La célula - MicroAgroalimunvime

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LA CELULA PROCARIOTA.
ESTRUCTURA Y FUNCIÓN
LA CÉLULA
CLASIFICACIÓN DE LOS SERES VIVOS
• Versión simplificada y modificada del Árbol filogenético Universal
establecido por Carl Woese y su discípulo Gary Olsen que muestra los
tres Dominios. El termino "dominio" refiere a un nuevo taxón
filogenético que incluye tres líneas primarias: Archaea, Bacteria y
Eucaria. En línea descendente siguen seis Reinos: I-Moneras, IIArqueobacterias (obviamente separadas de Moneras), III-Protistos, IVHongos, V-Plantas y VI-Animales.
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Primer concepto de la TEORÍA CELULAR: “las
células son partes elementales de los seres vivos”;
Schleiden
y
Schwann (1839)
• Todos los organismos están compuestos
de células.
• En las células tienen lugar las reacciones
metabólicas del organismo.
• Las células contienen el material
hereditario.
• Las células provienen tan solo de otras
células preexistentes.
• La célula:
• es la unidad estructural
• es la unidad de función
• es la unidad de origen
• Salvo contadas excepciones, las células son diminutas. Su
forma es muy variada: algunas son esféricas, otras son
prismáticas y otras tienen forma cilíndrica
• Características estructurales de las células :
•
Individualidad: Todas las células están rodeadas de una envoltura
una bicapa lipídica desnuda, en células animales;
una bicapa lipídica con una pared de polisacárido, en hongos y vegetales;
con una membrana externa y otros elementos que definen una pared compleja,
en bacterias Gram negativas;
con una pared de peptidoglicano, en bacterias Gram positivas.
•
Contienen un medio interno acuoso, el citosol, que forma la mayor parte
del volumen celular y en el que están inmersos los orgánulos celulares.
• Poseen material genético en forma de ADN,
el material hereditario de los genes
que contiene las instrucciones para el funcionamiento celular,
• Poseen material genético ARN,
a fin de que el primero se exprese.
•
Tienen enzimas y otras proteínas, que sustentan, junto con otras biomoléculas,
un
metabolismo activo.
Desde la perspectiva de considerar como carácter básico y
fundamental para la clasificación de los seres vivos la
estructura
y organización de la unidad básica del ser vivo, en 1937,
Chatton plantea dividir a los seres vivos en dos grupos:
PROCARIOTAS y ECUCARIOTAS.
PROCARIOTAS
Eucaryote
Procaryote
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Estructura de los microorganismos
Células procariotas
Tamaño y morfología de las bacterias.
Estructuras fundamentales
Citoplasma
Ribosomas bacterianos
Nucleoide
Membrana bacteriana y
Pared peptidoglicano.
Bacterias Gram-positivas y Gram-negativas.
Tinciones.
Elementos facultativos de la célula procariota
Cápsula y capas mucosa.
Apéndices bacterianos: flagelos y fimbrias.
Endosporas.
Clasificación de los procariotas
• Históricamente:
– Forma
– Medios de locomoción
– Pigmentos
– Necesidades
nutrimentales
– Apariencia de sus
colonias
– Propiedades de tinción
(Tinción de Gram)
• Actualmente:
– Secuencias de
nucleótidos de ADN o
ARN
• 13 a 15 reinos de
bacterias
• 3 reinos de archaeas
– Cambia rápidamente
– Se ha propuesto 3%
como nivel de umbral
para la identificación de
especies.
Clasificación de las células microbianas
(estructura celular)
1.- Microorganismos Procariotas
- Bacterias
- Cianofíceas
- Arqueobacterias
2.- Microorganismos Eucariotas
- Algas
- Hongos filamentosos y
Levaduras
- Protozoos
CÉLULA PROCARIOTA
(del griego Karyon: núcleo y pro: antes)
• Son organismos formados por una sola
célula
• Los mas antiguos y abundantes sobre la
tierra
• Presentan una gran diversidad metabólica
• Presentan un elevado ritmo de división
celular (fisión binaria)
• No presentan membranas de envoltura
Citoplasma con gránulos de
almacenamiento ricos en
glucógeno, lípidos, fosfatos.
Ribosomas similares a las
de cél eucariotas pero mas
pequeños, 70s.
Membr plasm similar a la de
eucariotas pero sin
colesterol ni esteroles.
(Excepto los micoplasmas).
Ptan invaginaciones
llamadas mesosomas.
Célula Procariota
Una sola molécula de ADN
circular asociada a histonas
y ARN en contacto directo
con el citoplasma.
Funciones de la membrana plasmática
•Limitan la bacteria
•Regulan el paso de sustancias nutritivas.
•Los mesosomas incrementan la superficie de la membrana
plasmática y en ellos hay gran cantidad de enzimas.
Pared Celular
Procariotas: estructura rígida que envuelve la membrana
citoplasmática; responsable de la forma de la célula y de
su protección contra la lisis osmótica. Además puede
presentar estructuras externas: glicocalix, flagelos,
filamentos, fimbrias, pili,...
• La mayoría de las células procarióticas son hipertónicas en relación al medio
que las
rodea
presentan una pared celular que evita que estallen. (Excepto
los micoplasmas)
Ósmosis-Difusión pasiva de agua. El agua difunde libremente a través de las
membranas y no requiere de una proteína transportadora. El agua difundirá
siempre desde un medio con menor concentración de solutos (hipotónico) a un
medio con mayor concentración de solutos (hipertónico) hasta equilibrar las
concentraciones a ambos lados de la membrana
BACTERIA Y ARCHAEA
• Son microbios unicelulares
procariotas carentes de
organelos como núcleo,
cloroplastos y
mitocondrias.
• Son pequeños, con un
diámetro de alrededor de
0.2 a 10 micrómetros.
• Se podrían reunir
alrededor de 250 000
bacterias en un punto.
ARCHAEA
BACTERIA
Características:
• Tienen una pared celular que brinda protección a los
procariotas y les confiere su forma característica.
• Algunos procariotas se desplazan mediante flagelos
simples.
• Las endosporas protectoras permiten a ciertas bacterias
soportar condiciones adversas.
• Se reproducen por fisión binaria
• Se especializan en hábitats específicos y presentan
diversos metabolismos.
• Desempeñan muchas funciones que son importantes para
otras formas de vida.
• Algunas bacterias constituyen una amenaza para la salud
humana.
ARCHAEAS
BACTERIA y ARCHAEA
Diferencias
• La rígida pared celular que encierra las células
bacterianas contiene peptidoglicano, pero las paredes
celulares de los arqueos carecen de esta sustancia
exclusivamente bacteriana y poseen
pseudopeptidoglicano, glicoproteínas o proteína
dispuesta en simetría hexagonal (capa superficial
paracristalina-Capa S)
• La estructura y composición de otros componentes
celulares como las membranas plasmáticas, los
ribosomas y las ARN polimerasas.
• Las características fundamentales de procesos básicos
como la transcripción y la traducción.
El análisis reciente de secuencias de
nucleótidos de ARN ha mostrado que los
arqueos tienen un parentesco más
próximo con los eucariotas que con las
bacterias.
Table of differences between Archaea, Bacteria and Eukaryotes
Characteristic
Archaea
Bacteria
Eukaryotes
Predominantly multicellular
Cell contains a nucleus and other membrane bound
organelles
DNA occurs in a circular form*
No
No
Yes
No
No
Yes
Yes
Yes
No
Ribosome size
70s
70s
80s
Membrane lipids ester-linked**
No
Yes
Yes
Photosynthesis with chlorophyll
No
Yes
Yes
Capable of growth at temperatures greater than 80 ºC
Yes
Yes
No
Histone proteins present in cell
Yes
No
Yes
Methionine used as tRNA Initiator***
Yes
No
Yes
Operons present in DNA
Yes
Yes
No
Intron present in most genes
No
No
Yes
Capping and poly-A tailing of mRNA
No
No
Yes
Gas vesicles present
Yes
Yes
No
Capable of Methanogenesis
Yes
No
No
Sensitive to chloramphenicol, kanamycin and streptomycin
No
Yes
No
Transcription factors required
No
Yes
Yes
Capable of Nitrification
No
Yes
No
Capable of Denitrification
Yes
Yes
No
Capable of Nitrogen Fixation
Yes
Yes
No
Capable of Chemolithotrophy
Yes
Yes
No
* Eukaryote DNA is linear
** Archaea membrane lipids are ether-linked
*** Bacteria use Formylmethionine
Basic Archaeal Shapes : At far left, Methanococcus janaschii, a coccus
form with numerous flagella attached to one side. At left center,
Methanosarcina barkeri, a lobed coccus form lacking flagella. At right
center, Methanothermus fervidus, a short bacillus form without flagella. At
far right, Methanobacterium thermoautotrophicum, an elongate bacillus
form.
BACTERIAS
ESTRUCTURA BACTERIANA
• Citoplasma
Fluido viscoso compuesto de una
variedad de sustancias
• Ribosomas
• Gránulos de reserva
• Espora
• Nucleoide
Es una región donde reside el
cromosoma. A diferencia del núcleo de
los eucariotas, el
nucleoide no está encerrado en una
membrana.
•Plásmidos
• Membrana citoplásmática
Barrera entre el ambiente externo y el
interior de la célula
• Pared celular
Una barrera rígida que protege a la
célula de una ruptura.
• Glicocalix
: Capa externa de la pared celular
• Apéndices:
Importantes para la movilidad y la
adherencias a ciertas superficies
• Flagelos
• Pili
Morfología de los procariotas
Procariotas son organismos pequeños
(μm) 1 μm = 10-3 mm
Amplia diversidad de morfologías:
cocos
bacilos
espirilos
espiroquetas
con apéndices
Filamentosos
pleomorfismo
Formas Bacterianas
Bacteria come in a wide variety of
shapes:
A. Rod-shaped
B. Round-shaped or spherical.
C. Round-shaped in clusters.
D. Round-shaped in twos.
E. Spiral-shaped.
F. Comma-shaped.
Helicobacter
Staphylococcus
Pseudomonas
Borrelia
Bacillus anthracis
Staphylococcus aureus
AGRUPACIONES BACTERIANAS
DNA BACTERIANO
• Un cromosoma empaquetado ”nucleoide”
• Tamaño del genoma: 0.5 to 6 Mb (500 a 6000
genes)
• Plásmidos: estructuras más pequeñas
cirulares de DNA
-
DNA extracromosomal
número de copias múltiple
genes de resistencia a antibióticos
genes que codifican para toxinas
multiplicación independiente de la
división celular.
RIBOSOMAS
60% RNA ribosomal & 40% proteína
consiste de 2 subunidades: grande & pequeña
La célula procariota difiere de la eucariota en el tamaño y
número de proteínas
Sitio de la síntesis de proteínas
Membrana plasmática
Las membranas no son simples barreras sino que:
_ Definen la extensión de la célula y establecen sus límites.
_ Forman barreras selectivamente permeables, impidiendo
el intercambio
indiscriminado de sustancias entre el exterior y el interior
celular.
_ Controlan la interacción entre células o con la matriz
extracelular.
_ Intervienen en las respuestas a señales externas a través
de los receptores.
Singer y Nicholson propusieron en 1972 “modelo del
mosaico fluido”.
De acuerdo con el mismo las membranas son “disoluciones
bidimensionales de lípidos y proteínas”.
Están formadas por un conjunto de moléculas hidrofóbicas e hidrofílicas que
se mantienen unidas por enlaces, en general, no covalentes.
Una de las principales características de las membranas biológicas es su alto
grado de fluidez. Esto implica que sus lípidos y proteínas pueden desplazarse
libremente en todas las direcciones, pero siempre sobre el plano de la
membrana. La membrana plasmática está compuesta por una bicapa de
fosfolípidos y proteínas.
Las proteínas se dividen en dos grandes grupos:
a) proteínas integrales: atraviesan la membrana de lado a
lado;
b) proteínas periféricas: están en contacto con la
membrana, pero no la atraviesan.
Cumplen distintas funciones, como por ejemplo: enzimas
reguladoras, receptores hormonales, transportadoras y
canales controladores del movimiento de iones y
moléculas a través de la membrana plasmática.
TRANSPORTE A TRAVÉS DE MEMBRANAS
CELULARES
La bicapa de fosfolípidos es permeable a moléculas polares sin carga
pequeñas como el agua, o no polares como el O2 y el CO2, pero es
impermeable a iones o moléculas polares grandes como la glucosa y los
aminoácidos, que van a poder entrar a la célula gracias a las proteínas.
TIPOS DE TRANSPORTE
- DIFUSIÓN SIMPLE:
El transporte se realiza entre compartimientos separados por una
membrana permeable a ese soluto, se denomina difusión simple, no
requiere de otra energía adicional que no sea el movimiento de las
moléculas, desplazándose éstas a favor de su gradiente de
concentración.
Las moléculas que se movilizan por difusión simple son las no
polares y pequeñas, las liposolubles y las polares pequeñas, pero sin
carga eléctrica neta, como el H2O.
En el caso particular del H2O, la difusión simple se denomina
ósmosis.
- DIFUSIÓN FACILITADA:
Como mencionamos anteriormente, hay sustancias que no pueden
atravesar la membrana debido a su polaridad y/o a su tamaño. La
difusión facilitada ocurre siempre a favor del gradiente, por lo tanto
no requiere gasto de energía. Puede tratarse de un gradiente de
concentración (las moléculas se dirigen del compartimiento de
mayor concentración hacia el de menor concentración) o de un gradiente
de potencial eléctrico (el soluto con carga eléctrica,
independientemente de su signo, se desplazará de una zona donde
la carga sea mayor hacia otra donde la carga sea menor).
En este tipo de transporte intervienen proteínas de membranas
denominadas proteínas carriers o permeasas. Estas proteínas fijan la
molécula de sustrato y a continuación sufren un cambio conformacional
reversible que les permite transportar el soluto de un lado al otro de la
membrana. No se requiere gasto de ATP, ya que es el propio gradiente el
que impulsa el pasaje a través de los transportadores.
Canales iónicos: Existen canales iónicos en todas las células, tanto
en la membrana plasmática como en las membranas de los organoides.
Son altamente selectivos, porque cada canal sólo puede transportar
un tipo de ión (K+, Na+, etc.).
La mayoría de los canales no permanecen abiertos permanentemente,
sino que se abren en respuesta a estímulos. Estos estímulos pueden ser
tanto la presencia de una sustancia inductora como una modificación de
la carga eléctrica de la membrana.
- TRANSPORTE ACTIVO:
En determinados momentos las células deben importar moléculas que
están en menor concentración en medio extracelular que en el citoplasma y
necesitan mantener constante la composición iónica intracelular.
Es un transporte que se realiza en contra del gradiente, ya sea éste de
concentración o eléctrico y, en consecuencia, se requerirá gasto de
energía en forma de ATP. El transporte activo se realiza por medio de bombas y
también presenta formas de monotransporte, cotransporte y contratransporte
MECANISMOS DE INTERCAMBIO CON FLUJO DE MEMBRANA
En una célula no sólo ingresan y salen iones y pequeñas moléculas sino que
también
ingresan o salen partículas de mayor tamaño.
Este tipo de transporte involucra siempre gasto de ATP, ya que la célula
realiza un movimiento general de su estructura, particularmente de la
membrana plasmática y del citoesqueleto.
- ENDOCITOSIS: En este proceso, una extensión de la membrana rodea
progresivamente
al material que será internalizado, formando una vesícula endocítica.
Posteriormente,
el material incorporado es digerido por los lisosomas.
Dependiendo del material que ingrese a la célula se pueden distinguen tres
tipos de endocitosis:
1) Fagocitosis, implica la ingestión de partículas de gran tamaño, como
microorganismos, restos celulares, inclusive de otras células, por medio de
vesículas
llamadas fagosomas.
2) Pinocitosis, es la incorporación de líquido y de partículas disueltas en
él por medio de pequeñas vesículas.
3) Endocitosis, mediada por receptor: determinadas moléculas (ligandos) que
la célula
incorpora son reconocidos por receptores específicos, ubicados en la
membrana
plasmática
MEMBRANA CITOPLASMÁTICA
Barrera de permeabilidad altamente selectiva ( 8nm)
Esta constituida por lípidos y proteínas
Formada por una bicapa fosfolipídica hidrofílíca en el exterior
e hidrofóbica en el interior
Los grupos hidrofílicos se asocian con el agua, proteínas hidrofílicas y
oras sustancias cargadas como iones metálicos Ca2+ y Mg2+
Principales funciones de la
membrana citoplasmática
Proteínas de membrana están implicadas en el
transporte y
otras funciones a través de la membrana
LA MEMBRANA CITOPLASMÁTICA COMO BARRERA
DE PERMEABILIDAD
Tres sistemas de Transporte de Membrana
• Por lo menos tres tipos de transportes
• Transporte simples
• Transporte tipo fosfotransferasa
• Transporte tipo ABC (ATP-binding cassette)
El transporte simple y el sistema ABC transportan sustancias sin modificarlas
químicamente, mientras que la translocación de grupo ocasiona la modificación
química (fosforilación) de la sustancia transportada
Estructura de los Transportadores Transmembranales y tipos de procesos
de transporte
12 moléculas proteícas alineadas en círculo formando un canal a través de la
membrana (12 hélices de tipo alfa que se pliegan hacia atrás y adelante
Las tres clases de transportadores son
• Uniportadores (unidireccional)
• Simportadores (co-transporte)
• Antiportadores
En los casos de transporte de tipo antiporte y simporte , la molécula co-transportada
se indica en amarillo
Sistema de transporte ABC (ATP-binding cassette)
Transporte dependiente de proteínas periplasmáticas de unión
Diverso (200 tipos diferentes de transporte en procariotas) familia de Pr homólogas
Proteínas periplasmática – alta afinidad por sustrato (10-6 M)
Proteína trans-membranales
Proteína ATP quinasa hidrolítica
Exportación de proteínas
• Esencial para ayudar al transporte
de enzimas para atacar nutrientes
insolubles (almidón) o toxinas
proteicas
• Las Proteínas son exportadas a
través de la acción de proteínas
llamadas translocasas , que son
específicas para el tipo de
proteínas exportada
•E.j. translocasa Sec YEG=
proteína de membrana
PARED CELULAR
PEPTIDOGLICAN, MUCOPÉPTICO O MUREINA
Responsables de la forma y la rigidez
Únicamente en Bacteria
La resistencia de la pared se debe a la presencia
de peptidoglucano que consiste en dos tipos de
azúcares poco comunes unidos a péptidos cortos.
• Glicanos (polisacárido) base que consiste de
Murámico N-acetil (Mur)
N-acetil glucosamina (Gln)
• Cadenas laterales de péptido que contiene
Acidos D-y L-aminoácidos
Acido diaminopimélico (en algunos casos)
• Las cadenas laterales forman reticulados por puentes
peptídicos que varían en estructura entre las especies
bacterianas.
Figure 7 - The Gram
positive cell wall
Figure 1 - Gram
negative cell wall
Gram positivas
Gram negativas
De acuerdo a sus propiedades de
tinción a las eubacterias (bacterias
verdaderas,
parea diferenciarlas de las
arqueobacterias) con pared se las
divide en dos grandes grupos:
Grampositivas y Gramnegativas, que
difieren en la absorción del colorante
de Gram.
EUBACTERIA y ARCHAEA
Diferencias
• La rígida pared celular que encierra las células
bacterianas contiene peptidoglicano, pero las paredes
celulares de los arqueos carecen de esta sustancia
exclusivamente bacteriana y poseen
pseudopeptidoglicano, glicoproteínas o proteína
dispuesta en simetría hexagonal (capa superficial
paracristalina-Capa S)
• La estructura y composición de otros componentes
celulares como las membranas plasmáticas, los
ribosomas y las ARN polimerasas.
• Las características fundamentales de procesos básicos
como la transcripción y la traducción.
PARED CELULAR DE BACTERIAS
GRAM POSITIVAS
NEGATIVAS
Figure 7 - The Gram
positive cell wall
GRAM
Figure 1 - Gram
negative cell wall
Coloración de Gram
Alcohol
disuelve los lípidos de la pared
bacteriana
Figure 1 - A Gram stain of
Gram + Staphylococcus
cells.
Figure 2 - Gram stain of
Gram - E. coli cells
Property
Gram Positive
Gram Negative
Thickness of wall
20-80 nm
10 nm
Number of layers in wall
1
2
Peptidoglycan content
>50%
10-20%
Teichoic acid in wall
+
-
Lipid and lipoprotein content
0-3%
58%
Protein content
0%
9%
Lipopolysaccharide
0
13%
Sensitive to penicliiin
+
- (not as)
Digested by lysozyme
+
- (not as much)
Figure 3 - A comparison
of cell wall types
GRAM POSITIVA
GRAM NEGATIVA
• PEPTIDOGLICAN
Subunidad :repeticiones
alternadas de Nacetilglucosamina
y ácido N-acetilmuramico –
él último se une por enlaces
cruzados entre cadenas cortas
de péptidos (L-alanina, D-alanina,
D-ácido glutámico, y lisina o
Ácido diaminopimélico)
.
• Gram positivas – varias hojas
de péptidoglican
• Gram negativas – una o dos
hojas de péptidoglican
El tetrapéptido de la unidad repetitiva muestra únicamente variación en un AA : LisDAP
M= ácido N- acetilmurámico
G= N-acetilglucosamina
100 variaciones de pared y la máxima
variación se da en el puente de conexión
Se destaca D-alanina y D-glutámico
El NAM y DAP no se encuentra en eucariotas
Enlaces tetrapéptidicos cruzados
formados por los aminoácios
De una cadena de peptidoglican con
otra que proveen a la pared de los
procariotas de una extrema fuerza y
rigidez.
Puente (glicina, serina,treonina
aspártico)
PARED CELULAR DE BACTERIAS GRAM-POSITIVAS
MUREINA mas ácidos teicoicos cargados negativamente
– glicerolfosfato o ribitolfosfato
Probablemente los aminoácidos y los azúcares también están unidos.
Carga total negativa unida a Ca++ y Mg++ .
Con lípidos = ácidos lipoteicoicos
Ésteres fosfato
PROTOPLASTOS Y LISOZIMA
• ALGUNOS PROCARIOTAS SON PROTOPLASTOS = pérdida de pared
Protoplastos naturales membranas inusualmente fuertes :Mycoplasmas tienen
esteroles.Thermoplasma (Archaea) no tiene pared membranas especiales (calorácido)
o viven en hábitats osmóticamente protegidos (como el cuerpo de los animales Ej:
formas L (Instituto Lister )
•Protoplastos se pueden obtener por tratamiento con lisozima
La lisozima fue descubierto por Alexander Fleming (penicilina)
Se encuentra en virus bacterianos, lágrimas, saliva.
Esferoplastos
Variaciones extremas de morfología de
Mycoplasma pneumoniae
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Bacterias que carecen de pared celular
• Ejemplo: Mycoplasma
• Especies de Mycoplasma tiene formas
extremadamente variables ya que no tienen
pared celular rígida.
• algunos Mycoplasmas causa una forma
suave de neumonía.
• Ni la penicilina ni la lisozima afecta a estos
organismos
• Mycoplasma y otras bacterias pueden
sobrevivir sin pared celular ya que su
membrana es más resistente debido a la
presencia de esteroles
Thermoplasma (Archae)
Pared de Archae
• La pared de Archae de pseudopeptidoglicano, que formado por ácido Nacetiltalosaminurónico que reemplaza al ácido N-acetilmurámico del
peptidoglican.•El esqueleto del pseudopeptidoglican se une por enlaces β-1,3
en lugar de enlaces β-1,4 del peptidoglican
•Pared formada puede estar formada por proteínas, polisacáridos o
glicoproteínas Ej Methanosarcina (glucosa, ac glucurónico, galactosamina.
Acetato) Halococcus (sulfato)
Archaea también tienen un capa paracristalina (capa S) proteína/ glicoproteina
simetría hexagonal. Barrera de permeabilidad externa y elementos de
protección
Pared de las Bacterias Gram negativas
Membrana externa de Bacterias of Gram-negativas
• Bacterias Gram-negativas se caracterizan por una membrana
externa de lipopolisacárido (LPS), proteína y lipoproteína
Lipopolisacárido esta compuesto por
Lípido A: Unión aminoéster a un disacárido NAG-P (àcidos orgánicos: caproico,
láurico, mirístico, palmítico y esteárico)
Núcleo de polisacárido (,cetodoxioctonato(KDO),heptosas.gal y glu y NAG
Polisacárido O-específico (glu, manosa, gal. ramnosa y dideoxiazúcares
abecuosa, paratosa,etc secuencias de 4 o 5 unidades repetidas
• Lípido A del LPS tiene propiedades de endotoxina, que puede
causa graves síntomas en humanos Salmonella. Shigella Escherichia
• Lipido A es un potente modificador de la respuesta
biológica que puede estimular el sistema inmune de
los mamíferos
.
– Durante la enfermedad infecciosa causada por
Bacterias Gram- negativas ,
La endotoxina liberada de las células que se
multiplican tiene efectos similares sobre animales y
contribuyen a los síntomas y patología de la
enfermedad
.
Relativamente permeable a pequeñas moléculas debido a las porinas:
canales de tres subunidades idénticas de 1 nm de diámetro para
pequeñas moléculas de bajo peso molecular
Porinas específicas e inespecíficas
Espacio periplasmático: 12 a 15 nm entre la membrana citoplasmática
y la superficie interna de la membrana externa: enzimas hidrolíticas,
proteínas de unión y quimiorreceptores
Relación entre la pared celular
y la coloración de Gram
Gram Positiva
Gram Negativa
La coloración de Gram
Se cubre el frotis con
cristal violeta 1 min
Se adiciona una solución
de Yodo-iodurada 1 min
Se decolora con alcohol
brevemente 20 sec
Contra-coloración con fucsina
zafranina 1min
Figure 1 - A Gram stain of
Gram + Staphylococcus
cells.
Figure 2 - Gram stain of
Gram - E. coli cells
El alcohol penetra rápidamente la membrana enriquecida de lípidos de las
bacterias gram-negativas y extrae el cristal insoluble formado por el
complejo violeta-ioduro de la célula
Estructuras de superficie e
inclusiones celulares
• Son opcionales: producidas por algún tipo
de procariotas pero no por otras
Estructuras especiales de los
procariotas
Cápsula
Bacteriana
Glicocalix: cápsula y capa
mucosa
Glicocálix: material polisacarídico que se
extiende alrededor de la célula
Cápsula: matriz rígida que excluye a los
Colorantes
Capa mucosa: se deforma fácilmente
Algunas bacterias poseen por fuera de la pared una
cápsula de polisacáridos y su presencia se asocia a la
actividad patogénica, ya que la CÁPSULA puede
interferir con la fagocitosis que efectúan los glóbulos
blancos del huésped.
Composición
química:
-Polisacáridos
-Proteínas
Cápsula:
estructura
rígida
Capa mucosa:
se deforma
con facilidad y
no excluye
partículas
Las bacterias encapsuladas son menos fagocitadas
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Las bacterias encapasuladas son más resistentes a la
fagocitosis
Resisten mejor a la acción de la fagocitosis
de las células del sistema inmune
Resistencia la desecación
TINCIÓN DIFERENCIAL Tinción de cápsulas
Se trata de una tinción negativa usando tinta china
que permite determinar la presencia de cápsulas
polisacarídicas.
DIFERENTES ASPECTOS DE LA CAPSULA BACTERIANA
Klebsiella
pneuminiae
Bacillus antrhacis
Streptococcus
pneumoniae
Flagelos y Movilidad
Movilidad por la mayoría de los microorganismos
es llevada acabo por flagelos
En procariotas el flagelo es un filamento largo y
fino (20nm). Forma helicoidal muestra una
distancia constante entre dos curvas o vueltas
adyacentes longitud de onda
Es una estructura compleja compuesta por
diversas proteínas, la mayoría de las cuales están
ancladas en la pared celular y en la membrana
citoplasmática.
• El filamento del flagelo, que está constituido por
un solo tipo de proteína rota a expensas de la
fuerza motriz de protones que conduce el motor de
flagelo
.
Flagelos
Membr externa
Peptidoglicano
Membr plasmática
• Para su movilidad muchas bacterias poseen flagelos
que sonestructuralmente diferentes del flagelo eucariota.
• Están constituidos por monómeros de una pequeña
proteína globular llamada flagelina.
• Forman una estructura tubular hueca.
• No está encerrado en la membrana celular como en los
eucariotas, sino que sale de la célula como un filamento
proteínico desnudo a lo largo de la superficie bacteriana.
• Está incrustado en la membrana citoplasmática.
• Le permite a las bacterias moverse como por acción de
hélice.
Estructura de un flagelo bacteriano
Diferentes disposiciones de flagelos bacterianos
Monotrica
Lofotrica
Anfitrica
Peritrica
Pseudomonas
Escherichia coli
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Proteus
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Flagelos y Movilidad
Flagelo polar (a) los
flagelo se ubica a un
lado o ambos lados de
la célula (b)
Flagelos peritricos (d)
y (e)los flagelos se
insertan en distintas
ubicaciones alrededor
de la superficie celular
El Flagelo está compuesto de la proteína
flagelina
50 genes implicados en el movimiento
La energía proviene de la fuerza motriz de
protones. El flujo de protones se realiza
por las proteínas Mot 1 rotación /1000 H*
Los flagelos mueven la célula por
rotación muy parecido a la propulsión
de un motor de bote
Alcanzan un movilidad de
aproximadamente 60 largos de la
célula /segundo.
Rotor y estator: fuerzas
electrostáticas con las
proteínas ubicadas
helicoidalmente
Movilidad por deslizamiento
Los procariotas se pueden mover por deslizamiento
No emplea flagelos sino que reptan a lo largo de una superficie sólida (células filamentosas
ej cianobacterias, Bacterias Gram negativas ej mixobacterias)(10 μm/seg) la secreción de
polisacárido mucoso
Flavobacterium johnsoniae: movimiento de proteínas de superficie impulsan a la célula en
mecanismo del tipo de cadena continua
Filamentos axiales
Flagelos internos , ubicados entre la
pared celular y la vaina externa de
espiroquetas
Movilidad
Movilidad por deslizamiento
Polisacárido mucoso
Sistema de respuesta sensoriales: Quimotaxis y Fototaxis
Las bacterias móviles pueden responder a gradientes químicos o
físicos del ambiente en forma positiva o negativa dirigiendo el
movimiento de la célula hacia la molécula señal (cambios temporales
no espaciales)
Taxia i tactismo: movimiento dirigido
Quimiotaxis: respuesta a agentes químicos
Fototaxis : respuesta a la luz
En el proceso de quimiotaxis de una bacteria peritrica
Movimiento al azar realizan carreras se desplazan hacia delante y
volteretas, cambia la dirección al azar.
La presencia de una sustancia atrayente acarrea frecuentes corridas y
volteretas más escasas. Participan quimioreceptores de membrana
.
Estructuras especiales de los
procariotas
Pili Bacteriano
Pili Bacteriano
•
•
•
•
Proyecciones similares a pelos cortos.
Estan constituídos por la proteína PILINA.
Ayuda en la adhesión a la base de epitelio. (Por ejemplo, la córnea)
Especial (largo) F-pili para la conjugación
Pili o Fimbrias
• Pelos cortos parecidos a proyecciones. No
confieren movilidad. Naturaleza proteica
• Ayudan en la adhesión al epitelio del hospedador
(e.g. cornea)
• Especiales (más largos) pili para conjugación
• Pili tipo IV. Movilidad a tirones.(Moraxella y
Pseudomonas
Funciones del pili:
unir las bacteriasas, fuentes alimenticias o a dos
bacterias en conjugación (transmisión de ADN entre
bacterias).
La mayoría de los procariotas se reproducen por
división celular simple, también llamada fisión binaria.
1) El cromosoma se une a
la membrana
2) ADN se replica
3) Membrana celular y
pared celular se invaginan
en forma envolvente
4)Las células hijas se
separan
NOTA: Los plásmidos que
se replican de forma
independiente
Cuando se multiplican los procariotas, se
producen clones de células genéticamente
idénticas.
Plásmido
Reproducción bacteriana
Fisión Binaria
Conjugación Bacteriana
Intercambio genético en
bacterias
Sin embargo, suelen ocurrir mutaciones y éstas, combinadas con el
rápido tiempo de generación de los procariotas, son responsables de
su extraordinaria adaptabilidad.
Una mutación en genética y biología, es una alteración o cambio en la
información en los genes de un ser vivo (muchas veces por contacto
con mutágenos) y que, por lo tanto, va a producir un cambio de
características de éste. Las mutaciones se presentan súbita y
espontáneamente, y se pueden transmitir o heredar a la
descendencia.
La unidad genética capaz de mutar es el gen que es la unidad de
información hereditaria que forma parte del ADN.
El ácido desoxirribonucleico, abreviado como ADN, es un ácido nucleico que
contiene instrucciones genéticas usadas en el desarrollo y funcionamiento de
todos los organismos vivos conocidos y algunos virus , y es responsable de su
transmisión hereditaria .
El papel principal de la molécula de ADN es el almacenamiento a largo plazo de
información.
Contiene las instrucciones necesarias para construir otros componentes de las
células , como las proteínas y las moléculas de ARN.
Los segmentos de ADN que llevan esta información genética son llamados
genes , pero las otras secuencias de ADN tienen propósitos estructurales o
toman parte en la regulación del uso de esta información genética.
Desde el punto de vista químico , el ADN es un polímero de nucleótidos, es decir,
un polinucleótido.
Y cada nucleótido, a su vez, está formado por un azúcar (la desoxirribosa )
una base nitrogenada (que puede ser adenina →A,timina →T, citosina →C ,
guanina →G) un grupo fosfato que actúa como enganche.
Lo que distingue a un nucleotido de otro es, entonces, la base nitrogenada, y por
ello la secuencia del ADN se especifica nombrando sólo la secuencia de sus
bases.
La disposición secuencial de estas cuatro bases a lo largo de la cadena es la que
codifica la información genética: por ejemplo, una secuencia de ADN puede ser:
ATGCTAGATCGC...
En los organismos vivos, el ADN se presenta como una doble cadena de
nucleótidos, en la que las dos hebras están unidas entre sí por unas conexiones
denominadas puentes de hidrógeno.
Para que la información que contiene el ADN pueda ser utilizada por la
maquinaria celular, debe copiarse en primer lugar en unos "trenes" de
nucleótidos, más cortos y con unas unidades diferentes, llamados
ARN.
Las moléculas de ARN se copian exactamente del ADN mediante un
proceso denominado transcripción.
Una vez procesadas en el núcleo celular , las moléculas de ARN
pueden salir al citoplasma para su utilización posterior.
La información contenida en el ARN se interpreta usando el código
genético, que especifica la secuencia de los aminoácidos de las
proteínas, según una correspondencia de un triplete de nucleótidos
(codón ) para cada aminoácido.
El diccionario "secuencia de nucleótido-secuencia de aminoácidos"
permite el ensamblado de largas cadenas de aminoácidos (las
proteínas) en el citoplasma de la célula.
Por ejemplo, en el caso de la secuencia de ADN indicada antes
(ATGCTAGATCGC...), la ARNpolimerasa utilizaría como molde la cadena
complementaria de dicha secuencia de ADN (que sería TAC-GAT-CTA-GCG-...)
para transcribir una molécula de ARNm que se leería AUG-CUA-GAU-CGC-... ;
el ARNm resultante, utilizando el código genético, se traduciría como la
secuencia de aminoácidos metionina -leucina -ácido aspártico -arginina -...
Las secuencias de ADN que constituyen la unidad fundamental, física y
funcional de la herencia se denominan genes .
Cada gen contiene una parte que se transcribe a ARN y otra que se encarga
de definir cuándo y dónde deben expresarse .
La información contenida en los genes (genética) se emplea para generar ARN
y proteínas , que son los componentes básicos de las células, los "ladrillos"
que se utilizan para la construcción de los orgánulos u organelos celulares ,
entre otras funciones.
Dentro de las células, el ADN está organizado en estructuras llamadas
cromosomas que, durante el ciclo celular , se duplican antes de que la célula
se divida .
Los organismos procariotas (bacterias y arqueas ) lo almacenan en el
citoplasma de la célula.
Los virus ADN lo hacen en el interior de la cápsida de naturaleza proteica.
Existen multitud de proteínas, como por ejemplo los factores de
transcripción , que se unen al ADN dotándolo de una estructura
tridimensional determinada y regulando su expresión.
Los factores de transcripción reconocen secuencias reguladoras del ADN y
especifican la pauta de transcripción de los genes.
El material genético completo de una dotación cromosómica se denomina
genoma y, con pequeñas variaciones, es característico de cada especie .
La definición de mutación a partir del conocimiento de que el
material hereditario es el ADN y de la propuesta de la doble
hélice para explicar la estructura del material hereditario
(Watson y Crick,1953), sería que una mutación es cualquier
cambio en la secuencia de nucleótidos del ADN. Cuando
dicha mutación afecta a un sólo gen, se denomina mutación
génica. Cuando es la estructura de uno o varios
cromosomas lo que se ve afectado, mutación cromosómica.
Y cuando una o varias mutaciones provocan alteraciones en
todo el genoma se denominan, mutacion genomica.
En la transformación los fragmentos de ADN liberados por una célula rota
son tomados por otra célula bacteriana.
En la transducción, el material genético de una bacteria es llevado
hasta la otra por medio de un bacteriófago (virus que infecta a la
bacteria).
En la conjugación dos células intercambian material genético, a
través de las vellosidades sexuales o vellosidades F que son pelos
largos, delgados y huecos por el que pasan los fragmentos de ADN de
una bacteria a otra o un
plásmido.
Una adaptabilidad adicional es provista por las recombinaciones
genéticas que son resultado de procesos de conjugación,
transducción y transformación.
La CONJUGACIÓN BACTERIANA es el proceso de transferencia de material
genético entre una célula bacteriana donadora y una receptora mediante el
contacto directo o una conexión que las una.
La conjugación bacteriana a menudo es considerada el equivalente bacteriano
a la reproducción sexual o al apareamiento debido a que implica el intercambio
de material génico.
Durante la conjugación la célula donadora provee un elemento génico móvil o
conjuntivo que generalmente es un plásmido o transposón.
Requiere contactos directos entre ambas células, con intervención de
estructuras superficiales especializadas y de funciones específicas (pili sexuales
en los Gram negativos, y contacto íntimo en los Gram positivos).
La información génetica transferida a menudo beneficia al receptor. Las ventajas
pueden incluir resistencia antibiótica, tolerancia xenobiótica o la capacidad de
usar nuevos metabolitos.
Conjugación
La TRANSDUCCIÓN es un proceso mediante el cual el ADN es
transferido desde una bacteria a otra mediante la acción de un
virus.
También se utiliza para designar al proceso mediante el cual ADN
exógeno es introducido en una célula mediante un vector viral.
Esta es una herramienta que usualmente utilizan los biólogos
moleculares para introducir en forma controlada un gen extraño
en el genoma de una célula receptora.
Cuando los bacteriófagos (virus que infectan bacterias) infectan
una célula bacteriana, su modo normal de reproducción consiste
en capturar y utilizar la maquinaria de replicación, transcripción, y
traducción de la célula de la bacteria receptora para producir gran
cantidad de virones, o producir partículas virales, incluido el ADN
o ARN viral y la cubierta de proteína.
TRANSFORMACIÓN es el término utilizado para las alteraciones
genéticas resultantes de introducir ADN por virus (transducción) o por
contactos intercelulares entre bacterias (conjugación).
A la transformación de células animales se le llama transfección. El
término transformación es también usado, de manera más general,
para describir mecanismos de transferencia de ADN o ARN en biología
molecular (es decir, teniendo en cuenta más que las consecuencias
genéticas).
Por ejemplo la producción de transgénicos como maíz transgénico
requiere la inserción de nueva información genética en el genoma del
maíz usando el mecanismo apropiado de transferencia de ADN; el
proceso se le llama comúnmente transformación.
El ARN también puede ser transferido en las células usando métodos
similares, pero esto no provoca normalmente cambios heredables y
por lo tanto no es transformación real.
Esporas
ENDOSPORA BACTERIANA
 La endospora bacteriana es una estructura altamente diferenciada producida por ciertas
bacterias Gram positivas 20 géneros (Bacillus y Clostridium)
Resistentes al calor, desecación, radiación, ácidos y desinfectates químicos
Estructura deshidratada que contiene macromoléculas esenciales y dipicolinato de calcio
y proteínas ácidas
Impermeables a los colorantes
• Endospores can remain dormant
indefinitely
but germinate quickly when the appropriate
trigger is applied.
ENDOSPORA BACTERIANA
10 al 30% de agua de la célula
Enzimas inactivadas
pH una unidad menor
SASPs pequeñas proteínas ácido solubles de la
espora
Proceso de esporulación
200 genes spo sps
Estructura de resistencia y latencia
Esporas de Bacillus stearothermophilus son empleadas para el
control de esterilización por calor
Esporas de Bacillus anthracis se emplearon en la guerra
biológica
Germinación:
•Activación, germinación y crecimiento
•Se hacen hervir las esporas duante unos 15 min, para que
germinen a células vegetativas y luego se siembran en medio de
cultivo adecuado y se observa el crecimiento de las bacterias
vegetativas.
Cuerpos intracelulares de reserva
y cuerpos de inclusión
Varían en tamaño, número y contenido. la
bacteria los puede utilizar cuando hay
depleción de nutrientes Ejemplos:
glicogeno, poli-beta-hidroxibutirico ,
Gránulos de azufre y polifosfato
Magnetosomas: son partículas cristalinas
de Fe3 O 4 dipolo magnético,
magnetotaxis proceso en el que se
orientan o desplazan siguiendo un polo
magnético
Oxidan compuestos reducidos de azufre
como sulfuro y tiosulfatos y se acumula
azufre elemental
Vesículas de gas : para flotación.
Estructura hueca fusiforme,rígida, log 300 a
1000nm x 45 a 120nm. Membrana proteica
impermeable al agua y solutos y permeable al
gas GvpA y GvpC.
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