas y así poder observar que pasa con la calidad bacteriológica del agua en el transcurso del cauce del Río Matlacobatl. Con los resultados obtenidos es posible determinar la viabilidad de seguir realizando las actividades que hasta el momento se están llevando a cabo tales como: ecoturísticas, riego, uso doméstico y consumo humano. Se obtuvieron tubos negativos y tubos positivos, los cuales sirvieron para el cálculo en la tabla estadística del número más probable de organismos coliformes en 100 mL. de muestra de acuerdo a la norma. Los resultados se agruparon de acuerdo a fecha de muestreo, estación y tipo de prueba, pudiendo así obtener las densidades mostradas en la tabla 6, las cuales corresponden a la prueba presuntiva de coliformes totales y para su comparación y estudio se graficaron. 34 Carlos Javier Ramos Pérez. Tabla 6. Resultado de la prueba presuntiva de coliformes totales en las aguas del río Matlacobatl, Xico, Veracruz, México. Fecha de muestreo. Número de estación. Total 2008. 1 2 3 4 5 NMP/100mL. 13 de Octubre. 1100 93 210 93 43♠ 1539 10 de Noviembre. 3♠ 240 460 4 21 728♠ 01 de Diciembre. 93 210 460 93 43♠ 899 26 de Enero. 2400* 2400* 2400* 2400* 2400* 12000♦ 30 de Mayo. 2400* 2400* 2400* 2400* 2400* 12000♦ 26 de Junio. 2400* 93 460 23♠ 93 3069 10 de Julio. 2400* 460 93♠ 1100 460 4513 7 de Septiembre. 150♠ 240 150♠ 240 240 1020 Promedio 1368.25♦ 767 829.125 794.125 712.5♠ 2009. NMP/100mL. (*) Representa la mayor concentración de coliformes totales en la prueba presuntiva, por estación de muestreo. (♦) Indica la mayor concentración total por fecha de muestreo y por promedio de estación de coliformes totales en la prueba presuntiva. (♠) Representa la menor concentración de coliformes totales en la prueba presuntiva, por estación de muestreo, por total y por promedio. De la tabla número 6 podemos ver que los muestreos realizados el 26 de Enero y 30 de Mayo del 2009 fueron los que presentaron el máximo valor aceptable 1 de presencia de coliformes totales, para la prueba presuntiva, ocupando así por medio de la clave proporcionada por la norma NMX-AA-42-1987 “Calidad del agua determinación del número más probable (NMP) de coliformes totales, coliformes fecales (termotolerantes) y Escherichia coli presuntiva”, el más alto valor probable estadístico con 12000 NMP/100 mL., para cada fecha respectivamente. Siendo así el muestreo realizado el 10 de Noviembre de 2008 el que presentó menor densidad estadística con 728 NMP/100 mL. 35 Carlos Javier Ramos Pérez. En la gráfica 1 se presenta el resultado de la comparación por estación y por muestreo de la prueba confirmativa de acuerdo a la tabla número 5, en el cual podemos observar que la estación 1 muestra la mayor presencia de coliformes totales en la prueba presuntiva, con un promedio de 1368.25 NMP/100mL. , para toda la prueba, mientras que la estación 5 muestra la menor presencia con un promedio de 712.5 NMP/100mL. para toda la prueba. Gráfica 1. Concentración de coliformes totales para la prueba presuntiva entre estaciones y por fecha de muestreo. 36 Carlos Javier Ramos Pérez. En la gráfica 2 se presenta el resultado de la prueba presuntiva realizado el 13 de Octubre de 2008, en el cual podemos observar que la estación 1 muestra la mayor presencia de coliformes totales con 1100 NMP/100mL., mientras que la estación 5 muestra la menor presencia con 43 NMP/100mL. Gráfica 2. Concentración de coliformes totales para la Prueba Presuntiva entre estaciones. Realizado el 13 de Octubre de 2008. En la gráfica 3 se presenta el resultado de la prueba presuntiva realizado el 10 de Noviembre de 2008, en el cual podemos observar que la estación 3 muestra la mayor presencia de coliformes totales con 460 NMP/100mL., mientras que la estación 1 muestra la menor presencia con un valor inferior a 3 NMP/100mL. Gráfica 3. Concentración de coliformes totales para la prueba presuntiva entre estaciones. Realizado el 10 de Noviembre de 2008. 37 Carlos Javier Ramos Pérez. En la gráfica 4 se presenta el resultado de la prueba presuntiva realizado el 01 de Diciembre de 2008, en el cual podemos observar que la estación 3 muestra la mayor presencia de coliformes totales con 460 NMP/100mL., mientras que la estación 5 muestra la menor presencia con un valor de 43 NMP/100mL. Gráfica 4. Concentración de coliformes totales para la prueba presuntiva entre estaciones. Realizado el 01 de Diciembre de 2008. En la gráfica 5 se presenta el resultado de la prueba presuntiva realizado el 26 de Enero de 2009, en el cual podemos observar que todas las estaciones presentan un alto nivel de presencia siendo así 2400 NMP/100mL. Gráfica 5. Concentración de coliformes totales para la prueba presuntiva entre estaciones. Realizado el 26 de Enero de 2009. 38 Carlos Javier Ramos Pérez. En la gráfica 6 se presenta el resultado de la prueba presuntiva realizado el 30 de Mayo de 2009, en el cual podemos observar que todas las estaciones presentan un alto nivel de presencia siendo así 2400 NMP/100mL. Gráfica 6. Concentración de coliformes totales para la prueba presuntiva entre estaciones. Realizado el 30 de Mayo de 2009. En la gráfica 7 se presenta el resultado de la prueba presuntiva realizado el 26 de Junio de 2009, en el cual podemos observar que la estación 1 muestra la mayor presencia de coliformes totales con 2400 NMP/100mL., mientras que la estación 4 muestra la menor presencia con un valor de 23 NMP/100mL. Gráfica 7. Concentración de coliformes totales para la prueba presuntiva entre estaciones. Realizado el 26 de Junio de 2009. 39 Carlos Javier Ramos Pérez. En la gráfica 8 se presenta el resultado de la prueba presuntiva realizado el 10 de Julio de 2009, en el cual podemos observar que la estación 1 muestra la mayor presencia de coliformes totales con 2400 NMP/100mL., mientras que la estación 3 muestra la menor presencia con un valor de 93 NMP/100mL. Gráfica 8. Concentración de coliformes totales para la prueba presuntiva entre estaciones. Realizado el 10 de Julio de 2009. En la gráfica 9 se presenta el resultado de la prueba presuntiva realizado el 07 de Septiembre de 2009, en el cual podemos observar que las estaciones 2, 4 y 5 muestran la mayor presencia de coliformes totales con 240 NMP/100mL., mientras que la estaciones 1 y 3 muestran la menor presencia con un valor de 150 NMP/100mL. Gráfica 9. Concentración de coliformes totales para la prueba presuntiva entre estaciones. Realizado el 07 de Septiembre de 2009. 40 Carlos Javier Ramos Pérez. En la tabla 7 podemos observar los resultados obtenidos de acuerdo a la prueba confirmativa de coliformes totales: Tabla 7. Resultado de la prueba confirmativa de coliformes totales en las aguas del río Texolo, Xico, Veracruz, México. Fecha de muestreo. Número de estación. Total 2008. 1 2 3 4 5 NMP/100mL. 13 de Octubre. 2400* 2400* 27♠ 240 240 5307 10 de Noviembre. 3♠ 240 2400* 23 240 2906 01 de Diciembre. 460 460 240♠ 2400* 1100 4660 26 de Enero. 2400* 2400* 2400* 2400* 2400* 12000♦ 30 de Mayo. 2400* 2400* 2400* 1100♠ 2400* 10700 26 de Junio. 210♠ 1100 1100 240 2400* 5050 10 de Julio. 2400* 2400* 240♠ 2400* 2400* 9840 7 de Septiembre. 4 3♠ 23 240 93 363♠ Promedio 1284.6 1425.3♦ 1103.7♠ 1130.3 1409.1 2009. NMP/100mL. (*) Representa la mayor concentración de coliformes totales en la prueba confirmativa, por estación de muestreo. (♦) Indica la mayor concentración total por fecha de muestreo y por promedio de estación de coliformes totales en la prueba confirmativa. (♠) Representa la menor concentración de coliformes totales en la prueba confirmativa, por estación de muestreo, por total y por promedio. De la tabla 7 podemos observar que los muestreos realizados el 26 de Enero y el 30 de Mayo de 2009, presentan la mayor concentración de coliformes totales para la prueba confirmativa, siendo así 12000 NMP/100mL., y 10700 NMP/100mL., respectivamente, con respecto a la norma. 41 Carlos Javier Ramos Pérez. En la gráfica 10 se presentan los resultados de la comparación por estación y por muestreo de la prueba confirmativa de coliformes totales de acuerdo a la tabla 6, en el cual podemos observar que las estación 2 muestra la mayor presencia de coliformes totales con un promedio de 1425.37 NMP/100mL., para toda la prueba, mientras que la estación 3 muestra la menor presencia con un promedio de 1103.75 NMP/100mL., para toda la prueba. Gráfica 10. Concentración de coliformes totales para la prueba confirmativa por estación y por fecha de muestreo. 42 Carlos Javier Ramos Pérez. En la gráfica 11 se presenta el resultado de la prueba confirmativa realizado el 13 de Octubre de 2008, en el cual podemos observar que las estaciones 1 y 2 muestran la mayor presencia de coliformes totales con 2400 NMP/100mL., mientras que la estación 3 muestra la menor presencia con un valor de 27 NMP/100mL. Gráfica 11. Concentración de coliformes totales para la prueba confirmativa entre estaciones. Realizado el 13 de Octubre de 2008. En la gráfica 12 se presenta el resultado de la prueba confirmativa realizado el 10 de Noviembre de 2008, en el cual podemos observar que la estación 3 muestra la mayor presencia de coliformes totales con 2400 NMP/100mL., mientras que la estación 1 muestra la menor presencia con un valor menor a 3 NMP/100mL. Gráfica 12. Concentración de coliformes totales para la prueba confirmativa entre estaciones. Realizado el 10 de Noviembre de 2008. 43 Carlos Javier Ramos Pérez. En la gráfica 13 se presenta el resultado de la prueba confirmativa realizado el 01 de Diciembre de 2008, en el cual podemos observar que la estación 4 muestra la mayor presencia de coliformes totales con 2400 NMP/100mL., mientras que la estación 3 muestra la menor presencia con un valor de 240 NMP/100mL. Gráfica 13. Concentración de coliformes totales para la prueba confirmativa entre estaciones. Realizado el 01 de Noviembre de 2008. En la gráfica 14 se presenta el resultado de la prueba confirmativa realizado el 26 de Enero de 2009, en el cual podemos observar que todas las estaciones muestran presencia de coliformes totales con 2400 NMP/100mL. Gráfica 14. Concentración de coliformes totales para la prueba confirmativa entre estaciones. Realizado el 26 de Enero de 2009. 44 Carlos Javier Ramos Pérez. En la gráfica 15 se presenta el resultado de la prueba confirmativa realizado el 30 de Mayo de 2009, en el cual podemos observar que las estaciones 1,2,3 y 5 muestra la mayor presencia de coliformes totales con 2400 NMP/100mL., mientras que la estación 5 muestra la menor presencia con un valor de 1100 NMP/100mL. Gráfica 15. Concentración de coliformes totales para la prueba confirmativa entre estaciones. Realizado el 30 de Mayo de 2009. En la gráfica 16 se presenta el resultado de la prueba confirmativa realizado el 26 de Junio de 2009, en el cual podemos observar que la estación 5 muestra la mayor presencia de coliformes totales con 2400 NMP/100mL., mientras que la estación 1 muestra la menor presencia con un valor de 210 NMP/100mL. Gráfica 16. Concentración de coliformes totales para la prueba confirmativa entre estaciones. Realizado el 26 de junio de 2009. 45 Carlos Javier Ramos Pérez. En la gráfica 17 se presenta el resultado de la prueba confirmativa realizado el 10 de Julio de 2009, en el cual podemos observar que las estaciones 1,2,4 y 5 muestran la mayor presencia de coliformes totales con 2400 NMP/100mL., mientras que la estación 3 muestra la menor presencia con un valor de 93 NMP/100mL. Gráfica 17. Concentración de coliformes totales para la prueba confirmativa entre estaciones. Realizado el 10 de Julio de 2009. En la gráfica 18 se presenta el resultado de la prueba confirmativa realizado el 07 de Septiembre de 2009, en el cual podemos observar que la estación 4 muestra la mayor presencia de coliformes totales con 240 NMP/100mL., mientras que la estación 2 muestra la menor presencia con un valor menor a 3 NMP/100mL. Gráfica 18. Concentración de coliformes totales para la prueba confirmativa entre estaciones. Realizado el 7 de Septiembre de 2009. 46 Carlos Javier Ramos Pérez. En la tabla número 8 podemos observar los resultados obtenidos para la prueba E.C. (coliformes fecales): Tabla 8. Resultado de la prueba de coliformes fecales en la prueba E.C. en las aguas del rio Texolo, Xico, Veracruz, México. Fecha de Número de estación. Total muestreo. 2008. NMP/100mL. 1 2 3 4 5 10 de Julio. 2400* 23 23 2400* 75 4921♦ 7 de Septiembre. 3♠ 14* 4 3♠ 9 33♠ Promedio 1201.5♦ 18.5 13.5♠ 1201.5♦ 42 13 de Octubre. 10 de Noviembre. 01 de Diciembre. 2009. 26 de Enero. 30 de Mayo. 26 de Junio. NMP/100mL. (*) Representa la mayor concentración de coliformes fecales en la prueba E.C., por estación de muestreo. (♦) Indica la mayor concentración total por fecha de muestreo y por promedio de estación de coliformes fecales en la prueba E.C. (♠) Representa la menor concentración de coliformes fecales en la prueba E.C., por estación de muestreo, por total y por promedio. De la tabla 8 podemos observar que el muestreo que presenta mayor concentración de coliformes fecales es el de el 10 de Julio de 2009 con una concentración total de 4921 NMP/100mL., mientras que el muestreo del 7 de Septiembre de 2009 presenta una concentración total de 33 NMP/100mL. 47 Carlos Javier Ramos Pérez. En la gráfica 19 se presenta el resultado de la comparación por estación y por muestreo de la prueba E.C., en el cual podemos observar que las estación 1 y 4 muestran la mayor presencia de coliformes fecales con un promedio de 1201.5 NMP/100mL., para toda la prueba, mientras que la estación 3 muestra la menor presencia con un promedio de 13.5 NMP/100mL., para toda la prueba. Gráfica 19. Concentración de coliformes fecales para la prueba E.C. por estación y por fecha de muestreo. 48 Carlos Javier Ramos Pérez. En la gráfica 20 se presenta el resultado de la prueba E.C. realizado el 10 de Julio de 2009, en el cual podemos observar que las estaciones 1 y 4 muestran la mayor presencia de coliformes fecales con 2400 NMP/100mL., mientras que las estaciones 2 y 3 muestran la menor presencia con un valor de 23 NMP/100mL. Gráfica 20. Concentración de coliformes fecales entre estaciones. Realizado el 10 de Julio de 2009. En la gráfica 21 se presenta el resultado de la prueba E.C. realizado el 07 de Septiembre de 2009, en el cual podemos observar que la estación 2 muestra la mayor presencia de coliformes fecales con 14 NMP/100mL., mientras que las estaciones 1 y 4 muestran la menor presencia con un valor menor a 3 NMP/100mL. Gráfica 21. Concentración de coliformes fecales entre estaciones. Realizado el 7 de septiembre. 49 Carlos Javier Ramos Pérez. Parámetros in situ. Los parámetros in situ que se tomaron fue la lectura de Temperatura, pH, Oxigeno disuelto. Pineda, Rendón y Ricaño en el 2004, tomando como referencia a HANNA (2001), Stevens Institute of Technology (2004) describen la importancia y relevancia de estos parámetros: Oxigeno Disuelto. El oxígeno disuelto es necesario para la supervivencia y el desarrollo de los peces, vegetación, bacterias y organismos acuáticos. La ausencia de oxígeno permite la descomposición anaeróbica de la materia orgánica y la producción de material tóxico en el agua. Se ha determinado que se consideren potencialmente peligrosos niveles de oxigeno inferiores a 5 mg L-1. Habitualmente el agua se considera de buena calidad cuando contiene más de 75 % de oxígeno disuelto. El oxígeno sin embargo juega un papel negativo en las aplicaciones industriales ya que favorece la corrosión. Temperatura. La temperatura es una propiedad termodinámica que influye en gran proporción en las propiedades físicas, químicas y biológicas del agua, por lo que es importante hacer una medición precisa de ella. Es necesario controlarla en casi todas las aplicaciones industriales, desde plantas calefactores de agua, donde no debe estar por debajo de los niveles mínimos, hasta plantas de purificación de agua donde no debe exceder nunca de 25 °C. Potencial de Hidrogeno (pH). El valor del pH indica la naturaleza ácida, neutra o alcalina de un líquido. El rango de los valores de pH van desde 0 (muy ácido) hasta 14 (muy alcalino) siendo el pH 7 neutro. Las aplicaciones de purificación del agua, requieren valores de pH entre 6.5 y 8.5, el pH puede incluso jugar un papel importante en cómo se comportan las sustancias. 50 Carlos Javier Ramos Pérez. En la tabla número 9 podemos observar los valores que se obtuvieron para el oxigeno disuelto, expresado en mg L-1: Tabla 9. Concentración de oxigeno disuelto en el agua del río Matlacobatl, Xico, Veracruz. Oxigeno Disuelto (mg L-1). Fecha de No. de estación. muestreo. 13 de Octubre de 1 2 3 4 5 5.8 5.6♦ 6 5.6 6.4* 5♦ 5.2* 5♦ 5♦ 5♦ 5.4 5.6* 5.2♦ 5.6* 5.6* 6.4* 6.2♦ 6.4* 6.4* 6.4* 5.6♦ 5.8 6.2* 5.8 5.8 5.8* 5.2♦ 5.2♦ 5.6 5.2♦ 6.2* 5.6 5.6 5.2♦ 5.4 10.2* 10♦ 10.2* 10♦ 10♦ 6.3* 6.15♦ 6.225 6.15♦ 6.225 2008. 10 de Noviembre de 2008. 01 de Diciembre de 2008. 26 de Enero de 2009. 30 de Mayo de 2009. 26 de Junio de 2009. 10 de Julio de 2009. 07 de Septiembre de 2009. Promedio. (*) Representa la mayor concentración de oxigeno disuelto por fecha de muestreo y por promedio. (♦) Indica la menor concentración de oxigeno disuelto por fecha de muestreo y por promedio. Por consiguiente de acuerdo a la importancia y relevancia del oxigeno disuelto, los resultados obtenidos son de buena calidad, debido a que presentan un nivel superior a 5 mg L-1, siendo así el muestreo del 07 de Septiembre de 2009 el que contiene el más alto nivel con una concentración de 10.2 mg L-1 en promedio para la fecha. 51 Carlos Javier Ramos Pérez. En la tabla número 10 se muestran los resultados obtenidos para la lectura de temperaturas en el momento de captura de la muestra: Tabla 10. Temperaturas por estación y por fecha de muestreo. Temperaturas (°C). Fecha de No. de estación. muestreo. 13 de Octubre de 1 2 3 4 5 19* 19* 19* 19* 19* 17 17 17 17 17 16♦ 16♦ 16♦ 16♦ 16♦ 17 17 17 17 17 19* 19* 19* 19* 19* 19* 19* 19* 19* 19* 19* 19* 19* 19* 19* 19* 19* 19* 19* 19* 18.125 18.125 18.125 18.125 18.125 2008. 10 de Noviembre de 2008. 01 de Diciembre de 2008. 26 de Enero de 2009. 30 de Mayo de 2009. 26 de Junio de 2009. 10 de Julio de 2009. 07 de Septiembre de 2009. Promedio. (*) Representa la mayor temperatura por fecha de muestreo. (♦) Indica la menor temperatura por fecha de muestreo. La más alta temperatura registrada fue de 19 °C para 5 fechas de muestreo (13 de Octubre de 2008, 30 de Mayo de 2009, 26 de Junio de 2009, 10 de Julio de 2009 y 07 de Septiembre de 2009), mientras que la menor fue de 16 °C en el muestreo del 01 de Diciembre de 2008. Teniendo como promedio para todas las fechas 18.125 °C. 52 Carlos Javier Ramos Pérez. En la tabla 11 podemos observar el potencial de hidrógeno para todas las fechas de muestreo en el momento de captura de la muestra: Tabla 11. Potencial de Hidrógeno por estación y por fecha de muestreo. Potencial de Hidrógeno (pH). Fecha de No. de estación. muestreo. 1 13 de Octubre de 2 3 4 5 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6 2008. 10 de Noviembre de 2008. 01 de Diciembre de 2008. 26 de Enero de 2009. 30 de Mayo de 2009. 26 de Junio de 2009. 10 de Julio de 2009. 07 de Septiembre de 2009. Promedio. El pH siempre se mantuvo constante para todos los muestreos, tanto en fecha como en estación, siendo así menor al punto neutro por una unidad y menor al pH necesario para agua purificada por media unidad (.5). 53 Carlos Javier Ramos Pérez. 8. Discusión. Desde hace mucho tiempo se reconoce que los organismos del grupo coliforme son un buen indicador microbiano de la calidad del agua, debido principalmente a que su detección y recuento en el agua son fáciles. Se encontraron diferencias entre las muestras trabajadas, tanto por estación del año como entre estaciones de trabajo, debido a las diferentes condiciones ambientales que se registraron; así como también por fecha de muestreo. Se considera que las diferentes condiciones físicas de los lugares tales como la salida o entrada de cauces, escurrimientos por precipitación, temporadas de secas, pH, temperatura y descargas de aguas negras, como lo mencionan Alvízar y Gutiérrez (1995), Pineda, Rendón y Ricaño en el 2004 y Cruz Lorenzo (2009), quienes afirman que la concentración de coliformes totales varía entre los muestreos realizados en las diferentes temporadas del año (secas y lluvia), haciendo notar que la presencia de coliformes fecales, esta en función de los aportes de sedimentos provenientes de terrenos aledaños al cuerpo de agua lo que hace que la densidad del numero de microorganismos aumente o disminuya. Las condiciones climatológicas en las que fueron colectadas las muestras fueron variadas, siendo los muestreos de Octubre de 2008, Enero, Mayo, Junio y Julio 2009 los que presentaron condiciones soleadas, sin precipitación en días anteriores ni en el momento del muestreo, siendo los muestreos de Junio y Julio los más secos. Esto posiblemente pudo ocasionar una dilución y elevar la concentración de bacterias coliformes totales y fecales en el agua del Río Matlacobatl, pues los datos obtenidos así nos lo indican. Esto coincide con el trabajo de Pineda, Rendón y Ricaño en el 2004 y Cruz Lorenzo (2009). Los muestreos realizados en Noviembre y Diciembre de 2008 y Septiembre de 2009, fueron realizados en días nublados, con lluvias en días anteriores, lo que contribuyo al arrastre de sedimentos hacia la corriente principal, siendo Diciembre de 2008 el que presento mayor nivel del cauce y presencia de llovizna en el momento del muestreo. A pesar de que se pudo presentar una mayor concentración de coliformes totales y fecales por 54 Carlos Javier Ramos Pérez. el arrastre de contaminación bacteriológica ocasionado por el escurrimiento de la precipitación, estos meses tuvieron menor densidad bacteriológica. Fenómeno que coincide con el trabajo de Cruz Lorenzo, 2009, realizado en cuerpos de agua de la Unidad de Servicios Bibliotecarios y de Información. Valencia, M. 1994, afirma que los resultados de presencia de coliformes fecales en muestras de agua, dependen mucho de las condiciones hidrometeorológicas y de las actividades humanas, pero también concluyó que hay ciertas bacterias coliformes autóctonas que cumplen una función específica dentro de los cuerpos de agua y por ello los resultados siempre variarían en caso de repetirse las pruebas; mismo que sucedió en este estudio al presentar diferencias entre estaciones como por fechas de muestreo. El agua del Río Matlacobatl presenta contaminación biológica por bacterias coliformes totales y fecales, originada por descargas de aguas residuales así como también por el escurrimiento y arrastre de la materia desde el suelo originado por las lluvias. El consumo directo del agua y de los organismos que habitan en ella ocasiona repercusiones a la salud humana como lo es el desarrollo de enfermedades gastrointestinales como lo mencionan Luna Huerta (1994) y Robles del Ángel (1994), que las enfermedades gastrointestinales son resultado de consumir agua y de organismos que habitan en ella con cierto grado de contaminación. Fenómeno que todavía no ocurre en el agua del Río Matlacobatl pues el hallazgo de la presencia de bacterias coliformes fecales no es alarmante. Siendo así la estación 1 para la prueba presuntiva de coliformes totales la que presenta un mayor valor estadístico probable de contaminación para todos los muestreos; donde las fechas de Mayo, Junio y Julio 2009 presentaron mayor concentración de coliformes totales, por lo tanto esta estación presenta la menor calidad bacteriológica. Para los meses de Mayo y Junio de 2009 son los que presentan mayor presencia de coliformes totales para la prueba presuntiva con un valor estadístico probable de 2400 NMP/100mL. 55 Carlos Javier Ramos Pérez. A pesar de su cercanía con descargas de aguas residuales provenientes de actividades en casa, la estación 5 para toda la muestra presuntiva presenta la menor presencia de coliformes totales, para toda la prueba presuntiva, con un valor probable de 712 NMP/100mL. La estación 3 para los meses de Noviembre y Diciembre de 2008 y Junio de 2009, fue la que presentó mayor constancia en concentración de bacterias coliformes totales en la prueba presuntiva, mientras que la estación que presentó mayor variación en cuanto a fechas de muestreo fue la 4. En lo que se refiere a la prueba confirmativa de coliformes totales y la prueba E.C. los valores estadísticos probables fueron más altos de lo que se esperaba, de acuerdo a la comparación de contaminación bacteriológica de coliformes totales en la prueba presuntiva, debido a un error metodológico en el desarrollo de la técnica. Obteniendo así la presencia de coliformes totales en la prueba confirmativa para todas las fechas y estaciones, siendo la estación 2 la que presenta la mayor concentración en base a promedio teniendo así un promedio de 1425 NMP/100mL., y teniendo una presencia igual o mayor a 2400 NMP/100mL., para los meses de Octubre de 2008, Enero, Mayo y Julio de 2009. La menor presencia de bacterias coliformes totales en la prueba confirmativa fue para la estación 3, con un promedio de 1103 NMP/100mL., para todas las fechas; los meses de Octubre, Diciembre de 2008, Julio y Septiembre de 2009, son los que presentaron la menor presencia de coliformes totales para esta estación. En lo que respecta a la detección de coliformes fecales (E. coli), se tiene de referencia dos fechas de muestreo que corresponden a Julio y Septiembre de 2009, teniendo así para Julio una alta presencia para las estaciones 1 y 4 con una concentración igual o mayor de 2400 NMP/100mL., y para Septiembre las estaciones 1 y 4 fueron las que obtuvieron un valor menor a 3 NMP/100mL., pareciendo contradictorio a los resultados del mes de Julio, pero cabe señalar que el mes de Septiembre presento lluvia días antes y una llovizna en el momento del muestreo, pudiendo haber una dilución por lluvia y así variar los resultados. 56 Carlos Javier Ramos Pérez. 9. Conclusión. Se detectó la presencia de organismos coliformes totales y fecales. La estación 1 presento el mayor valor de bacterias de coliformes totales y fecales para todas las fechas de muestreo. La época del año que presento mayor densidad de organismos coliformes fue la temporada de secas, como lo muestran los valores obtenidos en los meses de Mayo y Junio. El error metodológico en el desarrollo de la técnica influencio en los resultados, pues se obtuvieron valores bacteriológicos más altos de lo esperado, sin embargo muestran la presencia de organismos coliformes totales y fecales. El agua necesita ser tratada previamente para uso agrícola en frutas que se consuman sin quitar la cascara y para hortalizas de tallo corto. Para uso recreacional en contacto directo necesita ser tratada para reducir la presencia de bacterias coliformes totales y fecales. Para uso recreacional en contacto secundario la calidad se encuentra aceptable. El agua para uso potable requiere de tratamientos para el consumo humano y uso doméstico. 57 Carlos Javier Ramos Pérez. 10. Recomendaciones. Debido a la descarga de aguas residuales que presenta el río “Matlacobatl” se recomienda desviar las redes de alcantarillado hacia una planta de tratamientos de aguas residuales para evitar descargas que atenten contra la flora y fauna, así como también hacia la salud humana. Desarrollar actividades relacionadas con la educación ambiental, para que las comunidades sean conscientes y revertir el comportamiento en relación con el medio ambiente. Fomentar el ecoturismo de bajo impacto. Monitorear la calidad del agua periódicamente para conocer el estado en que se encuentra y poder así tomar otras medidas correctivas para este sitio, debido a las diferentes actividades que se realizan. 58 Carlos Javier Ramos Pérez. 11 Bibliografía: Alarcón Gutiérrez B., 2005, Diagnóstico de la calidad de agua de un manantial ubicado en Potrerillo Veracruz, para evaluar su posible aprovechamiento acuícola, Tesis Licenciatura, Xalapa, Facultad de Ingeniería Química, Universidad Veracruzana, 185 pp. Alvízar Nuñes A. y Gutiérrez Domínguez A. A., 1995, Aislamiento y cuantificación de coliformes totales y fecales en el agua potable del municipio de Fortín, Veracruz por el método de filtro de membrana, período 1993-1994, Tesis Licenciatura, Córdoba, Facultad de Biología, Universidad Veracruzana, 63 pp Comisión Nacional del Agua (CNA), 2002, Compendio básico del agua en México (en línea) http://chapala.110mb.com/documentación/linea/federal/cna/cna.htm, consultado el 26 de Agosto de 2010. 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Tesis Licenciatura, Córdoba, Universidad Veracruzana, 63 pp. 60 Carlos Javier Ramos Pérez. NOM-001-SEMARNAT-1996. Establece los límites máximos permisibles de contaminantes en las descargas de aguas residuales en aguas y bienes nacionales. NOM-002-SEMARNAT-1996. Establece los límites máximos permisibles de contaminantes en las descargas de aguas residuales a los sistemas de alcantarillado urbano o municipal. NOM-003-SEMARNAT-1997. Establece los límites máximos permisibles de contaminantes para las aguas tratadas que se rehúsen en servicios al público. NOM-127-SSA-1-1994. Salud ambiental, agua para uso y consumo humano-límites permisibles de calidad y tratamientos a que debe someterse el agua para su potabilización. NMX-AA-42-1987. Calidad del agua determinación del número más probable (NMP) de coliformes totales, coliformes fecales (termotolerantes) y Escherichia coli presuntiva. Organización Mundial de la Salud (OMS), 1998, Calidad del agua para uso recreacional. 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En la prueba presuntiva se realiza la inoculación de la muestra en el medio de cultivo Caldo lactosado, el cual se preparó con 13g. de medio de cultivo por litro de agua (13gr./L). Se realizó el llenado de tubos con rosca de 10 mL., de capacidad con Caldo lactosado y se introdujo una campana Durham de forma invertida, cuidando que no quedara en el interior de la campana burbuja alguna de aire; se procedió a la esterilización con autoclave a 15 libras de presión durante 15 minutos, después de este tiempo se dejaron enfriar y se procedió a sembrar las muestras en diluciones de 1 mL., 0.1 mL. y 0.01 mL. con micropipeta como se muestra en la figura 4. Por cada dilución se utilizaron 3 tubos con medio de cultivo Caldo lactosado. Se utilizó un mechero Bunsen para desinfectar el área. Figura 4. Preparación de diluciones. 63 Carlos Javier Ramos Pérez. Los tubos inoculados se incubaron a 35 +/- 0.5°C, en estufa, después de un período de incubación de 24 horas se examinan los tubos y se considera como resultado positivos aquellos que muestren turbidez debida al crecimiento bacteriano y formación de gas en las campanas Durham. Si a las 24 horas de incubación no hay presencia de turbidez y formación de gas en las campanas Durham, se reincuban y se examinan nuevamente a las 48 horas para detectar reacciones positivas. (Fig. 5) Figura 5. Producción de gas. 64 Carlos Javier Ramos Pérez. Prueba confirmativa. En la prueba confirmativa se realiza la resiembra de los tubos que hayan mostrado presencia de gas, pero ahora será con el Caldo Bilis Verde Brillante al 2%, realizando el llenado de tubos con 10 mL de capacidad, esterilizando a 15 libras de presión durante 15 minutos. Para realizar la inoculación se utilizó un asa bacteriológica, un mechero Bunsen; donde el asa se pasa por la llama del mechero hasta dejarla al rojo vivo y así evitar contaminación de las muestras, se dejó el mismo periodo de incubación (24-48hrs.) a la misma temperatura (35°C) y la producción de gas en las campanas Durham nos confirmará la presencia de Coliformes. Ambas pruebas se esquematizan en la figura 6. Coliformes fecales. Para la realización de la prueba de coliformes fecales se utilizó el medio de cultivo E.C. realizando el llenado de tubos con 10 mL de capacidad, esterilizando a 15 libras de presión durante 15 minutos. Para realizar la inoculación se siguió el mismo procedimiento que en la prueba confirmativa. Se dejó el mismo periodo de incubación (24-48hrs.) a una temperatura de 45 °C y la producción de gas en las campanas Durham nos confirmará la presencia de Escherichia coli. 65 Carlos Javier Ramos Pérez. Figura 6. Esquematización para la determinación de coliformes totales. 66