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Revista CENIC Ciencias Químicas, Vol. 38, No. 1, 2007.
COMUNICACIÓN CORTA
Evaluación del grado de hidrólisis
de la hidrocortisona acetato. Un caso en estudio
Juan Antonio Mesa Díaz,* Oscar García Pulpeiro,1 Néstor Pérez Souto y Juan Enrique Tacoronte
Morales.
Centro de Ingeniería e Investigaciones Químicas, Laboratorio de Química Orgánica, Vía Blanca s/n entre Infanta y Palatino,
Cerro, Ciudad de La Habana, Cuba. Correos electrónicos: [email protected]; [email protected]. 1Laboratorio
Farmacéutico “Roberto Escudero”.
Recibido: 20 de diciembre de 2005.
Aceptado: 28 de febrero de 2007.
Palabras clave: hidrólisis, desacetilación, hidrocortisona acetato.
Key words: hydrolisis, deacetylation, hydrocortisone acetate.
La hidrólisis de grupos acetoxi,
grupo funcional protector (GFP),
constituye una vía de obtención de
hidroxi-derivados con potenciales
propiedades farmacológicas, útiles
en el tratamiento terapéutico de patologías humanas. En este trabajo, se
hace uso de un método específico
para hidrolizar, cuantitativamente,
grupos acetatos, conocido como Método de Zemplen1,2 que se basa en la
labilidad de grupos acetatos frente a
una disolución de metóxido de sodio
0,1 mol/L previamente preparada. De
esta manera, se logra sustituir el grupo acetato (OAc) proveniente del C21 sin afectar otros fragmentos de la
molécula, generándose in situ el pro-
O
CH3
OAc
C
H
CH3
HO
porcentaje de degradación (hasta un
60 % de hidrólisis) de la hidrocortisona acetato (HCAc) en una crema
al 1 %, sin tener necesidad de emplear
una disolución de referencia de HC,
lo cual constituyó el objetivo de esta
comunicación.
Las mediciones se realizaron en
un equipo de Cromatografía Líquida de Alta Resolución (CLAR), bomba LC 1120 GBC, detector UV/Vis LC
1200 GBC, software EZCROM versión 6,8. Columna: LichroCARTÒ
250-4, Lichropher 100, RP-18 (5 mm),
λ = 240 nm . Fase móvil: acetonitrilo/
agua [40 : 55 (v/v)], flujo: 1 mL/min.3- 5
Se procedió de la manera siguiente: se prepararon tres patrones
ducto de degradación fundamental,
hidrocortisona (HC, Fig. 1), que al
mismo tiempo, constituye una sustancia de referencia. Debe considerarse que ambas sustancias, HCAc
y la HC, tienen prácticamente el
mismo coeficiente de extinción molar y el mismo cromóforo (anillo A).
La hidrólisis se realiza en una zona
alejada de este (C-21) que no afecta
la absorción de manera significativa
y por eso se puede evaluar con la
misma sensibilidad (muy similar factor de respuesta) ambos compuestos
con el mismo método CLAR sin tener que desarrollar otro método aparte para la HC. Esto permite realizar
correlaciones para evaluar el grado o
H
H
H
H
O
O
OH
MeONa
HO
Hidrólisis
CH3
CH3
C
OH
O
O
CH3
OH
H
H
H
CH3
O
OH
CH3
CH3
O
Na
O Na
C
H
HO
OH
MeO
O
Hidrocortisona acetato
HO
CH3
H
H
C
O
H
O
H
C
H
H
H
CH3O
C
CH3
O
H
H
Hidrocortisona
Fig. 1. Mecanismo de hidrólisis del -OAc del C-21 de la HCAc en presencia de MeONa 0,1 mol/L, lo que genera in situ la HC y
permite corroborar la presencia de HC.
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Revista CENIC Ciencias Químicas, Vol. 38, No. 1, 2007.
de concentración 80, 100 y 180 ppm
respectivamente de hidrocortisona
acetato (HCAc) en forma de crema,5
a los cuales se le añaden diferentes
volúmenes del reactivo de Zemplen
(MeO−Na+/MeOH), para lograr diferentes grados de hidrólisis. Esta operación se realizó por cuadriplicado y
se tomó el valor medio de las áreas
correspondiente a los picos cromatográficos. De esta forma, se determinó el porcentaje de degradación
a través de la relación de áreas: (HC/
HCAc) x 100 y estos valores se
graficaron contra el área de HCAc
(Tabla 1, Fig. 2), a través de una curva de calibración. Se aplicó en este
caso, a una muestra en forma de crema de hidrocortisona acetato al 1 %
de concentración desconocida (Figuras 3 a la 8).
BIBLIOGRAFÍA
1. Mesa J.A. Síntesis de fragmentos de la
unidad repetitiva del Polisacárido
Capsular del Streptococcus pneumoniae
14. Trabajo de Diploma, Fac. de Química Universidad de la Habana, 2002.
Tabla 1. Relación de porcentajes de degradación
(hidrólisis) contra área del pico de HCAc.
Área
pico HCAc
HCAc sin
hidrolizar
(%)
0,87
5,42655E6
99,13
2,39
5,12617E6
97,61
2,56
5,24664E6
97,44
9,9
5,11921E6
90,10
13,59
4,82623E6
86,41
30,3
4,282E6
69,70
59,6
3,24701E6
41,40
5500000
Y=A+B* X
A
B
R
5000000
Area pico HCAc meV
Área HC x 100
Área HCAc
2. Said R., Compostella F., Franchini
L., Wagner B., Panza L., Ernst B.
Synthetic Potential of Fucosyltransferase III for the Synthesis of Fluorescent labeled Milk Oligosaccharides. J. Carboh. Chem., 24, 789-807,
2005.
3. QUIMEFA, Cuba. Proyecto Ramal de
I+D (59-03-04), Hidrocortisona Crema
al 1 %. Desarrollo de Formulación y
Estudio de Estabilidad, Centro de Ingeniería e Investigaciones Químicas y
Laboratorio Farmacéutico “Roberto
Escudero”, 2003-2005.
4. The United States Pharmacopoeia
(USP-27) Convention, Inc. Copyright ©
2004.
5. British Pharmacopoeia (BP), CD-ROM,
Vol. I-II, Medical and Pharmaceutical
substances, 2004.
CONCLUSIONES
Mediante un sencillo procedimiento de hidrólisis (Zemplen), se
logró evaluar el grado o porcentaje
de degradación de la hidrocortisona
acetato materia prima, así como
identificar la hidrocortisona (producto de degradación) generada in
situ como sustancia de referencia
para formulaciones de tipo crema.
Esto permite optimizar el tiempo de
síntesis de sus derivados y su análisis por cromatografía líquida de alta
resolución.
5.3556E6
-35350.92485
t-Value
110.72601
-19.07143
-0.9932
4500000
F Statistic
363.71931
4000000
Prob>F
<0.0001
3500000
3000000
0
10
20
30
40
50
60
Relación de áreas A HC/A HCAc *100
Fig. 2. Curva de porcentaje de degradación de la HCAc.
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Fig. 3. Cromatograma de referencia de
HCAc.
tr = 8,382 min (HCAc).
Fig. 4. Cromatograma de referencia
+10 µL de MeONa.
tr = 3,738 min (HC); tr = 8,292 min (HCAc).
Fig. 5. Cromatograma de referencia
+20 µL de MeONa.
tr = 3,760 min (HC); tr = 8,323 min (HCAc).
Revista CENIC Ciencias Químicas, Vol. 38, No. 1, 2007.
Fig. 6. Cromatograma de referencia
+ 30 µL de MeONa.
tr = 3,738 min (HC); tr = 8,483 min
(HCAc).
Fig. 7. Cromatograma de referencia
+ 40 µL de MeONa.
tr = 3,750 min (HC); tr = 8,325 min
(HCAc).
Fig. 8. Cromatograma de referencia
+ 50 µL de MeONa.
tr = 3,790 min (HC); tr = 8,360 min
(HCAc).
CORROSIÓN Y PROTECCIÓN
Grupo de Corrosión e Ingeniería de Materiales,
Facultad de Ingeniería Química,
Instituto Superior Politécnico ‘’José A. Echeverría’’.
CETA
CONSULTORIA EN INGENIERIA
Y ARQUITECTURA
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Tel.: (537) 204 0745. FFax:
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CONSULTORÍAS, ASESORAMIENTO Y SERVICIOS:
❑ Diseño y evaluación de sistemas de protección catódica: estudios de campo, proyectos, equipos
y montaje.
❑ Selección, evaluación y aplicación de inhibidores de corrosión en sistemas industriales.
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médico-farmacéutica y otras.
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en la industria o en instalaciones de servicios turísticos, hospitalarios y similares.
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de Corrosión y Protección hasta temas específicos para la preparación dirigida del personal
hacia las particularidades productivas de sus Centros e instituciones respectivos.
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