BACTERIAS Organismos microscópicos, primitivos unicelulares y procarióticos Se conocen alrededor de 1600 especies La mayoría son estrictamente saprófitas Muchas causan enfermedades en el hombre (neumonía, tuberculosis, tifoidea) y en animales (brucelosis) Aproximadamente 100 enfermedades en plantas especies causan Las bacterias fitopatógenas causan muchas enfermedades graves en las plantas cultivadas en todo el mundo, pero menos que las ocasionadas por hongos o virus. También es relativamente menor el daño y el costo económico que ocasionan. Devastación por el tizón de fuego (Erwinia amylovora) en una huerta de dos años de manzana Gala en alta densidad en Michigan, después de una tormenta violenta CARACTERÍSTICAS GENERALES DE LAS BACTERIAS FITOPATÓGENAS La mayoría son saprófitas facultativas Flageladas La mayoría Gram negativo No producen endosporas Se reproducen por fisión binaria Alta tasa de multiplicación SEGÚN SU FORMA LAS BACTERIAS PUEDEN SER: bacilos (bastones) cocos (esféricas) bastones pleomórficos (tendencia hacia formas irregulares) formas espiraladas La mayoría de las bacterias asociadas con las plantas son bacilos Estructura típica de una bacteria Gram negativa con forma de bacilo ESQUEMA DE UNA BACTERIA Y SUS PARTES Las dimensiones de las bacterias fitopatógenas en forma de bacilo son: de 1-2 μm de largo x <1 μm de ancho Hay bacterias filamentosas Agrobacterium, Erwinia, Pseudomonas y Xanthomonas son bacilos Streptomyces spp. causante de la sarna de la papa es filamentosa FOTOGRAFIAS DE BACTERIAS EN CELULAS VEGETALES Bacterias en estoma Bacterias en el interior de una célula FLAGELOS Monótrico Lofótrico Anfítrica Perítrica Polar En general, las bacterias se reproducen por fisión binaria (una célula se divide en dos), pero el proceso es complejo. Si están presentes, los elementos de ADN extra-cromosómicos o plásmidos se reproducen en sincronía con el cromosoma bacteriano, pero bajo ciertas condiciones se pueden perder naturalmente o por manipulación química REPRODUCCIÓN MEDIANTE FISIÓN BINARIA Mecanismos de variabilidad en bacterias mediante procesos semejantes a la sexualidad Conjugación Transformación Transducción CONJUGACIÓN TRANSFORMACIÓN TRANSDUCCIÓN Patovar: grupo de bacterias con características iguales o similares, que se pueden diferenciar solamente por la planta en la que provocan enfermedad Género especie patovar (variación patogénica) Xanthomonas campestris pv. vesicatoria Xanthomonas campestris pv. fragariae Xanthomonas campestris pv. cucurbitae Características que se utilizan para la identificación de bacterias Morfológicas Culturales (forma, bordes, color de las colonias) Fisiológicas Bioquímicas Patológicas (capacidad para atacar a determinado huésped) MORFOLOGÍA DE COLONIA EN MEDIO DE CULTIVO SÓLIDO Forma Elevación Borde CARACTERÍSTICAS FISIOLÓGICAS Producción de pigmentos fluorescentes Pseudomonas fluorescens se caracteriza por producir pigmentos fluorescentes La tinción de Gram divide a las bacterias en dos grandes grupos: las Gram positivo que se tiñen de color morado y las Gram negativo que se tiñen de rojo Esto se debe a la diferencia en la constitución de sus paredes celulares Comparación de las paredes celulares de Bacterias Gram positivo y Gram negativo TINCIÓN DE GRAM Frotis Un toque del asa sobre la colonia bacteriana se debe disolver sobre una gota de agua y extender como una capa fina sobre un portaobjetos Deja secar la preparación y fijar al calor suave PASOS DE LA TINCIÓN DE GRAM Tinción con cristal violeta Fijación con una solución de yodo (Estabiliza el cristal violeta, todas las bacterias en la preparación permanecen de color púrpura o azul) Extracción con alcohol (Decolora algunas bacterias (las Gram negativas) y no otras (las Gram positivas) Tinción de contraste con safranina (Las bacterias gram positivas ya están teñidas con cristal violeta y permanecen de color púrpura. Las bacterias gram negativas se tiñen de color rosa) PASOS DE LA TINCIÓN DE GRAM Gram positivo Gram negativo ESQUEMA DE DIFERENCIAS ENTRE BACTERIAS GRAM NEGATIVO Y GRAM POSITIVO RACCIÓN A LA TINCIÓN DE GRAM DE LOS PRINCIPALES GÉNEROS DE BACTERIAS FITOPATÓGENAS GRAM (+) GRAM (-) Clavibacter Erwinia Streptomyces Pseudomonas Xanthomonas Xylella Agrobacterium TAXONOMÍA La mayoría de las bacterias patógenas de plantas son Gram-positivos y se clasifican dentro del Phylum Actinobacteria, o Gramnegativas, en el Phylum Proteobacteria Además, su diferenciación se basa en las características químicas y fisiológicas, por ejemplo, composición de la pared celular, producción de enzimas, utilización de sustratos, etc. Sin embargo el mejor método para determinar las relaciones filogenéticas es el ADN TAXONOMIA DE BACTERIAS FITOPATÓGENAS El análisis de los ARNr 16S se ha utilizando ampliamente para establecer las relaciones filogenéticas dentro del mundo procariota, causando un profundo impacto en la visión de la evolución y como consecuencia, en la clasificación e identificación bacteriana Esto ha dado lugar al sistema de clasificación vigente y ha permitido la identificación rápida y precisa de las bacterias El resultado es uno o más árboles filogenéticos que representan las relaciones evolutivas A partir de estos árboles, si el muestreo taxonómico y de regiones ha sido adecuado, se pueden realizar inferencias sobre las relaciones evolutivas de las especies Actualmente se recomienda la identificación que utiliza criterios fenotípicos junto con datos de secuenciación Versión simplificada del Árbol filogenético Universal propuesto por Carl Woese y su discípulo Gary Olsen. Se basa en la secuencia molecular del ARNr 16S de la subunidad ribosómica menor presente en los procariotas y su homólogo el RNAr 18S de los eucariotas. Muestra los tres Dominios, este termino se refiere a un nuevo taxón filogenético que incluye tres líneas primarias: Archaea, Bacteria y Eucaria. En línea descendente siguen seis Reinos GÉNEROS DE BACTERIAS FITOPATÓGENAS CICLO DE AGALLA DE LA CORONA CAUSADA POR AGROBACTERIUM TUMEFACIENS Diagrama de la célula de Agrobacterium tumefaciens El ADN de una célula de A. tumefaciens está contenido en el cromosoma bacteriano y en otra estructura llamada plásmido Ti (inductor de tumores). El plásmido Ti contiene: * Un segmento de ADN llamado ADN-T que es transferido a la célula de la planta en el proceso de la infección. * Una serie de genes vir (de la virulencia) que dirigen el proceso de la infección AGROBACTERIUM TUMEFACIENS ADHERIDA A CÉLULAS VEGETALES SINTOMAS OCASIONADOS POR AGROBACTERIUM TUMEFACIENS SÍNTOMAS OCASIONADOS POR BACTERIAS PUDRICIONES MANCHAS EN HOJAS Y FRUTOS TUMORES TIZÓN Y ROÑA ENFERMEDADES VASCULARES ERWINIA AMYLOVORA Aspecto del tejido de una rama de peral afectada Aspecto de su crecimiento en medio de cultivo MANEJO DE ENFERMEDADES BACTERIANAS No existe un control químico efectivo Las medidas de manejo se basan en la prevención Es fundamental incidir sobre el ambiente (microclima) haciéndolo menos favorable al desarrollo de la enfermedad Enfermedades que no están presentes en el país: control legal Enfermedades presentes: aplicar medidas de manejo que afecten – la tasa de multiplicación – sobrevivencia – diseminación CONTROL CULTURAL Suelo/sustrato libre del patógeno Utilización de material sano Evitar las condiciones de humedad Rotación de cultivos Variedades resistentes Evitar heridas Solarización CONTROL CULTURAL Desinfectar herramientas, manos, estructuras Cortinas rompe viento Evitar contaminar con suelo infestado Eliminar plantas o partes infectadas Tratamiento de semillas mediante desinfección o termoterapia CONTROL QUÍMICO Antibiótico de uso agrícola Sulfato de Estreptomicina Fungicidas con actividad bacteriostática – Cúpricos – Fungicidas con zinc – Productos con Yodo Desventajas de los productos quimicos Alto riesgo de que las bacterias se vuelvan resistentes Riesgos a la salud del aplicador y consumidor Prohibidos en los Programas de Producción Integrada CLASE MOLLICUTES Forman un grupo monofilético dentro de las bacterias Gram + Carecen de pared celular, sólo rodeados por la membrana plasmática Son los procariotas más pequeños que pueden autoreplicarse Resistentes a penicilina pero sensibles a tetraciclina CSD (stubborn citrus diseases), ocasionada por Spiroplasma citri, bacteria que carece de pared celular, limitada al floema. Se transmite en forma propagativa y circulativa por algunas chicharritas Los fitopatógenos son transmitidos por insectos que se alimentan del floema Mollicutes fitopatógenos: - Fitoplasmas – no se han podido cultivar in vitro - Espiroplasmas – cultivables in vitro