XIX Verano de la Investigación Científica y Tecnológica del Pacífico

XIX Verano de la Investigación Científica y Tecnológica del Pacífico
CARACTERIZACIÓN FILOGENÉTICA DE BACTERIAS PRESENTES EN EL
PROCESO DE FERMENTACIÓN DEL MEZCAL
Venecia Solórzano Villanueva Instituto Tecnológico de Morelia, [email protected].
Asesor Juan Carlos González Hernández Instituto Tecnológico de Morelia, [email protected]
PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA
Tomando en cuenta los efectos positivos y/o negativos de la presencia de diferentes
microorganismos en el sistema de fermentación alcohólica, es importante conocer su
identidad y prevalencia para poder inferir su participación en las características
bioquímicas y organolépticas finales del producto.
Una manera de conocer la identidad de los microorganismos es mediante técnicas de
Biología Molecular, en la presente investigación se pretende lograr una caracterización
filogenética de las bacterias presentes en la fermentación del mezcal.
METODOLOGIA
El primer paso a seguir fue cultivar los microorganismos en medio Mueller Hinton, se
prosiguió a realizar la extracción de ADN bacteriano mediante la técnica fenolcloroformo. Para asegurar la obtención de ADN fue cuantificado en un espectrofotómetro
para conocer su concentración.
Después se realizó la técnica de PCR para la amplificación de regiones específicas de
interés bajo las siguientes condiciones: Desnaturalización a una temperatura de 94 °C,
alineamiento a una temperatura de 50 °C y por ultimo elongación a 72 °C, cada uno
durante 30 seg. (45 ciclos). Los primers universales utilizados son E786F
(GATTAGATACCCTGGTAG) y E1541R (AAGGAGGTGATCCANCCRCA). Una vez
obtenido el producto de PCR se mandará secuenciar y se obtendrá la filogenia de cada
una de las 9 bacterias, comparándolas en el Gene Bank.
CONCLUSION
Durante este proyecto se ha logrado obtener DNA y ha sido cuantificado de las 9
bacterias presentes, nombradas como B1, B2, B3, B4, B5, B6, B7, B8 y B9. En este
momento nos encontramos realizando PCR con las condiciones antes mencionadas con
el fin de obtener las condiciones adecuadas para obtener un buen producto de PCR y
secuenciar los resultados obtenidos, logrando la caracterización de las 9 cepas de
interés.
Se agradecen los donativos parciales otorgados por PROMEP 2012 (103.5/12/3679).
© Programa Interinstitucional para el Fortalecimiento de la Investigación y el Posgrado del Pacífico
Agosto 2014