validación de la determinación colorimétrica de n

Del 20 al 22 de mayo de 2013
Unidad de Estudios Avanzados y Edificio
Polivalente, Ciudad Universitaria
VALIDACIÓN DE LA DETERMINACIÓN COLORIMÉTRICA DE
N-ACETILGLUCOSAMINA COMO PARÁMETRO DE CRECIMIENTO
DE MOHOS SOBRE UN SUSTRATO NATURAL
Salvador Rodríguez Neri, Erendira Lozada López, Abraham Méndez Albores,
Rómulo Bañuelos Valenzuela, Héctor René Vega Carrillo
Los mohos son organismos eucariontes que se asemejan a las plantas en que poseen pared
celular. Uno de los polisacáridos que la integran es la quitina formada por unidades de
glucosamina con enlaces ß 1-4. Se ha utilizado este metabolito para evaluar el crecimiento de
hongos de forma indirecta en diversos procesos de fermentación. El método colorimétrico usado
para cuantificar las hexosaminas en general, implica la obtención de la glucosamina por hidrólisis
ácida combinada con un tratamiento a vapor, posteriormente ésta es desaminada o acetilada. En el
primer caso el derivado ácido de glucosamina sufre la eliminación de la amina con acido nitroso
para dar 2,5-anhidro azúcares, que luego se fusionan con indol, pirrol, o hidrocloruro de la
hidrazona benzotiazolona para formar complejos coloridos. En el segundo caso se produce la
condensación de derivados de pirrol con N, N-dimetil-p-aminobenzaldehído para formar grupos
cromóforos. Dado que varía la composición y estado físico de los sustratos naturales que se
emplean en las fermentaciones. De igual manera varía la concentración y tipo de ácido usado en la
hidrólisis, así como el tratamiento térmico aplicado. Además las reacciones que ocurren durante el
ensayo son de naturaleza compleja; al método se le han realizado diversas modificaciones para
incrementar su sensibilidad, para minimizar otras dificultades derivadas de la interferencia de color
por otros hidrolizados como los monosacáridos y aminoácidos y para mejorar la estabilidad de los
compuestos coloridos generados. Por lo anterior existe la necesidad de contar con un método
confiable para cuantificar el desarrollo de los mohos en cada fermentación, por lo que en este
trabajo se validó el método mencionado, en la cuantificación del desarrollo celular de un moho en
un sustrato natural como lo es el trigo triturado. En el proceso se aplicaron diversas
concentraciones de ácido clorhídrico. El hidrolizado obtenido fue acetilado y se hizo reaccionar con
el p-dimetilaminobenzaldehido. Los espectros de absorción de los cromoforos fueron obtenidos.
Finalmente el método se valido por recuperación del analito.
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