Reglamentación de los productos de la biotecnología y forma

Rev. sci. tech. Off. int. Epiz., 1988, 7 (2), 239-254.
Reglamentación de los productos
de la biotecnología y forma de aplicarla
en el campo de la medicina veterinaria *
J.W. GLOSSER **
Resumen: El autor presenta la legislación aplicada en los Estados Unidos y el
papel del Servicio de Inspección de Sanidad Animal y Vegetal (APHIS) con
respecto a la autorización de empleo de vacunas y productos de diagnóstico
fabricados con métodos biotecnológicos. El uso de reactivos de diagnóstico para
las pruebas rápidas es prometedor, pero es necesario tomar precauciones para
evitar su empleo inadecuado.
PALABRAS CLAVE: Autorización de empleo - Biotecnología - Estados
Unidos - Legislación - Productos biológicos - Pruebas rápidas - Vacunas.
Al seguir la trayectoria de la dinámica del mercado de biotecnología en salud
animal y el efecto que podrían tener hoy en día los asuntos relativos a reglamentación,
desearía indicarles cómo aborda el Departamento de Agricultura de los Estados Unidos
(USDA) algunos de los problemas que en materia de reglamentación ha creado la
«nueva biotecnología». H a r é un breve análisis de nuestra política y autoridad en
materia de reglamentación de los productos biológicos p a r a empleo en medicina
veterinaria elaborados por medio de la biotecnología; les expondré algunos de los
problemas derivados de los mitos persistentes que rodean a la biotecnología, discutiré
las repercusiones comerciales y agrícolas de ésta y me referiré en detalle a nuestros
procedimientos y experiencia en cuanto a autorización del empleo de productos
biológicos y, por último, examinaré detenidamente las prometedoras perspectivas
observadas en una clase de estos p r o d u c t o s .
En el Departamento de Agricultura nuestra meta es proteger la agricultura nacional
por medio de reglamentos basados en sólidos principios científicos que sean claros,
precisos y pertinentes en el cambiante mundo tecnológico de hoy. En palabras sencillas,
la función del U S D A es fomentar un clima de reglamentación en el que se promuevan
la innovación, el desarrollo y la comercialización de nuevos productos agrícolas útiles
derivados de la biotecnología y, al mismo tiempo, se ponga en práctica, en forma
responsable, u n a política reglamentaria que limite los riesgos reales o potenciales.
No obstante, como autoridades reglamentarias y científicas debemos reconocer no
* Comentarios presentados en el XXI11 Congreso Mundial de Medicina Veterinaria, 21 de agosto
de 1987, Montreal, Canadá.
** Administrador Asociado, Servicio de Inspección de Sanidad Animal y Vegetal (APHIS),
Departamento de Agricultura de los Estados Unidos (USDA), Washington, DC, EUA.
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solo que estos productos deben ser inocuos y eficaces, sino que el público debe tener
confianza en su inocuidad.
El 31 de diciembre de 1984, el Departamento publicó u n a declaración indicando
su política en el campo de la reglamentación de la biotecnología y sus productos (8)
en la que se indicó lo siguiente:
1) los productos biotecnológicos no serán fundamentalmente distintos de los
elaborados por métodos convencionales;
2) el actual marco normativo es adecuado p a r a reglamentar la biotecnología, y
3) los organismos o productos obtenidos p o r técnicas de ingeniería genética no
se someterán a reglamentación sencillamente en razón del proceso por el cual se
obtuvieron.
La Ley sobre Virus, Sueros y Toxinas (VST), promulgada en 1913, le da al U S D A
la autoridad necesaria para reglamentar todos los productos biológicos p a r a empleo
en medicina veterinaria que se importan a los Estados Unidos o se envían o entregan
como parte del comercio interestatal (7). En recientes enmiendas hechas a la Ley sobre
la Seguridad Alimentaria promulgada en 1985, se amplió esa autoridad para cubrir
los productos enviados de u n lugar a otro dentro de un mismo Estado o exportados
y se proporcionaron al U S D A otros mecanismos p a r a hacer cumplir lo dispuesto,
como la autoridad de retener y decomisar productos (1).
Los Servicios Veterinarios (VS) del Servicio de Inspección de Sanidad Animal y
Vegetal (APHIS) autorizan el empleo de productos biológicos veterinarios en los
Estados Unidos cuando se cumple satisfactoriamente con todos los requisitos, incluso
examen y aceptación de etiquetas. La importación de productos a los Estados Unidos
debe realizarse con arreglo a una licencia expedida por el Secretario de Agricultura.
El reglamento concerniente a los productos biológicos veterinarios se encuentra en
el Título 9 del Código del Reglamento Federal (CFR), Partes 101 a 117.
Los productos biológicos veterinarios producidos por métodos en los que se emplea
A D N recombinantes, se evalúan caso por caso, observando las mismas normas
estrictas para la determinación de inocuidad, pureza, potencia y eficacia que se exigen
para autorizar el empleo de las sustancias biológicas producidas por métodos
convencionales. Más adelante me referiré a un esquema de clasificación de productos
derivados de sustancias recombinantes basado en las características biológicas y la
inocuidad. Este esquema se publicó también como parte de la Declaración Final de
Política del USDA sobre Biotecnología
el 26 de junio de 1986 (9).
A P H I S también expide, por intermedio de los Servicios Veterinarios, una licencia
para la importación en los Estados Unidos de materiales biológicos como cultivos
celulares, anticuerpos monoclonales, microorganismos, vectores o materiales afines.
Esta facultad le es conferida por la Ley VST y la p r o m u l g a d a el 3 de febrero de 1903.
El U S D A publica reglamentos y t o m a las medidas necesarias p a r a prevenir la
introducción o propagación de cualquier enfermedad contagiosa, infecciosa o
transmisible de los animales y / o de las aves vivas a los Estados Unidos de otros países
o de un Estado a otro. La importación y el comercio interestatal de microorganismos
y vectores están reglamentados en el Título 9 del CFR, Parte 122.
241
MITOS Y REALIDADES
DE LA REGLAMENTACIÓN DE LA BIOTECNOLOGÍA
Al hacer uso de la autoridad que se nos h a concedido, hemos descubierto que
una de las principales dificultades afrontadas con el advenimiento de la nueva
biotecnología tiene que ver tanto con la percepción del público como con la realidad.
El potencial de la nueva tecnología puede lograrse solo si corregimos los conceptos
erróneos y mitigamos o eliminamos los efectos perjudiciales de los mitos introducidos
y nutridos con el uso desacertado del término general «biotecnología».
Existe el deber de separar los mitos de la realidad p a r a poder administrar
efectivamente u n a política reglamentaria acertada. Sólo mediante tal separación
podremos explicar al público, en la debida forma, la razón fundamental de nuestra
política de reglamentación. E n mi opinión, hemos sido demasiado pasivos, o quizá
hayamos estado m u y preocupados por reaccionar a los riesgos observados, en lugar
de dedicar nuestras energías a celebrar u n a discusión justa y objetiva de lo que implica
en realidad la nueva tecnología y de lo que se puede esperar de los diversos procesos
biotecnológicos.
Si las oportunidades de u n a nueva técnica son tan grandes, ¿ p o r qué debe temer
el público? H a y dos razones:
1) t o d o lo desconocido causa temor a priori, y
2) la biotecnología, en sus conceptos y formas de ejecución, es sumamente
compleja y, por t a n t o , difícil de captar y de entender p a r a los profanos.
En el p a s a d o , muchas autoridades estaban convencidas de que los temores y
ansiedades relacionados con la biotecnología presentada al público se debían a falta
de información y que los científicos n o podían explicar los antecedentes, el estado,
ni las limitaciones de sus nuevos descubrimientos al ciudadano c o m ú n en palabras
claras y comprensibles.
Los científicos siempre h a n demostrado sus resultados con un proceso metódico,
sistemático y detallado para explicar los canales empleados y los anteproyectos a otros
científicos, haciendo caso omiso muchas veces del h o m b r e común.
En consecuencia, pareció razonable hacer todo lo posible por corregir esta situación
mediante la celebración de c a m p a ñ a s de información intensivas que permitieran
explicar al h o m b r e común, en palabras sencillas y atractivas, los principios y logros
de la biotecnología. Pareció completamente razonable que partiendo de esa
información, pudiéramos ver con claridad las singulares oportunidades que ofrece
la nueva biotecnología y que los posibles peligros son relativamente insignificantes
en comparación con los beneficios.
En los últimos años, se ha realizado un gran número de campañas de información
y programas de televisión y se han producido cintas y libros sobre biotecnología de
la mejor calidad. Más y más personas están informadas, pero aún no han desaparecido
los temores y ansiedades. Al contrario, h a n a u m e n t a d o . ¿ P o r q u é ?
Los sociólogos se dieron cuenta hace m u c h o tiempo de que el exceso de
información produce estrés cognoscitivo. La cantidad de información necesaria para
captar la importancia de la biotecnología requiere un esfuerzo intelectual que muchas
personas n o están dispuestas a hacer. Además, en muchos casos, los beneficios de
242
la biotecnología se han promovido más de la cuenta o se h a n exagerado. P o r t a n t o ,
a fin de evitar el estrés del exceso de información, es más fácil y sencillo seguir a
quienes dicen simplemente que debe rechazarse t o d o lo nuevo que es incomprensible
y sobre lo cual ni siquiera los expertos pueden decir con exactitud y en pocas palabras
a donde nos llevará la nueva tecnología. «El m u n d o ya está en mala situación, no
empeoremos las cosas.»
C o m o resultado de esto, el público se atiene m u c h o a mitos p a r a formarse u n a
opinión sobre los asuntos complejos.
Paradójicamente, las autoridades pertinentes deben reconocer que a medida que
aumenta la complejidad del asunto que se debe reglamentar, el público tendrá más
sospecha y desconfianza respecto al proceso reglamentario que al asunto en sí.
H o y en día pocos asuntos son tan mal comprendidos como la biotecnología.
Algunas personas defienden la biotecnología agrícola como la «solución al h a m b r e
mundial», otros alertan que no se debe dejar que se convierta en un ejemplo de «ciencia
homicida» y otros consideran el proceso como «sencillamente otra pieza de la caja
de herramientas de los genetistas».
El primero de los mitos que rodean a la biotecnología es que el proceso es algo
distinto u homogéneo y que uno de sus corolarios sería que existe u n a sola «industria
de biotecnología». Esta clase de razonamiento es sencilla y fácil pero imprecisa. El
término se h a convertido ahora en u n a agobiadora carga para los medios académicos,
el sector privado y el gobierno. L a biotecnología no es u n a sola entidad, sino más
bien una tecnología capacitante con amplias aplicaciones en diversos aspectos de la
industria y del comercio. De la forma en que empleamos el término hoy en día, la
biotecnología incluye muchas aplicaciones diferentes. Es el desarrollo de hibridomas
para la producción de anticuerpos monoclonales empleados en diagnóstico o
terapéutica. Es el uso de tecnología de A D N (ácido desoxirribonucleico) recombinante
(ADNr) para la producción de una vacuna antihepatitis B en levadura, u n a vacuna
antirrábica en virus de vaccinia e interleucina II en Escherichia coli. Es también la
introducción de mayores concentraciones de proteína de reserva en la soya o de un
producto de mayor valor nutritivo. A d e m á s , el empleo de la tecnología de A D N
recombinante p a r a la preparación de nuevos plaguicidas microbianos o de microbios
p a r a la lixiviación de mineral será importante p a r a los productos del futuro.
El G r u p o de Trabajo en Política Interna sobre Biotecnología, que es la
continuación del grupo establecido bajo el antiguo Consejo del Gabinete sobre
Recursos Naturales y el Medio Ambiente, a d o p t ó una amplia pero útil definición
de biotecnología: «la aplicación de los sistemas y organismos biológicos a los procesos
técnicos e industriales». Esta definición revela que la biotecnología abarca los diversos
procesos explicados antes. En consecuencia,
los procesos y productos
de la
biotecnología son tan diversos y tienen tan poco en común que es sumamente
difícil
hacer generalizaciones sobre ellos. Quizá u n a caracterización más válida y descriptiva
de la biotecnología sea: un grupo de diversos procesos biológicos que llevan a buenas
prácticas de fabricación, inocuas p a r a el medio ambiente.
U n segundo mito es que la biotecnología es nueva. Sin embargo, n o nos cayó
de repente a las manos hace uno o dos decenios. Esta tecnología ha estado en nuestro
medio desde antes del año 6000 a . J . C . cuando los sumerios y los babilonios explotaron
las propiedades que tenía la levadura p a r a la fabricación de alcohol y cerveza.
243
Sin embargo, a medida que se ha acelerado el éxito de esta tecnología h a crecido
el interés de las autoridades gubernamentales y de la comunidad financiera. El
resultado de tan particular atención h a sido la gradual ampliación de la definición
de «biotecnología» p a r a incluir varias técnicas que se han empleado por varios
decenios, sin que se les diera la especial consideración que reciben hoy en día. Los
productos derivados de la luz química o ultravioleta, la mutagénesis, las plantas
híbridas y los microorganismos producidos p o r medio de intercambio genético se
consideran a menudo hoy en día como objetos que deberían someterse a nuevos grados
de reglamentación relacionada con la «biotecnología».
Este cambio se deriva de varios factores, pero creo que el que más causa
preocupación innecesaria y creciente del público es el uso de un solo término impreciso
para describir estas actividades. Debemos encontrar un medio de describir los
productos que se someterán a reglamentación a la luz de las propiedades específicas
que llevaron a estudiarlos, sin aplicar simplemente el término «biotecnología». P o r
ende, la biotecnología — incluida su subdivisión de ingeniería genética — no es ni
monolito ni una nueva estructura y las técnicas más nuevas son obviamente extensiones
de las antiguas. No obstante, persiste un concepto erróneo sobre la nueva biotecnología
y sigue motivando intentos de tratarla como si fuera un caso especial. En conferencias
como esta, todos tenemos la oportunidad de ayudar a acabar con esos mitos y de
considerar a la nueva biotecnología dentro de la perspectiva que le corresponde.
Otro término muy susceptible de mala interpretación al discutir la «entrega
deliberada» de microorganismos producidos con técnicas de ingeniería genética es
un examen del producto caso por caso. El uso del término en el Departamento coincide
con el empleado por la Organización de Cooperación y Desarrollo Económicos
(OCDE) en su reciente publicación titulada Recombinant DNA Safety
Considerations.
En ese d o c u m e n t o , se emplearon cuidadosamente los términos «caso por caso» con
el significado específico de «un análisis particular de una propuesta según criterios
de evaluación pertinentes p a r a la propuesta en particular; no se pretende implicar
que cada caso exigirá análisis por u n a autoridad nacional o de otra índole ya que
pueden excluirse varias clases de propuestas». La determinación de «caso por caso»
hecha por la O C D E subraya el importante principio de que las categorías de productos
que implican u n riesgo insignificante o trivial se pueden definir como aquellas que
no exigen análisis especial por parte del gobierno (6).
EFECTOS COMERCIALES Y AGRÍCOLAS
La biotecnología tendrá su m a y o r efecto inmediato en los productos del sector
comercial como los farmacéuticos y agrícolas en general. Puesto que afecta
directamente asuntos básicos para el h o m b r e como la producción de alimentos, la
atención de salud y la disponibilidad de energía, sus repercusiones se sienten en realidad
a escala mundial.
Actualmente están en marcha interesantes investigaciones sobre aplicaciones
agrícolas p a r a intensificar la productividad animal y ayudar a alimentar a la población
del m u n d o . O t r a gran oportunidad es el control de las plagas y los agentes patógenos
que afectan a los animales y a las plantas. P r o n t o veremos más y mejores productos
para diagnosticar, prevenir y tratar las enfermedades de los animales, mejorar sus
razas o aun crear otras.
244
H o y en día, hay unas 450 sociedades que participan en la elaboración mundial
de productos p a r a el cuidado de los animales p o r medio de nuevas tecnologías: el
8 % de éstas son sociedades farmacéuticas o químicas de importancia, el 7 % n o se
clasifica como industrias veterinarias, pero corresponden a la definición de industria
de salud animal y el 8 5 % son pequeñas empresas de biotecnología o institutos de
investigación independientes.
U n a de las mayores preocupaciones de las sociedades dedicadas a la biotecnología
es el grado de protección que pueden lograr para los productos y procesos que generan.
En los Estados Unidos, esta protección se realiza de dos formas principales: patentes
y secreto comercial. A P H I S presta m u c h a atención al asunto de la «confidencialidad
de la información comercial» al tramitar sus solicitudes de autorización del empleo
de productos.
En el mercado de productos veterinarios, causa impresión la amplia gama de
artículos que se producirán con procesos de biotecnología. La gama se extiende desde
productos terapéuticos y biológicos o animales transgénicos o férmicos hasta productos
p a r a diagnóstico.
U n grupo de moléculas similares a las h o r m o n a s , que h a n recibido gran atención
por parte de la industria biotecnológica, son los interferones. C o m o glucoproteínas,
tienen el efecto de regular la respuesta inmunitaria del cuerpo. Los interferones han
demostrado ser prometedores para prevenir las virosis y se ha comprobado que pueden
ser eficaces p a r a controlar ciertas clases de infecciones y de cáncer. Sin embargo,
no fue posible confirmar clínicamente estas afirmaciones sino hasta hace poco, cuando
se pudo obtener una gran cantidad de interferones por medio de técnicas de ingeniería
genética.
NUEVAS VACUNAS
U n a de las repercusiones más importantes de la biotecnología está en la nueva
generación de vacunas que ha comenzado a surgir. Son muy diferentes de las vacunas
convencionales preparadas con agentes completos. A u n q u e las vacunas de agentes
vivos atenuados o muertos son muy eficaces contra muchas enfermedades, producen
algunas veces reacciones secundarias alérgicas y casos agudos o lentamente progresivos
de la enfermedad. A d e m á s , no siempre sirven p a r a inmunizar contra todas las cepas
de un agente patógeno y a m e n u d o requieren refrigeración, lo que dificulta su uso
en algunas partes del m u n d o .
Las nuevas vacunas no solo resuelven muchos de estos problemas, sino que ofrecen
la posibilidad de vacunar a las personas y a los animales contra una mayor variedad
de enfermedades. Estas vacunas son inocuas, estables y eficaces y se pueden producir
en cantidades abundantes a bajo costo. U n grupo llamado «vacunas de subunidades»
está formado por proteínas de superficie, o segmentos de éstas, de agentes infecciosos
producidos artificialmente mediante clonación molecular o síntesis orgánica.
Se están preparando vacunas derivadas de sustancias recombinantes p a r a conferir
protección contra enfermedades como estomatitis vesicular, lengua azul, anaplasmosis,
parvovirus porcino y canino, papiloma bovino, peste aviar, influenza, rabia, leucemia
felina, peste bovina y fiebre del Valle del Rift, p a r a n o m b r a r unas pocas.
245
Por supuesto, es más difícil producir vacunas contra agentes patógenos bacterianos
y parasitarios. Sin embargo, se han aplicado con éxito las técnicas de ingeniería
genética para la preparación de vacunas de proteína contra enfermedades bacterianas.
P o r ejemplo, existe una vacuna clonada p a r a proteger a los animales contra diarrea
causada por E. coli en por lo menos u n país europeo.
H o y en día, está en constante expansión el empleo de nuevos procedimientos
tecnológicos para la producción de sustancias biológicas veterinarias.
Las vacunas preparadas con métodos de ingeniería genética tienen su m a y o r
potencial de aceptación en el mercado de productos veterinarios. Eso se debe al costo
exorbitante de las enfermedades p a r a la industria pecuaria, que asciende a unos
$80 000 millones anuales en el m u n d o .
El mercado mundial p a r a la vacuna contra la fiebre aftosa, por ejemplo, es mayor
que el de cualquier otra vacuna, incluidos los productos p a r a uso h u m a n o . Las
pérdidas de productividad directamente atribuibles a la enfermedad se estiman en
un 2 5 % y el costo en $50 000 millones anuales. H o y en día, se gastan más de $1 000
millones anuales en vacunas convencionales contra la fiebre aftosa.
Puesto que no son sensibles a la temperatura, las vacunas de subunidades son
más apropiadas para empleo en los países donde pueden acumularse y aun manipularse
de manera descuidada sin que se pierda la eficacia.
En el caso de la determinación del sexo en embriones, los anticuerpos policlonales
están dando buenos resultados en los exámenes de confirmación del e m b a r a z o . Las
pruebas realizadas con anticuerpos monoclonales con este último fin y los exámenes
de fecundidad tendrán mayor especificidad y, sin duda, serán más atractivos en t o d o
el m u n d o .
Las h o r m o n a s del crecimiento producidas p o r microorganismos obtenidos con
técnicas de ingeniería genética también tienen un gran potencial en la agricultura.
La producción de leche de las vacas inyectadas con hormonas del crecimiento aumentó
hasta en un 4 0 % . Se estima que el mercado de esas h o r m o n a s en los Estados Unidos
es de unos 100 000 kg a u n costo de $40 por g r a m o .
En varios estudios recientes se ha pronosticado que, en los próximos dos decenios,
las ventas de productos de biotecnología para empleo en la atención de salud h u m a n a
y la agricultura alcanzarán un total de $10 000 a $15 000 millones en los Estados
Unidos y quizá hasta $30 000 millones en el m u n d o .
EL PROCESO D E AUTORIZACIÓN DEL EMPLEO
DE PRODUCTOS BIOLÓGICOS
A P H I S evalúa los riesgos por medio de un proceso de revisión de solicitudes.
Desearía examinar algunos puntos y señalar los mecanismos de salvaguarda que se
han incorporado al sistema.
Cada producto elaborado en u n establecimiento autorizado necesita la licencia
comúnmente expedida para productos biológicos veterinarios de los Estados Unidos.
Todos los productos se evalúan por separado p a r a averiguar qué será necesario para
determinar su pureza, inocuidad, potencia y eficacia.
246
Antes de hablar de los procedimientos p a r a la autorización del empleo de
productos, analizaré nuestra política sobre la confidencialidad de la información
comercial. El 23 de septiembre de 1985 A P H I S publicó en el Federal Register su
política p a r a proteger cierta información comercial privilegiada o confidencial (2).
Esta política se aplica no solo a la información veterinaria patentada, sino también
a la información confidencial en cualquier p r o g r a m a de A P H I S . Nuestra política se
basa en la premisa de que los documentos que llenan los requisitos estipulados en
la Ley sobre Libertad de Información, por constituir información confidencial o
privilegiada que contiene secretos comerciales o información comercial financiera,
se protegerán contra su divulgación. Esa información está físicamente guardada y
el U S D A comunica a las empresas el recibo de cualquier solicitud de fuentes n o
pertenecientes al Gobierno Federal. Además, en virtud de la Ley sobre Secretos
Comerciales se prohibe la divulgación no autorizada de esa información por empleados
del U S D A .
Categorías de productos autorizados
P a r a fines de la autorización pertinente, los productos biológicos obtenidos con
técnicas de ingeniería genética pueden clasificarse en tres amplias categorías. Esta
división se basa en las características biológicas de los nuevos productos y en los
asuntos relativos a su inocuidad (Cuadro I).
CUADRO I
Categorías de sustancias
biológicas
obtenidas con procesos
biotecnológicos
Categoría
I.
II.
III.
Vacunas inactivadas derivadas de ADN recombinante, bacterinas; toxoides
bacterianos, subunidades víricas o subunidades bacterianas.
Microorganismos vivos modificados agregando o suprimiendo uno o más
genes.
Vectores vivos portadores de genes extraños derivados de sustancias
recombinantes que codifican los antígenos inmunizantes u otros estimulantes
del sistema inmunitario.
La primera categoría abarca vacunas inactivadas obtenidas de A D N r , bacterinas,
toxoides bacterianos, subunidades víricas y subunidades bacterianas. Estos productos
no presentan ningún riesgo para el medio ambiente ni causan preocupaciones nuevas
o particulares respecto a su inocuidad. También se incluyen en esta categoría los
productos preparados con anticuerpos monoclonales, ya sea que se usen para fines
profilácticos o terapéuticos o como componentes de kits de diagnóstico.
La segunda categoría comprende productos que contienen microorganismos vivos
que se han modificado al agregarles o suprimirles uno o más genes. Los genes
suprimidos pueden codificar la virulencia, la oncogenicidad, la actividad enzimática
u otras funciones bioquímicas. Los genes agregados pueden resultar en la expresión
de nuevos antígenos inmunizantes o la producción de nuevos subproductos bioquímicos como betagalactosidasa. Es importante que los genes agregados o suprimidos
247
no compremetan las características de inocuidad de los microorganismos. En la
mayoría de los casos se espera que mejoren y, por t a n t o , no causarían ninguna nueva
amenaza p a r a el h o m b r e , para otras especies animales ni p a r a el medio ambiente.
La tercera categoría incluye productos en los que se emplean vectores vivos p a r a
transportar los genes extraños obtenidos de material recombinante que codifican los
antígenos inmunizantes y / u otros estimulantes del sistema inmunitario. Los vectores
vivos pueden transportar varios genes extraños obtenidos de material recombinante,
ya que llevan grandes cantidades de nueva información genética. Son también
eficientes al infectar e inmunizar a las especies animales que sirven de objetivo. Así
por ejemplo, estas propiedades hacen de las sustancias recombinantes preparadas con
virus de vaccinia un material muy popular para programas de preparación de vacunas.
Además de vaccinia, otros vectores actualmente sometidos a evaluación por las
organizaciones autorizadas, solicitantes y otras entidades de investigación incluyen
el virus del papiloma bovino, los adenovirus, los virus herpes, los baculovirus y la
levadura.
Procedimientos para la autorización del empleo de productos
Los requisitos generales p a r a la autorización del empleo de productos se resumen
en el C u a d r o II. Los productos en los que se emplean modernos procedimientos
biotecnológicos, como A D N r , síntesis química o tecnología de hibridomas, se t r a t a n
en forma similar a los preparados con técnicas convencionales. Quizá se necesiten
valoraciones especiales p a r a determinar la potencia y la estabilidad y otras pruebas
suplementarias para garantizar la inocuidad, sobre todo cuando hay microorganismos
vivos (3).
Si se nos envía una solicitud p a r a determinada clase de producto sobre el que ya
existe t o d o u n conjunto de datos, por ejemplo sobre los anticuerpos monoclonales
o los hibridomas, el proceso de revisión será m u c h o más corto. Así, en el caso de
los anticuerpos monoclonales, se c o m p a r a r á la especificidad y potencia de estos
productos con las de otros anticuerpos policlonales similares, y esas características
deberán ser al menos iguales a las de estos.
P a r a ayudar a mantener la uniformidad de producción, se exige a las instituciones
autorizadas que preparen materiales p a t r ó n p a r a la producción de un lote de estos,
que se define como semilla patrón (o semilla base). Se seleccionan e identifican las
semillas p a t r ó n de microorganismos con un número específico de pases y las
instituciones autorizadas las guardan permanentemente. La semilla p a t r ó n y el
producto acabado se someten a examen p a r a garantizar su pureza, inocuidad,
identidad e inmunogenicidad.
La semilla p a t r ó n de productos obtenidos de A D N r consistirá en un plásmido
o un virus que lleva un gen insertado. El plásmido construido se introduce al sistema
apropiado de expresión eucariótico o procariótico seleccionado para la producción
de vacunas. También se puede trasladar el A D N genómico directamente a varias
células de mamíferos. De otro modo, en esos casos se considerará la célula transfectada
estable como semilla p a t r ó n (Cuadro III).
Las semillas patrón de A D N recombinante se caracterizarán por ofrecer un m a p a
de construcción del plásmido bacteriano que contiene el nuevo gen. Es necesario
disponer de información básica sobre los procedimientos seguidos con el A D N r p a r a
248
CUADRO
Requisitos
II
generales para la autorización
del empleo
de
productos
Preparación y certificación de existencias
de semilla patrón (bacterias o virus)
Fabricación del producto experimental
según especificicaciones mínimas establecidas
Eficacia del huésped (inmunización y confrontación)
Desarrollo de una prueba de potencia para entrega por series
Preparación de tres lotes para análisis de consistencia
Pruebas de inocuidad en el terreno
Cumplimiento satisfactorio de todas las pruebas exigidas
en las normas de producción
Presentación de muestras a los Laboratorios nacionales
de los Servicios Veterinarios para pruebas de confirmación
Autorización del uso de los productos
Aceptación de etiquetas
Entrega de lotes antes de la autorización
CUADRO
III
Política del USDA en materia de autorización del empleo de
Semilla patrón propuesta para los productos derivados de
productos
ADNr
Plásmido construido
+
Sistema de expresión
Eucariótico
Procariótico
célula transformada
E. coli
célula transfectada
B. subtilus
Semilla patrón
(x pasos)
Escalamiento
Producción y
recuperación
Producto acabado
(Semilla patrón x + y)
249
similar aislar, purificar e identificar material genético de u n a fuente y la modificación
empleada p a r a insertar este material en un nuevo huésped. Los datos obtenidos del
aislamiento de clones, la proliferación y la selección de células singulares por sus
características genéticas quedaría en poder de las instituciones solicitantes autorizadas.
El fabricante debe efectuar u n análisis de las secuencias de nucleótidos a fin de
caracterizar debidamente el A D N extraño empleado para codificar u n antígeno en
particular (Cuadro IV).
CUADRO
Caracterización
propuesta
IV
de la semilla patrón
de
ADNr
Plásmido construido
1. Secuencia de nucleótidos
2.
3.
4.
5.
Análisis en gel de poliacrilamida
Farmacorresistencia
Mapeo de la restricción enzimática
Descripción y localización de iniciadores y promotores
Los ingredientes de origen animal empleados para fines de producción deben
ajustarse a las n o r m a s aceptadas de pureza y calidad.
Las células primarias y las líneas celulares empleadas p a r a la producción de u n a
semilla p a t r ó n o u n a vacuna deben seguir el reglamento del U S D A . H a b r á que
demostrar que todos los substratos celulares están exentos de bacterias, hongos,
micoplasmas, virus y otros agentes extraños. H a y que caracterizar las líneas celulares
y determinar su cariotipo para fines de estabilidad genética. H a b r á que realizar pruebas
de tumorogenicidad y oncogenicidad si hay indicios de que la célula puede provocar
formación de tumores malignos.
Hay que apoyar la inmunogenicidad de las vacunas con estudios de inmunización
y confrontación de animales huéspedes que sean estadísticamente válidos.
El fabricante debe seleccionar normas de producción que incluyan procedimientos
para garantizar la consistencia y recuperación del material antigénico específico. Los
procedimientos de recuperación deben incluir el retiro de excesivas concentraciones
de antibióticos y de productos de fermentación indeseables, como el exceso de
endotoxinas bacterianas. En el C u a d r o V se presentan algunos procedimientos de
prueba durante el proceso, que p o d r í a n emplearse con fines de vigilancia.
Se necesitarán pruebas de entrega por series en el ensayo del p r o d u c t o acabado
a base de A D N r para determinar su pureza, inocuidad y potencia. Además de estas
pruebas, se exigirá caracterización del producto para demostrar la expresión genética.
El C u a d r o VI contiene varios ejemplos.
Hasta la fecha, A P H I S h a autorizado el empleo de 19 productos fabricados con
procesos biotecnológicos. Dieciocho pertenecen a la categoría I y se clasifican en el
Cuadro VII. El primero, u n a bacterina, recibió la autorización correspondiente el
5 de octubre de 1983.
250
CUADRO V
Procedimientos
de pruebas
de vigilancia
durante
el
proceso
1
índice de crecimiento
2.
3.
4.
5.
6.
7.
Mapeo en gel (sulfato sódico dodecílico) (electroforesis)
Resistencia a los antibióticos
Marcadores metabólicos
Peso molecular
Actividad
Proteína expresada en porcentaje
CUADRO
Evaluación
VI
del producto
acabado
1. Pureza — procedimientos normales aplicables
2. Potencia - correlación de la prueba de eficacia con el
procedimiento in vivo o in vitro
3. Eficacia — datos normales sobre la inmunización y
confrontación del animal huésped
4. Inocuidad - programas ampliados previstos de pruebas en el
laboratorio y en el terreno
5. Expresión genética - análisis parcial de secuencias
cromatografía en fase líquida
de alto rendimiento
mapeo de péptidos
análisis en gel de poliacrilamida
determinación del peso molecular
CUADRO
Productos
autorizados
elaborados
VII
con procesos
Clase de producto
biotecnológicos
Número
Categoría I
Bacterina
Terapéutico
Kits de diagnóstico
5
2
11
Categoría II
Vacuna
1
251
En enero de 1986, concedimos la autorización al primer producto de la categoría II,
una vacuna de virus vivo modificado p r e p a r a d a con técnicas de ingeniería genética.
Se han producido y distribuido más de 750 000 dosis de esta vacuna de gen suprimido
contra la enfermedad de Aujeszky. P o c o después de haberse autorizado el p r o d u c t o ,
los adversarios de la ingeniería genética d e m a n d a r o n al D e p a r t a m e n t o , declarando
que no se había determinado la inocuidad de la vacuna. Sin embargo, n o h a habido
ningún problema de inocuidad relativo a los productos obtenidos con técnicas de
ingeniería genética, cuyo empleo h a sido autorizado por A P H I S .
La vacuna de gen suprimido contra la enfermedad de Aujeszky es un buen ejemplo
de la necesidad de que A P H I S exija que los solicitantes de autorización obtengan
los datos necesarios sobre inocuidad. En la actualidad, hay u n litigio entre la sociedad
de investigaciones sobre ingeniería genética a la que se concedió la patente p a r a el
proceso y la empresa encargada de la producción y comercialización de la vacuna.
Un asunto en tela de juicio es la credibilidad de los datos sobre inocuidad presentados
al fabricante de la vacuna por el dueño de la patente. Cabe recalcar que se exigió
que el fabricante presentara los datos sobre inocuidad que necesitaba A P H I S antes
de autorizar el empleo del p r o d u c t o y que el laboratorio de A P H I S en A m e s , Iowa,
los verificó.
A comienzos del presente a ñ o , A P H I S autorizó un limitado n ú m e r o de ensayos
prácticos con el fin de someter a p r u e b a une segunda vacuna contra la enfermedad
de Aujeszky producida con técnicas de ingeniería genética. Los ensayos con la vacuna
se realizarán con cerdos en seis de los principales Estados dedicados a la porcicultura.
LA CREACIÓN D E SONDAS GENÉTICAS
COMO INSTRUMENTOS DE DIAGNÓSTICO
La hibridación del A D N es otra técnica extraída de los laboratorios de investigación
para convertirla en parte de una sencilla prueba in vitro. Las dos líneas de material
genético constituido por A D N se hibridarán mutuamente aun en presencia de un gran
número de moléculas distintas de A D N no complementarias. Esta técnica forma la
base de un medio muy sensible p a r a detectar e identificar varios agentes infecciosos.
Las sondas existentes de u n a amplia variedad de agentes y secuencias de genes
se crearon en un principio para ayudar a investigar la biología molecular básica de
varios microorganismos. Sin embargo, en años recientes, la técnica ha demostrado
ser muy prometedora p a r a producir reactivos p a r a diagnóstico. H a y un conjunto
secundario de aplicaciones de diagnóstico p a r a las que las sondas de A D N son
singularmente apropiadas.
Su aplicación más importante y en la que existe poca competencia por parte de
otras pruebas bioquímicas e i n m u n o q u í m i c a s está en las investigaciones
epidemiológicas en las que se recoge material de los estudios realizados en el terreno
y se somete inmediatamente a prueba o se guarda p a r a examen en fecha posterior.
Un ejemplo reciente es la búsqueda de infecciones por Salmonella
newport
farmacorresistente en animales que han recibido compuestos antimicrobianos (4). Otra
aplicación a la que se a d a p t a n singularmente las sondas de A D N es la detección de
microorganismos, como micoplasmas y leptospiras, cuya proliferación es deficiente
o nula en los medios empleados en los laboratorios y cuya variación antigénica es
252
Todavía no se h a logrado alcanzar plenamente el extraordinario potencial que
prometen tener las sondas de A D N para el diagnóstico de las enfermedades infecciosas.
La principal razón de esta demora es la rápida introducción de inmunovaloraciones
rápidas y sensibles, basadas en su mayoría en anticuerpos monoclonales. Otro factor
limitante de su plena aplicación como auxiliares de diagnóstico es el establecimiento
de procedimientos apropiados de preparación de muestras y de u n sistema de
identificación del A D N n o radiactivo de gran actividad específica.
C o n la aparición de nuevos procesos de alta tecnología como los hibridomas que
producen anticuerpos monoclonales y la hibridación del A D N , ya se dispone de nuevos
reactivos p a r a el diagnóstico de una gran variedad de enfermedades de los animales,
incluidas las de las aves. Es preciso evaluar con cuidado los nuevos kits de diagnóstico
y compararlos con los métodos normales para asegurarse de que aquellos demuestren
una sensibilidad, especificidad y reproducibilidad iguales a las de los métodos normales
o mejores que las de estos.
Las pruebas de diagnóstico empleadas en medicina veterinaria y derivadas de
procesos biotecnológicos varían en cuanto a su complejidad y comprenden desde
complicados exámenes en los que se emplean equipos automáticos hasta sencillas
pruebas efectuadas con «palillos de inmersión» para empleo sobre el terreno. Sin
embargo, la tendencia es emplear más y más «kits» sencillos en los que se unan la
especificidad y la sensibilidad con la rapidez y la economía. A u n q u e los principios
y la tecnología que forman parte de la introducción de estas pruebas pueden ser de
gran complejidad, son abordables para el usuario y pueden ser empleadas por personas
sin formación ni equipo especializados.
Cualquiera que sea el procedimiento de diagnóstico escogido por los médicos
veterinarios o seleccionado y reconocido como el de «exámenes oficiales» por las
autoridades de salud animal, solo se lograrán resultados significativos cuando se
cumpla con ciertos criterios:
- la prueba seleccionada es apropiada para las circunstancias particulares;
-
se garantiza la calidad de la muestra empleada para la prueba;
- la muestra se recoge en un m o m e n t o óptimo y se t r a n s p o r t a y / o guarda en
condiciones apropiadas;
-
se conocen a fondo los factores que pueden interferir con los resultados;
-
se conoce la sensibilidad, la especificidad y el principio de la prueba, y
- la persona encargada de realizar la prueba está suficientemente capacitada para
ello y, cuando sea necesario, para interpretar los resultados.
Las pruebas con palillos de inmersión (dipstick tests) efectuadas p a r a empleo en
el terreno o la finca, por el veterinario o el agricultor, son muy atractivas. Sin embargo,
cabe recordar que sus limitaciones y restricciones son mayores que las de las destinadas
a empleo en el laboratorio o en el dispensario. Esas pruebas no solo deben ser sencillas
de realizar, sino que deben producir resultados duplicables en la amplia variedad de
condiciones ambientales que se encontrará en la práctica. P o r ejemplo, deben dar
resultados significativos en una amplia gama de temperaturas ambientales. El p u n t o
final debe ser claro y fácil de leer.
U n a dificultad particular del empleo de kits de diagnóstico tiene que ver con el
control de su uso en el terreno. La mayoría de esas pruebas se realizan con facilidad
253
y pueden ser empleadas por veterinarios en ejercicio, agricultores y ganaderos. Excepto
en el caso de enfermedades p a r a las que existen programas oficiales de control ya
establecidos o próximos a establecerse, es de esperar que el control de la distribución
y el empleo de esos kits sea poco o n u l o .
Puede suponerse que la comercialización de pruebas in situ se destinará
directamente al agricultor o al ganadero o se canalizará por medio del veterinario.
Preocupa el hecho de que u n p r o f a n o pueda obtener resultados erróneos si n o se
explican los antecedentes y principios específicos en los que se basa u n a prueba. Si
bien el uso de los kits puede ser sencillo, no sucede lo mismo con la interpretación
de los resultados. H a y peligro de que los kits que no cumplan con los requisitos y
las expectativas del usuario final lleven al mercado a inclinarse en contra de la
fabricación de los productos de mejor calidad que pueden ofrecerse en un futuro
próximo. P o r tanto, es m u y importante describir claramente el uso de la nueva prueba
de diagnóstico in vitro y las limitaciones de los kits. Un kit destinado a determinada
aplicación, muy probablemente será inadecuado para otra, a menos que se modifique.
A medida que continúa la tendencia de intensificación de las actividades agrícolas
y pecuarias, a u m e n t a r á el t a m a ñ o de los rebaños. Al suceder eso, también se
incrementará la densidad de población; por t a n t o , el diagnóstico rápido y preciso
de las enfermedades adquiere mayor importancia. Se necesitarán nuevos reactivos
de diagnóstico p a r a detectar enfermedades de la reproducción, enfermedades
orientadas hacia la producción y enfermedades que limiten la exportación de nuestro
ganado. Es paradójico que nosotros, como autoridades encargadas de la
reglamentación de los reactivos para diagnóstico, seamos también los patrocinadores
de las nuevas pruebas que han incrementado la sensibilidad y la especificidad que,
a su vez, llevarán a mayor precisión en nuestras decisiones reglamentarias.
A medida que se dispone de nuevas y mejores pruebas de diagnóstico, surge otra
dificultad no solo p a r a la autoridad reglamentaria sino también para los productores
de reactivos p a r a diagnóstico. Esa dificultad consiste en realizar evaluaciones
económicas sobre los ahorros en costos de producción logrados por los fabricantes
con el empleo de productos obtenidos con las nuevas tecnologías. Los estudios se
deben extender más allá de la documentación tradicional de la pérdida causada por
la enfermedad y de los ahorros de costos resultantes e incluir aspectos tan intangibles,
pero importantes, como la mayor eficiencia administrativa y el a h o r r o directo
proveniente del diagnóstico rápido y definitivo que acaba con la necesidad de adoptar
prolongadas medidas de cuarentena.
La preparación de reactivos para diagnóstico con mayor sensibilidad, que puedan
emplearse rápidamente para verificar los problemas causados por enfermedades
comunes en el país y exóticas, es siempre un asunto urgente p a r a las autoridades de
sanidad animal estatales y federales. Los anticuerpos monoclonales y las sondas de
A D N siguen avivando nuestro interés. Los instrumentos y productos de la nueva
biotecnología tendrán aplicación y beneficios directos p a r a A P H I S . Estamos
especialmente interesados e igualmente preocupados por la producción de kits p a r a
empleo en la finca. Estos son m u y atractivos pero, al mismo tiempo, nos causan
preocupación por las profundas consecuencias que podría tener su uso indebido. El
Gobierno, la industria de sustancias biológicas y los grupos de la industria pecuaria
deben t o m a r la delantera e informar al público sobre las desastrosas consecuencias
que indudablemente se derivarían del mal empleo de los mismos. Sin embargo, esa
posibilidad n o debe impedir el desarrollo de la nueva tecnología.
254
En resumen, nosotros, como autoridades reglamentarias, estamos en u n a situación
delicada. A medida q u e avanzan las técnicas de la nueva biotecnología, h a y
posibilidades de hacer grandes mejoras p a r a vencer muchos de nuestros urgentes
problemas de salud animal. P o r t a n t o , deseamos acelerar el proceso para obtenerlas.
C o m o se indicó antes, nuestra meta es fomentar u n clima de reglamentación en el
que se promueva la innovación, el desarrollo y la comercialización de nuevos productos
útiles obtenidos de la biotecnología y, al mismo tiempo, se ponga en práctica, en
forma responsable, u n a política reglamentaria que limite los riesgos reales o
potenciales. C o m o autoridad reglamentaria, debemos reconocer n o solo que estos
productos deben ser inocuos y eficaces, sino que el público debe tener confianza en
su inocuidad. A veces, eso demora y hasta puede impedir la preparación de productos.
Debemos lograr equilibrio al evaluar la inocuidad y eficacia de los productos en el
menor tiempo posible sin minar la confianza que tiene el público en nuestra política
de reglamentación.
Creemos tener los procedimientos y la experiencia práctica que se necesitan p a r a
poder afrontar el desafío. Ello exigirá que la comunidad científica en general acabe
con los mitos perjudiciales que pueden demorar innecesariamente la realización del
potencial que ofrece la biotecnología.
*
* *
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